白血病抑制因子与卵泡及早期胚胎发育的关系

白血病抑制因子 (LIF)是一种能在体内、外发挥多种生物学效应的多功能细胞因子 ,LIF在体外可促进原始生殖细胞的增殖生长 ,明显增强细胞分裂能力 ,增加分裂细胞数量和延长生存时间。排卵前卵泡液中LIF显著升高 ,提示与卵泡发育和排卵密切相关。LIF在体外可促进胚胎生长发育 ,增加卵裂率和卵裂胚胎数 ,提高胚胎质量和着床率。     

干细胞因子和白血病抑制因子对冻融后人原始卵泡体外生长发育的研究

目的:探讨干细胞因子(stem cell factor,SCF,又称KIT配体)和白血病抑制因子(leukaemiainhibitory factor,LIF)对冻融后人原始卵泡体外培养生长发育的影响。方法:收集18例卵巢良性肿瘤手术患者的正常卵巢皮质,采用直接覆盖玻璃化冷冻法保存卵巢组织,冻融后分离卵泡,随机分成5组:对照组(A组)、10 ng/ml SCF组(B组)、10 ng/ml LIF组(C组)、10 ng/ml SCF+10 ng/ml LIF组(D组)和100 ng/ml SCF+10 ng/ml LIF组(E组),行体外培养,比较SCF和/或LIF对人原始卵泡生长发育的影响。结果:①随培养天数的增加,对照组卵泡直径增长缓慢,明显小于各实验组(P<0.05);D、E组中卵泡直径增长迅速,较B、C组差异有统计学意义(P<0.05)。②随着培养天数的增加,各组卵泡均能分泌激素。4 d后对照组卵泡激素水平增长缓慢,明显低于各实验组(P<0.05),而D、E组中卵泡激素分泌增长迅速,较B、C组差异有统计学意义(P<0.05),D、E组中卵泡激素增长速度相差不大,但在第4日差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在体外培养液中添加SCF或LIF以及两者联合添加有利于促进卵泡的生长发育,提高E2分泌功能,且SCF和LIF联合其作用更加明显。     

白血病抑制因子及其受体与妊娠

白血病抑制因子 ( LIF)是一种多生物学活性的细胞因子。近年来的研究表明 ,LIF存在于子宫内膜、妊娠期蜕膜及胎盘上。它通过与其受体 ( LIFR)结合 ,从而调节胚胎的着床及妊娠的维持。LIF不仅与其他细胞因子之间相互调节 ,且它还受到激素内分泌的严格调控。进一步研究还发现 ,原因不明不孕症妇女子宫内膜 LIF的表达较正常妇女减弱甚至缺失 ,这提示 LIF的异常表达可能是原因不明不孕症患者着床失败的原因之一 ,也为不孕症的治疗及节育技术提出了一条新途径     

多囊卵巢综合征患者卵泡液LIF、IL-1β及性激素水平与IVF-ET结局关系的研究

目的:探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵泡液中白血病抑制因子(LIF)、白细胞介素-1β(IL-1β)及性激素水平与IVF-ET结局的关系。方法:用酶联免疫双抗夹心法和时间分辨免疫荧光法前瞻性研究了行IVF-ET的11例PCOS患者、14例对照组患者卵泡液中IL-1β、LIF及雌二醇(E2)和孕酮(P)的定量表达。结果:PCOS组卵泡液中LIF为21.1±11.1pg/mL,P为191.9×103nmol/L,明显低于对照组(33.5±11.8pg/mL,305.9×103nmol/L,P<0.05);而PCOS组卵泡液IL-Iβ为39.9±11.5pg/mL,E2浓度为3334.00nmol/L,明显高于对照组(28.3±10.6pg/mL,2138.1nmol/L),P<0.05。PCOS组胚胎种植率为8.8%,临床妊娠率为18.2%,明显低于对照组(16.7%,42.9%),P<0.05;PCOS组OHSS发生率为27.3%,明显高于对照组(7.1%,P<0.05)。LIF与E2在两组患者呈负相关(r=-0.442,P=0.027)、LIF与LH/FSH比值在PCOS组呈负相关(r=-0.682,P=0.021);IL-Iβ与E2在PCOS组呈正相关(r=0.612,P=0.045);LH/FSH比值与P在PCOS组呈负相关(r=-0.780,P=0.005);LIF与IL-Iβ水平两者间无明显相关性。结论:LIF可能是PCOS患者低种植率的关键因子;IL-Iβ可能是PCOS患者在控制性超排卵过程中易发生OHSS的一个致病因子;卵泡液IL-Iβ、LIF受卵巢激素调控。     

子宫腔息肉对不孕患者内膜白血病抑制因子的影响

目的:探讨子宫内膜息肉(EP)对不孕症着床期内膜白血病抑制因子(LIF)转录和表达的影响,初探其对内膜容受性的影响。方法:冻融胚胎移植(FET)前宫腔镜检查的继发不孕患者35例,其中术前彩色超声显示EP者为A组(n=25),未显示EP者为B组(n=10)。于黄体中期行宫腔镜检查EP数目、大小、位置等,并摘除息肉、刮取息肉周围子宫内膜及正常子宫腔内膜,免疫组织化学方法检测LIF,RT-PCR检测LIF m RNA转录水平。结果:患者一般情况及黄体中期雌、孕激素水平组间无统计学差异(P0.05);A组LIF m RNA转录水平及蛋白表达水平略高于B组,但差异无统计学意义(P0.05)。结论:EP对内膜LIF的转录及表达无明显不利影响。     

卵泡液中INH_B-ACT_A-FS系统的水平及其意义

目的:探讨卵泡液中抑制素-激活素-卵泡抑素(INHB-ACTA-FS),作为卵泡发育监测指标的临床意义。方法:ELISA法测定22例IVF卵泡液中INH-ACT-FS系统的水平,并与性激素、年龄、获卵数等进行相关性分析。结果:①在获卵数≥10个组,其周期d2的血FSH、卵泡液中的ACTA明显低于获卵数<10个组(P均<0.05),而前者卵泡液中的INHB、FS明显高于后者(P<0.01和P<0.05);②INHB与d2血FSH呈显著负相关,与IVF的重要参数(获卵数、受精卵数、卵裂数)间呈显著正相关;③ACTA与获卵数、受精卵数、卵裂数呈负相关;④FS与子宫内膜厚度呈显著正相关。结论:INHB-ACTA-FS系统与卵泡生长发育密切相关,其对IVF中卵巢反应和IVF结局有较好的预测作用。     

白细胞抑制因子(LIF)对离体小鼠子宫内膜岩藻糖基转移酶(FuT7)表达的影响

目的:探讨白血病抑制因子(LIF)对小鼠子宫内膜细胞岩藻糖基转移酶(FuT7)因子表达的影响。方法:分别用含LIF和抗LIF-抗体(LIF-Ab)培养液孵育子宫内膜细胞10h,通过PCR、免疫荧光和免疫印迹方法分析各组培养液中FuT7因子的表达。结果:PCR结果显示:与空白对照组比,LIF对离体子宫内膜细胞FuT7基因表达有上调作用(0.26±0.02vs0.18±0.01),而LIF-Ab可抑制子宫内膜细胞FuT7的表达(0.14±0.04vs0.18±0.01)。免疫荧光和免疫印迹结果同样显示经LIF孵育后,子宫内膜细胞FuT7蛋白量有所增加。结论:LIF在体外可调控子宫内膜细胞FuT7表达,并有可能借此来调控着床阶段特异表达的sLeX寡糖抗原量,继而影响整个着床调控网络。     

白血病抑制因子对人早孕滋养细胞MMP-2、MMP-9和TIMP-1表达的调节

目的:研究白血病抑制因子(LIF)对人早孕滋养细胞基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)和MMPs组织抑制物(TIMP-1)表达的影响。方法:以不同浓度的LIF作用于体外培养的细胞滋养细胞,于2h、4h、12h收集细胞。用RT-PCR方法检测MMP-2、MMP-9和TIMP-1 mRNA的表达。结果:LIF对人早孕滋养细胞MMP-2和TIMP-1 mRNA的表达无明显作用。LIF作用4h和12h,实验组MMP-9 mRNA明显上升(P<0.01),并呈明显剂量依赖关系。结论:LIF可以在一定的时间和剂量范围内促进滋养细胞MMP-9的表达。推测LIF可能通过节制性调节MMPs的表达,进而分解子宫内膜细胞外基质,介导滋养细胞的入侵。     

PCOS患者子宫内膜白血病抑制因子的表达及意义

目的:探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者不同组织学分期的子宫内膜白血病抑制因子(LIF)的表达与子宫内膜容受性的关系。方法:20例已婚PCOS患者(PCOS组)和26例已婚不孕症患者(对照组)在月经周期第5￣14日及排卵后7￣8 d采集其子宫内膜标本,经HE染色判定内膜组织学分期,采用免疫组织化学法检测内膜LIF的表达。结果:PCOS组间质反应不良和分泌反应欠佳的发生率均高于对照组,差异有统计学意义(χ2=5.000,P<0.05;χ2=7.219,P<0.01)。LIF的表达以腺上皮细胞的胞质为主,其在分泌中期子宫内膜的表达水平均高于增生期(P<0.01)。LIF在PCOS组增生期和分泌中期子宫内膜的表达水平均低于其相应的对照组(P<0.01)。结论:PCOS患者着床窗口期LIF的低表达可能影响着床的多个环节,参与了PCOS患者内分泌紊乱纠正后仍出现妊娠率低、流产率高的发生、发展过程。     

输卵管积水处理前后窗口期子宫内膜人白血病抑制因子（LIF）和白介素-2（IL-2）的表达

目的探讨输卵管积水预处理对改善窗口期子宫内膜的意义。方法选择输卵管积水患者17例为A组,输卵管积水处理（包括输卵管切除术及输卵管根部切断术）后的患者9例为B组,应用免疫组化法测定两组患者窗口期子宫内膜人白血病抑制因子（leukemia inhibitory factor,LIF）和白介素-2（IL-2）的表达情况。结果LIF在A组患者的窗口期子宫内膜的表达明显低于B组（P〈0.05）,而IL-2在A组患者的窗口期子宫内膜的表达明显高于B组（P〈0.05）。结论输卵管积水的患者窗口期子宫内膜LIF的低表达及IL-2的高表达可能是影响输卵管积水患者IVF-ET结局的因素之一。     

卵泡液和卵裂期胚胎培养液可溶性人类白细胞抗原G(sHLA-G)的表达与IVF-ET结局的相关性研究

目的:探讨卵泡液和卵裂起胚胎培养液中可溶性人类白细胞抗原G(sHLA-G)与卵裂期胚胎发育以及IVF-ET后临床妊娠率的关系,为临床优选卵母细胞及移植胚胎提供一种有效的非侵入性检测途径。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测取卵日卵泡液及第3日移植胚胎培养液中sHLA-G的表达及表达量,将40例患者分为sHLA-G表达阳性组(n=15)和sHLA-G表达阴性组(n=25)进行比较分析。结果:40份患者卵泡液sHLA-G阳性率为37.5%(15/40),87份第3日移植胚胎培养液中sHLA-G阳性率为56.32%(49/87),卵泡液和胚胎培养液sHLA-G阳性组与阴性组的获卵数和受精率均无差异(P>0.05),sHLA-G阳性组的卵裂率、第3日胚胎卵裂球数、优质胚胎率、临床妊娠率均明显高于阴性组(P<0.05),其中胚胎培养液sHLA-G阳性组的临床妊娠率显著高于阴性组(P<0.01)。结论:sHLA-G在部分卵泡液及早期胚胎培养液中均有表达,反映了胚胎良好的发育和种植潜能,预示着较好的IVF-ET结局,是一种优选卵母细胞和移植胚胎的有效的非侵入性途径。     

晚卵泡期孕酮水平提前上升相关因素分析及其发生机制的新探讨

目的:探讨晚卵泡期孕酮(P)水平上升对妊娠结局的影响,分析与P水平上升的相关因素并探讨其潜在机制.方法:回顾性分析1 083例IVF/ICSI患者的临床资料.根据hCG注射日血清P水平结合早发性LH峰将患者分为3组:低孕酮LH正常组(A组)、高孕酮LH正常组(B组)、高孕酮LH峰组(C组);根据hCG注射日卵泡数及E2水平将患者分为:卵巢正常反应组、卵巢高反应组.比较各组患者的临床特征、用药情况和妊娠结局.结果:P水平上升的最佳判断点为1.205 ng/ml. A、B和C组的临床妊娠率分别为51.0％、38.9％和28.6％(P=0.000),胚胎种植率分别为32.2％、24.9％和15.6％(P=0.001).与A组相比,B和C组的Gn使用总量更高(P=0.000)、获卵数更多(P=0.000).与B组相比,C组直径≥18mm的卵泡数更少、E2水平更低、P水平上升更高,差异有统计学意义(P＜0.05).与卵巢正常反应组相比,卵巢高反应组同量用药情况下P水平上升更高.孕酮提前上升的相关因素为体质量指数(BMI)、基础FSH、hCG注射日最大卵泡直径、E2水平、Gn使用总量和Gn启动剂量.结论:晚卵泡期P水平提前上升不利于妊娠结局,但不影响卵母细胞及胚胎质量.卵巢自身反应性与FSH剂量是导致P水平提前上升的关键因素.     

体外受精-胚胎移植周期中血清抑制素水平的研究

目的:探讨体外受精(IVF)周期与生理周期中抑制素水平变化规律的差异及其对IVF周期可能产生的影响。方法:测定10例正常育龄妇女月经周期各期血清INHA、INHB水平;测定35例初次接受IVF患者,IVF周期月经d2、d7、hCG注射日、取卵日及黄体中期分别取血检测定INHA、INHB水平。分析自然周期与IVF周期中激素水平变化规律间的差异。结果:育龄妇女月经周期中INHA、INHB水平的变化曲线各不相同。IVF周期中INHB变化趋势与自然周期相似。但INHA水平自围排卵期达峰值后持续下降,不再如自然周期那样出现黄体期高峰。结论:IVF周期取卵过程中颗粒细胞的损伤和丢失,导致INHA黄体中期峰值的缺陷。INHA水平的非生理性改变可能通过对黄体功能及子宫内膜蜕膜化的不利作用影响妊娠。     

胚胎移植日血清雌激素下降幅度对体外受精-胚胎移植结局的影响

目的:探讨黄体期雌激素下降幅度对IVF-ET后胚胎种植率和临床妊娠率的影响。方法:回顾性分析97个接受长方案控制性超排卵及IVF-ET治疗周期分别测定其hCG日和ET日血清E2水平,根据其下降幅度分为6组。A组:12个治疗周期,E2下降幅度<20%;B组:13个治疗周期,E2下降幅度20%-29%;C组:11个治疗周期,E2下降幅度30%-39%;D组:16个治疗周期,E2下降幅度40%-49%;E组:24个治疗周期,E2下降幅度50%-59%;F组:21个治疗周期,E2下降幅度≥60%。结果:ET日E2水平呈不同程度的下降,当下降幅度≥30%时胚胎种植率和妊娠率明显降低,差异出现显著性(P<0.05)。结论:长方案COH及IVF-EF中,ET日E2水平下降幅度≥30%时会引起胚胎种植率和临床妊娠率的降低,应考虑给予雌激素的补充。     

IVF-ET中输卵管积水对子宫内膜和内膜下血流的影响

目的:探讨输卵管积水对IVF-ET结局的影响。方法:接受IVF-ET助孕的110例不孕症妇女,根据有无输卵管积水分为积水组(n=48)和对照组(n=62),应用经阴道彩色多普勒超声检测,比较组间子宫动脉血流、内膜形态、内膜和内膜下血流及IVF-ET结局。结果:积水组与对照组一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05);积水组hCG注射日A型血流(可检测到子宫内膜和内膜下均有血流通过)、三线型内膜比率及妊娠率显著低于对照组(P<0.05),组间子宫动脉血流参数PI、RI和子宫内膜厚度差异无统计学意义(P>0.05)。结论:内膜形态的改变及内膜和内膜下血流减少可能是输卵管积水患者在IVF-ET种植率下降的原因。     

Basic Fibroblast Growth Factor: Peritoneal and Follicular Fluid Levels and its Effect on Early Embryonic Development

Objective: To investigate the effect of basic fibroblast growth factor (FGF) on preimplantation embryos and to evaluate the levels of basic FGF in follicular and peritoneal fluid.

Design: Prospective study.

Setting: University-based laboratory.

Patient(s): Follicular fluids (FFs) were obtained from women undergoing ovulation induction (n = 62) and peritoneal fluids were obtained from women with (n = 49) or without (n = 12) endometriosis.

Intervention(s): The effect of basic FGF on mouse embryos was assessed. Basic FGF concentrations were measured in pre-hCG and post-hCG FFs and in peritoneal fluids.

Main Outcome Measure(s): Two-cell murine embryos were treated with basic FGF and followed for the rate of blastocyst formation and embryo hatching. Follicular and peritoneal fluid basic FGF levels were measured by ELISA.

Result(s): Basic FGF (10 ng/mL) decreased the rate of blastocyst formation and embryo hatching. The level of basic FGF did not change in the FF around ovulation, and there was no correlation between FF basic FGF levels and reproductive parameters, with the exception of age. The levels of basic FGF in the peritoneal fluid of women with or without endometriosis were not different.

Conclusion(s): Basic FGF is present in follicular and peritoneal fluids, but its concentration in these fluids does not change during the menstrual cycle or in the presence of endometriosis. Basic FGF inhibits murine preimplantation embryonic development at concentrations 10–100 times higher than the levels detected in follicular and peritoneal fluids.     

Effect of Different Concentrations of Recombinant Leukemia Inhibitory Factor on Different Development Stage of Mouse Embryo In Vitro

Purpose: To assess the influence of different concentrationsof recombinant human leukemia inhibitory factor (LIF) onthe in vitro development of mouse embryos. Methods: The 2- to 4-cell embryos of CB6F1 mice werecultured in the human tubal fluid (HTF) media containingdifferent concentrations of LIF. Mouse embryos were dividedinto seven groups: (1) HTF; (2) 1500 IU/ml LIF; (3) 1000IU/ml LIF; (4) 750 IU/ml LIF; (5) 500 IU/ml LIF; (6) 250IU/ml LIF; (7) 125 IU/ml LIF. The embryonic numbers ofdifferent stages including 5–8 cell, 9–16 cell, morula, blastocyst,and hatching blastocyst were recorded. Results: The percentage of early embryo stage (2-cellembryos to 6- to 16-cell stages) in all groups were nonsignificantlydifferent. There were higher formation rates of preimplantationembryos (morula to hatching blastocyst) ingroups 2, 3, 4, and 5 than in groups 1, 6 and 7. Conclusions: LIF has positive effects on preimplantationembryo development and has nonsignificant influence onthe early embryo development. The lowest concentration ofLIF which could provide the optimal embryo developmentis 500 IU/ml.     

Vascular Endothelial Growth Factor Concentrations in Follicular Fluid Obtained from IVF-ET Patients: A Comparison of hMG, Clomiphene Citrate, and Natural Cycle

Purpose: Evaluation of vascular endothelial growth factor (VEGF) concentrations of follicular fluid (FF) in accordance with an ovarian stimulation protocol and ovarian response. Methods: The subjects of this study were 38 patients undergoing IVF-ET in our hospital. They were divided into three groups according to ovarian stimulation protocols; Group 1: hMG cycles (n = 19), Group 2: clomiphene citrate cycles (n = 10), Group 3: natural cycles (n = 9). They reclassified into three groups according to the number of oocytes harvested. VEGF concentration was measured in FF, employing ELISAs. Results: Group 1 shows lower VEGF concentrations in FF than Group 2 or Group 3. Excluding high responders from Group 1, no difference was found among these three groups. As for the reclassified groups, group of highest number of oocytes havested showed lowest VEGF concentrations in FF. Conclusions: VEGF concentrations in FF might negatively correlate with the number of follicles, irrespective of the ovulation induction protocol.     

体外受精——胚胎移植中血清及卵泡液催乳激素变化相关分析

目的:探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)过程中血清及卵泡液催乳激素(PRL)的变化规律及其意义。方法:检测38例接受IVF-ET患者治疗前(基础日)、治疗中(Gn 6日、HCG日、取卵日)血清PRL水平及取卵日卵泡液(左、右卵巢)PRL水平,分析变化规律及其与获卵、受精、胚胎质量及妊娠情况的相关性。结果:1PRL在取卵日左、右卵巢卵泡液的浓度明显高于基础日、Gn 6日、HCG日血清水平(P0.05)。2PRL的血清浓度从卵泡期开始上升,在HCG日达峰,约为基础日浓度的2.43倍,取卵日稍下降,Gn 6日、HCG日和取卵日的血清PRL浓度均显著高于基础日血清PRL浓度(P0.05)。3HCG日血清PRL浓度与回收卵数、成熟卵数呈正相关(P0.05);取卵日血清PRL浓度与回收卵数、成熟卵数、受精数、优胚数均呈正相关(P0.05);其余指标之间无显著相关性。4妊娠组与未妊娠组在IVF-ET过程中基础日、Gn 6日、HCG日、取卵日血清和左、右卵巢卵泡液中的PRL值比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论:垂体降调节及控制性超促排卵过程对垂体的PRL分泌无显著影响,HCG日、取卵日的血清PRL的浓度与获卵、受精及胚胎质量有一定的相关性。IVF-ET与正常月经周期存在相似的一过性PRL升高过程,但未影响妊娠结局。