HPLC-MAXPLOT UV检测法测定血清中丹那唑及其代谢产物

本文建立了同时测定人体血清中丹那唑(Ⅰ)及其主要代谢产物2-羟甲基妊娠素(Ⅱ)和其它代谢产物妊娠素(Ⅲ)的高效液相色谱法。方法用YWG C18柱并以甲醇—水(74:26)作为流动相,应用紫外最大吸收作图法(maxplot)检测技术,以UV 285,240nm分别测定Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ。使原型药和代谢产物都达到较高检测灵敏度。同时对方法的专一性、准确性和精密度等方面进行了评价,并应用于临床监测。     

激活素A及其受体卵泡休止素在子痫前期胎盘中的表达

目的探讨激活素A的βA亚基及其Ⅰ型、ⅠB型和Ⅱ型受体,激活素A结合抑制蛋白卵泡休止素在子痫前期患者胎盘组织中的表达变化。方法采用逆转录半定量聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学方法检测妊娠26、32周和38周18例健康和18例子痫前期胎盘组织中激活素A及其Ⅰ型、ⅠB型和Ⅱ型受体,卵泡休止素的表达,并比较两者的不同。结果激活素Aβ亚基在孕26、32周和38周子痫前期胎盘组织中表达较健康妊娠胎盘明显升高(P<0.05),Ⅰ型、ⅠB型和Ⅱ型受体在孕26、32周子痫前期胎盘组织表达高于健康胎盘(P<0.05),卵泡休止素的表达同健康妊娠胎盘相比无明显变化。结论激活素A及其受体在子痫前期胎盘表达增高,子痫前期发病越早,增高越明显,因此激活素A可作为妊娠期高血压疾病早期诊断的候选指标。     

用液相质谱法鉴定盐酸关附甲素在大鼠胆汁中Ⅰ相和Ⅱ相代谢产物(英文)

目的:研究盐酸关附甲素在大鼠胆汁中的代谢产物.方法:建立了液相质谱和串联质谱法(LC-MS)对关附甲素及其代谢产物鉴定的方法.大鼠静脉注射盐酸关附甲素后采集胆汁,通过与对照化合物的色谱保留时间、分子离子峰、碎片离子峰和紫外图谱对照从而鉴定Ⅰ相代谢物.胆汁经过葡萄糖醛酸酶或硫酸酯酶水解,鉴定其水解产物(苷元),从而确定Ⅱ相结合物,再通过LC-MS分离和确定分子离子峰,最后利用MS-MS寻找特征子离子和母离子的方法进行验证.结果:大鼠胆汁中存在Ⅰ相代谢物关附壬素;Ⅱ相结合物经葡萄糖醛酸酶和硫酸酯酶酶解后,出现关附甲素和关附壬素;LC-MS检测发现胆汁中m/z 606和 510两个准分子离子峰,推测分别为关附甲素葡萄糖醛酸苷和关附甲素硫酸酯:经MS-MS鉴定出m/z 606特征子离子m/z 177和m/z 430,进一步确证大鼠胆汁中存在关附甲素葡萄糖醛酸苷.结论:大鼠胆汁中存在Ⅰ相代谢产物关附壬素,以及Ⅱ相结合物关附甲素葡萄糖醛酸和硫酸结合物、关附壬素葡萄糖醛酸和硫酸结合物.     

汉黄芩素在FVB小鼠体内的磺酸化代谢特征研究

目的探讨汉黄芩素Ⅱ相代谢中主要的磺酸化代谢反应特征。方法采用FVB小鼠肠灌流模型及FVB小鼠肝脏S9体外反应体系,通过采用高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS/MS)和高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)测定汉黄芩素及其代谢产物,研究汉黄芩素主要的Ⅱ相代谢反应之一磺酸化代谢反应的特征。结果汉黄芩素在FVB小鼠小肠均发生葡萄糖醛酸化与磺酸化代谢反应,其中磺酸化代谢产物的排出速率为[(3.46±0.16)nmol/30 min/10 cm]。而汉黄芩素在结肠中只检测出磺酸化代谢产物,其排出速率为[(1.40±0.24)nmol/30 min/10 cm]。体外试验显示,汉黄芩素的磺酸化代谢符合双相酶代动力学特征,由两种磺酸化转移酶(Sult)亚型介导。结论汉黄芩素的磺酸化代谢反应是汉黄芩素肠道代谢的重要组成部分,其在肝脏的磺酸化代谢由两种Sult酶催化完成。     

城南细辛化学成分研究(Ⅰ)

目的研究城南细辛的活性化学成分.方法利用柱层析方法分离化合物,理化性质以及光谱方法(UV、IR、NMR、MS)鉴定化合物.结果从城南细辛中离分得3个化合物,鉴定为1-细辛脂素(Ⅰ),1-芝麻脂素(Ⅱ)和β-谷甾醇(Ⅲ).结论化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均为首次从该植物中分离得到.     

甲氨蝶呤联合米非司酮治疗未破裂异位妊娠68例的疗效观察

目的观察甲氨蝶呤(下称MTX)联合米非司酮治疗未破裂异位妊娠的疗效。方法2004年1月～2006年1月我院对168例未破裂的异位妊娠病例进行分析,随机分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组。Ⅰ组采用MTX50mg/m2每隔3d静脉注射1次,共2次;Ⅱ组采用MTX50mg/m2每隔3d分臀深部肌肉注射1次,共2次;Ⅲ组在Ⅱ组的方案上每天加服米非司酮100mg1次,共3次。结果Ⅰ组成功率为72%(36/50),Ⅱ组成功率为82%(41/50),Ⅲ组成功率为94.12%(64/68),Ⅰ、Ⅲ组间差异有显著性(P<0.01),Ⅰ、Ⅱ组间及Ⅱ、Ⅲ组间差异有明显性(P<0.05)。结论使用MTX50mg/m2隔3d肌注2次比隔3d静注2次效果好,而在Ⅱ组方案上同时加用米非司酮的治疗方案比Ⅰ、Ⅱ组方案的疗效更好。     

妊娠期糖尿病并发子痫前期的期待治疗时限及妊娠结局探讨

目的探讨妊娠期糖尿病并发子痫前期期待治疗时限及母儿预后结局。方法回顾性分析2005年1月至2008年12月,郑州市妇幼保健院收治的36例妊娠合并糖尿病并发子痫前期的孕妇(Ⅰ组),随机抽取无其他合并症的子痫前期(Ⅱ组)及妊娠期糖尿病(Ⅲ组)各40例,比较保胎天数及终止妊娠周数及终止妊娠结局。结果Ⅰ组与Ⅱ组比较,保胎天数及终止妊娠周数、妊娠结局差异无统计学意义。Ⅲ组的保胎天数及终止妊娠周数、妊娠结局与Ⅰ组和Ⅱ组相比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论妊娠期糖尿病并发子痫前期期待治疗时限应在控制血糖基础上以子痫前期病情发展为终止妊娠的指标,采取个体化原则,严密监护下不超过2周为宜。     

妊娠高血压综合征患者外周血P-选择素的表达

目的探讨妊娠高血压综合征患者外周血P-选择素的表达与意义。方法用流式细胞术检测30例妊娠高血压综合征患者、20例正常妊娠者与15例正常人外周血P-选择素表达。结果妊娠高血压综合征患者外周血P-选择素表达为(18.63±8.92)%,明显高于正常妊娠组(3.25±1.73)%(P<0.01)和正常对照组(2.78±1.04)%(P<0.01)。结论妊娠高血压综合征患者存在P-选择素的高度表达。     

灯盏花素对大鼠急性肝细胞损伤的保护作用

目的探讨灯盏花素对大鼠急性肝损害的保护作用。方法取Wistar大鼠18只,随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3组各6只。胶原酶原位灌流法分离大鼠肝细胞后于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别加入PBS 20mmol/L、LPS 3mg/L、LPS 3mg/L+灯盏花素20mmol/L,于施加因素后2、4、6、8、12、24h分别收集肝细胞和肝细胞培养液进行各指标测定。用透射电镜观察肝细胞形态学变化,用Fura-2-AM测定细胞内游离钙离子浓度,用[3H]油酸标记的生物膜法测定分泌型磷脂酶A2(secretory phospholipase A2,sPLA2),用Elisa法检测前列腺素E2(PGE2)的活性。结果Ⅱ组凋亡细胞与坏死细胞数均多于Ⅰ、Ⅲ组,差异均有统计学意义(P<0.01)。LPS加入肝细胞培养液2h、8h,Ⅱ组大鼠肝细胞中Ca2+浓度高于Ⅰ、Ⅲ组(P<0.05);Ⅱ组sPLA2、PGE2水平均高于Ⅰ组、Ⅲ组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论灯盏花素能显著抑制急性肝损害,可能与其对钙的拮抗和对sPLA2的抑制作用有关。     

白水茶中二种新黄酮甙的结构

从广西野生的白水茶(Camellia sinensis L.)中分得三种黄酮类成分:Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ。经理化常数测定、光谱分析和化学反应鉴定:Ⅰ为已知成分芹菜素(apigenin),Ⅱ为芹菜素-5-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-6″-O-乙酰基β-D-吡喃葡萄糖甙,Ⅲ为芹菜素-5-O-α-L-吡嘀鼠李糖基(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖甙。Ⅱ和Ⅲ为首次报道的新黄酮甙,暂分别命名为山茶甙A(camellianin A)和山茶甙B(camcllianin B)。     

激光散射法分析异丙酚纳米乳剂的粒径大小与分布

目的制备异丙酚纳米乳剂 ,以激光散射光谱分析其粒径大小与分布 ,为微粒分散药物制剂物理稳定性的研究提供简便、快速、有效的方法。方法制备 3种处方不同 ,工艺相同的异丙酚纳米乳剂 (分别为Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ ) ,以激光NICOMP3 80 /ZLS系统测得相应动态光散射光谱的体积为权重的重量平均粒径分布、散射强度为权重的重量平均粒径分布。结果 3个制剂动态光散射光谱有显著差别。纳米乳剂Ⅰ ,两种图谱示单峰 (davg=2 64 2nm) ;纳米乳剂Ⅱ和Ⅲ ,两种图谱示双峰 ,纳米乳剂Ⅱ中大粒子 (davg=3 1 5 5nm)占 5 4 3 % ,而小粒子 (davg=73 6nm)占 45 7% ;纳米乳剂Ⅲ示小粒子 (davg=87 1nm)占 74 9% ,而大粒子 (davg=2 3 2 7nm)占 2 5 1 %。结论 3种纳米乳剂激光光散射光谱有显著差别 ,纳米乳剂Ⅰ粒径与Ⅱ、Ⅲ相比虽稍大 ,但均匀 ,该处方制得的制剂室温放置 3年外观透明 ,物理稳定性良好     

达哪唑衍生物的合成

Synthesis of danazol analogues involved transformation of 3-ketosteroids (Ⅰa～c) into 2-hydroxymethylene steroids (Ⅱa～c) and subsequent cyclization to steroidal (2, 3 d) isoxazoles (Ⅲa～c), Further treatment with sodium methoxide gave the corresponding steroidal-3-oxo-2α-carbonitriles (Ⅳa～c). The binding ability of (Ⅲa～c) and (Ⅳa～c) to progesterone receptor were examined and (Ⅲc) was found to be two times as active as danazol.     

高效液相色谱法测定人血清中马兜铃酸Ⅰ、Ⅱ的含量

目的建立以高效液相色谱法测定人血清中马兜铃酸Ⅰ、Ⅱ含量的方法。方法色谱柱为C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水-冰醋酸(72∶27∶1),检测波长为250nm,流速为1.0ml/min。结果马兜铃酸Ⅰ、Ⅱ检测浓度线性范围分别为0.84~13.50μg/ml(r=0.9997,n=5)、2.03~32.50μg/ml(r=0.9994,n=5),最低检测浓度分别为0.3、0.1μg/ml。结论本方法简便、易行,可为临床诊治马兜铃酸肾病提供依据。     

瑞芬太尼靶控静脉麻醉用于妇科腹腔镜手术的临床观察

目的 比较不同靶控浓度瑞芬太尼复合丙泊酚全凭静脉麻醉与传统的静吸复合麻醉对机体应激反应的影响和血流动力学变化.方法 ASAⅠ～Ⅱ级妇科腹腔镜手术患者45例,随机分为静吸复合麻醉组(Ⅰ组),不同靶控浓度(4、6ng/ml)瑞芬太尼全凭静脉麻醉组(Ⅱ、Ⅲ组).每组15例.观察和测定麻醉前(T1),插管后1 min(T2),气腹后20 min(T3),气腹结束后20 min(T4)时的血压、心率、血糖和皮质醇.观察术毕停药后患者呼之睁眼时间、拔管时间,观察恶心呕吐等副反应,记录术中知晓的发生率和患者满意度等.结果 ①Ⅲ组皮质醇含量在T3、T4时点与Ⅰ组比较明显下降(P<0.01).②Ⅲ组血糖在T4时点同麻醉前比较升高(P<0.05),但同Ⅰ组比较差异有统计学意义(P<0.05).③Ⅲ组HR在T2、T3时点同Ⅰ组比较明显下降(P<0.01),Ⅲ组MAP在T2时点同Ⅰ组比较下降(P<0.05).④Ⅱ、Ⅲ组睁眼时间及拔管时间同Ⅰ组比较缩短(P<0.05).结论 在妇科腹腔镜手术中,丙泊酚3 μg/ml靶控瑞芬太尼6ng/ml全凭静脉麻醉比传统的静吸复合麻醉能更有效地抑制二氧化碳气腹所致的应激反应,苏醒快,且能获得血流动力学的稳定性.     

反相高效液相色谱法测定小鼠血浆中醋酸洗必泰浓度

目的 :建立小鼠血浆中醋酸洗必泰浓度的反相高效液相色谱测定法。方法 :以十二烷基磺酸钠为反离子 ,安定为内标 ,采用离子对萃取法对血样进行提取 ;μ-BondapakC18 柱 (3 9mm×300mm ,10μm)为分析柱 ,0 02mol/L磷酸二氢钾缓冲液 (pH=3)∶甲醇(44:56 ,V/V)为流动相 ,检测波长为257nm。结果 :醋酸洗必泰在0 5～10μg/ml血药浓度范围内 ,浓度与峰面积比值间线性关系良好 ,r=0 9997 ;3种血浆浓度 (1、4、8μg/ml)平均回收率为104 67 % ,日内、日间精密度分别为1 5 %、0 37 %、0 26 %及2 45 %、0 46 %、1 27 % ;血浆中药物的最低检测浓度为0 4μg/ml。结论 :该方法灵敏、准确 ,适用于临床药代动力学的研究。     

新类型酸性色素定量胺类化合物的研究:专利蓝Ⅴ测定胺类药物

前报认为此新类型蓝色酸性色素的基本构造为二氨基三苯甲烷磺酸,据此,找出了另一种同类型的酸性色素——专利蓝Ⅴ(PBV)。对它进行了配合物的吸收峰、试剂空白的降低、试剂浓度的选定、最佳pH值的选择、检出限、检量线、色素与两种胺的分子配合比、PBV测定法的精密度、五种胺配合物的吸收系数比较等研究,证明它与二甲苯蓝、羊毛罂粟蓝有类似的性质以及同样的灵敏度。进一步说明所认定的此类型的基本构造是对的。     

HPLC法检查环戊丙酸雌二醇原料药的有关物质

目的:建立环戊丙酸雌二醇原料药中有关物质的检查方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Kromasil C18,流动相为硝酸铵溶液-乙腈(23∶77,V/V),流速为1.5 ml/min,检测波长为280 nm,进样量为50μl。杂质Ⅰ按不加校正因子的主成分自身对照法计算,杂质Ⅱ采用杂质对照品外标法进行定量。结果:杂质Ⅰ与杂质Ⅱ检测质量浓度线性范围分别为0.3².0、0.52.0、0.5⁴.0μg/ml(r均为0.999 9),校正因子分别为0.970、0.368;杂质Ⅰ、杂质Ⅱ与环戊丙酸雌二醇检测限分别为6.3、1.5、2.3 ng,定量限分别为21.0、5.0、7.7 ng。3批样品中均检出杂质Ⅰ、杂质Ⅱ,但未检出雌二醇。结论:建立的方法准确、灵敏度高,可用于检查环戊丙酸雌二醇原料药中的有关物质。     

HPLC法同时测定美愈伪麻胶囊中三个组分的含量

目的用HPLC法测定美愈伪麻胶囊中盐酸伪麻黄碱 (Ⅰ )、愈创木酚甘油醚 (Ⅱ )、氢溴酸右美沙芬 (Ⅲ )的含量。方法以非那西汀为内标物 ,色谱柱为DiamonsilODS (4 .6mm× 2. 0 0 0mm ,5 μm) ,以 0. 0 3mol·L-1NaH2 PO4溶液 (用H3 PO4调节 pH值至 3. 0 ) 甲醇 乙腈 (V∶V∶V =6 0∶35∶5 )为流动相 ,检测波长 2 0 7nm。结果组分Ⅰ在 6 .2～ 4. 3 1mg·L-1(r =0 .9993) ,组分Ⅱ在 2 0 . 0～ 14 0 . 0mg·L-1(r =0 . 9990 ) ,组分Ⅲ在 2. 0～ 14 . 0mg·L-1(r =0 9999)内呈良好的线性关系 ,平均回收率分别为 99. 7% (RSD =0 . 4 % )、10 0 . 0 % (RSD =0 . 4 % )、10 0 . 2 % (RSD =1. 0 % )。结论可用于美愈伪麻胶囊的质量控制。     

高效液相色谱法测定万应胶囊中胡黄连苷Ⅰ和胡黄连苷Ⅱ的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定万应胶囊中胡黄连苷Ⅰ和胡黄连苷Ⅱ含量的方法。方法:色谱柱为DiamonsidTMC18,流动相为乙腈-水-冰醋酸(20∶80∶0.5),检测波长为266nm,流速为1.0ml/min。结果:胡黄连苷Ⅰ、胡黄连苷Ⅱ检测浓度分别在9.55~95.5μg/ml(r=0.9 997)、15.6~156μg/ml(r=0.9 998)范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.7%(RSD=2.46%)、101.2%(RSD=2.35%)。结论:本方法简便、快速、准确、回收率好,可用于该制剂的质量控制。     

关苍术HPLC指纹图谱研究及白术内酯Ⅰ和Ⅲ的含量分析

目的:建立关苍术的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并测定关苍术中白术内酯Ⅰ和Ⅲ的含量。方法:指纹图谱和含量测定研究的色谱柱分别为KromasilC18(250mm×4.6mm,5μm)和ODSHypersilC18(250mm×4.6mm,5μm),检测波长分别为240nm和220nm,流动相分别为水-乙腈(梯度洗脱)和甲醇-水(60:40,V/V),流速为1mL.min-1,进样量为10μL。结果:关苍术指纹图谱中共标定了9个共有指纹峰,10批样品的相似度均>0.9。白术内酯Ⅰ和Ⅲ的进样量分别在50.1～417.5ng(r=0.9997)和49.5～412.5ng(r=0.9998)范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系,平均加样回收率分别为101.02%和97.12%,RSD分别为4.32%和4.01%(n均为9)。结论:所建指纹图谱具有较好的精密度、重复性和稳定性;所建含量测定方法简单、灵敏、结果可靠,均可用于关苍术的品质评价和质量控制。