老年机械通气患者气管内导管生物被膜形成状况的研究

目的：探讨老年机械通气患者气管内导管生物被膜的形成状况,明确相关性和危险因素.方法：分析22例老年患者的25个气管导管各留置时间段与细菌培养结果.结果：25个气管导管细菌培养阳性22个,占88%,培养阴性的3个,占12%.结论：细菌密度与气管插管时间密切相关,随着插管时间的延长,细菌计量明显增加.     

呼吸机导管内细菌生物被膜抗吞噬作用

目的探讨侵入性导管内细菌生物被膜抗吞噬作用。方法于2010年7月-2011年12月收集新生儿ICU病房危重新生儿病例呼吸机导管标本32份,对导管内壁细菌分离鉴定,选择生物膜模式菌株模拟导管中液体流动状态重建细菌生物被膜,观察细菌生物被膜形态结构及吞噬细胞与细菌生物被膜的相互作用,分析导管细菌生物被膜形成与导管伴生感染的关系。结果 32例导管标本经细菌分离培养和ATB生化鉴定,显示鲍曼不动杆菌14株,铜绿假单胞菌9株,葡萄球菌6株,真菌3株;14例鉴定的鲍曼不动杆菌标本中有8株产生生物被膜菌株;患者侵入性导管容易被细菌粘附形成生物被膜,扫描电镜可用于观察细菌生物被膜形成情况,生物被膜具有明显抗吞噬作用。结论生物被膜抗吞噬作用是感染难治的重要因素。     

采用不同的气管切开导管预防呼吸机相关性肺炎效果观察

目的 观察使用带双气囊的气管切开导管对降低机械通气患者呼吸机相关性肺炎（VAP）发生率的作用.方法 将68例行气管切开机械通气治疗48h以上的患者随机分为观察组（36例）和对照组（32例）,对照组采用常规带一个气囊的气管切开导管;观察组采用带双气囊的气管切开套管,下方气囊用于充气,上方气囊连接负压吸引器吸引气囊上滞留物及口咽部分泌物,观察两组机械通气1周、2周及2周以后VAP的发生率.结果 机械通气1周、2周,观察组VAP发生率显著低于对照组（P〈0.05）.结论 采用改进后的气管切开套管可显著降低VAP的发生.     

间歇声门下吸引对机械通气患者呼吸机相关性肺炎发生率的影响

目的探讨可冲洗式导管间歇声门下吸引对机械通气患者呼吸机相关性肺炎发生率的影响。方法选取2010年7月-2011年8月行机械通气的患者246例作为研究对象;将其随机分为观察组和对照组,对照组采用常规气管导管进行机械通气,观察组采用间歇声门下吸引方法。结果常规气管导管行机械通气的患者VAP的发生率为45.8%,而采用可冲洗导管间歇吸引行机械通气的患者VAP的发生率为23.8%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论可冲洗导管间歇吸引声门下滞留物能明显降低机械通气患者呼吸机相关性肺炎发生率,值得临床推广应用。     

气管套管气囊阻塞导管内口致呼吸困难3例

目的报道3例气管切开长期机械通气的老年患者突然出现呼吸困难的情况,分析其发生原因并提出处理对策。方法收集气管切开的长期机械通气的老年患者为观察对象,监测其呼吸频率及血氧饱和度,在病情平稳的基础上突然出现呼吸困难的情况。结果在保障呼吸机不漏气的前提下,3例患者均存在过度充气,气囊将导管内口部分堵塞情况,在体位变动时阻塞加重导致患者呼吸困难。分析其原因考虑与气管软化扩张[2-3]、气管套管老化等有关。结论气管切开长期机械通气的老年患者突然出现呼吸困难需要警惕气囊阻塞导管内口的可能。     

NICU新生儿机械通气细菌培养结果分析及对策

目的 探讨基层新生儿重症监护病房(NICU)机械通气下呼吸道及血液标本细菌培养阳性分布与预后的相关性及对策,以降低基层NICU机械通气下医院感染发生率及提高感染发生后的救治成功率.方法 对非感染性疾病入院的机械通气的新生儿实行主动监测,所有患儿送气管导管末端培养,根据临床表现送痰培养或血培养.结果 对156例机械通气的新生儿进行主动监测,有99例新生儿培养阳性,阳性率为63.5％;血培养与呼吸道培养为同一细菌的有27例,占27.3％,其中单一血培养阳性11例,占11.1％,单一呼吸道阳性的61例,占61.6％;血及呼吸道培养为同一细菌的病例与单一痰培养阳性、单一血培养阳性及二者培养均阴性的病例相比,病死率要高、平均胎龄低、平均插管时间长,差异有统计学意义(P＜0.01);且血及呼吸道培养同一细菌阳性的病例中又以铜绿假单胞菌和大肠埃希菌预后最差.结论 基层NICU机械通气管理要进一步规范,低胎龄儿、低体重儿更是是监控的重点对象,抗菌药物使用要更加合理.     

气管内导管致气管食管瘘的原因分析及预防措施

目的 探讨气管内导管致气管食管瘘的原因及其预防措施.方法 回顾性分析22例气管内导管致气管食管瘘的危重症患者的临床资料,分析其高危因素和预防措施.结果 22例患者中20例死亡.气管食管瘘发生与气管内导管类型、气囊压力、导管留置时间、不稳定活动及导管更换等因素有关.结论 选择合适的气管内导管、常规监测气囊压力、妥善固定、对躁动患者适当镇静、缩短机械通气及气管导管留置时间,能最大限度减轻气管黏膜机械性损伤,降低气管食管瘘的发生率.     

银染法鉴定表皮葡萄球菌生物被膜

目的 银染法观察表皮葡萄球菌生物被膜生长变化的可靠性. 方法 建立细菌生物被膜,分别用银染法和扫描电镜进行观察生物被膜的变化. 结果 银染后普通光学显微镜观察和扫描电镜观察对生物被膜变化的观察结果完全相符. 结论 用银染法观察细菌生物被膜的变化可靠、便捷.     

莫西沙星对气管内插管表面流感嗜血菌生物膜的影响

目的观察莫西沙星对慢性阻塞性肺疾病急性发作动物模型气管内置管表面流感嗜血菌生物膜的影响。方法气管内注入流感嗜血菌建立慢性阻塞性肺疾病急性发作的动物模型,然后气管内置入硅胶管,观察莫西沙星是否对气管内置管表面流感嗜血菌生物膜的形成和膜内菌落计数产生影响。结果莫西沙星对气管内放置的硅胶管表面形成的生物膜有抑制作用,表现为用药后硅胶管表面分离的细菌数较少(P0.05),扫描电镜也发现在莫西沙星作用下硅胶管表面无法形成成熟的生物膜,仅见散在的细菌黏附于管壁上,个别有细菌的散在团状聚集,但尚未融合呈膜状。结论莫西沙星是对气管内置管表面流感嗜血菌生物膜形成有抑制作用的抗菌药物。     

细菌生物膜的形成与导管相关性尿路感染的关系

目的观察留置导尿患儿导尿管表面细菌生物膜的形成过程,探讨形成的影响因素及其与导管相关性尿路感染的相关性。方法选取2016年9-12月某儿童医院泌尿外科留置导尿患儿27例为研究对象,使用扫描电镜(SEM)观察27例留置导尿患儿导尿管表面细菌生物膜(BF)的结构;比较7例CAUTIs患者与20例非CAUTI患者导尿管BF的形成率,并进行影响导尿管管壁形成生物膜的多因素logistic回归分析。结果尿培养阳性尿管表面均观察到BF形成,形成率为100%;9例(69.23%)导管培养阳性的导管表面形成生物膜,微生物培养阳性组生物膜的形成率均较阴性组高(P<0.01);尿培养和导管培养同时分离出的前三位的细菌为:粪肠球菌、表皮葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌。留置10d左右导尿管的管壁在电镜下可观察到逐渐成熟的细菌生物膜。留置导尿时间是影响导尿管管壁形成生物膜的危险因素[P=0.046,OR(95%CI)=3.552(1.021,12.353)];抗菌药物使用超过5d的导尿管管壁形成生物膜的风险是抗菌药物使用天数5d以内的15.34倍(P=0.024)。所有CAUTIs患者尿管管壁均有BF形成,但仅有10%的非CAUTI患者管壁能观察到BF,差异有统计学意义(P<0.001)。结论儿童平均留置(9.78±1.20)d的导尿管管壁可观察到成熟的细菌生物膜,留置导尿患儿导尿管管壁细菌生物膜的形成与CAUTIs存在着密切关系,随着留置时间的延长形成生物膜的风险越大,长时间应用抗菌药物并不能降低BF的形成。微生物培养结果与生物膜的形成呈正相关,其中导管培养方法较尿培养更能准确发现管壁内细菌的定植与BF的形成。     

大肠埃希菌生物膜在三种导尿材料上形成的对比

目的：观察不同材质导尿管对大肠埃希菌生物膜形成的影响。方法：在乳胶、纯硅胶、硅橡胶材质导尿管膜片上制备大肠埃希菌生物膜,扫描电镜观察生物膜的形态。用冲洗、冲洗＋超声振荡方法处理附有不同生长时期生物膜的导尿管,通过菌落计数法了解两种方法对不同时期生物膜的清除效应。结果：乳胶、纯硅胶、硅橡胶导尿管生物膜内均有细菌团块样聚集,可见纤维素样物质交联。硅橡胶导尿管生物膜内纤维素样交联物相对较少。在生物膜形成的初期,两种处理方法具有相同清除效应;但当生物膜趋于成熟后,单用冲洗方法难以将黏附细菌洗脱。结论：建议选择使用经济、实用的硅橡胶导尿管。在生物膜形成初期,对导尿管一般冲洗能较彻底地清除黏附细菌。     

慢性鼻-鼻窦炎的细菌生物膜表达

目的 探讨细菌生物膜在慢性鼻-鼻窦炎患者手术黏膜样本的表达.方法 获取69例慢性鼻-鼻窦炎患者手术中筛窦黏膜样本为试验组,获取15例鼻中隔偏曲患者、10例鼻骨骨折患者钩突黏膜样本为对照组,所有样本均行扫描电子显微镜检查及细菌培养;Fisher's精确概率检验分析细菌生物膜与细菌培养的相关性、细菌生物膜与慢性鼻-鼻窦炎的相关性、细菌培养与慢性鼻-鼻窦炎的相关性,Pearson卡方检验分析细菌生物膜与慢性鼻-鼻窦炎临床分型分期的相关性.结果 试验组发现细菌生物膜的病例49例,阳性率为71.0％;培养检出细菌的病例共45例,均分离自细菌生物膜阳性病例样本,阳性率为65.2％,均观察到黏膜纤毛不同程度的损伤;对照组未发现细菌生物膜,未培养出细菌,可以观察到黏膜纤毛较浓密,排列整齐;细菌培养与细菌生物膜表达存在相关性(P=0.001),细菌生物膜表达与慢性鼻-鼻窦炎存在相关性(P=0.000),细菌培养阳性与慢性鼻-鼻窦炎存在相关性(P=0.000),细菌生物膜表达与慢性鼻-鼻窦炎临床分型分期不存在相关性(P=0.942).结论 慢性鼻-鼻窦炎患者黏膜可以观察到细菌生物膜存在,细菌生物膜可能参与慢性鼻-鼻窦炎的发病过程;细菌生物膜表达与细菌培养阳性结果相关.     

Cross-contamination potential of saliva ejectors used in dentistry

It has been postulated that evacuation systems used in dentistry could be a source of cross-contamination between patients through backflow of bacteria dislodged from the saliva ejector tubings. The bacterial microflora associated with these systems was characterized using transmission electron microscopy (TEM) and microbiological cultures. The potential for backflow was investigated by a study of pressure differentials in evacuation system tubing and by the presence of bacteria in backflow samples. Evacuation lines were coated with microbial biofilms in which microcolonies of Gram-positive cocci and Gram-negative bacilli predominated, embedded in an extensive polysaccharide matrix. Most bacteria were metabolically active. Occasionally, buccal material such as collagen, fibrin and eukaryotic cell debris was observed. In other experiments, flow reversal was detected several times during saliva ejector use though each of these events was brief (less than 0·1 s). Aspiration of saliva, or occlusion of the mouthpiece opening by the oral mucosa, were the major factors leading to backflow episodes. Bacteria associated with backflow were found in almost 25% assays, with counts ranging from 1–300 cfu/occurrence. The majority of the bacteria isolated from biofilm or backflow samples were staphylococci, micrococci and non-fermentive Gramnegative rods. Pathogens such as Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus were also isolated from backflow fluids. No oral streptococci could be recovered from biofilms in the tubing beyond 15min from the last saliva ejector use however, suggesting that these species did not survive in the biofilms. These data suggest, although without direct proof of cross-contamination, the possible existence of an infectious risk associated with oral evacuation systems, as potential pathogens may be shed from tubing biofilms following backflow. Even if the risk of cross-contamination between patients is considered to be low, the necessity for regular disinfection of these systems must be stressed, since biofilms can serve as a reservoir for pathogens or harbor potentially infectious material.     

碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌生物膜形成能力及成分分析

目的分析临床碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌(CRAB)生物膜形成能力及成分。方法 WHONET 5. 6分析CRAB的感染分布特点和药物敏感性,微量肉汤稀释法测定其对替加环素药物敏感性;PCR检测生物膜相关的外排泵基因adeG、adeB、adeJ、adeM和群体感应分子基因abaI,结晶紫染色法定量测定CRAB的生物膜形成量,扫描电镜定性分析CRAB生物膜的形态结构特点;高碘酸钠、蛋白酶K和DNA酶分析CRAB生物膜的成分。结果 CRAB主要分离自ICU感染患者,标本类型主要是痰液,对除替加环素外的其他临床常用抗菌药物普遍耐药;生物膜相关基因携带率高,均在80%以上,本研究中的CRAB均具有强生物膜形成能力,电镜下可见CRAB形成的生物膜数量丰富,结构致密;蛋白质和细胞外DNA对维持CRAB生物膜稳定性的作用明显强于多糖。结论 CRAB不仅对临床常用抗菌药物的耐药性强,且生物膜形成能力强;蛋白质和细胞外DNA是维持其生物膜稳定的主要成分。     

试验给水管网不同给水管材腐蚀的电镜分析及细菌API鉴定

目的研究不同给水管材的腐蚀、结垢及饮用水与生物膜中的菌种情况。方法以实验室模拟给水管网为研究对象,应用环境扫描电镜对目前给水管网中使用较为普遍的镀锌管、PPR管(无规共聚聚丙烯管)和ABS(苯乙烯管)管的腐蚀、结垢情况及结垢层元素组成进行了分析;应用生物梅里埃API(Analytic products NC)细菌鉴定系统10S和20E对饮用水及生物膜中常见的菌种进行了鉴定,并分析了菌种致病性。结果镀锌管的腐蚀、结垢情况最为严重,PPR和ABS管内壁存在薄结垢层。API10S试剂条鉴定实验给水管网水样的10株菌中有7株为条件致病菌;API20E试剂条鉴定水样及生物膜样品的21株菌中5株为致病菌,11株为条件致病菌,其余5株对人体尚无致病报道。结论饮用水管网微生物学水质较差,水及生物膜样品中大多数细菌都为条件致病菌,存在一定的微生物风险。在给水管材方面应加快城市旧管网改造步伐,推广应用新型管材。     

N-乙酰半胱氨酸与环丙沙星联合对铜绿假单胞菌生物被膜的抑制作用

目的 研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)、环丙沙星(CIP)单用及二者联合对铜绿假单胞菌生物被膜的抑制作用.方法 扫描电镜(SEM)观察NAC、CIP单用及二者联合对铜绿假单胞菌PAO1生物被膜形态的影响;结晶紫染色法定量分析二者单用及联合对铜绿假单胞菌生物被膜的影响;噻唑兰法(MTT)法测定二者联用的活菌数.结果 SEM观察到NAC对铜绿假单胞菌PAO1生物被膜有破坏解离作用,与CIP有协同作用;结晶紫染色法定量分析显示铜绿假单胞菌生物被膜的OD值随NAC剂量增大而减小;CIP(8MIC)作用后铜绿假单胞菌生物被膜的OD值下降至对照的69.1％～97.9％;CIP合用0.5、5 mg/ml NAC后OD值分别下降至CIP单用的(54.7±7.7)％、(48.9±11.4)％;NAC和CIP单用,分别在2.5 mg/ml和2 MIC时对成熟被膜下细菌的杀菌作用差异有统计学意义(P＜0.01),联合作用后NAC和CIP在0.5 mg/ml和1/2 MIC时即对被膜下细菌的杀菌作用差异有统计学意义(P＜0.01).结论 NAC对铜绿假单胞菌生物被膜有破坏解离作用、对被膜下细菌有杀菌作用,并与CIP存在一定的协同作用.     

Biofilms,Infection, and Parenteral Nutrition Therapy

Parenteral nutrition therapy is used in patients with a contraindication to the use of the gastrointestinal tract, and infection is one of its frequent and severe complications. The objective of the present study was to detect the presence of biofilms and microorganisms adhering to the central venous catheters used for parenteral nutrition therapy by scanning electron microscopy. Thirty‐nine central venous catheters belonging to patients with clinical signs of infection (G1) and asymptomatic patients (G2) and patients receiving central venous catheters for clinical monitoring (G3) were analyzed by semiquantitative culture and scanning electron microscopy. The central venous catheters of G1 presented more positive cultures than those of G2 and G3 (81% vs 50% and 0%, respectively). However, biofilms were observed in all catheters used and 55% of them showed structures that suggested central venous catheters colonization by microorganisms. Approximately 53% of the catheter infections evolved with systemic infection confirmed by blood culture. The authors conclude that the presence of a biofilm is frequent and is an indicator of predisposition to infection, which may even occur in patients who are still asymptomatic.     

隐丹参酮对表皮葡萄球菌生物膜的抑制作用

目的探索隐丹参酮对表皮葡萄球菌(SE)生物膜不同成熟阶段的抑制效果。方法体外构建SE生物膜模型,确定其黏附、聚集、成熟阶段时间点;通过半定量黏附实验、XTT法和扫描电镜检测不同浓度隐丹参酮作用下SE不同成熟阶段中生物膜基质量、膜内菌代谢活性和微观形态结构的变化。结果 SE生物膜黏附、聚集和成熟时间点分别为6、24、48 h;对于黏附阶段生物膜,128μg/mL和32μg/mL的隐丹参酮均能明显减少其生物膜基质量和杀灭膜内菌,差异有统计学意义(P0.05),且隐丹参酮抑制作用128μg/mL优于32μg/mL,差异有统计学意义(P0.05),同时均能破坏其微观形态结构;对于聚集与成熟阶段生物膜,仅128μg/mL的隐丹参酮能明显减少其生物膜基质量和杀灭膜内菌,差异有统计学意义(P0.05),同时能破坏其微观形态结构,而32μg/mL的隐丹参酮则无明显抑制效果(P0.05)。结论隐丹参酮对SE生物膜不同成熟阶段均具有一定抑制效果,且存在一定的剂量效应。     

口腔综合治疗台水路生物膜观察与消毒干预

目的评价口腔综合治疗台独立水源水路经次氯酸钠消毒前、后生物膜结构和菌落数情况。方法选择10台独立水源口腔综合治疗台,采集经525 mg/L次氯酸钠消毒水路前、后治疗台工作端水管内壁生物膜,计算总菌落数,并应用激光共聚焦扫描显微镜和扫描电镜观察生物膜结构。结果口腔综合治疗台水路消毒前、后生物膜菌落数几何均值分别为1.7×103 CFU/cm2和0 CFU/cm2,两者比较,差异有显著性（t=12.03,P=0.02）。激光共聚焦扫描显微镜及扫描电镜观察结果显示,消毒前口腔综合治疗台水路内壁存在生物膜,呈特征性结构,杆菌与球菌分布于基质中;消毒后,其生物膜结构受到一定程度破坏,但基质仍然存在。结论口腔综合治疗台水路存在微生物污染,其内壁有生物膜,并含有高浓度细菌,存在引起医患医院感染的潜在风险。525 mg/L的次氯酸钠消毒剂对口腔综合治疗台水路具有较好的消毒效果,可常规应用于临床独立水源口腔综合治疗台水路的消毒处理。     

Influence of unclogging agents on the surface state of enteral feeding tubes

Background: Despite standardized prevention procedures, recalcitrant clogging of enteral feeding tubes is observed, which requires recourse to varied unclogging agents. Some of these agents have proved effective in routine use, but their impact on the surface state of the tube materials has never been studied. In this work, the authors tested the impact of different unclogging agents on the materials used for these tubes (polyurethane and silicone). Methods: Enteral feeding tubes were placed in contact with different agents in vitro, and the surface state of the material was analyzed using 2 different methods: infrared spectroscopy and scanning electron microscopy. To assess the surface state of the silicone and polyurethane tubes, negative controls (undamaged tubes) and positive controls (deliberately damaged tubes) were used for each type. Results: The infrared spectroscopy method did not reveal any damage to the surface of either the silicone or the polyurethane tubes with either treatment. The test results by scanning electron microscopy showed that orange juice, pineapple juice, and cola had no detrimental action on the tube biomaterials under current conditions of clinical practice. Conclusions: Although some studies have advocated using polyurethane tubes to administer medication, silicone appears to be less vulnerable to damage by the agents tested.