乙肝病毒感染者血清3种细胞因子水平及其临床意义

目的观察3种乙型肝炎（下称乙肝）病毒（HBV）感染者血清IL-6、IL-8及肿瘤坏死因子n（TNF—α）水平及其临床意义。方法采用ELISA法检测HBV感染者与健康对照组血清IL-6、IL-8及TNF-α的水平。结果慢性HBV携带者和慢性乙肝患者组血清IL-6、IL-8和TNF-α含量均高于健康对照组,差异有统计学意义（P〈0．01）,慢性HBV携带者和慢性乙肝患者血清IL-6、IL-8含量高于非活动乙肝表面抗原（HBsAg）携带者,差异有统计学意义（P〈0．01）,非活动HBsAg携带者与健康对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论血清IL-6、IL-8和TNF-α含量变化与肝炎病变程度及病毒复制状况密切相关,其在血清中的水平可反映肝细胞损伤程度及病毒复制状况,动态监测其含量对临床病情评估及预后判断具有重要参考价值。     

慢性HBV感染者血浆循环DNA水平相关因素的研究

目的探讨影响慢性HBV感染者血浆循环DNA水平变化的相关因素。方法选择145例慢性HBV感染者作为研究对象,其中慢性乙型肝炎轻度30例、中度30例、重度25例;乙肝后肝硬化30例;肝癌30例。选择30例健康体检者作为对照组。采用双重荧光定量PCR法检测血浆中循环DNA的含量。结果随着慢性乙型肝炎病情加重,外周循环DNA水平逐渐升高,但在肝硬化组循环DNA水平反而降低,肝癌组又显著升高,组间差异具有统计学意义（P〈0．05）。在115例慢性HBV感染者中HBeAg阳性79例,HBeAg阴性36例,HBeAg阳性患者外周循环DNA水平（68．79±14．23ng／mL）显著高于HBeAg阴性患者（23．68±12．56ng／mL）（t=-2．162,P=0．032）;慢性HBV感染者外周循环DNA水平与ALT和AST水平呈显著正相关,,值分别为0．612和0．632,P值分别为0．014和0．021,但与血清HBVDNA无相关性（P〉0．05）。结论慢性HBV感染者外周循环DNA水平与病毒复制无关,但可反映肝细胞的炎症坏死程度。     

乙型肝炎病毒感染者血清HBV DNA与IL-21及IFN-γ水平的相关性

目的探讨乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)感染者血清乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)与白细胞介素21(IL-21)及γ-干扰素(IFN-γ)水平的相关性。方法选取我院收治的119例慢性乙肝患者,其中乙型肝炎(CHB)46例,乙肝后肝硬化(LC)41例,原发性肝癌(PHC)32例,同期选取35例肝功能检查表面抗体为阳性的健康正常者作为对照,采用荧光定量聚合酶链式反应(Fluorescence quantitative PCR,FQ-PCR)方法检测HBV感染者血清HBV DNA,利用酶联免疫吸附实验(Enzymes linked immunosorbent assay,ELISA)检测受试者血清IL-21及IFN-γ水平。结果 CHB、LC、PHC三组患者之间血清IL-21、IFN-γ水平比较无显著差异(P0.05),与健康对照组比较差异显著,且三组HBV感染者血清IL-21、IFN-γ水平明显高于健康对照组(P0.05);阴性组血清IL-21水平明显高于对照组(P0.05),且随着HBV DNA载量增加呈现明显升高趋势;阴性组血清IFN-γ水平明显低于对照组(P0.05),且随着HBV DNA载量增加呈现明显降低趋势;相关性分析结果显示,IL-21水平与HBV DNA载量呈较强正相关(rs=0.641,P0.05),IFN-γ水平与HBV DNA载量呈现负性相关(rs=-0.372,P0.05)。结论IL-21、IFN-γ与HBV感染者血清HBV DNA持续感染密切相关,推测IL-21、IFN-γ有望成为HBV感染者免疫治疗新靶点。     

慢性乙型肝炎患者乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA定量与血清中γ干扰素、白细胞介素10、转化生长因子β1水平的关系

目的定量检测慢性乙型肝炎（CHB）患者肝组织中HBVcccDNA与血清中γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素10（IL-10）、转化生长因子β1（TGF—β1）水平,探讨CHB患者肝组织中HBVcccDNA定量与机体免疫的关系。方法应用荧光定量聚合酶链反应方法（FQ-PCR）检测CHB患者肝组织内HBV cccDNA水平,同时检测肝组织、血清HBV DNA,并用酶联免疫吸附剂测定法（ELISA）定量测定血清IFN-γ、IL-10、TGF-β1水平。结果①患者的血清中IFN-γ水平显著低于正常对照组：IL-10及TGF-β1水平均显著高于正常对照组,（546．29±208．68）pg／L vs（762．82±78．58）pg／L,（403．71±177．48）pg／L vs（228．86±61．39）pg／L,（608．57±142．88）pg／L vs（373．86±86．18）pg／L（均P〈0．05）。②肝组织HBVcccDNA定量与肝组织HBV DNA及血清中HBV DNA定量均呈正相关（r=0．856、0．602,均P〈0．01）,肝组织HBV DNA定量与血清中HBV DNA也呈正相关（r=0．745,P〈0．01）。③肝组织HBVcccDNA定量和肝组织HBV DNA定量均与血清中IFN-γ呈负相关（r=-0．679、-0．523,均P〈0．01）,血清HBV DNA定量与IFN-γ呈负相关,但差异无统计学意义（r=-0．198,P〉0．05）;肝组织HBVcccDNA定量、肝组织HBV DNA定量及血清HBV DNA定量与IL-10呈正相关（r=0．723、0．657、0．458,均P〈0．01）,与TGFβ1均无明显相关性（P〉0．05）。结论肝组织内HBVcccDNA、HBV DNA、血清中HBV DNA载量与血清中IFN-γ、IL-10水平有相关性,说明病毒活跃及持续感染,除了取决于病毒本身的生物学特性外,更重要的是与宿主的免疫功能状态有关。     

细胞因子IL-15、IL-16、IFN-γ及TGF-β在慢性乙型肝炎病毒感染者外周血中的表达及临床意义的研究

目的探讨HBV感染者外周血细胞因子IL-15、IL-16、IFN-γ、TGF-β的表达水平变化的及临床意义。方法选择肝癌患者60例(HCC组)、肝硬化患者60例(LC组)、慢性乙型肝炎患者60例(CHB组)、慢性乙型肝炎病毒携带者60例(ASC组)和健康对照者40例(健康对照组),采用酶联免疫法检测细胞因子表达水平,运用聚合酶链反应检测HBV DNA载量,同时检测各项生化指标。结果随着患者病情加重,细胞因子IL-15、IL-16、IFN-γ、TGF-β表达水平均呈逐渐升高的趋势,且在肝硬化患者中达到最大值。与健康对照组相比,不同临床类型HBV感染者细胞因子表达水平均显著升高,差异有统计学意义(P0.05)。IL-15、IL-16、IFN-γ、TGF-β在CHB患者外周血HBV DNA高载量组表达水平最高,差异有统计学意义(P0.05)。结论 IL-15、IL-16、IFN-γ、TGF-β可能参与了乙型肝炎的肝脏炎性损伤过程,且其表达水平与病毒量具有一定相关性。     

慢性乙型肝炎和乙肝肝硬化及原发性肝癌血清肿瘤标志物的检测意义

目的研究肿瘤标志物甲胎蛋白（AFP）、糖链抗原125（CAl25）、糖链抗原19—9（CAl9—9）、癌胚抗原（CEA）在慢性乙肝病毒感染不同病程中的变化规律,为分析其在慢性肝病进程中的临床意义提供依据。方法选取慢性乙型肝炎病毒感染者129例（慢性乙型肝炎41例,乙肝肝硬化39例,其中代偿期14例,失代偿期25例,乙肝肝癌49例）和健康体检者50例,使用电化学发光法检测血清AFP、CAl25、CAl9—9、CEA水平。结果慢性乙型肝炎、肝硬化、肝细胞癌组中AFP分别为4．35ng／ml、5．78ng／ml和60．21ng／ml,CEA为1．51ng／ml、1．92ng／ml和2．45ng／ml,乙肝肝癌患者血清AFP、CEA水平明显高于其它三组（P〈0．05）;肝硬化患者血清CAl25水平高于其它三组（P〈0．05）。对于中一大量腹水的肝硬化患者,血清CAl25水平明显高于少量腹水和无腹水的肝硬化患者（P〈0．05）,且随腹水量的增多呈逐渐上升趋势。三组慢性肝病患者的血清CA19—9与健康体检组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。乙肝肝硬化患者血清CAl25、CEA与MLED评分呈正相关（Spearman等级相关系数分别为0．62,P〈0．05;0．36,P〈0．05）,CA19—9-、AFP与MELD评分的线形相关无统计学意义（P〉0．05）。仅CAl25与Child—Pugh评分显著相关（Spearman等级相关系数为O．84,P〈0．05）,CA19—9、AFP、CEA则无统计学意义（P〉0．05）。结论对于慢性HBV感染者,血清CAl25与腹水量呈正相关,并与肝病严重程度呈正相关,因此CAl25可作为辅助指标监测腹水变化及判断预后。非胃肠道肿瘤患者,血清CEA也可随肝病严重程度加重而增高。     

应用蛋白芯片技术观察慢性肝病患者血清细胞因子的变化规律

目的：应用蛋白芯片技术，探讨不同类型慢性肝病患者血清中细胞因子的变化规律。方法：自行构建细胞因子芯片，并优化检测体系。选择健康人群（正常对照组，30例）及轻、中、重度慢性肝炎患者各30例（慢乙肝组），A、B、C级肝硬化患者各30例（肝硬化组），慢性重型肝炎30例（慢重肝组）；检测各组患者血清中白细胞介素-2（IL-2）、γ-干扰素（IFN—γ）、IL-4、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、可溶性细胞间黏附分子-1（sICAM-1）、转化生长因子-β1（TGF-β1）、金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）7种细胞因子的水平。结果：慢乙肝组7种细胞因子与正常对照组比较差异均有显著性（P均〈0．01），Th1类细胞因子IL-2、IFN—γ在慢乙肝轻度组中的水平基本正常，慢重肝组浓度最低（P〈0．01）。Th2类细胞因子IL-4则以慢重肝组最高（P〈0．0t），其变化规律为轻度〈A级〈中度〈重度=B级〈C级〈慢重肝，TNF-α变化规律为A级=轻度〈中度=B级〈C级〈重度〈慢重肝，TGF-β1为轻度〈中度〈重度〈A级〈慢重肝〈B级〈C级，sICAM-1则表现为轻度〈A级〈B级=中度〈重度〈C级=慢重肝，TIMP-1为轻度〈中度〈A级〈重度〈慢重肝=B级〈C级（P均〈0．01）。结论：慢性肝病患者血清细胞因子水平在一定程度上可反映肝脏炎症及纤维化程度，并且与慢性肝病的发生、发展、转归、预后密切相关。     

乙肝患者血清HBV DNA载量与3种细胞因子水平分析

目的探讨乙型肝炎（简称乙肝）患者血清乙肝病毒（HBV）DNA载量与白细胞介素6（IL-6）、IL-8及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量变化的相关性,揭示HBV感染者在HBV载量不同时的炎性反应活动状况。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测71例HBV感染者及18例健康对照IL-6、IL-8及TNF-α含量。结果血清HBV DNA〈1．0×10^3IU／mL组IL-6、IL-8及TNF-α含量与健康对照组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;血清HBV DNA〉1．0×10^3IU／mL的其他3组IL-6、IL-8及TNF-α含量与健康对照组及HBV DNA〈1．0×10^3IU／mL组比较,差异有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05）;血清HBV DNA有复制的3组间IL-6、IL-8及TNF-α含量差异无统计学意义（P〉0．05）。结论HBV感染者血清IL-6、IL-8及TNF-α含量与HBV DNA载量呈正相关关系,其含量的动态变化可作为临床对HBV感染者炎性反应活动的观察指标。     

乙肝患者血清HBV cccDNA的临床意义

目的:探讨血清HBV cccDNA与肝组织HBV cccDNA、血清HBV DNA的关系及临床意义.方法:采用荧光定量PCR (FQ-PCR),对69例乙肝携带者、慢乙肝、乙肝肝硬化及肝癌血清及15例肝组织的HBVcccDNA、HBV DNA进行检测,化学发光免疫分析定量检测血清HBsAg.结果:(1)肝组织HBV cccDNA阳性检出率为86.7％,高于血清HBV cccDNA阳性检出率(66.7％,P＜0.05);(2)血清中HBV cccDNA与肝组织HBV cccDNA水平呈正相关(r=0.72,P＜ 0.05);(3)血清HBV cccDNA拷贝数随HBV DNA水平升高而增大,且两者水平呈正相关(r=0.82,P＜0.05);且HBV DNA高水平组(HBV DNA≥105 copies/mL)的血清HBV cccDNA的阳性检出率(96.6％)高于低水平组(103 copies/mL≤HBV DNA＜l×105 copies/mL)(67.5％) (P＜ 0.05);(4)血清HBVcccDNA检出率随着病程进展而升高,在乙肝携带者、慢乙肝、乙肝肝硬化及肝癌中检出率分别为33.3％、83.3％、87.0％、87.5％,具有显著差异(P＜0.05).结论:血清HBV cccDNA可间接反映患者肝组织内HBV cccDNA情况,且与血清HBV复制指标HBV DNA显著相关;并与乙肝不同病程有关.     

慢性丙型肝炎病毒感染者外周血单个CD4+Th 细胞内IFN-γ及IL-4的表达

目的研究慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染者外周血单个核细胞(PBMC)中Th细胞内IL-4和IFN-γ的表达情况,探讨Th1/Th2细胞及其细胞因子在慢性HBV感染中的作用.方法常规分离PBMC,在PMA、ionomycin、monensin的刺激下,应用FCM检测慢性HCV感染者外周血Th细胞内IL-4和IFN-γ表达情况,采用ELISA法检测血清可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)水平.结果在慢性HCV感染者中(包括慢性HCV携带者、慢性丙型肝炎以及肝硬化患者)分泌IFN-γ的细胞百分数远高于对照组(P＜0.01);各实验组分泌IL-4的细胞百分数均很低,并且与疾病的进展无任何关联.在慢性HCV感染者中血清sIL-2R水平明显高于健康对照组,并且与分泌IFN-γ的细胞百分数呈正相关.结论在HCV感染的不同阶段,血清sIL-2R和IFN-γ水平均升高,Th1细胞因子或Th1细胞可能在慢性HCV感染肝脏损伤的发病机制中起重要作用.     

江苏省南通地区乙型肝炎病毒基因分型与临床相关性

目的了解江苏省南通地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布状况及其临床相关性。方法选择南通地区HBV-DNA阳性的乙型肝炎病毒感染者300例,其中乙型肝炎表面抗原携带者(ASC)28例,慢性乙型肝炎(CHB)189例,重型肝炎(CSH)26例,肝硬化(LC)30例,肝细胞癌(HCC)27例,采用多对型特异性引物巢式PCR法检测HBV基因型。结果300份血清标本中B型89例(29.7%),C型196例(65.3%),BC混合型15例(5.0%);C基因型在LC组、HCC组中的比例显著高于ASC组和CHB组(P<0.05)。结论南通地区HBV基因型可能以B、C型为主,C型为优势基因型并与肝硬化、肝癌的发生相关。     

乙型肝炎病毒对胰岛素样生长因子结合蛋白7表达的影响及其临床意义

目的探讨乙型肝炎病毒（HBV）对胰岛素样生长因子结合蛋白7（IGFBP7）表达的影响及其临床意义。方法逆转录-聚合酶链反应（PCR）检测IGFBP7mRNA的表达水平,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清IGFBP7含量,分析IGFBP7在慢性乙型肝炎（CHB）、肝纤维化（LC）和肝细胞癌（HCC）患者间血清含量的差异。结果IGFBP7mRNA在HepG2．2．15细胞中的表达水平较HepG2高;与健康对照组相比,HBV感染者IGFBP7血清学水平明显升高（P〈0．05）;IGFBP7在Lc和HCC患者低于CHB患者（P〈0．05）。结论HBV能够上调IGFBP7的表达,其血清水平与疾病进程呈负相关。     

调节性T细胞在乙型肝炎慢性化中的免疫调控作用

目的 探讨乙型肝炎慢性化的免疫调控机制.方法 用酶联免疫吸附实验测定慢性乙型肝炎患者(CHB)的辅助性T淋巴细胞(Th1/Th2)细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10的血清浓度;同时用流式细胞术检测CHB的调节性.T细胞(Treg)在外周血中的分布频率.结果 与健康对照组相比,CHB组血清IL-2明显减低...     

应用实时荧光PCR方法检测乙肝病毒1896位点变异及临床意义

目的采用实时荧光定量PCR的方法检测乙肝病毒前C区1896位点突变,并探讨其临床意义。方法应用实时荧光定量PCR（RT-PCR）的方法对随机选取的临床诊断非慢性乙肝和肝硬化的乙型肝炎患者120例,已确诊的慢性乙肝患者80例,肝硬化患者32例进行乙肝病毒前C区1896位点突变的检测,并对80例慢性乙肝患者中HBeAg（＋）和HBeAg（-）组患者,以及不同含量的HBV DNA的HBeAg（-）组患者进行乙肝病毒前C区1896位点突变分析。结果 120例随机乙肝患者中,前C区1896位点突变率为25.0%（30/120）;而慢性乙肝患者中和肝硬化患者前C区1896位点突变率分别为48.8%（39/80）和62.5%（20/32）,与随机乙肝患者人群中变异率有显著性差异（P〈0.05）。慢性乙肝患者HBeAg（-）组患者乙肝病毒前C区1896位点突变率与HBeAg（＋）组比较,差异性显著（P〈0.05）。随HBV DNA含量的增加,前C区1896位点突变率显著增加（P〈0.05）。结论乙肝病毒前C区1896位点突变的发生与乙肝患者慢性化有关,检测乙肝病毒前C区1896位点突变对乙肝患者预后判断有重要意义。     

不同临床类型慢性乙肝患者乙肝病毒基因型检测

目的探讨本院慢性乙型肝炎患者乙肝病毒基因型分布特征及与临床类型的关系。方法利用线性探针分析法进行乙肝病毒基因分型。结果52例慢性乙肝患者检出乙肝病毒基因型B型24例（46．2％）,C型26例（50％）,A、B混合型2例（3．8％）,B、C两型均以男性多见,两型间性别比例差异无统计学意义（X2=0．65,P〉0．05）;在慢性肝炎轻度、中度、重度、肝硬化及肝癌中,B和C基因型的分布差异无统计学意义（P〉0．05）;A、B混合型2例分别为慢性乙型肝炎轻度和慢性乙型肝炎中度。C型HBeAg阳性率高于B型,差异有统计学意义（P〈0．05）,HBVDNA载量两组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论本组慢性乙肝患者的乙肝病毒基因型以B、C为主要亚型,且C型稍多,C型HBeAg阳性率高于B型。     

血管紧张素Ⅱ1型受体在乙型肝炎病毒感染者肝纤维化形成过程中的表达变化及意义

目的 研究血管紧张素Ⅱ1型受体(ATlR)在不同阶段慢性肝痛患者肝组织的表达情况,探讨血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)转换酶抑制剂(ACEIs)及血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂(ARBs)治疗肝纤维化的可能性.通过定量检测血清乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA),探讨HBV病毒栽量与肝纤维化分期的关系.方法 以2007年1月至2008年1月因慢性HBV感染行肝组织穿刺术或手术切除的肝组织标本55例,正常肝组织12例(正常对照组)为研究对象,分别进行病理分级.并根据慢性肝炎的纤维化分期标准,将入选病例分为:S0-1组、S2-4组、晚期肝硬化组及正常对照组.67例均在肝穿或手术前后2日内抽取空腹静脉血4 ml并分离血清.用免疫组织化学法及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肝组织中AT1R及AT1R mRNA的表达.用荧光定量PCR法对血清HBV DNA进行定量检测.结果 AT1R及AT1RmRNA在正常肝组织中只微弱表达或不表达,而随纤维化分期的加重其表达量逐渐增加.与正常对照组比较,各组肝组织中AT1R的阳性表达均增多(平均秩为21.91,41.28,53.12 vs 15.25,H=34.005,P<0.01),S0-1组与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),余组间比较差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05).AT1RmRNA的表达正常对照组为0.173±0.036,S0-1组0.196±0.045,S2-4组0.394±0.098,晚期肝硬化组0.603±0.116.S0-1组与正常对照组比较纤维化有加重趋势,但差异无统计学意义(P>0.05),余组间比较差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05).血清HBV DNA含量与肝组织纤维化分期之间无相关性(P>0.05).结论 AT1R及AT1RmRNA在正常肝组织中只微弱表达或不表达,在纤维化及硬化肝组织中表达高度上调.且其表达强度与纤维化分期密切相关.从而认为肾素血管紧张素系统(RAS系统)的AngⅡ及AT1R在肝纤维化发生发展过程中起了重要作用.血清HBV DNA含量与肝组织纤维化分期之间无明显关系.