塑料包埋制片技术在骨髓诊断中的应用

塑料包埋制片技术在骨髓诊断中的应用周荣妹骨髓活检标本常用传统的石蜡包埋及ＨＥ染色法，经脱钙和长时间的固定，常使细胞形态失真和某些物质的丧失，从而影响了结果判定。至８０年代初，国外用塑料包埋薄切片技术处理骨髓活检标本，细胞收缩小，能切出１～２μｍ的满意...     

216例骨髓脱钙时间的探讨

骨髓活检不仅关系到造血系统疾病的诊断 ,而且影响治疗及预后 ,由于骨组织是由无机钙盐构成 ,骨盐主要是羟基磷灰石的结晶 ,即磷酸钙和碳酸钙。致组织质硬 ,难以直接制片。必须经过脱钙处理后 ,才能进行常规HE制片、特染及免疫组化检查。然而 ,在临床实践中常因脱钙不全或脱钙过度等原因 ,制作不出良好的组织切片而影响病理诊断。为此 ,笔者对 2 16例骨髓活检标本脱钙时间加以总结 ,并进行改良方法以寻求最佳的制片效果 ,现介绍如下。1　材料与方法1.1　材料　骨髓活检标本 ,4 %盐酸脱钙液 ,70 %乙醇 ,密闭容器。1.2　方法　标本签收后立即…     

骨髓活检标本石蜡包埋制片方法

塑料包埋技术用于骨髓活检有许多优点，但目前还未能完全满足病理诊断需要。经过聚合后的骨髓组织，虽然能制成较薄的切片，但如需作免疫组织化学染色就相当困难。我们经过用多种脱钙液反复试验比较，最后选用“Formical-4”脱钙液用于骨髓活检标本脱钙，不论HE或免疫组织化学染色均收到良好效果。现将108例骨髓活检标本石蜡包埋制片方法介绍如下。     

介绍一种骨髓组织脱钙新方法

骨髓组织活检标本来之不易 ,在制片过程中若处理不当 ,会给诊断造成极大的困难。如何既快又好地制作高质量的骨髓病理组织切片对正确诊断尤为重要。笔者通过 2年的反复实践 ,摸索出一种骨髓组织脱钙后的常规制片方法(简称“新法”) ,现介绍如下。1　材料与方法1.1　标本　中南大学湘雅医院骨髓穿刺的活检组织 4 0例。1.2　试剂　脱钙液 :2 %硝酸 ,即浓硝酸 2ml加 98ml自来水 ;固定液 :10 %福尔马林液 ;染色液 :Gill苏木精 ,沉淀酸化伊红Y乙醇液。1.3　方法　穿刺活检组织入 10 %福尔马林液中固定 30min ;入 2 %硝酸脱钙液 ,室温下脱钙。在…     

骨髓活检组织制片中改良脱钙液的应用及常见问题分析

正在临床病理外检工作中,骨髓组织由于含有大量的钙盐而比较坚硬,需经过脱钙处理后才能进行常规制片,脱钙不全或脱钙过度均影响骨髓HE染色及免疫组化染色效果,降低病理诊断的准确率。作者在长期的骨髓制片工作中,摸索出一种适合骨髓组织的改良EDTA脱钙液,提高了骨髓制片质量和染色效果。本文现就骨髓活检标本固定及取材、脱钙、制片和染色等环节进行总结,供广大同仁分析交流,共同提高骨髓活检组织制片和染色质量。     

四种脱钙液对骨和骨髓组织及结构影响的比较

背景：由于骨和骨髓组织结构非常特殊,在常规的病理制片过程中,要同时显示坚韧质硬的骨组织和含有多种幼稚娇嫩造血细胞的骨髓组织是非常困难的。目的：选择一种既能完全除去骨组织中的钙质,又能保护骨髓组织及细胞结构不受破坏的最佳脱钙液。方法：将含骨髓组织的犬长骨组织随机分4组,同等条件下,14%硝酸甲醛生理盐水溶液;14%硝酸水溶液;20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液和20%甲盐酸水溶液4种不同脱钙液脱钙,记录脱钙时间,常规脱水、切片、苏木精-伊红染色,镜下观察,对比4种脱钙液对骨和骨髓组织常规病理切片质量和其苏木精-伊红染色效果。结果与结论：14%硝酸甲醛生理盐水溶液组脱钙能力最强,脱钙最均匀,耗时最短,既能有效完全除去骨皮质中的钙质,又能保护骨髓组织及细胞的形态完好,切片质量和苏木精-伊红染色的效果最佳;14%硝酸水溶液组脱钙液,使骨组织疏松发泡,组织变黄,对组织的损伤大,脱钙不均匀,组织切片不完整,制片质量和苏木精-伊红染色的效果最差;20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液组对组织的脱钙能力、损伤程度、制片质量和苏木精-伊红染色效果都比14%硝酸甲醛生理盐水溶液组稍差;20%甲盐酸水溶液组对骨和骨髓组织的损伤小,脱钙效果好,切片质量和苏木精-伊红染色的效果佳,介于20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液组和14%硝酸水溶液组之间。结果表明,4种脱钙液对骨和骨髓组织都具有良好的脱钙能力,制片质量及苏木精-伊红染色效果比较,14%硝酸甲醛生理盐水溶液> 20%甲盐酸甲醛生理盐水溶液> 20%甲盐酸水溶液> 14%硝酸水溶液;14%硝酸甲醛生理盐水溶液最适用于临床常规病理制片中骨和骨髓组织的脱钙。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

提高骨髓石蜡切片质量的几点体会

随着血液学的高速发展,近年来骨髓活检也越来越多地应用于临床.骨髓活检组织制片也是科研和临床病理经常遇到的重要技术问题.现在大多数单位都采用石蜡切片技术制作骨髓活检组织,但因骨髓组织富含钙盐及含有一定量的脂肪,按常规技术制作,常出现组织切片不完整、结构破坏、染色模糊不清,不利于诊断.另外石蜡制片的程序繁多,任何一个环节出现问题,均可影响切片的质量,而直接影响病理报道的准确性.     

盐酸脱钙液后脱钙在骨髓组织活检中的应用及体会

<正>骨髓组织活检是明确骨髓病变最主要的方法之一,但由于骨髓组织中含有大量的磷酸钙和碳酸钙,在常规制片中易致切片破碎、刀痕严重等问题,因此对骨髓组织进行充分的脱钙也显得格外重要[1-2]。目前在临床工作中,我们常使用的脱钙液有酸类脱钙液、电解质脱钙液、螯合剂脱钙液、离子交换树脂脱钙液等[2-3]。这些脱钙液作用机制不同,效果各有千秋[4]。在实际临床工作中我们对脱钙液选择的标准应该是效果强、时间短、对组织细胞形态以及对抗原影响小等[5]。本实     

改良EDTA脱钙液在骨髓活检组织中染色效果观察

正骨髓活检结合免疫组化染色对于血液系统疾病诊断、判断临床预后具有重要意义~([1])。骨髓组织细胞种类多和组织学形态丰富,部分病例需结合免疫组化染色以明确诊断~([2])。骨髓组织质地较硬,需脱钙后才能进行常规制片和免疫组化染色~([3])。其中最常用的酸类脱钙液易造成组织细胞表面抗原破坏或丢失,影响免疫组化染色结果~([4])。EDTA的脱钙作用优于酸性脱钙液~([5]),但脱钙速度慢、脱钙后组织会稍微变硬~([6])。本实验通过比较改良EDTA脱钙液脱钙骨髓与混合酸脱钙液脱钙及不脱钙骨髓的HE染色和免疫组化染色效     

骨髓活检标本的透射电镜样品制备

在骨髓活检标本的透射电镜样品制备中,对固定与脱钙问题进行了实验研究,结果表明,标本先经固定、再同时固定并脱钙所制备的样品,超薄切片顺利,细胞微细结构优良。     

超声波快速石蜡切片在病理活检中的应用

我们将超声波技术运用于小的活检标本 ,如内窥镜、宫腔、宫颈、声带等 ,并且在仪器操作说明书的基础上作了改进 ,改进后的制片质量和效果优于改进前的切片 ,与传统石蜡切片质量相差无异 ,完全符合病理诊断要求。一、材料与方法1.材料 :取自本院 2 0 0 1年 11月至 12月窥镜室、妇产科、耳鼻咽喉科、内科等科室的活检标本 65例。其中改进前 12例 ,改进后 5 3例。快速固定液配制方法 :95 %乙醇 85 0ｍｌ,40 %甲醛 10 0ｍｌ,冰乙酸 5 0ｍｌ。试剂均为北京化工厂产品。2 .仪器 :上海震康科技公司生产的ＰＨＴ 40 0病理样品超声波快速处理仪 ,双超…     

乙二胺四乙酸联合正丁醇在大鼠胫骨癌痛标本石蜡切片制作中的应用

目的 探索一种简便有效的制作大鼠胫骨癌痛标本石蜡组织切片的方法。方法 取大鼠胫骨癌痛模型组和正常组胫骨标本，使用乙二胺四乙酸（EDTA）加温脱钙联合正丁醇取代传统强酸脱钙、纯酒精脱水和二甲苯透明，制作石蜡切片后HE染色观察。结果 两组大鼠胫骨癌痛标本形态结构均保存完整。与传统方法相比，制片步骤简单，脱水和透明时间较为灵活，蜡块切割性能较好。结论 EDTA与正丁醇的联合应用，是大鼠胫骨癌痛标本石蜡组织切片制作适宜和可靠的方法。     

塑料不脱钙、石蜡包埋、明胶浸泡法对骨组织切片的比较

骨组织内含有大量的钙盐和无机盐,如不脱钙切片,常给骨组织切片和染色造成非常大的困难,直接影响实验结果。作者根据研究的需要,对塑料包埋不脱钙、石蜡包埋、明胶浸泡３种方法切片及染色进行比较,以便找出一种最佳切片方法。１　材料与方法１－１　塑料包埋组　所用材料是我所研究生课题实验材料。新西兰大耳白兔１０只,体重２－２～２－５ｋｇ,♀、♂不限。取双侧尺桡骨１－５ｃｍ保留周围少量肌肉。１０％中性福尔马林固定。梯度乙醇脱水。甲液：甲基丙稀酸甲酯（ＭＭＡ）７５ｍｌ,邻苯二甲酸二丁酯（ＤＢＰ）２５ｍｌ。乙液：Ｍ…     

HAS快速脱钙液的研制和应用

水杨酸溶液具有松解胶原、溶解脂肪的作用［１］，临床上常用于疣和鸡眼病的治疗。由于骨组织中的主要成分是无机盐和胶原，故我们试验将水杨酸（ｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄ）与盐酸（ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｃａｃｉｄ）、醋酸（ａｃｅｌｉｃａｃｉｄ）制成快速脱钙液（简称ＨＡＳ液），用于钙化和骨组织标本的快速脱钙，结果显示其具有脱钙作用迅速，组织结构保存良好，切片染色清晰的优点。我们对ＨＡＳ液的研制及应用进行总结，现介绍如下。一、材料与方法１．ＨＡＳ液的配制：取３６％～３８％的盐酸８ｍｌ，９９％醋酸５ｍｌ，水杨…     

骨髓活检组织石蜡切片制作的改进及特殊染色的应用

骨髓活检组织石蜡切片制作是病理诊断血液病常用制片方法,近年来在骨髓组织制片和染色上应用了一些新方法,但作为常规石蜡制片和染色目前仍在广泛地采用。本文就组织制片的改进和Giemsa染色方法的改良与特殊染色互补应用旨在对诊断起辅助     

骨组织不脱钙大切片制作技术

正骨组织制片是常规病理学技术制片中的难点。骨组织富含钙盐和无机盐,必须先进行组织脱钙才能进行石蜡包埋、切片。并且脱钙过程中经常存在脱钙不彻底或过分脱钙的情况,导致无法制片或常规染色不佳。骨组织在制片过程中原有组织形态通常会发生改变,不能准确的评价骨的动态重建过程[1],如新骨的形成、骨样组织的矿化等。常规人体股骨头大标本制片,只是切取病变部位,无法整体观察骨小梁生长的结构、方向性等构筑学参数。为解决上述问题,本     

三种骨组织脱钙方法的比较

骨组织制片是一重要环节,也是技术的一个难点。如果骨组织脱钙方法不当,会直接妨碍制片切片以及染色结果。作者对目前科研常用三种不同的脱钙方法进行了比较,从中筛选出一种较好的脱钙方法。认为10%甲酸-中性缓冲福尔马林脱钙液处理骨组织标本是一种较为理想的脱钙方法,具有很好的应用价值和推广作用。     

微波骨髓活组织快速半薄石蜡切片的制备

骨髓穿刺活组织检查（骨髓活检）是确诊血液疾病的主要技术之一。微波骨髓活检组织快速半薄石蜡切片的制备，把微波辐射应用到骨髓活检组织的固定、脱水、透明、浸蜡及其切片染色等主要步骤中，结果仅需２～３ｈ即可完成切片制作，而且制片质量近似骨髓组织塑料包埋切片技...     

石蜡包埋中骨髓标准化脱钙的应用

正骨髓活检是用一支特制的穿刺针在患者髂前上棘或髂后上棘处取出1.0～2.0 cm长、直径0.1～0.2 cm的圆柱形骨髓。骨髓富含钙盐、一定量的脂肪及少许纤维支架,具有组织小而硬、脆、松的特点,必须经过脱钙后才能进行石蜡包埋,制成骨髓切片。本实验经过长期实践,总结出一套骨髓标准化脱钙处理方法,操作安全简便,不仅制成了高质量的石蜡切片,而且在HE染色、网状纤维染色及免疫组化标记中,均取得了满意的效果,现将方法介绍如下。1 材料与方法     

石蜡包埋全喉大切片的制备及特殊染色

我们参考王德田等[1] 的方法 ,采用石蜡包埋、普通轮转式切片机 ,制成全喉大切片 ,并对其进行特殊染色。得到较好的效果。一、材料与方法1 把尸检切取的全喉和手术切除的喉癌标本根据需要在水平、冠状和矢状三个方向切开 ,选用 5 4%的甲醛固定。2 取材时应用刀锋锐利的解剖用刀 ,对已有钙化的甲状软骨用 5 %的硝酸水溶液进行脱钙 ,限 72ｈ为宜 ,脱钙后流水充分冲洗去除脱钙液。3 切片过程 :( 1)制片 :将切取的全喉组织放在适当有盖容器内依次进行脱水、透明和浸蜡。 75 %、85 %乙醇各脱水12ｈ ;95 %乙醇和 2次无水乙醇各脱水 12ｈ ;3次二…