胰升血糖素样肽1的研究进展

胰升血糖素样肽1(Glucagon like peptidel，GLP-1)是一种肠促胰岛素，具有其促进胰岛素释放、延缓胃排空、降低胰升血糖素和降低食欲等生理作用，为2型糖尿病的治疗提供了一个非常好的前景。它在降低血糖的同时不会增加体重，且可能在促进胰岛细胞增殖和改善胰岛素敏感性方面发挥作用。目前，该类药物正在研发之中。现将其进展综述如下。     

胰升血糖素样肽1对胰岛β细胞脂性凋亡的拮抗作用及机制

目的观察棕榈酸盐对胰岛β细胞凋亡及胰腺衍生因子（PANDER）的影响,并观察胰升血糖素样肽1（GLP-1）对其的干预。方法培养β-TC3细胞分别以PA、PA＋GLP-1以及空白处理24h,以MTT法、Annexin-V／PI荧光染色流式细胞术、Tunel荧光染色法检测细胞凋亡,以RT—PCR法测定PANDER mRNA的表达。结果PA浓度达0．25mmol／L时细胞存活率开始显著下降,并随浓度上升逐渐下降（P〈0．05）。GLP-1能显著拮抗PA致胰岛口细胞凋亡;PA能明显增加PANDER mRNA的水平,而GLP-1能显著抑制PA对PANDER的作用。结论PA在诱导胰岛B细胞凋亡的同时刺激PANDER表达,GLP-1拮抗PA致胰岛β细胞凋亡及PANDER的表达;PANDER可能是GLP-1拮抗胰岛B细胞脂性凋亡的靶点之一。     

胰升血糖素样肽-1治疗的胰腺外作用研究进展

随着研究的不断深入,人们发现胰升血糖素样肽-1 （GLP-1）不仅可以刺激胰岛β细胞分泌胰岛素调节血糖,还可保护肝脏、肾脏功能,调节脂类代谢,降低心血管危险因素,影响及保护中枢神经系统等.本文就GLP-1胰腺外作用的最新研究进展进行系统综述.     

胰升糖素样肽1对胰岛β细胞作用的研究进展

胰升糖素样肽1(GLP-1)是由小肠内L细胞分泌的肠道促胰岛激素,GLP-1与其特异性受体GLP-1受体(GLP-1R)结合后可激活腺苷酸环化酶,生成cAMP,并激活蛋白激酶A及鸟嘌呤核苷酸交换因子(GEF)信号途径,另外GLP-1还可通过不同的方式激活钙调蛋白通路及丝裂原活化蛋白激酶和磷脂酰肌醇3激酶通路,产生多种生理效应.GLP-1可促进胰岛素的1相和2相分泌,增加胰岛素的合成,此外GLP-1还可促进胰岛β细胞的增殖及分化,减少β细胞凋亡,减轻内质网应激对β细胞的损伤作用,增加β细胞存活.     

胰升血糖素样肽-1受体激动剂在2型糖尿病合并心血管疾病管理中的作用

T2DM患者常合并多重心血管危险因素,如血脂异常、高血压以及治疗过程中常伴发的低血糖、体重增加等.因此,T2DM患者是心血管疾病的高危人群.为降低T2DM的心血管风险,应控制血糖、血压、血脂、体重等指标.胰升血糖素样肽-1（GLP-1）受体激动剂在动物、细胞研究及临床试验中均显示具有心血管保护作用,可用于T2DM合并心血管疾病的管理.     

胰升血糖素样肽-1促进内浆网应激脂肪细胞内脏脂肪素的表达

目的 探讨胰升血糖素样肽-1（GLP-1）对内质网应激状态下脂肪细胞内脏脂肪素表达的调节作用。 方法 3T3-L1分化成熟的脂肪细胞,经Tg诱导建立内质网应激模型。脂肪细胞经Tg和/或GLP-1孵育后,收集细胞用于总RNA的提取,收集细胞液用于ELISA分析。定量PCR检测内脏脂肪素转录水平,ELISA检测其分泌水平。内质网应激发生通过测定sXBP-1表达水平增加来判断。使用细胞核因子κB（NF-κB）特异阻断剂PDTC预处理30 min,观察NF-κB在GLP-1调节内脏脂肪素表达中的作用。 结果 Tg诱导后sXBP-1表达增加,内脏脂肪素表达下降并呈剂量依赖性;同时给予GLP-1处理后,内脏脂肪素表达增加;PDTC降低内脏脂肪素基础水平,并未阻断GLP-1作用。 结论 GLP-1提升内质网应激状态下脂肪细胞内脏脂肪素的表达。     

胰升糖素样肽-1对高游离脂肪酸诱导的胰岛β细胞凋亡作用的研究

目的探讨胰升糖素样肽（GLP-1）对高浓度游离脂肪酸（FFA）诱导的胰岛细胞凋亡的保护作用。方法细胞采用小鼠胰岛素瘤细胞株betaNIT-1,试验分为4组：（1）对照组;（2）GLP-1组;（3）FFA组;（4）FFA＋GLP-1组。干预24小时以后,TUNEL法和Annexin-V/PI双标流式测定法测定各组细胞凋亡率,W estern b lot测定凋亡相关蛋白Bc l-2及Caspase-3的蛋白量。结果（1）1mM FFA可以诱导出明显的细胞凋亡（与对照组比较,P〈0.05）;（2）Annexin-v/PI流式测定及TUNEL法测定均表明GLP-1能抑制FFA诱导的细胞凋亡（FFA组与FFA＋GLP-1组比较,P〈0.05）;（3）W erstern b lot测定显示,FFA能使Bc l-2表达下降（FFA组与对照组比较,P〈0.05）,GLP-1能抑制这种改变（FFA＋GLP-1组与FFA组比较,P〈0.05;与对照组比较,P〉0.05）;Caspase-3在FFA组与对照组间无明显差异,但在GLP-1＋FFA组中,尽管与FFA组比较P〉0.05,但有下降趋势。结论GLP-1能够抑制高浓度游离脂肪酸诱导的NIT-1细胞凋亡,并且可能是通过改变凋亡蛋白的表达来实现这一功能的。     

胰升糖素样肽-1对胰岛β细胞凋亡的影响

凋亡在胰腺正常的生理活动和糖尿病发生的病理过程中均起重要的作用。细胞因子毒性、脂毒性和糖毒性均可引起β细胞凋亡。胰升糖素样肽-1由小肠内分泌细胞分泌,在糖尿病鼠类、培养细胞系、新鲜离体的人胰岛细胞及胰岛移植模型中均有抵抗凋亡的作用,可通过cAMP依赖途径激活cAMP反应元件结合蛋白、磷脂酰肌醇3激酶、蛋白激酶B,上调抗凋亡蛋白,下调caspase-3,减少β细胞凋亡。     

胰升血糖素样肽1对非酒精性脂肪性肝病大鼠氧化应激损伤的干预

目的 通过建立大鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型,观察胰升血糖素样肽1(GLP-1)对NAFLD大鼠氧化应激损伤的干预效应.方法 60只雄性SD大鼠分为正常饮食组(NC组,n=15)和高脂饮食组(HF组,n=45),12周末评估NAFLD模型的建立.NC组给予等渗盐水干预,HF组再分为等渗盐水组(NS组,n=10),低剂量GLF-1组(LG组,n=10),中剂量GLP-1组(MG组,n=10),高剂量GLP-1组(HG组,n=10),给予等渗盐水及不同剂量(50μg/kg,100μg/kg,200 μg/kg) GLP-1进行干预,4周后检测血清生物化学指标(甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、ALT、AST),肝组织超氧化物歧化酶、丙二醛及细胞色素氧化酶P450 2E1 (CYP2E1)mRNA和蛋白含量.两个样本均数比较采用t检验或近似t检验,多个样本均数比较采用LSD检验或Dunnett T3检验.结果 NS组超氧化物歧化酶水平较NC组显著降低[(165.81±11.64) U/mg对比(192.89±16.53) U/mg,P＜ 0.05],丙二醛水平显著升高[(7.30±1.79)nmol/mg对比(3.10±1.30)nmol/mg,P＜0.05],CYP2E1 mRNA及蛋白含量亦明显升高(P＜0.05).经过GLP-1干预后,与NS组比较,LG、MG、HG组大鼠肝组织超氧化物歧化酶水平呈升高趋势[(171.44±9.80) U/mg对比(177.66±14.77)对比(186.17±15.43) U/mg,仅HG组,P＜0.05],MDA水平明显降低[(5.16±1.45)nmol/mg对比(4.08±1.22) nmol/mg对比(3.31±1.14)nmol/mg,P＜0.05],CYP2E1 mRNA和蛋白水平亦呈降低趋势(CYP2E1 mRNA含量仅HG组差异有统计学意义,P＜0.05;CYP2E1蛋白含量在MG、HG组差异均有统计学意义,P值均＜0.05). 结论 GLP-1可改善肝组织脂质沉积,减轻NAFLD大鼠氧化应激损伤.     

胰高血糖素样肽1改善胰岛β细胞凋亡的研究

不论1糖尿病还是2型糖尿病，皆存有β细胞的破坏，凋亡是早期β细胞死亡的主要形式，因此减少凋亡对保持β细胞数量和功能至关重要。近年发现，胰高血糖素样肽1（GLP-1）具有促进β细胞增殖和减少细胞凋亡的作用。本研究以MIN6β细胞为对象，首先研究GLP-1对软脂酸诱导的细胞凋亡的影响，0．5mmol／L软脂酸作用于细胞36h，诱导39．4％细胞凋亡，10nmol／L GLP-1可使软脂酸诱导的细胞凋亡减少至32．8％，细胞活力增加13．9％，同时，GLP-1还可使细胞在低糖浓度下基础胰岛素的分泌增加，对高糖刺激的敏感性增加。     

艾塞那肽抑制高糖诱导内皮细胞凋亡的作用机制

在正常糖浓度(5.5 mmol/L)和高糖(33 mmol/L)培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分别加入不同浓度的艾塞那肽并干预不同时间后,噻唑蓝(MTF)法检测细胞活力,应用流式细胞仪检测细胞早期凋亡率,Western印迹法检测蛋白激酶B(Akt)磷酸化、Bcl-2和Bax蛋白表达水平.结果显示,HUVECs经高糖培养48和72 h后,细胞活力明显下降(P＜0.01).经1、10和100 nmol/L艾塞那肽干预48 h后,细胞活力明显增加,并呈浓度依赖性(P＜0.01).与正常糖浓度组比较,高糖组细胞凋亡率升高,Akt磷酸化和Bcl-2蛋白表达水平下降,Bax蛋白表达增加,Bcl-2/Bax比值降低(P＜0.01).艾塞那肽干预后,细胞凋亡率下降,Akt磷酸化和Bcl-2蛋白表达增加,Bax蛋白表达下降,Bcl-2/Bax比值升高(P＜0.01),而艾塞那肽的作用可被磷酸肌醇3激酶(PI3K)抑制剂LY294002所对抗(P＜0.01).提示艾塞那肽可通过PI3 k/Akt信号通路调节Bcl-2/Bax蛋白表达来抑制高糖诱导的内皮细胞凋亡,起到保护内皮细胞的作用.     

胰升血糖素样肽1对3T3-L1前脂肪细胞增殖及分化的影响

目的探讨胰升血糖素样肽1（GLP-1）对3T3-L1前脂肪细胞增殖及分化的影响。方法在3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的不同阶段添加不同浓度梯度的GLP-1（7—36）,使用XTT比色法测定细胞增殖情况,油红O脂肪染色、异丙醇萃取法评价细胞分化情况,RT-PCR法测定不同分化阶段PPAR-ymRNA表达水平。结果高浓度GLP-1（10^-9～10^-7mool／L）能够减弱3T3-L1前脂肪细胞的增殖能力;GLP-1在10^-11～10^-8mmoL／浓度梯度均存在抑制3T3-L1前脂肪细胞向脂肪细胞分化的作用,但对分化过程中PPARymRNA的表达水平均未见显著影响。结论本研究发现GLP-1能够抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖及分化,提示脂肪细胞可能也是GLP-1减轻体重作用的潜在靶点。     

胰升血糖素样肽-1受体激动剂和二肽基肽酶-4抑制剂治疗2型糖尿病临床疗效的观察

目的 观察胰升血糖素样肽-1 （GLP-1）受体激动剂和二肽基肽酶-4（DPP-4）抑制剂对于治疗T2DM的临床疗效. 方法 将T2DM患者按随机数字表法分为DPP-4组和GLP-1组,每组各40例.26周后,观察两组治疗疗效及各项指标的变化. 结果 26周后,两组FPG及HbA1c均较治疗前下降（P＜0.05）,与DPP-4组比较,GLP-1组下降更明显. 结论 GLP-1治疗T2DM的疗效优于DPP-4,值得在临床上推广使用.     

GLP-1对高糖诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用及机制分析

目的 以高糖刺激的乳鼠心肌细胞模拟糖尿病诱导心肌细胞损伤,给予胰高血糖样多肽-1（GLP-1）预处理,观察其对高糖引起的心肌细胞凋亡的影响,以及细胞内硫氧还蛋白（Trx）系统的变化.方法 将分离培养48 h的大鼠乳鼠心肌细胞分为3组：①正常对照组：使用含葡萄糖5.5 mmol/L的DMEM培养基加入甘露醇20 mmol/L作为对照培养基进行培养;②高糖组：使用含葡萄糖25 mmol/L的DMEM培养基作为高糖培养基进行培养模拟糖尿病;③高糖＋ GLP-1组：以含葡萄糖25 mmol/L的DMEM培养基加入终浓度10 nmol/L的GLP-1继续培养模拟糖尿病GLP-1干预.心肌细胞分别在三种培养基中培养24h后测定指标.结果 ①与正常组比较,高糖组细胞乳酸脱氢酶活性、细胞凋亡率、p38激酶活性均显著升高,Trx活性明显降低（P＜0.05）;硫氧还蛋白表达无明显变化,但细胞内蛋白硝基化的标志物3-硝基酪氨酸生成量增加,Trx的内源性抑制蛋白硫氧还蛋白相互作用蛋白（TXNIP）表达明显上调,活性氧（ROS）生成和丙二醛（MDA）的含量均明显升高（P均＜0.05）.②与高糖组比较,高糖＋GLP-1组乳酸脱氢酶活性、细胞凋亡率、p38激酶活性明显降低,Trx活性明显恢复（P＜0.05）,3-硝基酪氨酸生成、TXNIP表达、活性氧生成和丙二醛的产生量均明显降低（P均＜0.05）.结论 高糖可引起培养的乳鼠心肌细胞发生损伤和凋亡,这种损伤与高糖引起的Trx活性和功能下降有关.蛋白的硝基化、TXNIP的表达上调均可抑制Trx的活性,使其抗自由基和抗凋亡功能减弱,自由基生成增加,p38激酶介导的凋亡途径加强,进而引起心肌细胞损伤和凋亡.GLP-1处理可使高糖引起的TXNIP表达明显下调,蛋白硝基化减轻,Trx活性得到改善,细胞自由基损伤和凋亡减轻,通过对Trx系统的保护而逆转高糖引起的细胞损伤和凋亡.     

营养物质刺激肠道L细胞分泌GLP-1的机制

在营养物质的刺激作用下,肠上皮的L细胞分泌胰高血糖素样肽-1( GLP-1),后者具有控制餐后血糖和食欲的重要作用.这些营养物质包括糖类物质、蛋白质、脂类物质,其中糖类物质刺激L细胞分泌GLP-1的机制包括ATP敏感的K通道(KATP通道)、钠-葡萄糖协同转运体(SGLT)1、味觉受体通路;蛋白质刺激L细胞分泌GLP-...     

GLP-1相关降糖药物的临床应用

胰高血糖素样肽-1(GLP-1)具备多重抗高血糖作用.近年来基于其治疗2型糖尿病的方案已成为新的研究热点并引起广泛关注.它的几种类似物作为新的降糖药物相继完成Ⅲ期临床研究并在一些国家上市.现就GLP-1的结构、功能,以及几种相关降糖药物的临床研究做一概述.     

Near-normalisation of diurnal glucose concentrations by continuous administration of glucagon-like peptide-1 (GLP-1) in subjects with NIDDM

Summary The gut hormone, glucagon-like peptide-1 (GLP-1) is a potent insulin secretogogue with potential as a therapy for non-insulin-dependent diabetes mellitus (NIDDM). GLP-1 has been shown to reduce glucose concentrations, both basally, and, independently, in response to a single meal. For it to be an effective treatment, it would need to be administered as a long-acting therapy, but this might not be feasible due to the profound delay in gastric emptying induced by GLP-1. In order to assess the feasibility and efficacy of continuous administration of GLP-1 in NIDDM, we determined the effects of continuous intravenous infusion of GLP-1 (7–36) amide, from 22.00–17.00 hours, on glucose and insulin concentrations overnight and in response to three standard meals, in eight subjects with NIDDM. These were compared with responses to 0.9 % NaCl infusion and responses in six non-diabetic control subjects who were not receiving GLP-1. Effects on beta-cell function were assessed in the basal state using homeostasis model assessment (HOMA) and in the postprandial state by dividing incremental insulin responses to breakfast by incremental glucose responses. To assess possible clinical benefit from priming of beta cells by GLP-1 given overnight only, a third study assessed the effect of GLP-1 given from 22.00–07.30 hours on subsequent glucose responses the next day. Continuous GLP-1 infusion markedly reduced overnight glucose concentrations (mean from 24.00–08.00 hours) from median (range) 7.8 (6.1–13.8) to 5.1 (4.0–9.2) mmol/l (p < 0.02), not significantly different from control subjects, 5.6 (5.0–5.8) mmol/l. Daytime glucose concentrations (mean from 08.00–17.00 hours) were reduced from 11.0 (9.3–16.4) to 7.6 (4.9–11.5) mmol/l (p < 0.02), not significantly different from control subjects, 6.7 (6.5–7.0) mmol/l. GLP-1 improved beta-cell function in the basal state from 62 (13–102) to 116 (46–180) %β (p < 0.02) and following breakfast from 57 (19–185) to 113 (31–494) pmol/mmol (p < 0.02). GLP-1 only given overnight did not improve the glucose responses to meals the next day. In conclusion, continuous infusion of GLP-1 markedly reduced diurnal glucose concentrations, suggesting that continuous GLP-1 administration may be a useful therapy in NIDDM. [Diabetologia (1997) 40: 205–211] Received: 3 July 1996 and in final revised form: 23 October 1996     

罗格列酮对高糖诱导下大鼠肾小球系膜细胞增殖及细胞周期的影响

以大鼠肾小球系膜细胞株(HBZY-1)为靶细胞,观察不同浓度不同时间罗格列酮(RSG)对高糖培养的系膜细胞的作用,发现RSG在一定范围内以剂量和时间依赖关系抑制高糖诱导的肾小球系膜细胞增殖,阻止系膜细胞由G1期进入S期,并诱导细胞凋亡。RSG有效减轻了高糖诱导的肾小球系膜细胞的病理损伤。     

二甲双胍对波动性高糖诱导的内皮细胞功能障碍的逆转作用及其机制

目的探讨二甲双胍对波动性高糖诱导的内皮细胞损伤的保护作用及其可能机制。方法以体外培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）作为研究对象,分为6组：正常葡萄糖对照组、高渗对照组、持续性高糖组、波动J生高糖组、波动性高糖＋二甲双胍组以及波动性高糖＋二甲双胍＋化合物C组,各组均干预72h。以硝酸还原酶法检测细胞上清液亚硝酸盐浓度代表一氧化氮（NO）产生水平;流式细胞仪分析测定细胞内活性氧簇（ROS）水平;Westernblotting检测单磷酸腺苷激活蛋白激酶（AMPK）、磷酸化AMPK（Thr-172,p-AMPK）及三磷酸鸟苷环化水解酶1（GTPCH1）的蛋白表达水平。组间比较采用单因素方差分析和Q检验。结果（1）与正常葡萄糖对照组（100％）相比,波动性高糖组细胞内ROS水平增加[（222．4±62．0）％],NO水平下降[（70．3±7．1）％];添加二甲双胍后ROS水平降低[（100．2±17．4）％],NO水平升高[（96．3±9．2）％];添加AMPK抑制剂化合物c后ROS水平增加[（167．2±19．6）％],NO水平降低[（83．3±8．7）％]。差异均有统计学意义（均P〈0．05）。（2）与正常葡萄糖对照组相比,波动性高糖组p-AMPK[（1．72±0．08）比（2．34±0．09）]和GTPCH1[（4．07±0．17）比（7．83±0．56）]表达水平降低;添加二甲双胍后p-AMPK（2．72±0．22）和GTPCH1（10．24±1．05）表达水平增高;添加化合物C后GTPCH1表达水平降低（2．39±0．34）。差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论二甲双胍可通过激活AMPK信号通路,上调GTPCH1表达,从而改善波动性高糖所致的内皮细胞功能障碍。