鼻内镜术后鱼腥草滴鼻液与糠酸莫米松鼻喷雾剂联合局部应用对鼻黏膜组织重塑的影响研究

目的　探讨鼻内镜术后鱼腥草滴鼻液与糠酸莫米松鼻喷雾剂联合局部应用对黏膜组织修复与重塑的影响。方法　将46例行鼻内镜手术的慢性鼻-鼻窦炎伴和不伴鼻息肉患者,通过随机数表随机分为3组,分别为鱼腥草滴鼻液+糠酸莫米松鼻喷联合治疗组（16例）、单用糠酸莫米松鼻喷雾剂组（15例）及单用鱼腥草滴鼻液组（15例）,在鼻内镜术后给予相应治疗,3个月后评估患者术后治疗有效率情况。采用免疫组化法评估鼻黏膜上皮细胞损伤分级,并分别计数鼻黏膜上皮细胞中转化生长因子β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）、成纤维细胞生长因子-2（fibroblast growth factor-2,FGF-2）、基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）阳性细胞数。结果　治疗3个月后,联合治疗组患者治疗后的病情完全控制率优于单药治疗组（P 均<0.05）,联合治疗组患者中无鼻黏膜损伤比例显著高于单药治疗组,且基底膜厚度较单药治疗组薄,TGF-β1阳性细胞数较单药治疗组少（P 均<0.05）。治疗后联合治疗组鼻黏膜上皮细胞中FGF-2阳性细胞数和MMP-9阳性细胞数较单药治疗组明显减少（P 均<0.05）。结论　鼻内镜术后鱼腥草滴鼻液与糠酸莫米松鼻喷雾剂联合局部应用,较局部单用以上两种药物有更好疗效,可促进黏膜上皮化,能明显减缓鼻黏膜重塑过程的发生与发展,促进鼻黏膜功能恢复,对鼻内镜术后鼻黏膜修复及预后具有积极意义。     

IL-36γ通过NF-κB通路调控慢性鼻窦炎伴鼻息肉组织重塑相关因子的表达

目的　明确白细胞介素36γ（IL-36γ）在慢性鼻窦炎伴鼻息肉（chronic rhinosinusitis with nasal polyps,CRSwNP）中对组织重塑相关因子基质金属蛋白酶9（MMP-9）和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL）的调控作用。方法　免疫组织化学及ELISA技术检测对照组、慢性鼻窦炎不伴鼻息肉（chronic rhinosinusitis without nasal polyps,CRSsNP）组和CRSwNP组鼻黏膜组织中IL-36γ、MMP-9和NGAL的定位及定量表达,并分析其与各临床参数的相关性。原代培养鼻息肉黏膜上皮细胞分为对照组（PBS）、IL-36γ组及NF-κB阻断剂（BAY）组,qRT-PCR和ELISA检测各组中MMP-9和NGAL的表达。结果　IL-36γ主要表达于鼻黏膜上皮细胞中,MMP-9、NGAL主要表达于鼻黏膜上皮细胞和黏膜下炎症细胞中。IL-36γ、MMP-9 及NGAL在CRSwNP组中的表达量显著增高（P 均＜0.05）;MMP-9、NGAL与Lund-Mackay及Lund-Kennedy评分呈显著正相关（P 均＜0.05）。IL-36γ增加鼻息肉黏膜上皮中MMP-9和NGAL表达,BAY可抑制这一效应。结论　IL-36γ可能通过调控MMP-9和NGAL表达影响CRSwNP组织重塑。     

不伴鼻息肉的慢性鼻-鼻窦炎鼻黏膜组织重塑研究

目的：观察慢性鼻-鼻窦炎不伴鼻息肉（cRssNP）黏膜组织重塑的特点。方法：收集30例CRSsNP患者和10例对照组的钩突黏膜组织,分别进行苏木精一伊红染色、Masson三色胶原染色、阿辛蓝-过典酸-希夫染色及苦味酸-天狼星红染色,观察黏膜上皮损伤、杯状细胞化生、基膜增厚、细胞外基质胶原沉积、腺体增生及胶原组成等情况。结果：①CRSsNP组上皮细胞损伤1级、2级和3级均比对照组明显增多（P〈0．01或P〈0．05）,而损伤0级比对照组明显减少（P〈0．01）。②黏膜下固有层黏液腺增生明显,分泌旺盛,上皮层杯状细胞计数较对照组明显增多（P〈0．01）。③黏膜细胞外基质胶原沉积较对照组明显增多,基膜明显增厚（P〈0．01）。④胶原沉积以Ⅰ型胶原为主,Ⅲ型、Ⅳ型胶原较少。结论：CRSsNP存在明显的鼻黏膜组织重塑,表现为上皮细胞损伤,细胞外基质胶原沉积、基膜增厚、杯状细胞和黏液腺增生。     

实验性变应性鼻炎最轻持续炎性反应对豚鼠鼻黏膜的影响

目的建立豚鼠实验性变应性鼻炎最轻持续炎性反应（minimal persistent inflammation，MPI）模型，观察长期处于MPI状态下鼻黏膜的改变，初步探讨这一过程中转化生长因子β1，（transforming growth factor-β1，TGF-β1）和基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinases-9，MMP-9）表达的变化。方法健康雄性Hartley系豚鼠30只，随机分为MPI模型组和对照组，每组15只。首先以含卵清蛋白（ovoalbumin，OVA）和氢氧化铝凝胶的生理盐水混合液行基础致敏和强化致敏，再以低浓度OVA长期鼻腔激发，建立豚鼠变应性鼻炎MPI模型。通过阿辛蓝-过碘酸-希夫（alcian blue-periodic acid-Schiff，AB-PAS）染色和Masson三色胶原染色（Masson’s trichrome，MT），分别检测鼻黏膜上皮内杯状细胞的数量以及基底膜内胶原的含量；采用双重免疫荧光法标记TGF-β1和MMP-9，激光共聚焦显微镜下观察两种因子在鼻黏膜内的分布及表达情况。结果与对照组相比，MPI模型组豚鼠鼻黏膜内杯状细胞数量明硅增多，差异具有统计学意义（t=13．720，P〈0．05）；基底膜明显增厚，胶原含量增多（t=4．542，P〈0．05）。对照组豚鼠鼻黏膜内，TGF-β1几乎没有表达，MMPO只在纤毛上皮细胞内有轻微的表达。MPI模型组豚鼠鼻黏膜内，两种因子均有表达。TGF-β1主要表达于黏膜上皮细胞及固有层内浸润的炎细胞胞质和细胞外基质；MMP-9主要表达于黏膜上皮细胞及固有层内浸润的炎细胞胞质中，其在黏膜上皮细胞内的表达强度高于对照组（t=25．218，P〈0．05）。结论长期处于变应性鼻炎MPI状态下，豚鼠鼻黏膜内出现了具有组织重塑特征的改变，TGF-β1和MMP-9可能在这一过程中发挥作用。     

不伴鼻息肉的慢性鼻及鼻窦炎黏膜重构的组织病理学研究

目的观察不伴鼻息肉的慢性鼻及鼻窦炎（chronic rhinosinusitis without nasal polyps, CRSsNP）黏膜是否具有相似的组织重构的特征。方法选取50例CRSsNP患者和20例对照组的钩突黏膜,分别进行HE染色、Masson2色胶原染色、VanGieson染色（VG染色）和阿辛蓝一过碘酸．希夫（alcian blue-periodic acid-Schiff,AB-PAS）染色,观察黏膜上皮损伤、基底膜厚度、黏膜下胶原和腺体增生等情况。结果所有CRSsNP组黏膜均存在上皮脱落、基底膜增厚、黏膜下胶原沉积和黏液腺细胞增生等组织病理学特征,且均较对照组严重。结论黏膜组织重构是CRSsNP的普遍现象。     

慢性鼻-鼻窦炎鼻息肉内镜术后糖皮质激素对鼻黏膜重塑的影响

目的探讨慢性鼻-鼻窦炎鼻息肉（chronic rhinosinusitis with nasal polypsis，CRSwNP）内镜术后糖皮质激素对鼻黏膜重塑的影响。方法30例CRSwNP患者行鼻内镜手术切除的鼻腔病变黏膜组织作为术前组；术后将患者平均分为两组：激素组（术后应用糖皮质激素丙酸氟替卡松喷剂，200μg／d）和对照组（术后未应用丙酸氟替卡松及其他糖皮质激素）。术后第1、3个月复查时取其前筛区黏膜标本。另取6例行鼻中隔矫正术患者的钩突处黏膜作为正常对照。采用HE染色观察鼻黏膜上皮损伤（脱落）情况；以免疫组化方法观察鼻黏膜中转化生长因子-β1（transforming growth factor．β1，TGF．β1）和胶原Ⅲ的表达。结果术前组鼻黏膜标本可见90％（27／30）的上皮损伤为3期，10％（3／30）为2期；87％（26／30）的鼻黏膜标本可见TGF-β1阳性细胞，胶原Ⅲ阳性基底膜厚度〉20μm者占97％（29／30）。术后第1个月时，对照组和激素组鼻黏膜形态及免疫组化TGF-β1和胶原Ⅲ的表达无明显差异。术后第3个月时，对照组53％（8／15）的上皮损伤为3期，33％（5／15）为2期，14％（2／15）为1期；激素组93％（14／15）为0期，7％（1／15）为1期，两组比较差异有统计学意义（Uc=4．481，P〈0．05）。免疫组化显示对照组TGF-β1阳性炎性细胞数量明显高于激素组（t=2．32，P〈0．05），对照组胶原Ⅲ阳性基底膜厚度〉20μm者10例（67％），与激素组（4例，27％）相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论CRSwNP内镜术后鼻腔黏膜发生组织重塑，术后及时恰当地应用糖皮质激素对抑制重塑，预防复发十分重要；术后随访不应少于3个月或更长。     

大环内酯类药物治疗慢性鼻-鼻窦炎的疗效观察

目的　探讨大环内酯类药物治疗慢性鼻-鼻窦炎不伴鼻息肉（chronic rhinosinusitis without nasal polyp,CRSsNP）的临床疗效。方法　对82例成人CRSsNP患者按照鼻窦CT评分严重情况随机分成治疗组和对照组两组,每组各41例。治疗组给予布地奈德喷鼻,2次/d,克拉霉素250 mg口服,1次/d,连续3个月;对照组予布地奈德喷鼻,2次/d。所有患者均每1个月进行1次肝肾功能评估,观察比较两组用药前、后主观客观指标的变化（视觉模拟量表评分,鼻内镜检查Lund-Kennedy评分,鼻窦CT扫描评分）。结果　治疗组所有患者视觉模拟量表评分、鼻内镜检查Lund-Kennedy评分及鼻窦CT扫描评分均明显下降（t =23.79、31.69、26.06,P 均<0.05）,与对照组比较（t =10.42、13.28、10.17,P 均<0.05）差异有统计学意义。结论　大环内酯类药物能有效控制CRSsNP的症状,特别对于激素治疗不敏感的患者,不适于手术的患者更是一种有效的治疗手段。     

慢性鼻-鼻窦炎中转化生长因子β1与胶原纤维的表达及意义

目的：探讨转化生长因子（TGF—β1）及胶原纤维在慢性鼻-鼻窦炎中的表达及在鼻腔上皮黏膜组织重塑中的作用,及TGF-β1与胶原纤维沉积的关系。方法：62例鼻内镜手术患者分为CRSwNP组21例,CRSs—NP组15例,复发性鼻息肉组11例及对照组15例,其标本均进行免疫组织化学和Masson胶原染色。人工计数阳性细胞个数,通过Mann—WhitneyU检验方法分析CRSwNP组、CRSsNP组、复发性鼻息肉组与对照组的表达情况。实验各组与对照组组间用单因素的方差分析One—wayANOVA进行分析。结果：实验各组与对照组均有TGF-131表达,也都有胶原的沉积。其中,TGF-β1在CRSsNP组较对照组表达明显减低（P〈0．05）,CRSwNP组较CRSsNP组表达明显增加（P〈0．05）;Masson胶原染色中,CRSsNP组较对照组表达明显减低（P〈0．01）。复发性鼻息肉组较对照组表达明显增加（P〈0．05）。TGF-β1和Masson胶原染色之间呈正相关（P〈0．05）。结论：TGF-β1和胶原纤维沉积不仅与慢性鼻-鼻窦炎的组织重塑相关,而且TGF-β1的表达增加与胶原纤维过多沉积也呈正相关。     

烧伤湿性医疗技术对鼻黏膜基质金属蛋白酶9和嗜酸性粒细胞表达的影响

目的通过检测基质金属蛋白酶9(matrix metallopro-teinases,MMP-9)和嗜酸性粒细胞(eosinophil,EOS)在鼻腔黏膜的表达水平,探讨烧伤湿性医疗技术(MEBT/MEBO)对慢性鼻窦炎鼻息肉患者鼻内镜术后疗效的影响。方法对45例接受鼻内镜手术治疗的慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者,随机分为实验组(24例)和对照组(21例)。实验组为MEBT/MEBO组,对照组为空白组,分别应用免疫组织化学和苏木精-伊红染色方法检测慢性鼻窦炎鼻息肉患者术后2周术腔黏膜组织中的MMP-9和EOS的表达。结果对照组术腔黏膜组织中EOS的表达水平显著高于实验组,MMP-9免疫阳性细胞数及着色强度均高于实验组,差异均有统计学意义(P<0.0 5)。结论 烧伤湿性医疗技术(MEBT/MEBO)应用于慢性鼻窦炎鼻息肉患者鼻内镜术后创面处理,能够明显加速术腔上皮化,可能与通过抑制MMP-9降低EOS在鼻黏膜局部的浸润有关。     

鼻用激素剂量差异对变应性鼻炎小鼠鼻黏膜重塑及MMP-9表达的影响

目的:探讨不同剂量鼻用激素对变应性鼻炎(AR)小鼠鼻黏膜重塑及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法:将30只雌性BALB/c小鼠随机分为5组,A组[生理盐水组(NS组)],B组[卵清蛋白组(OVA组)],D1组(低剂量布地奈德组),D2组(中剂量布地奈德组)及D3组(高剂量布地奈德组)。分别接受OVA或NS腹腔注射、鼻部激发。D1、D2及D3组小鼠使用不同剂量的布地奈德鼻喷激素(0.6μg/20g、3.0μg/20g、15.0μg/20g)喷鼻12周,1次/d。分别在4周末及16周末评估小鼠鼻部症状学的变化,并于16周末取小鼠鼻腔组织分别行苏木精-伊红染色、PAS及MT法染色评估其鼻腔黏膜重塑变化。使用ELISA测定小鼠鼻腔黏膜MMP-9的含量。结果:16周末B组小鼠的挠鼻、喷嚏次数及嗜酸粒细胞浸润个数均较A组增多,且出现杯状细胞增多,黏膜下腺体增生、肥大,上皮下纤维化及胶原沉积的变化。0.6μg/20g的布地奈德治疗可以抑制AR小鼠的鼻部症状学变化及嗜酸粒细胞浸润,而对于鼻腔黏膜重塑变化则需要至少3.0μg/20g的鼻喷激素。鼻喷激素可以抑制AR小鼠鼻腔中MMP-9的分泌。结论:高剂量鼻用激素可能通过抑制AR小鼠鼻腔MMP-9的分泌,抑制鼻腔黏膜重塑的发展。     

实验性变应性鼻炎最轻持续炎性反应对豚鼠鼻黏膜的影响

目的 建立豚鼠实验性变应性鼻炎最轻持续炎性反应(minimal persistent inflammation,MPI)模型,观察长期处于MPI状态下鼻黏膜的改变,初步探讨这一过程中转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)表达的变化.方法 健康雄性Hartley系豚鼠30只,随机分为MPI模型组和对照组,每组15只.首先以含卵清蛋白(ovoalbumin,OVA)和氢氧化铝凝胶的生理盐水混合液行基础致敏和强化致敏,再以低浓度OVA长期鼻腔激发,建立豚鼠变应性鼻炎MPI模型.通过阿辛蓝-过碘酸-希夫(alcian blue-periodic acid-Schiff,AB-PAS)染色和Masson三色胶原染色(Masson's triehrome,MT),分别检测鼻黏膜上皮内杯状细胞的数量以及基底膜内胶原的含量;采用双霞免疫荧光法标记TGF-β1和MMP-9,激光共聚焦显微镜下观察两种因子在鼻黏膜内的分布及表达情况.结果 与对照组相比,MPI模型组豚鼠鼻黏膜内杯状细胞数量明显增多,差异具有统计学意义(t=13.720,P＜0.05);基底膜明显增厚,胶原含量增多(t=4.542,P＜0.05).对照组豚鼠鼻黏膜内,TGF-β1几乎没有表达,MMP-9只在纤毛上皮细胞内有轻微的表达.MPI模型组豚鼠鼻黏膜内,两种因子均有表达.TGF-β1主要表达于黏膜上皮细胞及固有层内浸润的炎细胞胞质和细胞外基质;MMP-9主要表达于黏膜上皮细胞及固有层内浸润的炎细胞胞质中,其在黏膜上皮细胞内的表达强度高于对照组(t=25.218,P＜0.05).结论 长期处于变应性鼻炎MPI状态下,豚鼠鼻黏膜内出现了具有组织重塑特征的改变,TGF-β1和MMP-9可能在这一过程中发挥作用.     

应用Logistic回归分析鼻内镜下治疗慢性鼻-鼻窦炎效果影响因素

目的探讨鼻内镜下手术治疗慢性鼻-鼻窦炎患者的临床治疗效果及影响因素。方法选择我院2010年1月-2011年12月行鼻内镜手术的慢性鼻-鼻窦炎患者270例,其中不伴有鼻息肉慢性鼻-鼻窦炎患者146例,伴鼻息肉者124例。收集相关临床资料,对鼻内镜术后6个月进行疗效评定,并应用Logistic回归分析影响手术治疗效果的危险因素。结果鼻内镜下手术治疗270例慢性鼻-鼻窦炎患者,总体病情完全控制率达87．78％（237／270）;不伴鼻息肉组病情完全控制率达92．47％（135／146）明显高于伴鼻息肉组82．26％（102／124）（X^2=6．512,P=0．011）,不伴鼻息肉组手术疗效明显优于伴鼻息肉组（X^2=7．539,P=0．023）;Logistic回归分析显示临床类型、是否伴有变应性鼻炎、VAS评分、Lund-Mackay评分、Lund—Kennedy评分、是否复发、术后随访依从性是影响手术疗效的主要因素。结论Logistic回归分析显示鼻内镜下治疗慢性鼻一鼻窦炎疗效除与是否伴有鼻息肉有关外,还与其他多种因素相关。     

常年性持续性变应性鼻炎患者鼻黏膜组织中类固醇受体-β mRNA的表达

目的通过检测皮质类固醇（corticosteroids,CS）受体α及βmRNA在接受鼻腔CS治疗后不同疗效的两组常年性持续性变应性鼻炎（AR）患者鼻黏膜的定量表达,探讨在不同组AR鼻黏膜组织中CS-α和CS-β的表达意义。方法通过随访120例门诊AR患者后筛查出65例常年性持续性AR患者,其中CS敏感组36例,CS抵抗组29例。采用荧光定量反转录聚合酶链反应（FQ-RT-PCR）方法,检测65例常年性持续性AR患者鼻黏膜组织中CS-αmRNA和CS-βmRNA的定量表达。结果在CS抵抗组鼻黏膜组织中CS-βmRNA表达[（5.62±1.28）×102拷贝/μg]均高于CS敏感组[（4.62±0.48）×102拷贝/μg,t=-6.67,P〈0.01]和正常鼻黏膜组[（5.32±0.55）×102拷贝/μg,t=-8.29,P〈0.01],并在该两组之间差异均有统计学意义。CS-αmRNA与CS-βmRNA的比值在CS敏感组（658.32±65.16）与CS抵抗组（525.70±68.10）间差异有统计学意义（t=10.16,P〈0.01）。结论常年性持续性AR患者中的CS-βmRNA高表达、CS-αmRNA表达下调提示CS抵抗的存在,CS-β在评价AR患者对CS治疗疗效上有一定作用。     

鼻腔结构重塑在慢性鼻-鼻窦炎治疗前后的主客观评估及相关性研究

目的探讨慢性鼻-鼻窦炎(chronic rhinosinusitis,CRS)患者行鼻腔结构重塑前后的主客观评估及相关性研究。方法对70例CRS患者鼻内镜下行下鼻甲射频消融外移术、中鼻甲成形术及窦口鼻道复合体功能性切除术,同期行鼻中隔黏膜下矫正术。术前对所有患者作主观症状视觉模拟量表(visual analog scale,VAS)调查、客观检查及评分、Lund-Kennedy内镜评分和Lund-Mackay CT评分。术后随访1年,分别行以上3种评分,并作相关性分析。结果术前VAS评分总分与CT评分呈显著正相关(r=0.39,P<0.01),内镜评分与CT评分呈正相关(r=2.11,P<0.05),但嗅觉障碍的VAS评分与内镜、CT评分无相关性,差异无统计学意义。术前VAS与术后VAS评分差异具有统计学意义(t=39.51,P<0.01),术后VAS与术后内镜评分差异具有统计学意义(r=0.59,P<0.01),术前与术后Lund-Kennedy内镜评分比较差异具有统计学意义(t=39.30,P<0.01)。结论术前VAS评分、CT评分、内镜评分呈正相关,术后随访1年,手术后主观症状VAS总分与术前差异具有统计学意义,与术后Lund-Kennedy内镜评分呈正相关。术前及术后的鼻塞、头晕、面部疼痛、鼻漏症状与客观评估有相关性。手术需多方面评价,有利于个体化的手术。     

IL-5和GM-CSF在慢性鼻-鼻窦炎手术前后鼻窦黏膜中的表达及意义

目的检测慢性鼻-鼻窦炎（chronic rhinosinusitis,CRS）手术前后鼻窦黏膜组织中白细胞介素-5（interleukin-5,IL-5）、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte-macrophage colonystimulating factor,GM-CSF）的表达,探讨IL-5、GM-CSF在CRS患者手术前后术腔黏膜转归过程的表达变化规律及其作用。方法采用ElivisionTMS-P免疫组织化学技术与HE染色方法检测10例行鼻内镜手术的Ⅱ型CRS患者术前,术后第1周、4～6周和8～10周鼻窦黏膜组织中IL-5和GM-CSF的表达;同时以1 0例单纯鼻中隔偏曲患者上颌窦口黏膜组织作为对照。结果①CRS患者术前,术后第1周、4～6周和8～10周鼻窦黏膜组织中IL-5和GM-CSF的表达水平均明显高于对照组（P〈0.01）。②CRS术后第1周IL-5和GM-CSF表达均较术前明显降低（P〈0.01）;术后第4～6周IL-5和GM-CSF的表达达高峰,术后第8～10周IL-5和GM-CSF的表达下降。结论IL-5和GM-CSF在Ⅱ型CRS患者术前、术后鼻窦黏膜组织中表达呈一定的规律变化,提示IL-5和GM-CSF可能与CRS病变的转归有密切关系。