卡托普利对豚鼠心室肌细胞动作电位及外向延迟整流钾电流的作用

目的 探讨卡托普利对豚鼠心室肌细胞动作电位及外向延迟整流钾电流的作用。方法 采用内充3M KCL的标准微电极记录心肌动作电位。采用膜片钳全细胞技术，钳制电位-50mV，持续时间100ms，指令电位 40mV，记录外向延迟整流钾电流(Ik)最大峰电流。结果 与缺血组比较，卡托普利组APD30、APD50及ERP显著延长，APD50无显著变化。缺血组Ik幅度显著增高，而卡托普利组及卡托普利 缺血组显著降低。各组电流—电压关系曲线形态虽无显著变化，但缺血组显著上移，而卡托普利组、卡托普利 缺血组比缺血组下移。结论卡托普利降低外向钾电流及延长APD30、APD50和ERP。     

黄芪总黄酮对豚鼠心室肌细胞动作电位和延迟整流钾电流的作用

目的:研究黄芪总黄酮(TFA)对豚鼠心室肌细胞动作电位(AP)和延迟整流钾电流(IK)的作用。方法:实验采用标准玻璃微电极细胞内记录心室肌细胞AP和全细胞膜片钳技术记录IK。结果:应用TFA 20 mg/kg后心室肌AP的幅度从给药前的(70.25±5.97)mV降低到(58.73±4.86)mV(n=6,P<0.05);AP时程(APD90)从给药前的(236.08±17.63)ms延长到(282.13±22.01)ms(n=6,P<0.05)。应用TFA 40 mg/kg后心室肌AP的幅度从给药前的(72.65±5.12)mV降低到(48.32±8.76)mV(n=6,P<0.05);AP时程(APD90)的从给药前的(265.34±14.82)ms延长到(315.46±24.33)ms(n=6,P<0.05)。而应用TFA 20 mg/kg后,在+50 mV指令电压下,心室肌细胞的IK从(1.21±0.24)nA降至(0.96±0.27)nA(n=6P<0.01),应用TFA 40 mg/kg后心室肌细胞的IK从(1.45±0.36)nA下降到(1.01±0.27)nA,差异有显著性(n=6P<0.01)。结论:TFA可以降低心室肌AP幅值,延长AP时程,抑制心室肌细胞的IK幅值,并且有一定的剂量依赖性。     

低渗性肿胀对豚鼠心室肌细胞动作电位及延迟整流钾电流的影响

观察单个豚鼠心室肌细胞动作电位和主要复极期电流延迟整流钾电流(IK)的变化,探讨急性心肌缺血再灌注室性心律失常发生的离子机制。采用全细胞膜片钳记录技术,观察低渗液(200mOsm/kg)灌流胶原酶分离的单个豚鼠心室肌细胞发生肿胀后的动作电位各参数的变化,同时记录IK及其快、慢两种激活成分(IKr及IKs)的变化。结果:低渗液灌流后心室肌细胞迅速发生肿胀,动作电位幅度(APA)、静息膜电位(RMP)及阈电位水平无明显变化;而动作电位时程(APD)在600,1000和3000ms三种基础起搏周长(BCL)刺激时均缩短(P<0.05),尤以APD复极达50%和90%时缩短更为明显。APD生理性频率适应性消失且离散度增大。低渗性肿胀状态下IK电流幅度在3000ms长去极化保持时间(主要成分为IKs)刺激时从1134.33±150.17pA增加至1621.98±234.95pA(P<0.001,n=10);而在100ms短去极化保持时间(主要成分为IKr)刺激时从693.44±96.44pA降低至294.06±71.79pA(P<0.05,n=8);并且使IK的IV曲线向上移位。结论:低渗性肿胀的心室肌细胞IK特别是IKs的增加是引起APD缩短的重要因素,是急性心肌缺血再灌注室性心律失常发生的离子机制之一。     

索他洛尔对豚鼠心室肌动作电位及延迟整流钾电流的作用特性

目的　研究索他洛尔对豚鼠乳头状肌动作电位 (AP)和单个心室肌细胞延迟整流钾电流的作用及索他洛尔致心律失常的可能机制。方法　用标准微电极技术和全细胞膜片钳技术 ,分别测定豚鼠乳头状肌AP和单个心室肌细胞离子电流。结果　在索他洛尔浓度为 10 0 μmol/L时可明显延长APD ,使APD2 0 和APD90 分别延长13.33%和 19.71%。且该作用随BCL增加而增加 ,呈现出逆频率依赖性特点。在单个心室肌细胞的实验中10 0 μmol/L索他洛尔仅对IKr有阻滞作用 ,使IKr及IKr,tail的幅值从 (0 .6 8± 0 .2 7) pA/pF和 (0 .94± 0 .30 ) pA/ pF降至(0 .4 7± 0 .18) pA/ pF和 (0 .6 0± 0 .32 )pA/ pF ;且此作用也呈逆频率依赖性。结论　索他洛尔对心肌电生理的逆频率依赖性的作用特性可能是其诱发尖端扭转性室速 (TdP)等心律失常的机制之一。     

延迟整流钾通道与动作电位复极及心律失常

延迟整流钾通道 （IK）主要参与心肌动作电位的复极过程。其至少包含两种成分 :快速激活成分 （Ikr）和缓慢激活成分 （Iks）。目前 IK 通道的分子基础已趋阐明 ,HERG,Kv L QT1 或 min K基因突变均可抑制 IK 流 （Ikr或 Iks） ,导致心肌复极延长 ,最终可产生 QT延长综合征 （L QTS）     

豚鼠M细胞缓慢激活型延迟整流钾电流对缺血的反应

目的：研究缺血对豚鼠心室M细胞缓慢激活型延迟整流钾通道电流（Iks)的影响。方法：利用全细胞膜片钳技术观察豚鼠心室M细胞Iks，利用不同成分浴槽液模拟细胞正常及缺血坏死，观察Iks尾电流锋值的变化情况。结果：指令电压≥0mV时，缺血组电流显小于正常组，P＜0．05；指令电压小于0mV时，两组间无显性差异，P＞0．05。结论：缺血时M细胞Iks显减弱，可能会增加心室壁电活动不均一性，促使心律失常的发生。     

心肌肽素对豚鼠心室肌细胞内向整流钾电流的影响

目的研究心肌肽素对豚鼠心室肌细胞内向整流钾电流(IK1)的影响,探讨心肌肽素抗心律失常的作用机制。方法用急性酶解法分离豚鼠心室肌细胞,用标准的全细胞膜片钳技术,观察不同浓度的心肌肽素对内向整流钾电流的影响。结果在测试电压100mV的条件下,观察豚鼠心室肌细胞IK1内向电流对心肌肽素的影响。10μg/ml心肌肽素使IK1从给药前21.0±6.3pA/pF降低到给药后18.4±5.4pA/pF(P<0.05),抑制率为(20±3)%。50μg/ml心肌肽素使IK1从给药前22.8±5.5pA/pF降低到给药后16.0±3.8pA/pF(P<0.01),抑制率为(32±6)%。50μg/ml心肌肽素没有改变IK1的电流密度电压曲线形态。结论心肌肽素抑制豚鼠心室肌细胞IK1,可能是其抗心律失常作用的机理之一。     

牵拉刺激对豚鼠心室肌动作电位时程的影响及其机制

目的本实验观察了牵拉刺激对离体豚鼠左心室乳头肌动作电位的影响,为探讨心肌牵张激活离子通道电流的特点提供实验依据。方法实验采用标准微电极细胞内记录技术引导豚鼠心室乳头肌细胞动作电位,用微机化生理信号采集分析系统(NSA-Ⅲ)记录并处理信号。结果①牵拉心肌可加快整个复极过程,APD20、APD50和APD90均有缩短(P<0.05)。牵拉作用呈心肌长度依赖性。牵拉刺激对RP和APA无显著性影响(P>0.05)。②内向整流钾通道(IK1)阻断剂BaCl2(100μmol/L)可明显减弱因牵拉刺激导致的动作电位时程缩短。应用格列本脲、奎尼丁和氯化钆与未用药组比较无显著差异(P>0.05)。结论①在豚鼠心室肌存在牵拉刺激激活的外向电流,这种电流加快复极过程,使动作电位时程明显缩短。②该电流可能与内向整流钾通道(IK1)有关,但是与ATP敏感性钾通道和IKr无关。     

溶血磷脂酸对兔心室肌电稳定性的影响

目的:评价溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)对兔心室肌电稳定性的影响.方法:20只新西兰大白兔随机分为LPA高浓度组和低浓度组,制备兔左室楔形心肌块灌注模型,分别灌流含LPA 10 μmol/L和 1 μmol/L的台式液.利用浮置玻璃微电极法同步记录楔形心肌块内、外膜心肌细胞动作电位(Endo-APD90、Epi-APD90)和跨室壁心电图.分别观察2组Endo-APD90、Epi-APD90,跨室壁复极离散度(TDR),QT间期以及S1S2刺激下的室性心动过速诱发率在给药前后的变化.结果:高浓度组给药后与给药前比较:QT间期、Endo-APD90、TDR均增大(均P<0.01),S1S2刺激的室性心动过速诱发率也明显增高(P<0.05),但Epi-APD90无明显变化(P＞0.05). 低浓度组给药后与给药前比较,其电生理参数变化差异无统计学意义(P＞0.05).结论:高于生理浓度的LPA使兔心室肌的电不稳定性增加,有致心律失常作用.     

α1肾上腺素受体对豚鼠心肌细胞延迟整流钾电流的调控

人心肌上主要存在α1肾上腺素受体 ,生理状况下 ,α1受体激动不引起心肌的异常电活动 ,但在心肌缺血时 ,由于局部儿茶酚胺聚集 ,受体密度增加 ,使其作用增强 ,并因为心肌对α1受体作用反应的不一致性 ,可能引起致命的心律失常。因此 ,α1受体在心肌缺血及再灌注时诱发的心律失常发生机制中起重要作用。α1受体的这些作用与其影响心肌细胞电生理有关。延迟整流钾电流 (Ｉｋ)作为心肌细胞膜上重要的离子流主要参与动作电位的复极过程 ,不仅受细胞膜电位变化的控制 ,同时也受到细胞膜上α1受体及其细胞内信息传导系统的调控。但有关α1对心肌细…     

替米沙坦在牵张刺激导致的心室肌细胞延迟整流钾通道改变中的作用

目的:探讨替米沙坦在牵张刺激导致的心室肌细胞延迟整流钾离子通道改变中的作用。方法:将体外培养的乳鼠心室肌细胞分为对照组、牵张组、替米沙坦组、牵张+替米沙坦组。定量分析细胞蛋白/DNA比值及细胞培养上清中N-末端B型利钠肽原(NT-proBNP)水平以鉴定牵张有效性。实时荧光定量PCR检测延迟整流钾离子通道基因KCNH2、KCNQ1、KCNE1和KCNE2的mRNA水平;Western blot检测KCNH2和KCNQ1蛋白表达水平。结果:牵张刺激导致心室肌细胞蛋白/DNA比值增大和细胞培养上清中NT-proBNP水平升高。与对照组相比,牵张组KCNH2、KCNQ1、KCNE1和KCNE2 mRNA水平上调;替米沙坦可明显抑制牵张刺激引起的KCNH2、KCNQ1和KCNE1变化,而对KCNE2基因无显著抑制效应。与对照组相比,牵张组KCNH2和KCNQ1蛋白表达下调;与牵张组相比,牵张+替米沙坦组KCNH2和KCNQ1蛋白水平明显上调。结论:阻断血管紧张素受体可以抑制牵张刺激引起的心室肌细胞延迟整流钾通道改变。     

1-磷酸鞘氨醇对心肌细胞延迟整流钾电流2种成分的作用

目的:研究1-磷酸鞘氨醇(S1P)对豚鼠心室肌细胞延迟整流钾电流的2种成分快速激活整流钾电流(IKr)和缓慢激活整流钾电流(IKs)的作用。方法:用胶原酶酶解法急性分离豚鼠心室肌细胞,随机分为正常对照组、S1P(1.1μmol/L)组、S1P(1.1μmol/L)加苏拉明(Suramin)(200μmol/L)组。利用全细胞膜片钳的方法记录心室肌细胞IKr和IKs及其尾电流。结果:①对照组IKr和IKr的尾电流分别为(0.85±0.53)nA和(0.65±0.40)nA。加入S1P后,IKr和IKr的尾电流受到明显抑制,下降到(0.63±0.37)nA和(0.56±0.29)nA(P<0.05,n=6)。而加入S1P加Suramin后,抑制作用消失,IKr和IKr的尾电流为(0.85±0.41)nA和(0.71±0.43)nA,与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05,n=6)。②对照组IKs和IKs的尾电流分别为(1.53±0.61)nA和(0.82±0.34)nA。加入S1P后,下降到(1.47±0.46)nA和(0.79±0.41)nA,但差异无统计学意义(P>0.05,n=6)。结论:S1P可降低豚鼠心室肌细胞IKr的幅值,并且是通过其特异性的G蛋白耦联S1P受体介导而产生这些作用。S1P对豚鼠心室肌细胞IKs没有作用。     

缺血后处理对大鼠心室肌细胞内向整流钾电流和动作电位的影响

目的探讨缺血后处理(IPC)对大鼠心室肌细胞内向整流钾电流(IK1)和动作电位的影响及机制。方法实验分IPC组、缺血/再灌注(I/R)组、单纯灌流(SP)组,利用大鼠心脏建立离体灌注模型,采用胶原酶酶解法分离得到大鼠单心室肌细胞,采用膜片钳全细胞技术分别记录三组心室肌细胞电流和动作电位的变化。结果在-120mV和-30mV刺激电压水平,IK1电流密度:IPC组低于I/R组,I/R组高于SP组(P均<0.05),IPC组同SP组无差异(P>0.05)。与SP组和IPC组比较,I/R组静息电位明显升高(P<0.05);而动作电位幅度、20%动作电位时程、50%动作电位时程、90%动作电位时程均明显下降(P<0.05)。而IPC组各值与SP组无差异(P>0.05)。结论IPC可以降低大鼠缺血/再灌注心肌细胞IK1,延长缺血/再灌注心肌细胞APD。     

维生素K3通过延迟整流钾通道影响豚鼠结肠平滑肌收缩

目的研究维生素K3对豚鼠结肠平滑肌肌条自发性收缩频率和平均张力的影响,和对细胞膜延迟整流钾通道的影响,并初步探讨其治疗肠痉挛的机制。方法将豚鼠处死后取5cm左右长的结肠,用张力换能器测量(40,100,400)μmol/L维生素K3对肌条收缩频率和平均张力的影响,再将肌条消化得到单个豚鼠结肠平滑肌细胞,用K(v)电级内液充灌玻璃微电级,分别用台氏液和含40μmol/L,100μmol/L,400μmol/L的维生素K3的台氏液灌流。以-40mV为钳制电压钳制细胞,20mV为阶跃,检测K(v)。每检测1个浓度维生素K3后均用台氏液洗脱1min。结果40μmol/L,100μmol/L,400μmol/L维生素K3可减弱豚鼠结肠平滑肌的收缩频率和平均张力(40,100,400)μmol/L,维生素K3相对正常组的频率分别下降了(21.4±2.16)%,(42.3±3.24)%,(66.5±3.67)%(P<0.05),张力分别减少了(23.6±2.64)%,(46.7±2.96)%,(69.7±3.23)%(P<0.05)。40μmol/L,100μmol/L,400μmol/L维生素K3作用下延迟整流钾电流的峰值相对正常组分别增加了(44.04±4.36)%,(92.05±6.34)%,(115.89±6.41)%,(P<0.05)。结论维生素K3能浓度依赖性的减弱平滑肌条的收缩频率和平均张力,并增强延迟整流钾通道的开放,这可能是其治疗胃肠痉挛的机制之一。     

延迟整流钾通道在哮喘大鼠模型气道平滑肌张力调控中的作用

目的　探讨电压依赖性延迟整流钾通道 (KV)在哮喘大鼠模型气道平滑肌张力调控中的作用及其对气道反应性的影响。方法　应用等长张力记录方法 ,观察钾通道对正常和哮喘大鼠离体支气管静息张力及收缩张力的影响。结果　 (1)KV 阻断剂 4 氨基吡啶 (4 AP)诱发大鼠离体支气管产生浓度依赖性的收缩反应。哮喘组支气管 (10只 ) 4 AP收缩反应量效曲线较对照组 (10只 )明显左移 ,两者达到最大效应的一半所需浓度的负对数值 (pD2 )分别为 2 5 8± 0 0 7,2 12± 0 0 4,两组比较差异有显著性 (P <0 0 1) ;最大反应强度 (Emax)哮喘组为 (3 2± 5 )mg/mg ,与对照组 [(3 1± 6)mg/mg]比较 ,差异有显著性 (P >0 0 5 ) ;(2 )在对照组中 ,4 AP使支气管对内皮素 1(ET 1)和组胺的收缩反应量效曲线明显左移 ,处理前pD2 分别为 6 2 7± 0 3 8、5 5 9± 0 2 7,处理后为 6 80± 0 47、6 42± 0 14,处理前、后比较 ,差异有显著性 (P均 <0 0 1) ;Emax处理前分别为 (3 6± 8)mg/mg、(3 6± 8)mg/mg,处理后为(40± 8)mg/mg、(3 9± 9)mg/mg,处理前、后比较 ,差异有显著性 (P均 >0 0 5 ) ;(3 )在哮喘组中 ,4 AP对ET 1和组胺诱发支气管收缩反应的量效曲线无显著影响 ,处理前pD2 分别为 6 5 1± 0 0 7、5 86± 0 14,处     

红霉素对豚鼠心电图及心室乳头肌细胞慢反应动作电位的影响

目的 研究红霉素对豚鼠心电图和心室乳头肌细胞慢反应动作电位的影响。方法 常规心电图记录法,观察红霉素（每100 g体重0. 5,1. 0,2. 0,4. 0,8. 0 mg）对豚鼠体表心电图PR间期、QRS波时限、QT间期、QTc、RR间期和HR的影响;应用细胞内微电极技术,记录并观察红霉素（0. 01,0. 03,0. 1,0. 3 mmol/ L）对心室乳头肌细胞慢反应动作电位静息电位（RP）、动作电位幅值（APA）、动作电位复极50%、90%的里程（APD50、APD90）、有效不应期（ERP）和0期最大除极速率（Vmax）的作用。结果 2. 0,4. 0和8. 0 mg三种剂量下,红霉素使PR间期分别延长7.0%、14. 2%和54. 1%,4. 0或8. 0 mg与0. 5 mg相比,药物对PR间期的影响有显著性差异; 0. 03 mmol/ L的红霉素使APD50和APD90分别延长9. 4%和7. 7%,0. 1 mmol/ L时,红霉素使APD50和APD90分别延长16. 3%和14. 4%,0. 3mmol/ L时,APD50和APD90分别延长21. 4%和18. 3%;0. 1和0. 3 mmol/ L时,Vmax分别下降7. 6%和12. 3%。 0. 1与0. 01 mmol/ L相比,红霉素对APD50和APD90两指标的影响有显著性差异,0. 3 mmol/ L与0. 01 mmol/ L相比,该药对APD50、 APD90和Vmax的影响都有显著性差异。结论 红霉素可抑制豚鼠心室乳头肌细胞L鄄型钙通道,减慢房室交界部位的兴奋传导,导致心电图PR间期延长。