Harris苏木精染液化学性质的探讨

苏木精·伊红 (Hematoxylin·Eosin ,HE)染色是组织切片常用染色方法 ,苏木精在不同媒染剂如铝、铁、钼、钨等金属离子参与下可以显示多种组织成分 ,用途广泛。与铝、铁混合用于细胞核染色 ;与钼、钨结合适用于神经胶质细胞染色 ;与钨结合适用于细胞有丝分裂染色 ,还能显示骨骼肌和心肌纤维中的横纹及纤维蛋白染色 ;与碳酸锂结合显示神经髓鞘[1～ 3] 。因此在有关苏木精染料的化学性质上就存在着两种不同的观点 :有人认为苏木精是用于细胞核染色的碱性染料[4 ,5] ;也有人认为是酸性染料[1] 。 1 90 0年Harris创立了一种用于细胞核染色的H…     

利用媒染染料茜素蓝S显示硫酸化粘液物质

媒染染料的主要特征是当加不同媒染剂时,其染色性能亦不相同。Puchter(1974)以氯化铁作为媒染剂配制茜素蓝S溶液,细胞核染成蓝色,软骨和嗜碱性细胞亦成蓝色,他认为这个络合物和铬矾—核酸菁蓝相似,可能是与核酸的磷酸基结合。天青石蓝用铬矾或硫酸铜作媒染剂时,核染成蓝色,软骨和粘液染成紫色。用铁矾或氯化铁作媒染剂,则可代替苏木精显示细胞核。上皮细胞内酸性粘液物质的分布很广,其化学性质分硫酸化和非硫酸化(羧酸化)两种,而且在同一种上皮和粘液腺内常以混合形式存在,因此用一种染色是不易区分的。欲区分硫酸化和羧酸化粘液物质,多采用Spicer(1960)醛品红与爱先蓝结合染色法,因醛品红     

基于常规HE染色的组织最佳核染时间探索

正一张高质量的HE切片是保证病理诊断准确性的决定性因素之一,其中细胞核染色效果的优劣尤为关键,它将直接影响HE切片的染色质量,故控制好苏木精染液的染色时间是常规HE染色中最为重要的环节。近年来,随着病理技术水平的不断提高,全自动染色机正以其卓越的性能与良好的切片处理效果,特别是高效、稳定,逐渐取代了传统手工染色,被国内外各级医院和教学研究室接受并使用。在此基础     

EDTA在HE染色中的应用

正苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色是病理技术中最基本的染色方法,染色理想状态是在镜下见细胞核与细胞质蓝红相映,对比明显;核膜及核染色质颗粒清晰可见。实际工作中因组织干涸、固定脱水不足、脱钙等原因会造成切片染色困难,细胞核染色淡或出现局部灰染,给临床病理诊断带来困扰。经过大量实验,本科室对处理不好的组织切片染色前用EDTA抗原修复液进行高压修复,使染色质量得     

HE染色切片标本褪色的原因及解决方法

ＨＥ染色法是组织学与病理学常用的染色方法,ＨＥ染色切片标本是学生观察最多的一种切片。但该切片经数年后,细胞易褪色,直接影响观察效果。本文结合多年实践经验与详细观察,就这一现象的成因与解决方法提出如下浅见。１褪色原因（１）封固剂的酸化问题：干性封固剂是最常用的封固剂,主要是加拿大胶和中性树胶,但这两种封固剂均采用二甲苯作为溶剂。因日久二甲苯往往被逐渐氧化,生成苯甲酸和邻苯二甲酸而呈酸性,可导致碱性染料（苏木精）褪色（熊绪 ）。（２）切片标本经苏木精、伊红染色的过程中,脱水不净。（３）载玻片和盖玻片…     

Lillie-Mayer苏木精在冷冻切片快速进行性染色中应用

恒温冷冻切片是用于术中快速病理诊断的主要制片技术,除了要求技术人员有熟练的操作技能外,更重要的是要求在制作程序及苏木精染液的配制和使用方法上做出有效的选择,才能达到最佳的染色效果.Lillie-Mayer苏木精染液是一种从英国引进的改良配方,应用于冷冻切片的快速进行性染色,全程染色约90 s完成,该方法简化了盐酸乙醇分化的程序,节省了分化和返蓝中所消耗的时间,避免了盐酸乙醇酸化后引起的部分组织脱落掉片的现象.现将我科多年来在冷冻切片的快速染色方法及Lillie-Mayer苏木精染液的配制方法介绍如下.     

病理组织漂烘仪在快速冷冻切片染色中的应用

正快速冷冻切片技术对手术中的快速病理诊断有很重要的意义,在病理科的日常工作中具有非常重要的地位,快速冷冻切片染色质量的优劣直接影响病理诊断的准确率~([1])。作者在日常工作中,将病理组织漂烘仪应用到快速冷冻切片染色技术中,收到了较好的效果,现介绍如下。1材料与方法1.1材料徕卡CM1900冷冻切片机,常州华利病理组织漂烘仪,苏木精(百博生物公司),1%盐酸水溶液,0.5%氨     

介绍一种冷冻切片快速染色方法

制作优质的冷冻切片,以缩短染色时间、提高染色细胞的核浆清晰度最为重要。我们试将苏木精。伊红按比例配成混合液使整个染色过程在1min内完成,且不必经过盐酸乙醇分化,染色鲜艳而稳定,现介绍如下。1材料和方法1．1染液配制（1）冷冻固定液：85％乙醇85ml,4％甲醛10ml,冰醋酸5ml。（2）苏木精伊红混合染色液：沉淀酸化伊红Y乙醇应用液1份,哈雷苏木精液3份混合供染色用。1．2切片制作取手术新鲜组织置恒冷式切片机载物台上,－20℃冷冻后6μm切片,玻片附贴切片后即刻用冷冻固定液固定10S,水稍洗,滴加苏木精伊红混合染色液至液体覆…     

Harris苏木精染色的常见问题及解决方法

在常规病理诊断过程中,常用的是Harris苏木精和沉淀酸化伊红Y乙醇液染色(H-E染色).染色质量是由多种因素决定,但苏木精细胞核染色是其中关键的方面,根据笔者多年来的经验,现就在染色过程中存在的常见问题和改进方法进行探讨.     

三种类型的苏木精在HE染色中的效果比较

自1863年Waldeyer倡导使用苏木精染色细胞核,伊红染色细胞质,使不同组织和细胞成分呈现不同颜色和产生不同的折射率,HE染色一直被广泛应用于病理形态学诊断、教学和研究。在实际工作中使用的苏木精通常为自然氧化或人工氧化两种,将自然氧化和人工氧化的苏木精以1∶1比例混合成混合苏木精,染色效果很好,现将这三种类型的苏木精在HE染色中的效果介绍如下。     

同时显示大鼠中枢神经系统神经元和神经纤维的全程连续切片方法

目的　探索一种简便易行并能同时显示大鼠中枢神经系统 (CNS)神经元和神经纤维的全程连续切片方法。　方法　经过灌流固定的CNS组织低温冰箱速冻后连续冰冻切片和改良的苏木精染色方法。　结果　大鼠全程CNS连续切片各断面上神经元呈蓝黑色 ,神经纤维呈蓝色 ,背景淡黄色。　结论　运用低温速冻、连续冰冻切片、改良的苏木精染色方法可制作同时显示CNS神经元和神经纤维的全程连续切片。     

量化管理在病理染片过程中的应用

长期以来 ,病理组织处理过程都是凭经验更换试剂、染料 ,这样就造成质量不稳定或者试剂浪费。为了保证每张切片的质量和节约试剂 ,我们提出量化管理的概念 ,供大家探讨。1　方法对每天的工作量、温度进行登计 ,统计每次更换新液体后到组织块脱水不佳时 ,这一批试剂共做了多少蜡块数 ,苏木精、伊红染多少张切片后细胞核着色开始发灰 ,细胞质颜色不鲜艳。并观察与季节、气温的关系。1.1　 观察组织脱水过程 ,采用樱花全封闭组织脱水机进行组织处理 ,每道液体 30 0 0ｍｌ,37℃恒温。1.2　观察苏木精染色过程 ,统计苏木精、伊红 (每道 80 0ｍｌ)…     

基于硬组织切片染色的颈椎钩椎关节的解剖研究

目的利用硬组织切片技术、苏木精—伊红染色及甲苯胺蓝染色方法对成人钩椎关节的组织形态及各层结构进行观察,并对钩椎关节的解剖结构进行探讨。方法选取成年男性全颈椎标本,截取C₂~C₆钩椎关节进行福尔马林固定,脱水,于光固化机中包埋聚合。利用硬组织切片机对标本进行切片处理,磨片机对标本进行磨片处理,并使用苏木精—伊红及甲苯胺蓝进行染色。观察染色后钩椎关节组织形态及结构特点。结果苏木精—伊红染色的钩椎关节骨切片可清晰见到椎体及椎间盘被钙盐沉积分开,上下椎体切面可见粉染骨小梁,骨小梁间可见骨髓组织。甲苯胺蓝染色的钩椎关节骨切片可见成骨细胞和破骨细胞的各种骨组织形态,椎体切面可见体积、宽度、分布均正常的蓝色骨小梁。结论硬组织切片技术可以较完整保留钩椎关节的固有组织形态,经苏木精—伊红染色、甲苯胺蓝染色均可清晰观察到钩椎关节各层结构及形态特征。     

冷冻切片流程中的常见问题及优化措施

<正>冷冻切片技术是临床病理学诊断中常用的一种技术方法,其主要原理是在低温环境下使组织在较短时间内达到适合的硬度,随后进行快速切片、染色完成制片工作,进而于显微镜下观察切片对肿瘤性质进行判定,为临床医师在手术中确立手术方案提供强有力的支撑^[1]。冷冻切片质量直接影响了术中病理医师快速诊断的速度及准确率,因此,在短时间内完成一张优质的冷冻切片非常重要。     

不同浓度酸对Harris苏木精染色液染色效果的影响

在病理医检常用的多种苏木精染色液中,Harris苏木精可即配即用,染色力强,核着色鲜艳,是常用的细胞核染色剂。缺点是出现氧化膜较快,易生成沉淀和过染。要减少这些缺点,就要尽量保持染色液稳定。Harris苏木精染色液的稳定,除与周围环境的温度、光、空气、试剂和染料的纯度有关外,还与其配制过程中是否加入冰醋酸或盐酸及加入酸的多少有关。     

四种脱钙液对骨和骨髓组织及结构影响的比较

背景：由于骨和骨髓组织结构非常特殊,在常规的病理制片过程中,要同时显示坚韧质硬的骨组织和含有多种幼稚娇嫩造血细胞的骨髓组织是非常困难的。目的：选择一种既能完全除去骨组织中的钙质,又能保护骨髓组织及细胞结构不受破坏的最佳脱钙液。方法：将含骨髓组织的犬长骨组织随机分4组,同等条件下,14%硝酸甲醛生理盐水溶液;14%硝酸水溶液;20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液和20%甲盐酸水溶液4种不同脱钙液脱钙,记录脱钙时间,常规脱水、切片、苏木精-伊红染色,镜下观察,对比4种脱钙液对骨和骨髓组织常规病理切片质量和其苏木精-伊红染色效果。结果与结论：14%硝酸甲醛生理盐水溶液组脱钙能力最强,脱钙最均匀,耗时最短,既能有效完全除去骨皮质中的钙质,又能保护骨髓组织及细胞的形态完好,切片质量和苏木精-伊红染色的效果最佳;14%硝酸水溶液组脱钙液,使骨组织疏松发泡,组织变黄,对组织的损伤大,脱钙不均匀,组织切片不完整,制片质量和苏木精-伊红染色的效果最差;20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液组对组织的脱钙能力、损伤程度、制片质量和苏木精-伊红染色效果都比14%硝酸甲醛生理盐水溶液组稍差;20%甲盐酸水溶液组对骨和骨髓组织的损伤小,脱钙效果好,切片质量和苏木精-伊红染色的效果佳,介于20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液组和14%硝酸水溶液组之间。结果表明,4种脱钙液对骨和骨髓组织都具有良好的脱钙能力,制片质量及苏木精-伊红染色效果比较,14%硝酸甲醛生理盐水溶液> 20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液> 20%甲盐酸水溶液> 14%硝酸水溶液;14%硝酸甲醛生理盐水溶液最适用于临床常规病理制片中骨和骨髓组织的脱钙。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

电镜半薄切片应用于光镜研究的探讨

电镜半薄切片通常用于电镜超薄切片前的定位观察 ,我们在定位观察时发现 ,由于切片薄 ,结构显示清晰 ,可用于光镜研究 ,其观察结果优于石蜡切片。多年来 ,我们已将电镜半薄切片应用于实验研究和研究生课题实验。方法 :取材后将组织修为 1立方毫米左右 ,常规电镜样品处理 ,环氧树脂 6 18包埋 ,修块 ,L KBV型超薄切片机切片 ,切片厚度 1微米 ,脱树脂后 ,苏木精染色 ,H· E或甲苯胺兰染色 ,37℃温箱烤干 ,封片 ,观察。结果 :苏木精染色显示 ,细胞核呈紫兰色 ,胞浆淡兰色 ;H·E染色显示 ,细胞核为紫兰色 ,细胞质淡粉红色 ,但伊红染色较石蜡…     

Infinity HE高清恒染系统在病理常规染色中的应用

在日常病理工作中,为保证HE染色的质量,一般染片1500~1800张需更换染液。由于苏木精氧化持续等因素的存在,每张切片进行染色时试剂所处的状态不一致,也无法做到每张切片着色均一。在相对固定的染色程序中寻找稳定性较高的染液,保证在一定染片数量范围内每张切片着色均一,成为病理工作者致力解决的问题之一。本文就In-finity高清恒染系统在常规病理染色的稳定性进行评价。     

一种病理组织切片恒温染色台的设计

目的设计一种可提高组织切片苏木精-伊红(HE)染色速率及染色质量的病理组织切片染色装置。方法设计制作由水浴箱、带盖染色缸、电控箱三部分构成的组织切片恒温染色台,实验比对组织石蜡切片上的石蜡膜溶于二甲苯的互溶速率和镜下染色效果。结果在37.0℃条件下,石蜡膜在二甲苯中的溶脱时间比室温条件下缩短了近一半的时间,互溶速率两组比较差异有显著统计学意义(P<0.001);在减少1/2染色时间染制的切片组织色泽与室温条件下的染色效果类似,而且细小颗粒着色清晰。结论应用该设备条件的组织切片染色效果优于传统常温方法。     

肾穿刺组织荧光加苏木精染色效果观察

在肾脏病理诊断中 ,确定免疫复合物在肾组织中的沉积是很重要的。肾穿组织切片荧光染色后 ,肉眼和普通光镜下是无色的 ,不易观察组织结构 ,加染苏木后 ,则易行光镜观察 ,对荧光无影响。1　材料和方法　　我们取 10例新鲜肾穿组织 ,切 0 5ｃｍ进行冷冻切片 ,切片厚 3μｍ ,采用武汉博士德生物工程有限公司试剂分两组同时行ＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＭ及Ｃ3ｃ荧光染色 ,37℃染色 30ｍｉｎ后行ＰＢＳ洗 3ｍｉｎ× 3次 ,蒸馏水洗。第一组直接缓冲甘油封片 ,第二组浅染苏木精 1ｍｉｎ ,水洗 ,缓冲甘油封片。在荧光镜下分别观察两组切片 ,发现两组切…