羟基红花黄色素A抑制异常增殖血管内皮细胞的机制研究

目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)抑制异常增殖血管内皮细胞的作用机理。方法建立人结肠腺癌细胞LS180上清液和人脐静脉内皮细胞ECV304体外共培养模型,通过实时荧光定量PCR检测ECV304细胞中血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(KDR)、碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)及其受体(b FGFR)、HSPG2、p53、c-myc mRNA水平的表达;ELISA法检测细胞培养上清VEGF、VEGFR(KDR)、b FGF、b FGFR蛋白的表达。结果在共培养细胞模型中,0.66、0.33 mg/L浓度的HSYA对血管生成促进因子VEGF及其受体KDR、b FGF及其受体b FGFR和癌基因c-myc及与细胞增殖相关蛋白多糖HSPG2的mRNA表达具有抑制作用;对抑癌基因p53 mRNA的表达具有促进作用。0.66、0.33 mg/L浓度的HSYA对血管生成促进因子VEGF及其受体KDR、b FGF及其受体b FGFR的蛋白表达具有抑制作用。结论 HSYA抑制新生血管的生成、抑制共培养模型中血管内皮细胞的异常增殖,其可能的作用机理是通过调控VEGF及其受体、b FGF及其受体、HSPG2、c-myc和野生型p53的表达发挥抗肿瘤作用,揭示HSYA可能是潜在的肿瘤血管生成抑制剂。     

HPLC测定肤痒胶囊中羟基红花黄色素A的含量

目的 建立测定肤痒胶囊中羟基红花黄色素A含量的HPLC法.方法用HPLC测定肤痒胶囊中羟基红花黄色素A的含量,采用Hypersil ODS色谱柱,以甲醇∶乙腈:0.7%磷酸溶液(20:2:78)为流动相,流速1.0 ml/min,检测波长403 nm,柱温30 ℃.结果 羟基红花黄色素A含量在1.38-13.8 μg范...     

RP-HPLC测定红花W/O型乳膏剂中羟基红花黄色素A的含量

建立红花W/O型乳膏剂中羟基红花黄色素A含量测定的反相高效液相色谱法(RP-HPLC)。色谱柱为Zorbax Eclipse C₁₈(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,流动相:甲醇-乙腈-0.02%磷酸水溶液(26∶2∶72),流速:1.0 mL/min,柱温:55 ℃,检测波长:403 nm。乳膏剂依次经甲醇高温破乳、纯水高温萃取后,采用RP-HPLC检测。结果显示,乳膏剂中辅料对羟基红花黄色素A色谱峰不产生干扰。羟基红花黄色素A在1.236~12.36 μg/mL范围内呈良好的线性关系(y=156.17x+1.198 3,r=0.999 5),检测限为23.6 ng/mL,定量限为118 ng/mL,回收率在99.7%~103.3%范围内,精密度RSD为0.12%(n=6),室温放置24 h稳定性良好。本方法简便快捷,结果准确、重复性好,可用于红花W/O型乳膏剂中羟基红花黄色素A的含量测定。     

羟基红花黄色素A对常氧/低氧犬胸主动脉内皮细胞增殖的影响

目的 探讨羟基红花黄色素A(HSYA)对常氧/低氧两种条件下体外培养的犬胸主动脉内皮细胞增殖的影响.方法 采用内膜消化刮取法获取犬胸主动脉内皮细胞;在常氧(21%)/低氧(10%)两种条件下,分别以噻唑蓝(MTT)法观察HSYA对血管内皮细胞(VEC)增殖的影响,血管内皮生长因子(VEGF)作为阳性对照.结果 常氧条件下HYSA 1、0.1 mmol/L在72、96、120 h时对VEC有明显促增殖作用;低氧条件下HYSA 1、0.1、0.01mmol/L在24、48 h时对VEC有明显促增殖作用,且具有浓度和时间依赖性.HYSA 1 mmol/L与VEGF 2.6×10-7mol/L在同样条件下对VEC的促增殖作用强度相当.结论 在常氧/低氧两种条件下,HSYA均具有明显促VEC增殖作用,且在低氧条件更为明显.     

羟基红花黄色素A对心肌缺血再灌注损伤的作用及其机制的探讨

目的:探讨羟基红花黄色素A(HSYA)是否能够保护心脏的再灌注损伤及其作用机制。方法:采用离体大鼠心脏灌流方法,全心停灌30min和复灌120min模拟缺血/复灌损伤,测定心肌梗死面积、冠脉流出液中LDH含量。Westernblot测定缺血区心肌组织内皮一氧化氮合酶(eNOS)、磷酸化的内皮一氧化氮合酶(p-eNOS)蛋白的表达水平。结果:与缺血/复灌(I/R)组相比,HSYA治疗组心梗面积显著减少,并且乳酸脱氢酶(LDH)水平显著下降。NOS抑制剂L-NAME(10umol/L)可部分抵消HSYA对梗塞面积和LDH释放的保护作用。与对照组相比,HSYA组eNOS的磷酸化水平显著增高,而L-NAME可抑制其作用。结论:HSYA具有抗心肌缺血/复灌损伤的保护作用;HSYA抗心肌缺血/复灌损伤的作用机制可能与通过活化eNOS,增加NO生成有关。     

不同种植密度对红花产量和品质的影响

目的:研究不同种植密度,为红花的规范化种植提供依据.方法:试验以不同行×株距设置处理,以干花产量、种子产量以及有效成分红花黄色素为指标,对不同的种植密度进行考察.结果:不同种植密度对上述指标有很大影响.结论:合理的种植密度可以提高红花药材的产量和品质.     

红花黄色素对冠心病心绞痛及血管内皮功能的影响

<正>红花黄色素是由菊科植物红花的花瓣为原料,利用现代的生物技术提取而成的天然色素。本研究探讨红花黄色素对心绞痛患者的疗效及对血管内皮功能的影响。1资料与方法 1.1一般资料:按照WTO冠心病诊断标准,选择心绞痛反复发作、心电图有缺血改变的40例住院患者,按照随机分为红     

羟基红花黄色素A与心血管作用研究进展

羟基红花黄色素A(Hydroxysafflor yellow A,HSYA)是从传统的活血化瘀类名药红花(Carthamus tinctorius L)中分离出来的,也是红花发挥药理作用的主要物质。HSYA对心血管的作用主要有降压、保护心肌、抗凝、调节血管内皮细胞增殖的作用,文章对此最新进展进行综述。     

羟基红花黄色素A对人主动脉内皮细胞增殖及血小板反应蛋白表达的影响

目的:探讨羟基红花黄色素A(Hydroxysafflor yellow A,HSYA)对人主动脉内皮细胞(Human aortic endothelial cells,HAEC)血小板反应蛋白1(Tmmbospondin-1,TSP-1)表达的影响.以进一步研究HSYA抑制内皮细胞增殖及抗肿瘤的作用机制.方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察HSYA对HAEC增殖作用的影响.Real Time PCR法及免疫细胞化学法分别检测HSYA作用后,HAEC内TSP-1的mRNA及蛋白表达;ELISA法检测上清液中TSP-1含量.结果:HSYA对HAEC增殖作用的影响表现出浓度依赖性,较高浓度(＞0.065 7 g/L)对HAEC的增殖有抑制作用,较低浓度(＜0.065 7g/L)表现出促进作用.HSYA对TSP-ImRNA表达有促进作用,且这种作用随浓度增加而增强;TSP-1的蛋白表达与释放情况与RT-PCR结果相似.结论:HSYA能促进HAEC表达TSP-I;HSYA对内皮细胞的增殖表现出促进和抑制的双向作用,可能是TSP-1和血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)等多种因素共同作用的结果.而HSYA的抗肿瘤作用可能是通过较高浓度HSYA提高TSP-1的表达抑制内皮细胞增殖进而抑制血管形成来实现的.     

羟基红花黄色素A抑制新生血管形成的机制研究

目的从中药中寻找新的血管生成抑制剂,并探讨其抑制新生血管生成的作用机理.方法从红花中提取分离羟基红花黄色素A,利用鸡胚尿囊膜(CAM)实验观察羟基红花黄色素A对新生血管的抑制作用,并通过RT-PCR实验,观察羟基红花黄色素A对CAM组织中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体(VEGF-R)(flt-1) mRNA表达的影响.结果提取出的羟基红花黄色素A纯度达到了98.9%,浓度为0.59 g/L的羟基红花黄色素A能使CAM血管数明显变细减少(P<0.01)并能显著抑制CAM组织中bFGF、VEGF及VEGF-R(flt-1) 的mRNA表达(P<0.05).结论通过本实验我们首次得出羟基红花黄色素A能显著抑制CAM新生血管生成,其作用机制之一是通过抑制bFGF、VEGF及VEGF-R(flt-1)的mRNA表达来实现的,提示羟基红花黄色素A可能是一很有潜力的血管生成抑制剂.     

羟基红花黄色素对离体心脏功能的影响

目的研究羟基红花黄色素A（HSYA）对离体大鼠左心室收缩功能的影响。方法 42只大鼠根据实验需要随机分为正常对照组、HSYA组（1～100μmol/L）、HSYA（30μmol/L）对照组和HSYA（30μmol/L）＋K＋通道阻断剂组（分别为KATP阻断剂Gli、BKCa阻断剂Tea、KV阻断剂4-AP和KAch阻断剂Art）,每组6只。经Langendorff离体心脏恒压灌流,依次梯度给予含有HSYA的灌流液。通过左心室内的乳胶水囊经换能器连于PowerLab生物信号采集分析系统,观察给药前后以及不同浓度HSYA对左心室收缩功能的影响,并观察不同的K＋通道阻断剂对HSYA作用的影响。结果 HSYA能浓度依赖性抑制左心室收缩压、舒张末压、收缩最大速率和心率（P〈0.05或P〈0.01）;对舒张最大速率影响不大（P〉0.05）。Gli及Tea能剂量依赖性阻断HSYA的效应（P〈0.05或P〈0.01）,4-AP及Art对HSYA的效应没有影响（P〉0.05）。结论 HSYA可呈剂量依赖性抑制心脏的收缩功能和心率,其作用机制与开放KATP和BKCa通道有关。     

羟基红花黄色素对离体心脏功能的影响

目的 研究羟基红花黄色素A(HSYA)对离体大鼠左心室收缩功能的影响.方法 42只大鼠根据实验需要随机分为正常对照组、HSYA组(1～100 μmol/L)、HSYA(30 μmol/L)对照组和HSYA(30 μmol/L)+ K+通道阻断剂组(分别为KATP阻断剂Gli、BKCa阻断剂Tea、KV阻断剂4-AP和Kach阻断剂Art),每组6只.经Langendorff 离体心脏恒压灌流,依次梯度给予含有HSYA的灌流液.通过左心室内的乳胶水囊经换能器连于PowerLab生物信号采集分析系统,观察给药前后以及不同浓度HSYA对左心室收缩功能的影响,并观察不同的K+通道阻断剂对HSYA作用的影响.结果 HSYA能浓度依赖性抑制左心室收缩压、舒张末压、收缩最大速率和心率(P<0.05或P<0.01);对舒张最大速率影响不大(P>0.05).Gli及Tea能剂量依赖性阻断HSYA的效应(P<0.05或P<0.01),4-AP及Art对HSYA的效应没有影响(P>0.05).结论 HSYA可呈剂量依赖性抑制心脏的收缩功能和心率,其作用机制与开放KATP和BKCa 通道有关.     

羟基红花黄色素A对肿瘤上清诱导的人脐静脉内皮细胞周期及凋亡的影响

目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)对人肝癌细胞株HepG2培养上清液诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞周期及凋亡的影响。方法原代培养HUVEC,传至第3~6代进行实验。用流式细胞术检测HSYA作用下HepG2培养上清液刺激后异常增殖的内皮细胞细胞周期及凋亡情况的改变,并以ELISA法检测与凋亡有关的细胞因子TNF-α表达情况。结果HUVEC经肿瘤上清液刺激后G0/G1期细胞比例明显减少(P<0.05),S期细胞的比例明显增加(P<0.01),凋亡细胞的比例明显减少(P<0.05)。经HSYA作用后,细胞周期各期细胞所占比例与模型组比较无显著性差异,凋亡细胞比例明显增多(P<0.05)。同时,TNF-α在肿瘤上清液刺激后表达明显减少(P<0.05),经HSYA作用后又明显升高(P<0.05)。结论HSYA可以有效促进肿瘤上清液刺激后的人脐静脉内皮细胞的凋亡,其机制之一是通过提高凋亡相关因子TNF-α的表达来实现的。     

大孔树脂柱色谱法制备红花黄色素和羟基红花黄色素A

目的 建立简便有效的制备红花有效部位红花黄色素(safflor yellow，SY)及有效成分羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A，HSYA)的方法。方法 室温水提减压浓缩所得红花水提液上D-4020型非极性大孔树脂柱，水洗脱糖类等杂质，以30％和10％乙醇洗脱分别得SY和HSYA；采用分光光度法和HPLC法分析水洗脱除糖过程中SY和HSYA的损失率及醇洗脱SY和HSYA的回收率。结果 聚酰胺薄膜色谱结果显示SY和HSYA洗脱液分别可见4～5个和1个黄色荧光斑点。HPLC分析结果表明，两洗脱液中所含SY和HSYA纯度分别为92．4％和83．0％。在水洗除杂质和稀醇洗脱过程中，损失率和回收率分别为SY：7．5％和80．6％，HSYA：1．64％和77．3％。结论 本法适于大规模制备SY和HSYA。     

红花黄色素在小鼠组织中的分布特征

目的　对红花黄色素 (SY)在小鼠体内的代谢、分布等药动学指标进行考察 .方法　红花黄色素在生物样品的浓度采用紫外可见分光光度法测定 .结果　小鼠尾静脉注射2 6 4.9mg· kg- 1 红花黄色素 (UV)后 ,血药浓度 -时间曲线符合一室开放模型 ,曲线下面积 (AU C)为 5 786 2 .2μg· m in·m L- 1 ,半衰期 (t1 /2 )为 41.6 min,红花黄色素在肝和肾中浓度最高 ,心、脾和肺次之 ,脑中浓度最低 .结论　红花黄色素在小鼠体内分布广泛     

红花黄素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 研究红花黄素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤(I/R)的保护作用。方法 采用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。插入栓线前、插入栓线0.5h后以及再灌注2h后分别监测肛温、肢体II导联心电、股动脉压以及大脑局部脑血流量。大鼠清醒后,进行行为学评分,测定脑含水量并进行组织病理学检查。结果 红花黄素能显著提高缺血再灌注后局部脑血流量,对抗血压与心率变化,降低脑组织含水量,缩小脑梗死面积,减轻缺血所致组织病理改变。结论 红花黄素可以增加I/R脑血流量,恢复因缺血造成的自主神经功能损伤,对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用。     

红花黄色素缓解大鼠心肌缺血的作用

目的研究红花黄色素(SY)对异丙肾上腺素(ISO)诱发的大鼠心肌缺血的作用。方法多次ipISO造成大鼠心肌缺血模型;观察大鼠血压、Ⅱ导联心电图J点的改变和出现T波倒置的阳性率,以及光镜下心肌组织形态学的变化;荧光素酶生物发光法测定心肌组织ATP量;硫代巴比妥酸比色法测量心肌组织丙二醛(MDA)量;Falholt法测定血浆脂肪酸(FFA)量。结果SY可明显抑制ISO诱导的大鼠心肌缺血所致最大收缩压、平均收缩压、平均动脉压降低;缓解心肌缺血导致的心肌MDA、血浆FFA水平升高及心肌ATP量的降低,同时SY还可减少心肌缺血后心电图出现T波倒置的阳性率(P<0.05);但对大鼠心电图J点抬高和缺血心肌细胞组织形态学变化未见明显改善。结论SY具有缓解大鼠心肌缺血的作用。     

高尿酸血症对血管内皮细胞功能损伤的机制研究

目的探讨高尿酸血症对血管内皮细胞功能损伤的机制。方法采用自身对照动物实验,通过灌胃氧嗪酸钾来复制持续高尿酸血症大鼠模型,分别通过对大鼠眼球后静脉丛取血测定实验指标,给药第0、5、10、15、20天对大鼠眼球后静脉丛取血,进行尿酸、NO、iNOS测定,其中第20天对实验大鼠进行心脏取血,离心取上清液。取血完后取腹主动脉和肾脏进行HE染色,观察是否产生组织尿酸盐晶体;原代培养人脐静脉内皮细胞,高尿酸血清干预培养,检测细胞上清液中NO含量。结果随着造模时间的持续,大鼠血尿酸含量呈增加趋势(P<0.05),尤其第5、15天血尿酸含量明显增加(P<0.05),同时血清中NO、iNOS含量均随着时间持续而有所降低,HE染色腹主动脉和肾脏未发现尿酸盐晶体散在;人脐静脉内皮细胞经大鼠血清高尿酸血清干预后,内皮细胞NO含量降低。结论高尿酸血症呈时间依赖性,可持续性地损伤血管内皮细胞,降低血管内皮细胞功能,增加心血管病发生风险。     

内脏脂肪素对内皮祖细胞血管形成能力的影响

目的 内脏脂肪素(visfatin)是一种能够促进血管新生的新型脂肪细胞因子.血管内皮生长因子(VEGF)是血管新生中非常关键的因子.本文在培养的内皮祖细胞(EPCs),探讨visfatin对EPCs血管新生的影响.方法 密度梯度离心法分离人脐血的单个核细胞.利用EGM-2细胞培养基(含EPCs分化所需各种生长因子)进行培养,诱导单个核细胞贴壁向EPCs分化.流式细胞术测定早期EPCs干细胞分子标志CD133/CD34;Dd-ac-LDL和FITC-UEA-1双染鉴定正在分化的EPCs.不同浓度的重组visfatin(0.01-10nM)处理EPCs 24h.Tube形成和迁移实验评价EPCs血管新生能力;荧光定量实时PCIL检测VEGF mRNA水平.结果 0.1 nM和1 nM的visfatin能增加EPCs形成管腔样结构(与对照组比,P＜0.01),10 nM的visfatin组EPCs形成管腔样结构能力和迁移能力却显著降低(与1 nM visfatin组比,P＜0.01).0.1 nM和1 nM visfatin组细胞VEGF mRNA水平明显升高(与对照组比,P＜0.01),而10 nM visfatin组细胞VEGF mRNA明显降低(与1 nM visfatin组比,P＜0.01).结论 生理浓度visfatin能促进EPCs的血管形成,病理浓度其血管形成能力降低,其机制可能与VEGF的表达有关.     

红花黄素注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

目的:观测红花黄素注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法:采用结扎大鼠双侧颈总动脉30 min后,恢复再灌注60 min,建立脑缺血再灌注模型,观测红花黄素注射液对脑组织含水量、脑组织匀浆中Na+及Ca2 +浓度、Glu、Asp、GABA、Gly及MDA的动态变化。结果:红花黄素注射液可明显降低缺血再灌注大鼠脑组织含水量、脑组织内Ca2 +、Glu、Asp、Gly、GABA及脂质过氧化产物丙二醛( MDA)含量。结论:红花黄素有抑制大鼠脑缺血再灌注损伤作用,其机制可能与其抑制脑组织内Ca2 +及兴奋性氨基酸含量、抗脂质过氧化作用有关