三氧化二砷对鼻咽癌细胞周期和细胞骨架微丝的影响

目的 研究三氧化二砷（As2O3）对鼻咽癌细胞周期和细胞骨架微丝的影响并探讨其作用机制.方法 采用流式细胞仪（flow cytometry,FCM）、激光扫描共聚焦显微镜（Iaser scanning confocal microscopy,LSCM）和荧光标记技术,检测人鼻咽癌细胞株（nasopharyngeal carcinoma cell line,CNE1）经As2O3诱导后细胞周期和细胞骨架微丝的变化.结果 FCM显示,经浓度为2 μ mol/L、4 μ mol/L As2O3处理后,G1期的细胞显著增加（P＜0.001）;经8 μ mol/L As2O3处理后,出现明显的细胞凋亡峰（P＜0.001）,S和G2/M期细胞显著增加（P＜0.001）.经4 μ mol/L、8 μmol/L As2O3处理后,细胞内纤维型-肌动蛋白（F-actin）含量明显减低（P＜0.001）.LSCM图像观察到,经4 μ mol/L As2O3处理后,标记F-actin的绿色荧光显著减弱;经8 μ mol/LAs2O3处理后,凋亡细胞具有典型的凋亡形态特征.结论 As2O3引起的细胞周期的改变对CNE1细胞的分化和凋亡起重要作用;As2O3诱导的细胞骨架微丝的改变与细胞周期的改变密切相关.     

丹参酮ⅡA对人鼻咽癌CNE1细胞株B7H3表达的影响

目的:研究丹参酮ⅡA(TanⅡA)对人鼻咽癌CNE1细胞增殖及对共刺激分子B7H3表达的影响。方法:不同浓度TanⅡA作用人鼻咽癌CNE1细胞后,四甲基唑盐比色法检测CNE1细胞增殖,流式细胞术检测CNE1细胞凋亡和细胞周期,直接免疫萤光法检测CNE1细胞凋亡蛋白Bcl-2和共刺激分子B7H3的表达变化。结果:TanⅡA对CNE1细胞生长表现出明显抑制作用,抑制率与药物呈明显的时间与浓度依赖效应,差异有统计学意义(P<0.01);24h、48h、72h的IC50值分别为12.5μmol/L、4.8μmol/L和3.0μmol/L;低、中、高浓度组CNE1细胞凋亡率较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.01);细胞周期阻滞于G2/M期,低、中、高浓度组Bcl-2及B7H3表达较对照组下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TanⅡA对CNE1细胞具有抑制生长、促进凋亡的作用,TanⅡA下调Bcl-2及B7H3的表达可能是抗肿瘤作用机制之一。     

PI3K-Akt抑制剂诱导人鼻咽癌细胞CNE2凋亡的作用

近年的研究表明,磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K-Akt)信号转导通路在肿瘤信号转导中起着重要的调节作用.细胞在一系列内外因素的作用下,通过启动PI3K-Akt信号转导通路,诱导细胞的增殖、分化、转移,避免细胞发生凋亡[1-2].LY294002[2-(4-morpholinyl)-8-phenyl-4H-1-benzopyran-4-one]是PI3K的特异抑制剂,能够完全抑制PI3K 的活性,对其他ATP 依赖性激酶无抑制作用[3].本组实验应用PI3K-Akt 特异性抑制剂LY294002 作用于鼻咽癌细胞系CNE2,观察其对CNE2细胞生长的抑制作用,探讨LY294002 对鼻咽癌细胞系的作用及机制.     

草氨酸钠抑制细胞自噬对鼻咽癌放射敏感性的影响

目的　草氨酸钠对鼻咽癌CNE2细胞放射后自噬的影响,以及对放射的增敏作用。方法　鼻咽癌CNE2细胞培养于RMPI-1640 培养液,MTT 法检测 CNE2细胞生长抑制。Western blot检测自噬蛋白LC3Ⅱ表达。结果  0、10、20、40 mmol/L草氨酸钠处理CNE2细胞48小时后,细胞生长抑制率分别为（0.37±0.04）%、（7.28±2.24）%、（6.54±4.161）%、（27.09±5.35）%,各组间具有显著性差异（P 均<0.01）。60 Gy X线照射联合0、10、20、40 mmol/L草氨酸钠处理CNE2细胞48小时后,细胞生长抑制率分别为（31.62±7.24）%、（38.32±10.43）%、（50.28±11.35）%、（62.12±13.16）%,各组间具有显著性差异（P 均<0.05）,细胞克隆抑制率分别为（52.16±11.34）%、（60.27±11.83）%、（77.25±13.16）%、（86.42±13.74）%,各组间具有显著性差异（P 均<0.05）。LC3Ⅱ蛋白灰度扫描分析显示对照细胞、射线处理细胞、射线+10 mmol/L草氨酸钠处理细胞、射线+20 mmol/L草氨酸钠处理细胞、射线+40 mmol/L草氨酸钠处理细胞LC3Ⅱ表达的相对灰度值分别0.104±0.013、0.714±0.183、0.562±0.126、0.414±0.095和0.253±0.052,各组间具有显著性差异（P 均<0.05）。结论　草氨酸钠抑制了放射引起的CNE2细胞自噬,增强了CNE2细胞对放射的敏感性。     

染料木黄酮对喉癌Hep-2细胞系增殖和凋亡的影响

目的　探讨染料木黄酮（genistein,Gen）对人鳞状细胞喉癌Hep-2细胞系增殖和凋亡的影响。方法　用CCK-8法检测不同浓度Gen对Hep-2细胞系增殖的影响;用实时荧光定量聚合酶链反应（Real-Time PCR）检测Gen对Hep-2细胞系血管内皮生长因子受体-3（vascular endothelial growth factor receptor-3,VEGFR-3）mRNA表达的影响;用流式细胞术检测Gen单独及联合VEGFR-3特异性阻滞剂MAZ51对Hep-2细胞系凋亡的影响;Western blot检测各组AKT蛋白表达及其磷酸化水平。结果　Gen可抑制Hep-2细胞系增殖,且抑制作用呈剂量依赖性;Gen能抑制Hep-2细胞系的VEGFR-3 mRNA表达,抑制率为32%;单用Gen和MAZ51均能诱导Hep-2细胞系凋亡,二者联合应用对Hep-2细胞系的凋亡诱导作用明显增强;Gen与MAZ51均能抑制AKT第308位苏氨酸（Thr308）及第473位丝氨酸（Ser473）磷酸化激活,使p-AKT-Thr308和p-AKT-Ser473减少,两种药物合用抑制率更高。结论　Gen可通过抑制VEGFR-3表达阻止AKT磷酸化激活,并发挥抑制喉癌细胞增殖和诱导其凋亡的抗癌作用。     

苦参碱对人鼻咽癌CNE2细胞的生长抑制作用及凋亡相关基因Caspase表达的研究

目的：观察苦参碱对人鼻咽癌CNE2细胞的生长抑制及对凋亡相关基因Caspase-3 mRNA及Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9蛋白表达的影响,探讨苦参碱抑制人鼻咽癌细胞增殖和诱导其凋亡的机制。方法：采用MTT法检测不同浓度（0、0.25、0.50、0.75、1.00、1.50、2.00g/L）苦参碱对CNE2细胞增殖的影响;采用荧光PCR法检测不同浓度（0、0.75、1.00、1.50g/L）苦参碱处理48h后Caspase-3mRNA的变化;Western Blot检测Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9蛋白的变化情况。结果：苦参碱对CNE2细胞具有明显的抑制作用,呈浓度依赖性;能上调CNE2细胞Caspase-3mRNA和Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白的表达,且呈浓度依赖性。结论：苦参碱能抑制CNE2细胞的生长,呈浓度依赖性。其作用与上调CNE2细胞Caspase-3mRNA和Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白的表达,启动Caspase级联反应密切相关。     

白藜芦醇对甲状腺癌SW579细胞株的抗肿瘤作用及机制探讨

目的 观察白藜芦醇对甲状腺癌SW579细胞株的抗肿瘤作用并探讨可能作用机制。方法　体外常规培养甲状腺癌SW579细胞,将细胞分为对照组和白藜芦醇组（终 浓度为20、40、80 μmol/L）,MTT法检测甲状腺癌SW579细胞活性,BrdU荧光染色检测甲状腺癌SW579细胞增殖,DAPI染色法检测细胞凋亡,caspase-3和caspase-9活性检测试剂盒分析白藜芦醇对甲状腺癌SW579细胞亡的作用机制。结果　白藜芦醇（20、40、80 μmol/L）组甲状腺癌SW579细胞活性、BrdU表达、DAPI染色显著低于对照组,但细胞内caspase-3和caspase-9活性上升（P＜0.01）。Ac-DEVD-CHO和ZLEHD-FMK可显著提高白藜芦醇组（80 μmol/L）中甲状腺癌SW579细胞的活性（P＜0.05）。结论  白藜芦醇对抗甲状腺癌细胞具有抑制作用,通过激活caspase-3和caspase-9内源性凋亡信号通路可能是其作用机 制之一。     

Aurora-A促进鼻咽癌化疗抵抗的机制研究

目的　探讨丝/苏氨酸蛋白激酶Aurora-A促进鼻咽癌化疗抵抗的机制。方法　应用Western blot和Q-PCR检测鼻咽癌组织及癌旁正常组织中Aurora-A的表达水平。选取Aurora-A高表达的鼻咽癌细胞系CNE2，添加Aurora-A激酶抑制剂60 nm VX 680处理8小时后，加入浓度为10 μg/ml的顺铂处理24小时，收集细胞通过流式细胞术检测细胞凋亡情况，同时WB和Q-PCR检测细胞凋亡相关信号通路蛋白的表达情况。结果　Aurora-A在鼻咽癌组织中表达水平明显高于癌旁正常组织，相对于正常鼻咽细胞NP69，Aurora-A在不同鼻咽癌细胞中表达显著升高且在CNE2中表达最高；相对于未处理CNE2，添加顺铂或/和Aurora-A抑制剂VX680处理的CNE2细胞能显著促进鼻咽癌细胞凋亡及p-AKT、p21及Cleaved-Caspase-3的表达。结论　Aurora-A通过p-AKT/p21/Cleaved-Caspase-3通路促进鼻咽癌的化疗抵抗。     

EphA2经P-糖蛋白调控鼻咽癌紫杉醇敏感性的实验研究

摘要：目的探讨EphA2经P 糖蛋白(P glycoprotein,P gp)调控鼻咽癌紫杉醇耐药性的分子机制。方法使用慢病毒载体在鼻咽癌细胞中沉默或过表达EphA2,Western blotting检测P gp蛋白的表达变化; siRNA干扰沉默P gp表达,CCK8法检测P gp蛋白在EphA2介导的鼻咽癌紫杉醇耐药中的作用;小分子化合物LY294002阻断PI3K/Akt信号通路,观察该通路在EphA2调控P gp表达中的作用。结果P gp在EphA2沉默组中表达下调,过表达组中上升;紫杉醇作用于空白对照组、阴性对照组和P gp沉默组的细胞存活率分别是(68.9±4.0)%、(72.4±6.2)%和(52.1±3.7)%,P gp沉默组对紫杉醇的耐药性较空白和阴性对照组降低(P<0.05);在过表达EphA2的鼻咽癌细胞中下调P gp表达,紫杉醇刺激后,P gp沉默组的存活率(36.1±5.1)%显著低于空白对照组(57.9±6.2)%和阴性对照组(58.2±5.8)%(P<0.05);在EphA2过表达鼻咽癌细胞中,给予抑制剂LY294002作用后,Akt总量无明显改变而磷酸化的Akt表达下降,且P gp表达下降。结论EphA2通过P gp依赖性途径促进鼻咽癌紫杉醇耐药,且P gp蛋白的表达增高与EphA2活化PI3K/Akt有关。     

促红细胞生成素抑制氧化损伤诱导的人眼Müller细胞凋亡

目的探讨促红细胞生成素(EPO)抑制氧化损伤导致的Müller凋亡的可能性及其分子机制。方法对培养的人眼Müller细胞系MIO-M1细胞采用Brd U标记法和MTT比色法观察正常及过氧化氢(H2O2)或葡萄糖氧化酶(GO)氧化损伤条件下0、0.01、0.1、1、10、30、100 U/m L EPO作用24、48、72 h后对Müller细胞增殖、迁移的影响;采用MTT比色法观察加PI3K/PDK1/PKB(Akt)信号传导通路阻断剂LY294002后Müller细胞增殖的变化;采用ELISA实验观察Müller细胞对EPO的表达和分泌;通过Western-blotting技术检测体外不同条件培养下EPO对ERK1/2及Akt信号传导通路的作用。结果正常培养条件下,EPO有轻度促进Müller细胞增殖迁移的作用,但差异无统计学意义;正常培养条件下,Müller细胞自身不分泌EPO,0.4 mmol/L H2O2致Müller细胞损伤80%时,其培养液内EPO的表达量为正常培养液下的1.42倍;氧化损伤状态下,0.08 mmol/L H2O2或8 U/L GO作用Müller细胞24 h后导致其半数死亡且Akt信号通路激活;提前2 h加入外源性EPO后,发现30 U/m L EPO对抗氧化所致Müller细胞的损伤作用最明显;同时提前2 h加入Akt信号通路阻断剂LY294002后,Akt信号传导通路的保护作用被阻断减弱。结论 EPO对体外正常培养的Müller细胞不具有促进增殖迁移作用;正常培养条件下Müller细胞自身不表达并且不分泌EPO,氧化损伤条件下Müller细胞自身可低分泌EPO;加入外源性EPO后,EPO可能通过Akt信号传导通路对H2O2损伤的Müller细胞发挥保护作用。     

Ad．RGD—ING4对人鼻咽癌细胞CNE抑癌增效及其机制的研究

目的：研究带RGD的腺病毒介导的ING4对人鼻咽癌细胞CNE生长、凋亡及细胞周期的影响并探讨其可能调节机制。方法：以Ad．RGD-ING4及腺病毒空载体感染CNE细胞,RT—PCR法检测ING4基因的表达水平,Westernblot法检测目的蛋白的表达。用MTT试验检测ING4对CNE细胞生长情况的影响,用AnnexinV—PE／7一AAD双染色测定ING4对CNE细胞凋亡的影响,用PI单染色检测ING4对CNE细胞细胞周期的影响。RT—PCR检测p21、Bcl-2、Bax基因的表达水平的差异,Westernblot法检测Survivin蛋白、Cleaved—caspase3蛋白表达的差异。结果：CNE细胞感染Ad．RGD-ING472h后,ING4在CNE细胞中过表达,CNE细胞的生长受到明显抑制,细胞凋亡率明显升高,G2／M期出现明显阻滞。RT-PCR结果显示,感染Ad．RGD-ING4的CNE细胞中Bcl-2表达下降,p21、Bax表达升高,差异具有统计学意义（均P〈0．01）。Westernblot结果显示Survivin蛋白表达下降,Cleaved—caspase3蛋白表达升高。结论：Ad．RGD-ING4可以对鼻咽癌细胞株CNE的起到抑癌增效作用,这一作用可能是通过下调Bcl-2、Survivin表达及上调p21、Bax、caspase3实现的。     

重组人内皮抑素对鼻咽癌细胞CNE2增殖及凋亡的影响

目的探讨重组人内皮抑素(rh-endostatin,rh-ES)对鼻咽癌CNE2细胞增殖、凋亡的影响。方法分别以25、50、100、200、400μg/ml的rh-ES体外处理人鼻咽癌细胞株CNE2,同时设空白对照组和细胞对照组。利用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测不同浓度和时间rh-ES作用下的细胞增殖状态;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡;透射电镜观察CNE2细胞超微结构的变化。结果①MTT检测显示rh-ES(25～400μg/ml)能抑制CNE2细胞的增殖,不同浓度的rh-ES对人鼻咽癌细胞株CNE2具有不同程度的生长抑制作用,且存在时间剂量效应,以400μg/ml rh-ES作用72 h后抑制效果最为显著,各浓度组相比差异具有统计学意义。②流式细胞仪检测结果发现与CNE2细胞对照组相比,rh-ES实验组处于细胞周期G0/G1期的细胞明显增多,细胞凋亡率增加(P<0.05)。③电镜观察,rh-ES实验组CNE2细胞出现凋亡特征,细胞和细胞器皱缩,核染色质边集碎裂,核膜消失。结论 rh-ES能显著抑制鼻咽癌细胞CNE2细胞的增殖,并具有时间-剂量依赖性,其主要机制可能为诱导细胞凋亡,调整细胞周期分布。     

大鼠耳蜗血管纹缘细胞氧化性损伤体外模型的建立

目的 建立大鼠耳蜗血管纹缘细胞氧化性损伤的体外模型.方法 在体外培养的大鼠耳蜗血管纹缘细胞中加入过氧化氢(H2O2),观察细胞形态结构变化;采用CCK-8(cell counting kit-8)法检测200、300、400、600、800μmoL/LH2O2作用0.5、1、2、4、16、24 h对血管纹缘细胞活性的影响;检测不同浓度H2O2作用2 h后血管纹缘细胞脂质过氧化产物丙二醛含量的变化;利用碘化丙锭染色流式细胞仪测定细胞的凋亡率;通过免疫印迹法(Western blot)检测凋亡因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cmpase-3)活化片段cleaved-caspase-3的表达.结果 H2O2作用后血管纹缘细胞出现核固缩、边缘化,胞质浓缩,被膜包裹、隆起,产生凋亡;随着H2O2浓度的增加、作用时间的延长,缘细胞活性降低;200 μmol/L的H2O2作用2 h,即可诱导缘细胞凋亡率升高,差异具有统计学意义(P<0.05);cleaved-caspase-3在正常缘细胞呈微弱表达,H2O2作用后cleaved-caspase-3表达增强,并随H2O2浓度的增高而增强,但当H2O2达到600 μmol/L时,表达开始减弱,800 μmol/L时仅见微弱表达.结论 利用H2O2可成功建立耳蜗血管纹缘细胞氧化性损伤的体外模型,caspase-3的激活参与了缘细胞的氧化损伤过程.     

shRNA-hIAP2增强CNE-1鼻咽癌细胞对放射敏感性的实验研究

目的构建人凋亡抑制蛋白（ human inhibitor of apoptosis protein2, hlAP-2 ）的shRNA，靶向抑制hlAP-2基因联合放疗，探讨其对CNEl鼻咽癌细胞株放射敏感性的影响。方法首先采用MTT法确定最佳放射剂量；再构建4条hlAP-2．shRNA沉默片段并用脂质体法转染CNEl细胞，最后采用实时荧光定量PCR（Q—PCR）和免疫印迹法（Westernblot，WB）筛选出最佳沉默shRNA序列；用最佳沉默shRNA序列转染CNEl细胞，分别设置转染放射线照射组与未转染放射线照射组，采用实时定量PCR和WB检测hlAP．2的基因及其蛋白表达；流式细胞术测细胞凋亡，transwell测细胞侵袭能力。结果MTr法明确4Gv为最佳放射剂量；Q-PCR和WB检测结果显示4条hlAP-2-shRNA均能有效抑制hIAP-2mRNA及蛋白表达（P〈0．05），以hIAP-2-shRNA2沉默效果最显著（P〈0．05）；Q—PCR和WB检测结果显示转染hlAP-2-shRNA2后照射组与未转染hlAP-2-shRNA2照射组的CNEl细胞中hlAP-2基因与蛋白表达比较，差异具有统计学意义（P〈0．05）；流式细胞术检测结果显示转染hIAP-2-shRNA2后照射组比未转染hlAP-2-shRNA2照射组凋亡率差异具有统计学意义（P〈0．05）；transwell检测结果显示转染hIAP-2-shR-NA2后照射组与未转染hIAP-2-shRNA2照射组侵袭能力差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论转染hIAP-2基因沉默后放射可增加鼻咽癌细胞凋亡率，降低其侵袭能力，能够起到放疗增敏作用。     

Maspin蛋白在鼻咽癌放射敏感CNE2细胞株中的表达分析

目的探讨放射敏感鼻咽癌CNE2细胞株在放射条件下丝氨酸蛋白酶抑制剂Maspin蛋白的反应性变化,分析鼻咽癌放射作用的分子机制。方法采用MTT比色法检测放射线对鼻咽癌CNE2细胞株生长的影响,胎盼蓝染色法检测CNE2细胞增殖,流式细胞术检测CNE2细胞放射后的凋亡及周期改变,Western blotting分析Maspin蛋白的表达。结果鼻咽癌CNE2细胞株放射后,细胞周期重新分布,出现较多的G2/M期细胞以及较少的G0/G1期细胞;增殖受到抑制、细胞凋亡明显、Maspin蛋白表达上调,且其上调与细胞凋亡率增高呈现一致性改变,也与细胞周期分布改变相关。结论鼻咽癌CNE2细胞对放射线敏感、容易被诱发凋亡;细胞周期参与了放射诱导的CNE2放射反应调节;放射提高了CNE2细胞的Maspin蛋白表达,提示该蛋白参与了CNE2细胞的放射反应;Maspin蛋白表达提高涉及CNE2细胞周期和凋亡改变,是一个值得深入研究的鼻咽癌放射敏感相关分子。     

Cyclin D1在EGCG抗鼻咽癌中表达的变化及意义

目的：探讨Cyclin D1基因在表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）抗鼻咽癌中表达的变化及意义,揭示EGCG的抗鼻咽癌作用机制。方法：体外培养低分化鼻咽癌细胞株CNE-2并以不同浓度EGCG处理,倒置显微镜下观察不同浓度EGCG作用48h后CNE-2细胞的形态变化,采用MTT比色法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期,半定量逆转录PCR检测细胞中Cyclin D1mRNA的表达变化。结果：EGCG处理后,CNE-2细胞的数量及密度逐渐降低,分裂象减少,贴壁差,部分细胞变圆且体积变小,漂浮及凋亡细胞不断增多;细胞增殖明显受到抑制,CNE-2细胞被阻滞在G0/G1期,呈时间和剂量依赖性（P〈0.05）;Cyclin D1mRNA表达明显下调,且EGCG作用浓度与时间依赖性（P〈0.05）。结论：EGCG抑制CNE-2细胞的增殖,可能与其呈浓度与时间依赖性下调Cyclin D1mRNA的表达相关。     

氧化还原因子1对体外培养大鼠耳蜗螺旋神经节氧化损伤的保护作用

目的 观察表达无嘌呤无嘧啶核酸内切酶/氧化还原因子1(apurinic/apyrimidimicendonuclase/redox factor 1,APE/Ref-1)的重组腺病毒感染对H2O2所致体外培养大鼠耳蜗螺旋神经节细胞氧化损伤的保护作用.方法 体外培养大鼠耳蜗螺旋神经节细胞,APE/Ref-1腺病毒表达载体感染48 h后,加入不同浓度H2O2(0、10、25、50、100及300 μmol/L)干预1 h,更换正常培养液后继续培养24 h,通过蛋白免疫印迹分析、四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、原位缺口末端标记法(TUNEL)分别检测感染后螺旋神经节细胞APE/Ref-1蛋白表达、细胞活力以及凋亡情况.结果 通过腺病毒感染实现了APE/Ref-1基因在体外培养耳蜗螺旋神经节细胞的过表达,H2O2浓度为50～300 μmol/L时,APE/Ref-1组同对照组比较,细胞活力提高、凋亡率降低(P值均<0.01).结论 腺病毒介导的APE/Ref-1过表达对H2O2所致螺旋神经节细胞氧化损伤具有保护作用.     

靶向阻断COX-2信号通路对喉癌细胞生长的影响

目的观察赛来昔布靶向阻断COX-2信号通路对喉癌细胞生长的影响。方法用不同浓度的赛来昔布处理喉癌细胞Hep-2,通过MTT法检测赛来昔布对喉癌细胞的生长抑制率的影响。用浓度为15μmol/L的赛来昔布处理Hep-2细胞,通过流式细胞学检测药物处理前后细胞周期、凋亡率的差异,运用Western blot检测药物处理前后相关蛋白EGFR和COX-2表达的差异。结果赛来昔布处理后的Hep-2细胞与药物浓度成比例地出现生长抑制率增高;赛来昔布干预组细胞G1期比例大于对照组（P〈0.01）,凋亡率明显升高（P〈0.05）;与对照组相比,赛来昔布干预组出现明显的p-EGFR,COX-2表达降低（P〈0.05）。结论赛来昔布能抑制喉癌细胞株Hep-2生长,增加Hep-2细胞G1期阻滞,降低肿瘤细胞增殖能力和诱导细胞凋亡;赛来昔布可抑制喉癌细胞COX-2的表达和EGFR的磷酸化。提示COX-2抑制剂可能作为喉癌靶向治疗的新方法。     

鼻咽癌干细胞miRNA表达特征研究

目的 探讨鼻咽癌干细胞的miRNA表达特征.方法 分离扩增CNE2细胞株鼻咽癌干细胞,流式细胞术检测其干细胞标志物CD133和CD44表达活性,并与鼻咽癌细胞6 10B、5-8F、CNE1、CNE2、HONE1及鼻咽上皮细胞NP69进行对比分析,继行肿瘤相关miRNAs的qRT-PCR检测.同时,在以免疫组化法检测不同临床分期鼻咽癌原发灶组织CD133和CD44表达活性基础上,qRT-PCR法分析其特异性miR 200b表达特征及其与临床分期的相关性.结果 CNE2鼻咽癌干细胞以CD133标志物为突出特征,联合检测CD44具有更高敏感性和特异性;在所检测的肿瘤相关miRNAs中,鼻咽癌干细胞以miR 200b活性低下甚至缺失为基本特征,甚至低于高转移潜能鼻咽癌细胞5 8F.鼻咽癌原发灶组织标本干细胞标志物也以CD133为突出特征,并平行表现与临床分期相关的鼻咽癌干细胞特异性miR 200b活性显著低表达趋势.结论 鼻咽癌干细胞以CD133为特征性标志物,miR-200b活性特异性低表达甚至不表达,可能是其特征性分子靶点。