急性特发性血小板减少性紫癜患儿T细胞蛋白激酶C活性检测及意义

目的 研究急性特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿外周血T细胞蛋白激酶C(PKC)的活性变化及其与T细胞活化和血小板减少程度之间的关系.方法 无菌采集40例急性ITP患儿及35名健康儿童外周血,T细胞分离富集柱法分离纯化T细胞,用非同位素标记法检测T细胞PKC的活性变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)水平,血液分析仪计数血小板.结果 ITP患儿T细胞PKC的活性为(0.98±0.22)nmol·min-1·ml-1,与正常健康儿童[(0.53±0.13)nmol·min-1·ml-1]相比明显增强(P＜0.05),T细胞活化标志sIL-2R的表达[(528±124)U/ml]与正常儿童[(296±57)U/ml]比较显著升高(P＜0.05),T细胞PKC的活性变化与sIL-2R的表达呈显著正相关(r=0.872 50,P＜0.05),与血小板计数呈显著负相关(r=-0.810 67,P＜0.05).结论 急性ITP患儿外周血PKC活性增强可能导致T细胞活化,活性T细胞增多可能引起患儿血小板的损伤,提示PKC信号传导在ITP的免疫病理机制中发挥重要作用.     

急性特发性血小板减少性紫癜患儿T细胞蛋白激酶C活性检测及意义

目的研究急性特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿外周血T细胞蛋白激酶C(PKC)的活性变化及其与T细胞活化和血小板减少程度之间的关系。方法无菌采集40例急性ITP患儿及35名健康儿童外周血,T细胞分离富集柱法分离纯化T细胞,用非同位素标记法检测T细胞PKC的活性变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)水平,血液分析仪计数血小板。结果ITP患儿T细胞PKC的活性为(0.98±0.22)nmol.m in-1.m l-1,与正常健康儿童[(0.53±0.13)nmol.m in-1.m l-1]相比明显增强(P<0.05),T细胞活化标志sIL-2R的表达[(528±124)U/m l]与正常儿童[(296±57)U/m l]比较显著升高(P<0.05),T细胞PKC的活性变化与sIL-2R的表达呈显著正相关(r=0.872 50,P<0.05),与血小板计数呈显著负相关(r=-0.810 67,P<0.05)。结论急性ITP患儿外周血PKC活性增强可能导致T细胞活化,活性T细胞增多可能引起患儿血小板的损伤,提示PKC信号传导在ITP的免疫病理机制中发挥重要作用。     

特发性血小板减少性紫癜患儿外周血T细胞亚型的分析

T细胞亚型分化漂移可能与一些自身免疫病的发病机制有关。本研究旨在通过分析特发性血小板减少性紫癜（idiopathic thromboeytopenic purpura，ITP）患儿外周血Th／Tc、Th1／Th2、Tc1／Tc2细胞的平衡状态，探讨T细胞亚群失衡在ITP发病机制中的作用。收集30例ITP患儿外周抗凝静脉血，分离纯化得T细胞．以PE标记的抗CRTH2单克隆抗体和Cy5标记的抗CD4、CD8单克隆抗体作双色流式细胞术检测，分析ITP患儿Th／Tc、Th1／Th2、Tc1／Tc2比例的变化。结果显示：ITP患儿外周血T细胞与健康儿童相比，Th细胞百分率及Th／Tc比例明显下降（P〈0.05），Tc细胞百分率无明显变化（P〉0．05）；Th1及Th2细胞百分率明显下降（P〈0．05），Tc1及Tc2细胞百分率无明显变化（P〉0．05），Th1／Th2及Tc1／Tc2比例明显升高（P〈0.05）。结论：ITP患儿外周血可能存在细胞免疫功能低下及T细胞亚群漂移，Th1及Tc1细胞比例升高，呈明显Th1类细胞优势，此结果说明T细亚群分化异常在ITP发病过程中起着重要作用。     

急性特发性血小板减少性紫癜患儿外周血血小板抗体、调节性T淋巴细胞水平的检测及临床意义

目的检测急性特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿治疗前后外周血血小板相关抗体(PAIgG)、CD4+、CD25+、Foxp3+调节性T淋巴细胞(Tr细胞)的变化,探讨Tr细胞与PAIgG之间的相关性,分析Tr细胞及PAIgG在急性ITP患儿发病机制中的相互作用。方法用流式细胞仪检测外周血PAIgG和Tr细胞的数量,血细胞分析仪计数血小板(PLT)含量。结果急性ITP患儿治疗前外周血PLT数量、Tr细胞均低于健康对照组(均为P0.05),而PAIgG含量高于健康对照组(P0.05);随着病情痊愈或好转,血小板数量、Tr细胞含量达到正常值或接近正常值,而PAIgG含量仍然较高(均为P0.05),PAIgG在治疗前与血小板含量呈负相关(痊愈组及好转组:r值分别为-0.81,-0.78,均为P0.05),Tr细胞含量在治疗前与血小板含量呈正相关(r值分别为0.76、0.81,均为P0.05),Tr细胞含量与PAIgG含量在治疗前呈负相关(r值分别为-0.64、-0.73,均为P0.05)。结论急性ITP患儿外周血中Tr细胞数量和PAIgG含量、PLT数量均有较好的相关性,检测指标Tr细胞数量能够反映急性ITP患儿外周血中PAIgG和PLT数量的变化,Tr细胞水平的降低反映了机体的免疫功能状态降低,PAIgG及Tr细胞在急性ITP发病机制中发挥了重要作用。     

T淋巴细胞在特发性血小板减少性紫癜外周血表达的分析

目的探讨外周血淋巴细胞亚群变化对特发性血小板减少性紫癜影响。方法选取30例成年ITP患者,并且选取18例对照者正常的外周血标本,通过分离出单个核细胞,采用流式细胞术对淋巴细胞亚群进行科学的检测,通过检测结果,将30例ITP患者和18例对照组进行比较。结果 30例ITP的患者与对照组相比,CD3、CD4有所降低,而CD8有所升高。CD4/CD8的比值降低。ITP组与对照组间的比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 ITP患者的发病原因与细胞的免疫有着很大的关系。对患者进行免疫系统的纠正对于治疗ITP疾病有着重要的意义。     

特发性血小板减少性紫癜患者外周血调节性T细胞的研究

目的研究特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Tr细胞）的变化，探讨其在ITP发病机制中的作用。方法分别收集35例ITP患者及健康对照组外周抗凝静脉血，分离纯化T淋巴细胞。应用藻红蛋白（PE）标记的抗CD4单抗及异硫氰酸荧光素（FITC）标记的抗CD25单抗，作双色流式细胞术，分析ITP患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞百分率。结果ITP组外周血中Tr细胞明显低于健康对照组（P〈0．05），Tr细胞占CD4^＋T细胞的比例也低于健康对照组（P〈0．05）。结论ITP患者外周血存在细胞免疫功能失调，Tr细胞数量减少可能与ITP的发病机制有关。     

T细胞异常与特发性血小板减少性紫癜

80年代以来，越来越多的研究证实特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者体内存在着多种T淋巴细胞异常，T淋巴细胞表型及功能的异常可能在ITP发病中起重要作用。现就ITP患者T淋巴细胞异常及可能的致病机制作一综述。     

树突状细胞诱导T细胞异常与特发性血小板减少性紫癜

树突状细胞（DC）是体内最重要的抗原递呈细胞，在其诱导初始型T细胞（ThO）产生特异性免疫应答过程中可引起T细胞异常，从而引起自身免疫性疾病的发生。特发性血小板减少性紫癜正是由于该过程异常而发生的。     

特发性血小板减少性紫癜中的T、B细胞异常

特发性血小板减少性紫癜（ITP）是一组无明显外源性病因引起血小板减少的异质性疾病，不同患者所涉及、所主导的发病环节可能不同，其中T、B细胞所起的作用尤为重要。深入开展ITP患者T、B细胞异常的研究将有助于对ITP发病机制的认识和疾病分层后的个体化治疗。本文介绍了ITP患者自身反应性T细胞的异常产生，T、B细胞的异常激活和T细胞亚群失衡，所导致的血小板破坏效应阶段。     

树突状细胞诱导T细胞异常与特发性血小板减少性紫癜

树突状细胞(DC)是体内最重要的抗原递呈细胞,在其诱导初始型T细胞(Th0)产生特异性免疫应答过程中可引起T细胞异常,从而引起自身免疫性疾病的发生。特发性血小板减少性紫癜正是由于该过程异常而发生的。     

特发性血小板减少性紫癜患者外周血淋巴细胞协同刺激分子的表达

目的　探讨T、B淋巴细胞表面协同刺激分子在特发性血小板减少性紫癜 (ITP)的变化。方法　用流式细胞术检测 2 1例ITP患者和 9名正常人外周血淋巴细胞协同刺激分子B7 CD2 8和CD4 0 表达率 ,用ELISA方法检测ITP患者外周血PAIgG的含量。结果　ITP患者外周血CD4+ CD2 8+ 细胞率明显低于正常对照 ,CD86+ 、CD1 9+ CD86+ /CD1 9+ 细胞率明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,而CD2 8+ 、CD4 0+ 、CD80+ 、CD1 9+ CD80+ 、CD1 9+ CD86+ 、CD1 9+ CD4 0+ 、CD4+ CD2 8+ /CD4+ 、CD1 9+ CD80+ /CD1 9+ 、CD1 9+ CD4 0+ /CD1 9+ 细胞率与对照组相比差异无显著性。 2 1例ITP患者中 16例PAIgG的含量高于正常 ,平均值为(184 .6 2± 38.0 0 )ng 10 7血小板 ,且PAIgG的含量与CD1 9+ CD86+ /CD1 9+ 细胞率呈正相关。结论　ITP患者CD4+ T淋巴细胞表面的协同刺激分子CD2 8表达无缺陷。PAIgG与B淋巴细胞表面的协同刺激分子CD86 的改变明显相关 ,因此CD86 的改变可能参与ITP自身免疫的病理机制 ,并为ITP患者单克隆抗体治疗提供理论指导。     

特发性血小板减少性紫癜患者CD138表达情况及其意义

目的:探讨CD138细胞与特发性血小板减少性紫癜(ITP)惠者预后,及其与相关临床指标的关系.方法:用流式细胞术检测100例初诊ITP患者和20例正常对照外周血CD138细胞表达率.随访6个月后,将ITP患者分为急性型与慢性型二组,比较初诊时外周血CD138细胞表达率,并分析CD138细胞表达率与就诊时间、初诊时血小板计数、血小板相关抗体、骨髓巨核细胞计数、治疗反应的关系.结果:外周血CD138细胞表达率,急性型组与对照组无差异(P>0.05),慢性型组明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);慢性型患者外周血CD138细胞表达率与初诊时血小板计数、血小板相关抗体无相关(P>0.05),与就诊时间、骨髓巨核细胞计数、治疗反应相关(P<0.05).结论:CD138细胞在慢性型ITP患者外周血中高表达,可作为早期判断ITP惠者预后的重要指标之一.     

血小板参数在原发性血小板减少性紫癜患儿的临床应用分析

目的 探讨血小板参数在原发性血小板减少性紫癜（ITP）的临床应用价值.方法 以42例ITP患儿为研究对象,观察不同严重程度患儿血小板参数及所有ITP患儿治疗前后血小板参数的变化情况.结果 轻、中、重三组血小板计数（PLT）、平均血小板体积（MPV）、血小板体积分布宽度（PDW）、大血小板比率（P-LCR）两两比较均有统计学差异（P〈0.05）;ITP患儿治疗前后血小板参数PLT、PDW、MPV、P-LCR比较也均有统计学差异（P〈0.05）;血小板参数相关性分析,PLT与MPV呈负相关（r=-0.513,P〈0.05）,MPV与P-LCR呈正相关（r=0.713,P〈0.05）,其他均无相关性（P〉0.05）.结论 血小板参数的检测对于ITP疾病的诊断、病情判断及疗效评估均有重要的临床意义.     

免疫性血小板减少性紫癜患者单个核细胞中microRNA-30a表达增高及其意义

目的 探讨microRNA-30a是否参与了免疫性血小板减少性紫癜（ITP）的发病机制.方法 采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应（FQ-RT-PCR）技术检测38例ITP患者及35例健康者外周血单个核细胞（PBMC）中microRNA-30a和Lyn mRNA的相对表达量,并进行统计分析.结果 ITP患者外周血PBMC中microRNA-30a表达较健康对照组明显增高（P〈0.01）,且与血小板计数呈负相关（r2=0.42,P〈0.05）;ITP患者外周血PBMC中Lyn mRNA表达较健康对照组明显降低（P〈0.01）,且与microRNA-30a呈负相关（r2=0.33,P〈0.01）.结论 microRNA-30a可能通过Lyn参与了ITP的发病机制.     

调节性T细胞和Th17细胞比值的变化与特发性血小板减少性紫癜发病关系的研究

目的 探讨调节性T细胞和Th17细胞比值在特发性血小板减少性紫癜(ITP)发病机制中的作用.方法 应用流式细胞术检测29例ITP患者和28名正常人外周血中CD4+CD25+T细胞、CD4+CD25high T细胞、CD4+IL-17A+T细胞的数量,ELISA法测定血浆中IL-10、IL-17水平;RT-PCR法检测外周血Foxp3和RORc mRNA的表达水平.结果 与正常对照组比较,ITP患者外周血CD4+CD25+T细胞/CD4+T细胞比值升高(P＜0.05),CD4+CD25high T细胞/CD4+T细胞比值下降(P＜0.05),CD4+IL-17A+T细胞/CD4+T细胞比值差异无统计学意义(P＞0.05),CD4+CD25highT细胞/CD4+IL-17+T细胞比值从11.42±5.09降低为1.08±0.84(P＜0.05).ITP患者血浆IL-10水平明显低于正常对照组(P＜0.05),IL-17水平与对照组比较无显著差异(P＞0.05).ITP患者较正常对照组外周血中Foxp3 mRNA水平明显降低(P＜0.05),而RORc mRNA表达则较对照组明显升高(P＜0.05).结论 ITP患者存在调节性T细胞/Th17细胞比例平衡失调,其可能在ITP免疫发病机制中起一定作用.     

急性ITP患儿外周血 CD4+ CD25+ T细胞及相关细胞因子的研究

目的检测急性特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞(TR)及相关细胞因子的变化,探讨它们在ITP发病机制中的作用。方法用流式细胞仪检测外周血TR细胞的数量,ELISA法检测血浆中相关细胞因子的含量。结果ITP患儿外周血TR细胞的百分率显著低于正常对照组[(2.83±1.05)%vs(5.07±0.59)%,P<0.05];ITP患儿血清中IL-10、TGF-β1的含量也显著低于正常对照组[IL-10:(29.48±13.69)pg/mlvs(43.10±14.95)pg/ml;TGF-β1:(170.04±91.58)pg/mlvs(254.75±130.41)pg/ml,P<0.05]。ITP患儿外周血TR细胞在CD4+细胞中所占比例与血清中IL-10、TGF-β1的含量均呈正相关(r1=0.54,r2=0.66,P<0.05)。结论急性ITP患儿外周血中TR细胞数量的减少及相关细胞因子含量的降低可能与急性ITP患儿的细胞免疫失调有关。     

慢性特发性血小板减少性紫癜患者外周血树突细胞的变化及意义

目的 探讨慢性特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者体内树突细胞(DC)数量和功能的变化.方法 慢性ITP患者予以大剂量地塞米松(HD-DXM)冲击治疗,剂量40 mg/d,口服,连续4 d,观察短期疗效.用流式细胞术检测患者外周血中髓系DC(mDC)和浆细胞样DC(pDC)在治疗前后绝对数量的变化及与CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞的相关性;流式细胞术检测外周血总Dc表面协同刺激分子的表达.将慢性ITP患者外周血单核细胞来源的DC、CD4+T淋巴细胞与自身血小板或健康人同源异基因血小板混合培养,观察CD4+T淋巴细胞增殖情况,检测DC血小板相关抗原的呈递功能.结果 与正常对照组比较,慢性ITP患者外周血pDC和mDC绝对数量均无明显变化(P值均》0.05);而外周血CD4+FOXP3+T细胞数明显降低(P《0.01),pDc和mDC与CD4+FOXP3+T细胞数之间均存在负相关性(r=-0.396,P=0.045和r=-0.410,P=0.037).HD-DXM治疗初始反应率达92.3%,pDC绝对数量较治疗前减少达75.5%(P《0.01);而mDC较治疗前虽增加了24.3%(P《0.05),但mDC上CD11c表达的平均荧光强度(MFI)从治疗前340±30降至199±21(P《0.01);CD4+F0xP3+T细胞数较治疗前显著增加(P《0.01),治疗后pDC与CD4+F0XP3+T细胞存在负相关(r=-0.524,P=0.006),而mDC与CD4+F0XP3+T细胞间无相关性(r=-0.360,P=0.071).慢性ITP患者外周血DC表面协同刺激分子CD86表达的MFI明显高于正常对照组(P《0.05);CD86、CD40、CD80表达阳性率及CD40、CD80表达的MFI与正常对照组比较差异均无统计学意义(P值均》0.05).慢性ITP患者CD4+T淋巴细胞增殖反应强度高于对照组(P《0.05),DC对血小板相关抗原呈递功能亢进.结论 DC可能参与了慢性ITP的免疫发病机制,并与CD4+CD25+Treg细胞有一定的关联.