急性白血病患者WAVE-1蛋白测定的临床研究

目的探讨WASP家族Verprolin同源蛋白-1（WAVE-1）测定在急性白血病患者中的临床意义。方法运用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和Western blotting法分别测定65例急性白血病、21例非恶性血液病及50例正常对照者血清中WAVE—1含量,并进行比较。结果急性白血病患者血清WAVE-1含量明显高于正常对照组（P〈0．01）;非恶性血液病患者血清WAVE—1低于急性白血病患者（P〈0．01）,而与正常对照组比较无显著性差异（P〉0．05）。化疗后完全缓解的急性白血病患者血清WAVE-1含量明显低于化疗前（P〈0．01）,复发者血清WAVE-1含量又复升高（P〈0．01）。结论检测WAVE-1对急性白血病诊断、鉴别诊断及预后判断均有参考价值。     

淋巴细胞微核及DNA异倍体率对MDS早期诊断价值的研究

目的探讨淋巴细胞微核4项检测指标与DNA倍体分析对白血病早期诊断及鉴别诊断价值及预后、转归的意义。方法利’用改良淋巴细胞微核4项检测指标对MDS、对照组（急性白血病（AL）、良性血液病、恶性肿瘤、良性肿瘤）及正常对照组进行DNA倍体分析。结果淋巴细胞微核4项检测指标：AL和恶性肿瘤明显高于对照组（p〈0．01）；札与恶性肿瘤比较（p〉0．05）；MDS较ALL、恶性肿瘤明显降低，而较对照组明显增高（p〈0．01）。DNA异倍体率：AL及恶性肿瘤分别与良性疾病和正常人有差异（p〈0．05及p〈0．01）：MDS较ALL明显减低（p〈0．01）；而与ANLL和良性肿瘤无显著差异（p〉0．05）。各组DNA异倍体率均较微核阳性率明显减低（p〈0．01），并与疾病进展、预后密切相关。结论淋巴细胞微核4项检测指标及DNA异倍体率。二者关系密切，可作为白血病早期诊断与鉴别诊断及预后、转归的重要指标。     

急性白血病复发时克隆演化的研究

为研究克隆演化在急性白血病复发发病机制中作用，应用聚合酶链反应（PCR）联合Southern杂交检测75例及其中36例复发急性非淋巴细胞白血病（ANLL）IgH重排基因，PCR检测81例及其中35例复发急性淋巴细胞白血病（ALL）IgH、TCRVγ2－Jγ、TCRVδ－Dδ3重排基因及bcr／ablmRNA，配合形态学和免疫学检查发现8例ALL（22．9％）和4例（11．1％）ANLL复发时形态学，免疫学或／和重排基因类型发生改变（克隆演化）。克隆演化是某些急性白血病复发的主要原因，克隆演化发现对于白血病治疗改进有重要意义，其选择机制尚需进一步研究。     

骨髓增生异常综合征转白血病临床观察

骨髓增生异常综合征（MDS）是造血于细胞增殖分化异常的克隆性疾病。10％－35％的患者可转化为急性白血病（An），其机制尚未阐明。我们对16例MDS转An的患者进行了临床多参数分析，以寻找MDS转AL的演变规律及探讨MDS与AL的相互关系。1材料和方法1．1］l＄床资料在经FAB分型（198）确诊随访的57例MDS患者中，发现MDS转AL16例（28．0％）O男12例，女4例，年龄19－68岁，中位数44．5岁。其中初诊时为难治性贫血（RA）3例，难治性贫血伴原始细胞增多（RAEB）8例，转化中的IIMS：I3（RAEKT）5例。全部病例在初诊时行骨髓细胞…     

抑癌基因PTEN在急性白血病发病中临床意义的探讨

目的：研究抑癌基因PTEN在恶性血液病中的表达情况,探讨其与急性白血病（AL）的相关性。方法：选取恶性血液病74例[AL35例,骨髓增生异常综合征（MDS）20例,慢性粒细胞白血病（CML）13例,骨髓增殖性疾病（MPD）6例]。另取非恶性血液病24例及正常骨髓10例作为对照。采用S-P免疫组织化学检测骨髓单个核细胞中的PTEN表达情况,同时分析PTEN与临床指标的相关性,并对疾病转归进行跟踪随访。结果：PTEN阳性表达率在对照组中非恶性血液病患者（83.33%）低于正常人（90.0%）,但差异无统计学意义（P〉0.05）,恶性血液病AL组（57.14%）与对照组差异有显著性（P〈0.05）;AL-完全缓解（AL-CR）组（63.16%）与对照组差异有显著性（0.05〉P〉0.01）,AL-初治组（55.17%）与AL-CR组无显著差异（P〉0.05）,MDS组难治性贫血伴原始细胞增多（MDS-RAEB）为53.33%,CML组为53.85%。MDS-RAEB组和CML组与对照组相比均有显著性差异（均P〈0.05）,但与AL-初治组相比差异无显著性（P〉0.05）。PTEN低表达与外周血中白细胞计数及发病时骨髓中原始细胞比例有一定相关性（r≈0.50）,与MDS-RAEB转化AL、慢性粒细胞白血病急性变（CML-AL）呈正相关性（r≈0.53）。结论：AL存在PTEN表达异常,PTEN与AL的发病可能有一定的关系,提示PTEN在AL的发病中有一定意义。     

恶性血液病Flt3基因内部串联重复突变分析

目的：研究Flt₃-ITD在恶性血液病中的突变及分布情况。 方法：采用PCR法检测103例恶性血液病患者基因组DNA Flt₃-ITD突变。结果：44例初治急性髓细胞白血病（AML）患者中8例发生Flt₃-ITD突变,突变率为18.2%,以M1型最高;急性淋巴细胞白血病（ALL）、骨髓增生异常综合征（MDS）、多发性骨髓瘤（MM）、非何杰淋巴瘤（NHL）及慢性髓细胞白血病（CML）均未检出Flt₃-ITD突变。 结论：Flt₃-ITD可作为AML重要分子标志。     

CIP2A在骨髓增生异常综合症中的意义探讨

目的探讨CIP2A在骨髓增生异常综合症（MDS）中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法对31例MDS患者、19例急性髓系白血病（AML）患者（包括4例由MDS转变而来）和20例对照组骨髓单个核细胞中CIP2A蛋白质水平进行检测。结果 MDS组CIP2A蛋白的表达水平高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。MDS高危组CIP2A蛋白的表达水平显著高于MDS低危组（P〈0.05）,AML组CIP2A蛋白的表达水平显著高于MDS高危组（P〈0.05）。结论 CIP2A在MDS骨髓单个核细胞中高表达可能与MDS的疾病发展有关。     

Ph阳性慢性粒细胞白血病断裂点簇区域重排的探讨

用3'bcr和5'bcr探针对9例慢性粒细胞白血病(CML)患者和1例红白血病患者进行了Southern印迹分析。8例慢性期CML患者可检出bcr重排,1例急变期的CML患者可能发生了bcr重排,1例红白血病患者未检出异常片段。3'bcr和5'bcr探针及相应的限制性内切酶对于确定Ph( )CML中bcr重排有重要价值。     

血液病患者人微小病毒B19感染的检测

迄今国外已证实，人微小病毒B19（HumanparvovirusB19，PVB19）的持续感染可见于先天性系统性免疫缺陷症、急性淋巴细胞白血病和爱滋病患者以及器官移植后，是这类患者发生机会感染的重要病原，亦是这类患者发生慢性贫血的直接原因。本研究采用特异性好、敏感度极高的套式PCR以及限制性酶切技术对63例临床血液病患者进行PVB19感染的检测，并比较国外B19病毒参考株，初步分析血液病患者PVB19的感染状况。收集我校南方医院白血病病例32例、贫血症ZI例、淋巴瘤6例、骨髓病4例，所有病例均经骨髓细胞学检查证实。PVB19参考林由英国Tedd…     

聚合酶链反应检测老年人急性白血病IgH基因重排的意义

目的为进一步了解老年人急性白血病的分子生物学特征。方法应用聚合酶链反应（PCR）检测28例老年人急性白血病免疫球蛋白重链（IgH）则基因重排结果66.7％（4／6）老年人急性淋巴细胞白血病（ALL）和40．9％（9／22）急性非淋巴细胞白血病（ANLL）存在IgH基因重排：IgH基因重排阳性老年人ANLL治疗缓解率（22．2％）显著低于IgH基因重排阴性老年人ANLL（66.7％）（P＜0.05）。结论应用PCR技术检测老年人急性白血病基因重排可帮助了解老年人白血病的分子生物学特征和预后,此方面尚需进一步研究。     

常见血液病骨髓活检与涂片诊断分析

目的探讨骨髓活检与涂片诊断常见血液病的意义。方法分析88例血液病患者的骨髓活检和涂片资料、部分结合组织化学染色。结果在骨髓纤维化（MF）、骨髓转移瘤（MCBM）诊断．白血病的预后及微小残留、骨髓增生异常综合征（MDS）诊断及转归等方面,活检优于涂片,对于白血病及MDS的FAB分型、巨幼细胞性贫血（MA）、特发性血小板减少性紫癜（ITP）等的诊断,涂片优于活检。结论血液病的诊断骨髓活检结合涂片可提高诊断正确率。     

脐血输注在恶性血液病治疗中的临床应用（附32例分析）

近20年来由于强烈化疗的应用，恶性血液病尤其是急性白血病的缓解率和治愈率显著提高”’，但联合化疗后骨髓抑制，白细胞、血小板可明显降低。我们于1996年6月至ig97年10月对脐血输注在恶性血液病化疗后骨髓抑制期的支持治疗作用进行了观察，现总结报告如下。卫临床资料卫．1病例选择：均经我院骨髓细胞学、病理检查确诊。治疗组犯例，男20例，女12例，年龄18～61岁。其中急性淋巴细胞白血病（ALL）6例，急性非淋巴细胞白血病（ANLL）18例，骨q增生异常综合征难治性贫血伴原始细胞增多一转变型（MDS一RAEB—T）2例，非零奇金淋巴瘤（…     

血小板减少症患者血小板参数检测的临床意义

目的探究血小板减少症患者血小板参数的变化及其临床意义。方法采用Sysmex XE-2100全自动五分类血液分析仪检测83例不同类型血小板减少症患者，包括24例急性白血病（AL），28例骨髓增生异常综合征（MDS）和31例特发性血小板减少性紫癜（ITP）病人治疗前后血小板计数（PLT）、血小板比积（PCT）、平均血小板体积（MPV）和血小板分布宽度（PDW），并将检测结果与正常对照组进行比较。结果初诊时ITP、AL和MDS患者的PTJT和PCT明显低于正常对照组（P〈0．01），其中ITP患者的MPV和PDW明显高于AL、MDS患者以及正常对照组（P〈0．01），AL和MDS患者的PDW也明显高于正常对照组（P〈0．01），但二者的MPV值与正常对照组比较无明显差异。ITP、AL和MDS患者缓解后PLT和PCT明显上升，而PDW下降，与未缓解组比较有显著差异（P〈0．01），ITP缓解组的MPV明显低于未缓解组（P〈0．01），而AL和MDS缓解组的MPV值与未缓解组比较无显著差异。结论血小板参数的检测对于明确血小板减少的病因及其预后具有重要临床意义。     

老年急性白血病Survivin、Cox-2蛋白的表达

目的探讨老年急性白血病（AL）骨髓细胞中Survivin、Cox-2蛋白的表达及其相关性。方法采用免疫组化S-P法检测35例老年AL患者治疗前后骨髓细胞中Survivin、Cox-2蛋白的表达情况。结果病例组、急性非淋巴细胞白血病（ANLL）组、急性淋巴细胞白血病（ALL）组Survivin、Cox-2蛋白阳性表达率均明显高于对照组，差异有显著性（均P〈0．01）；完全缓解（CR）者Survivin、Cox-2蛋白阳性表达率低于部分缓解（PR）、未缓解（NR）者，差异有显著性（P〈0．01）；Spearman秩和相关分析显示Survivin、Cox-2蛋白表达呈显著正相关（rs=0．495，P〈0．01）。结论Survivin、Cox-2均与老年AL的发生、发展、疗效及预后密切相关，且两者有一定的协同作用。     

应用间期荧光原位杂交检测骨髓增生异常综合征8号和20号染色体异常

目的筛选出经济、实用的探针组合提高细胞分子遗传学在MDS诊断中的应用；探讨常规细胞遗传学分析（CCA）及荧光原位杂交（FISH）两种技术在MDS检测中的灵敏度和特异性；探讨MDS患者的8、20号染色体改变及与预后的关系。方法采用常规细胞遗传学法和FISH法分析48例患者的骨髓细胞的染色体异常情况。用SPSS12．0统计软件，对患者的遗传学异常与疾病转归、预后之间关系进行相关性检验。结果检出染色体异常26例（54．2％），其中复杂异常5例（10．4％），单一＋8异常13例（27．1％），20q-异常3例（6．3％）。平均随访12个月，38例存活，10例死亡，5例转变为急性白血病。复杂核型与MDS的急性白血病转化及死亡密切相关。结论击者CCA结合FISH能提高MDS的诊断率；探针组合简便、经济，能够检出MDS中＋8，20q-核型异常，有较强的临床实用性；结合细胞分子遗传学改变能较准确判断MDS患者的预后。     

T-淋巴细胞亚群在血液病中的诊断应用

目的探讨提高T-淋巴细胞亚群对血液病的诊断准确性,指导临床的治疗和愈后。方法采用流式细胞仪检测T-淋巴细胞亚群变化关系,求出p值及相关性。结果在检测的9种疾病中,慢性白血病（CL）CD4、CD8、CD3明显减低,p〈0.01,CD4/CD8比值虽然较正常对照减低,但较其他疾病无显著差异p〈0.05;CD4与正常对照比较明显降低p〈0.05,其中以慢性白血病（CL）减低明显p〈0.01,其次排序是急性白血病（AL）、再生障碍性贫血（AA）、特发性血小板减少性紫癜（ITP）、粒细胞减少症（AG）、骨髓增生异常综合症（MDS）、缺铁性贫血（IDA）、溶血性贫血（HIA）、慢性白血病（ACD）;CD8较正常对照明显增高（p〈0.05）,尤以特发性血小板减少性紫癜（ITP）增高明显,其次排序为再生障碍性贫血（AA）、急性白血病（AL）、慢性白血病（ACD）、骨髓增生异常综合症（MDS）、粒细胞减少症（AG）、溶血性贫血（HIA）、缺铁性贫血（IDA）;CD4/CD8比值除AA、ITP、AL、MDS、AG、CL减低外,p〈0.05,其他无显著差异p〉0.05;CD3除CL明显减低外,其他疾病与正常对照无显著差异p〉0.05。结论骨髓造血细胞增殖和分化障碍与T-淋巴细胞亚群有关。通过该项检测有助于血液病的诊断和鉴别诊断,了解发病机制及病理生理,指导临床的正确治疗。     

应用3种方法诊断弓形虫淋巴结炎

目的探讨研究弓形虫淋巴结炎的病理诊断。方法应用免疫组化、原位杂交及间接原位PCR技术,检测71例（均来自可疑弓形虫感染者）经病理诊断为慢性非特异性淋巴结炎（淋巴结反应性增生）病人组织切片中的弓形虫。结果发现在71例中弓形虫阳性病例分别为17例（23．94％）、35例（49．30％）、41例（57．75％）,免疫组化与原位杂交、间接原位PCR结果差异有统计学意义（P〈0．005）。结论在病理诊断为慢性非特异性淋巴结炎（淋巴结反应性增生）的病人中,部分为漏诊的弓形虫淋巴结炎病例。免疫组化、原位杂交及间接原位PCR均能显示淋巴结组织切片中的弓形虫,但弓形虫检测结果阳性率从高到低依次为间接原位PCR、原位杂交及免疫组化。     

骨髓增生异常综合征骨髓细胞凋亡与肿瘤坏死因子α的研究

目的：探讨骨髓增生异常综合征（MDS）患者骨髓细胞凋亡及髓内肿瘤坏死因子α（TNFα）水平,初步揭示MDS无效造血机制,方法：采用TUNEL法检测26例MDS及10例正常健康对照组新鲜骨髓单个核细胞（BMMNC）凋亡,RT－PCR探讨…BMMNC中TNFαmRNA表达,ELISA法测定骨髓上清液TNFα蛋白水平。结果：早期MDS（RA＋BM原始细胞＜10％RAEB）患者的骨髓细胞凋亡率明显增加,进展期MDS（BM原始细胞＞10％RAEB＋RAEB－t)骨髓细胞凋亡率与对照组无显著差异,凋亡累及各阶段幼稚粒细胞及有核红细胞。早期MDS细胞凋亡程度与骨髓增殖程度有关。58％（15／26）MDSTNFαmRNA,77%(20/26)MDS髓内TNFα蛋白升高,早期MDS髓内TNFα水平与凋亡呈正相关,并于外周血血红蛋白（Hb）量呈负相关。结论：早期MDS骨髓细胞凋亡增加,随病情演变,凋亡逐渐下降,这可能与异常克隆逃逸凋亡有关。髓内TNFα增加是骨髓细胞发生凋亡的机制之一。α     

PCR技术在中枢神经系统淋巴细胞白血病早期诊断中的意义

目的：探讨PCR技术对中枢神经系统白血病的早期诊断。方法：采用细胞分子生物学基因诊断技术－聚合酶链反应技术（PCR）检测脑脊液中白血病淋巴细胞的IgH和TCRγ基因重排。结果：确诊组15例脊液标本用PCR均检测到基因重排,检出率为100％,未确诊组10例脑脊液标本中有4例PCR检测出重排基因,该4例患者临床上均尚出现脑膜白血病的症状和体征。结论：PCR检测脑脊液中白血病淋巴细胞基因重排有利于CNLL的早期诊断,尤其是脑脊液中微小病变的监测。     

Survivin、bcl-2蛋白在白血病中的表达及相关性探讨

目的：探讨急性白血病骨髓细胞中Survivin、bcl-2蛋白的表达及相关性。方法：采用免疫组化S-P法检测70例白血病患者骨髓细胞Survivin、bcl-2蛋白表达情况。结果：病例组、ANLL、ALL、CML组Survivin、bcl-2蛋白阳性表达率明显高于对照组，差异有显著性（P〈0．01）；ANLL、CML组Survivin、bcl-2蛋白阳性表达率明显高于ALL组，差异有显著性（R0．01）；而ANLL与CML组之间差异无显著性（P〉0．05）；Spearman秩和相关分析显示，Survivin、bcl-2蛋白表达呈显著正相关（rs=0．32，P〈0．01）。结论：Survivin、bcl-2均与白血病发生、发展密切相关，且两者有一定的协同效应。