丹参素对氧自由基所致大鼠心肌线粒体H~ -ATP酶损伤的保护作用

本实验采用FeSO_4/抗坏血酸体系观察氧自由基对鼠心肌线粒体H~ -ATP酶的损伤作用以及丹参素(DS-182)的保护效应。结果表明:FeSO_4/抗坏血酸可使线粒体H~ -ATP酶水解活性明显下降,而丹参素具有明显的保护作用,它可防止H~ -ATP酶水解活性的下降,并呈一定的浓度依赖关系和“饱和效应”。     

黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶对培养心肌细胞的损伤及硒的保护作用

向培养心肌细胞中加入黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶(X-XOD)后,动作电位的APA、OS、V_(max)及APD减少,MDP、TP水平上移;细胞在MEM中搏动率降低,加钡后细胞收缩频率迅速增加,且X-XOD作用时间越长,上述改变越显著。X-Mo的作用与此类似,但较轻。加硒则能逆转上述的细胞损伤性变化。这表明X-XOD和X-Mo均能造成心肌细胞损伤,硒对心肌细胞有保护作用。     

锌对培养的心肌细胞氧自由基损伤效应的观察

通过向培养基中加入黄嘌呤和黄嘌呤氧化酶造成心肌细胞的氧自由基损伤,观察了微量元素Zn的抗氧化损伤作用。实验分为①对照组:MEM 20%小牛血清;②XOD组:对照组加黄嘌呤0.42mM和黄嘌呤氧化酶5.3nM;     

心肌肽素抗培养心肌细胞阿霉素损伤作用

目的:观察小分子多肽类物质心肌肽素抗培养心肌细胞阿霉素损伤作用。方法:建立培养心肌细胞阿霉素(ADM)损伤模型, 观察心肌肽素对心肌细胞肌酸磷酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)及线粒体脱氢酶活性的影响, 以荧光染料Fura-2-AM定量测定细胞内游离Ca²⁺浓度。结果:心肌肽素可剂量依赖性降低细胞培养液中CPK和LDH活性及对抗细胞内线粒体脱氢酶活性下降, 可剂量依赖性地降低培养心肌细胞[Ca²⁺]_i。结论:心肌肽素对阿霉素损伤培养心肌细胞具有保护作用。     

过敏毒素C5a和氧自由基在多脏器损伤（衰竭）中的作用

本文通过给成年家犬（ｎ＝６）静脉注射Ｅ．Ｃｏｌｉ大肠杆菌（１０＾１０／ｋｇ）或失血（ｎ＝６），平均动脉压降至５．３ｋＰａ，造成二组多脏器损伤模型。对其肺、肝、心、肾功能、过敏毒素Ｃ５ａ、血浆丙二醛，血浆超氧化物歧化酶；中性粒细胞ＳＯＤ活力进行动态观察。与对照组（ｎ＝６）比较，两实验组随着实验时间延长，受损伤的脏器增多，程度加重，与之相应的是Ｃ５ａ活性明显升高（Ｐ＜０．０１）；血浆及中性粒细胞ＳＯＤ     

铜,锌对培养心肌细胞缺氧／再给氧损伤的影响

本文观察了不同浓度的铜、锌对培养乳鼠心肌细胞缺氧/再给氧损伤后超氧歧化酶(superoxid dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-px)活性和脂质过氧化(lipid peroxidation,LPO)代谢产物丙二醛(malondialodehyde,MDA)含量改变,以及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放的影响。结果表明:缺氧/再给氧后,心肌细胞SOD活性降低,GSH-px活性和MDA含量增高,LDH释放增加。铜、锌均能不同程度地提高SOD活性,但铜的作用强于锌。锌、铜均可降低LDH的释放,但锌的作用强于铜,锌、铜浓度过高反而增加LDH的释放。此外,铜使GSH-px活性明显升高,并显著降低MDA含量。     

山莨菪碱、樟柳碱对家兔心肌缺血再灌注过程中氧自由基产生的影响

本文以家兔开胸冠状动脉左室枝结扎/放开为心肌缺血再灌注模型,探讨心肌缺血再灌注过程中氧自由基积聚的机理及山茛菪碱、樟柳碱对氧自由基产生及清除的影响。缺血心肌早期再灌注后,白细胞发光明显增强(P<0.01),心肌组织丙二醛含量明显增加(P<0.05),心肌组织SOD活力明显降低(P<0.01)。再灌注前给予山莨菪碱或樟柳碱,可有效地抑制白细胞发光(P<0.01),防止心肌MDA增加(P<0.05),但对心肌SOD活力无明显保护作用。     

不同月龄大鼠单侧大脑中动脉闭塞对心肌的影响

３个月及１８个月大鼠各４０只闭塞单侧大脑中动脉后３小时其心肌组织病理学，超微结构，Ｎ－乙酰－β－Ｄ氨基葡萄糖苷酶活性，超氧化物歧化酶活性和过氧化脂质代谢产物丙二醛含量，外周血血小板聚集度等变化的比较发现，老年大鼠的心肌改变程度比成年大鼠明显，表现为心肌组织点状坏死灶，线粒体肿胀，部分峭排列不规则，ＮＡＧａｓｅ活性增高，ＳＯＤ水平下降，ＭＤＡ含量升高，血小板解聚度降低等。提示老年大鼠脑腐卒中发生后可     

前列环素血栓素和氧自由基在大鼠急性胰腺炎并发肺损伤中作用及川芎嗪的影响

应用牛磺胆酸钠诱发大鼠急性出血坏死性胰腺炎并发肺损伤模型，动态观察血中ＴＸＢ＿２、６－酮－ＰＧＦ＿１ａ及ＬＰＯ含量变化并观察川芎嗪的影响。结果表明：随着肺损伤程度加重，血浆ＴＸＢ＿２含量、ＴＸＢ＿２／６－酮－ＰＧＦ＿１ａ比值，ＬＰＯ含量渐增高，肺系数值也增加；川芎嗪能显著降低ＴＸＢ＿２和ＬＰＯ含量，稳定ＴＸＢ＿２／６－酮－ＰＧＦ＿１ａ比值，降低肺系数值，改善肺组织病理形态变化，从而提高存活率。     

硒化角叉菜胶对大鼠心脏氧反常的作用

在离体大鼠心脏氧反常模型上,硒化角叉菜胶27mg/L(含硒0.3mg/L)可明显降低复氧时的室颤发生率(P<0.05)和静息张力(p<0.01)。以自旋捕捉技术(DMPO为捕捉剂)ESR谱仪检测氧反常心肌产生的自由基,可检出羟自由基(·OH)和碳中心自由基,分别与DMPO形成的自旋加合物,其中[DMPO-OH]·的相对峰强化比为1∶2∶2∶1,波谱参数aN=aH=15.01G;[DMPO-R]·的aN=16.25G,aH=23.25G。而硒化角叉菜胶有清除·OH以外的自由基的作用。     

钡对培养的鼠心肌细胞动作电位与搏动的影响

本实验在培养的鼠心肌细胞上观察到:在无钡培养基中,心肌细胞可因膜超极化而使动作电位发放及自发性搏动停止;向培养基中加入0.1mMBaCl_2所致的除极化足以使此停搏的心肌细胞群落恢复搏动,并能使非搏动群落转化为搏动群落。当培养基中BaCl_2浓度在0.3—4.8mM范围内递增时,呈现剂量依赖性的搏动频率加快;动作电位的APA、OS、MDP、TP递减;APDbp、APDth、F递增,显著性由P<0.05递增至P<0.001。当BaCl_2浓度高于4.8mM时,又可因过度除极化而使动作电位及搏动骤停。上述实验所见完全符合钡离子阻塞钾通道,并可经钙通道内流、启动收缩的基本机制。     

镁对大鼠缺氧再给氧心肌细胞内游离钙的影响

目的和方法：用ＡＣＡＳ５７０粘附式细胞仪，以荧光素染色法观察镁（Ｍｇ２＋）对体外培养乳鼠心肌细胞内游离钙（Ｃａ２＋）的影响及对缺氧再给氧时细胞内Ｃａ２＋作用。结果：细胞外Ｍｇ２＋降至０３ｍｍｏｌ·Ｌ－１，细胞内Ｃａ２＋荧光强度上升速度加快，达到稳定所需时间延长，出现Ｃａ２＋振荡曲线。增加Ｍｇ２＋浓度可使细胞内Ｃａ２＋降低。Ｍｇ２＋还可以显著减少缺氧再给氧时细胞内Ｃａ２＋，Ｐ＜００１。结论：细胞外低Ｍｇ２＋可导致细胞内Ｃａ２＋增加，Ｍｇ２＋有维持正常心肌细胞内Ｃａ２＋稳定性及拮抗缺氧再给氧时细胞内Ｃａ２＋超载作用     

氧自由基在高氧所致离体血管内皮细胞损伤中的作用

本实验研究了离体兔主动脉血管内皮细胞在常压高氧(100%O_2)条件下(0～72h)细胞形态、三磷酸腺苷(ATP)、黄嘌呤氧化酶(XO)活性、丙二醛(MDA)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)活性的改变。我们的实验发现内皮细胞形态改变(细胞肿胀、畸形、脱落)呈时间依赖性;ATP含量经短暂的升高后(24h)持续降低(48～72h);高氧作用24～48h内皮细胞XO活性、MDA含量持续升高,72h XO活性、MDA含量开始降低,但仍高于对照组;GSH-px活性在48h内无明显改变,72h其活性升高。上述结果表明高氧确能引起内皮细胞损伤,氧自由基在其损伤过程中有重要作用。     

前列腺素E_2对体外培养的新生大鼠心肌细胞的机能及超微结构的影响

本实验观察了PGE_2对体外培养的新生大鼠心肌细胞的机能及超微结构的影响。发现4ng/ml PGE_2可以立即引起细胞搏动频率明显减慢,作用6分钟对心肌细胞及微丝的形态结构没有明显影响;作用6小时,其微丝排列规则而整齐,与正常比较未见异常,但心肌细胞膜出现皱折,微足突变粗短甚至消失,微泡也消失。表明PGE2对心肌细胞的作用具有时间依赖性。     

过氧化氢诱导心肌细胞凋亡性和非凋亡性死亡的研究

目的:探讨活性氧过氧化氢(H₂O₂)对心肌细胞损伤作用。方法:用不同浓度的H₂O₂作用于新生鼠培养心肌细胞,通过琼脂糖凝胶电泳、Giemsa染色和流式细胞仪等方法观察H₂O₂对心肌细胞的凋亡性损伤作用,同时检测培养介质中乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)等生化指标的改变。结果:5 mmol/L H₂O₂作用于培养心肌细胞6 h,在琼脂糖凝胶电泳上出现梯状DNA带;Giemsa染色细胞涂片可见到染色体浓聚或边缘化,成新月型聚集在核膜周边,并有凋亡小体的存在;流式细胞仪可检测出亚二倍体峰的出现。结论: H₂O₂具有浓度和时间依赖关系诱导心肌细胞的凋亡,在低浓度H₂O₂(＜1 mmol/L)导致培养心肌细胞的早期生物化学改变,自由基含量升高,膜通透性增加,同时伴有少量心肌细胞凋亡;而在高浓度H₂O₂(＞10 mmol/L)时会造成培养心肌细胞的坏死性死亡,细胞膜崩塌,脂质过氧化物(MDA)大量产生,LDH大量泄漏,DNA琼脂糖凝胶电泳出现弥散(smear)泳带;5~10 mmol/L H₂O₂诱导大量心肌细胞凋亡性死亡,同时伴有LDH和MDA含量升高等生物化学的改变。     

The gold anti-rheumatic drug auranofin governs T cell activation by enhancing oxygen free radical production

Gold-containing drugs continue to be used in the treatment of rheumatoid arthritis, but their mode of action remains unknown. One model to explain gold action is that gold-containing compounds can alter free radical production in cells of the immune system, but direct evidence for this hypothesis has been lacking. In this study we show that auranofin can enhance the rapid flux of reactive oxygen species (ROS), which accompanies phytohemagglutinin activation of peripheral blood T cells. Blocking this enhancement by the addition of antioxidants can reverse the functional effects of the drug on T cell responses, which we have previously demonstrated. These results provide strong experimental support for a model in which gold anti-rheumatics act by modulating ROS production. Furthermore, our experiments suggest that auranofin may be a useful tool to investigate the postulated role of ROS in the intra cellular T cell signaling pathway.     

急性桐油中毒导致大鼠心肌损伤的酶组织化学及超微结构观察

目的：探讨急性桐油中毒对心肌的损伤机制。方法：模拟人体桐油中毒方式灌喂大鼠,复制大鼠急性桐油中毒模型。采用光镜、电镜及组织化学方法,观察急性桐油中毒对大鼠心肌的影响。结果：急性桐油中毒心肌明显受损,光镜下细胞及间质水肿,电镜下心肌线粒体肿胀,空泡样变,并有髓样小体形成。组化观察心肌琥珀酸脱氢酶（SDH）活性显著下降,乳酸脱氢酶（LDH）活性有增强趋势。结论：急性桐油中毒通过对心肌细胞线粒体的直接损伤以及对能量代谢的影响而引起心脏功能的明显损害。     

氨对培养胚鼠大脑神经元形态的影响

为研究氨对培养神经元的影响，并探讨神经元形态改变在肝性脑病发生中的作用。通过对胚胎大鼠大脑神经元的分散培养，结合光镜，透射电镜及免疫组织化学法，观察了氨对分散培养胚鼠大脑神经细胞的影响，发现氨可引起神经元胞体肿胀，尼氏小体溶解，胞质内出现颗粒及空泡变性，甚至突起崩解，核固缩，细胞坏死脱落；电镜下示细胞内内质网，线粒体扩张及囊性变，粗面内质网脱颗粒，大量致密小体出现，突起肿胀，微丝减少；神经微丝蛋白及突触体素的表达减少。实验结果表明，氨对培养神经元具有一定毒性作用，神经元的病变可能影响了其正常功能，促使肝性脑病的发生。