重组腺病毒p53基因治疗肝癌研究进展

目的：探讨重组腺病毒p53基因（recombinant humanAd—p53,rAd—p53）治疗肝癌的抗肿瘤机制及临床应用。方法：应用PubMed、万方和CNKI数据库,以“肝癌、重组腺病毒p53基因、基因治疗、实验研究和临床应用”为关键词,检索1994—06—01—2013—11—31文献739篇,纳入标准：1）p53基因与肝癌发生的相关性;2）重组腺病毒p53基因抗肿瘤机制;3）重组腺病毒p53治疗肝癌的实验研究;4）重组腺病毒p53治疗肝癌的临床应用研究。根据纳入标准选择符合分析的文献36篇。结果：p53基因是公认的肿瘤抑制基因,具有促使肿瘤细胞自杀和帮助缺陷细胞修复的作用。rAd—p53是复制缺陷型5型腺病毒载体与人p53基因重组的肿瘤基因治疗制品。rAd-p53通过多种途径发挥抗肿瘤作用,包括使肿瘤的细胞周期阻滞和发生程序性死亡,促进放射线对肿瘤细胞引起的细胞周期阻滞和凋亡,刺激机体产生抗肿瘤免疫反应,抑制肿瘤血管内皮生长因子,控制肿瘤的血管生成,使注射部位瘤组织产生局部血供障碍和坏死。此外,还能增加肝癌细胞的放化疗敏感性,间接增强抗肿瘤疗效。rAd-p53基因疗法为肝癌治疗开辟了崭新的途径,多项-l盘床研究疗效良好。结论：rAd—p53基因对肿瘤的作用机制体现了在抗肿瘤治疗方面的有效性,并在基础研究及临床应用中均取得了显著进展,再肝癌的防治中将取得更大的突破。     

重组腺病毒p53基因治疗肺癌的研究进展

肺癌是人类最常见的恶性肿瘤之一，为恶性肿瘤死亡的首要病因，对肺癌采用传统治疗包括化疗、放疗和手术方法总的生存率不到15％；另外，化疗、放疗在杀伤肿瘤细胞的同时，对正常细胞也有明显的毒性，这就需要我们发展新的治疗策略来达到治疗目的。自2004年1月世界首个基因治疗药物——重组人p53腺病毒注射液(今又生)正式在我国上市以来，肿瘤基因治疗引起全世界高度瞩目。本文就近年来重组腺病毒p53基因(Ad-p53)治疗肺癌的研究进展作一综述。     

E1B55kDa缺陷型腺病毒对人肝癌细胞的杀伤研究

目的 探讨E1B55kDa缺陷型腺病毒dl1520对肝癌细胞的体内外杀伤作用。方法 用dl1520分别感染p53基因型不同的人肝癌细胞,感染后第4天用染色的方法检测存活细胞。用RT－PCR检测细胞内p53和p21^Waf-1基因表达的改变,通过检测腺病毒衣壳蛋白hexon基因的表达证实腺病毒的感染。在SCID裸鼠瘤体内注射dl1520,观察dl1520对肝癌细胞的体内杀伤作用。结果 p53基因缺失的肝癌细胞Hep3B对dl1520诱导的细胞毒性作用最敏感,超过60％的细菌被杀伤,而不足20％的PLC／PRF／5（p53基因突变型）和HepG2(p53基因野生型）肝癌细胞被杀伤。腺病毒感染后,HepG2细胞内p53和p21^Waf-1基因表达水平均明显升高。瘤体内注射dl1520,可显著抑制Hep3B裸鼠移植瘤的生长,而对PLC／PRF／5和HepG2的裸鼠移植瘤则无明显的生长抑制作用。结论 E1B55kDa缺失的腺病毒可以选择性地杀伤p53基因缺失的肝癌细胞,是一种潜在的肿瘤治疗手段。     

腺病毒介导的p53基因对喉癌细胞生长的抑制作用

目的探索ｐ５３基因在喉癌基因治疗方面的可行性。方法以人喉癌细胞系Ｈｅｐ－２为实验对象,将载有人野生型ｐ５３ｃＤＮＡ并含巨细胞病毒（ＣＭＶ）启动子的重组腺病毒（Ａｄ５ＣＭＶ－ｐ５３）感染Ｈｅｐ－２细胞及肿瘤组织,体内外实验观察Ａｄ５ＣＭＶ－ｐ５３对Ｈｅｐ－２细胞生长的影响。结果当Ａｄ５ＣＭＶ－ｐ５３在１００ＭＯＩ效靶比时,全部Ｈｅｐ－２细胞得到转染。感染２天后ｐ５３蛋白表达达到高峰,Ｈｅｐ－２生长受到明显的抑制。Ａｄ５ＣＭＶ－ｐ５３感染Ｈｅｐ－２细胞在裸鼠中失去致瘤性。瘤内注射Ａｄ５ＣＭＶ－ｐ５３后,荷瘤裸鼠的肿瘤体积明显减小。结论Ａｄ５ＣＭＶ－ｐ５３转导野生型ｐ５３基因可能是一种有效的喉癌基因治疗途径。     

p53基因治疗恶性肿瘤的研究进展

p53基因是一种十分重要的抑癌基因，在机体组织细胞的生长、发育、分化等过程中起重要作用。p53基因丢失、缺失或突变可以导致人类恶性肿瘤的发生，而且与肿瘤的分化程度相关。目前，以p53基因治疗肿瘤的研究发展非常迅速。利用p53基因治疗肿瘤已成为继手术、放疗、化疗后的又一种有希望的肿瘤生物治疗方法。最近，有学者引入介入技术经肿瘤供血动脉直接灌注重组p53，为p53基因治疗肿瘤开辟了一条新途径。本文就p53基因的结构、功能与肿瘤的关系以及在肿瘤基因治疗中的应用综述如下。     

p53基因治疗与放射治疗联合应用于肿瘤研究

野生型p53基因的导入不仅可诱导肿瘤细胞凋亡，而且还可以提高肿瘤细胞对放射线的敏感性，从而增强放射治疗对肿瘤细胞的杀伤作用，但其作用机制尚未完全明了。野生型p53基因和放射线的协同作用有助于提高肿瘤疗效，从而使针对p53基因的基因治疗和放射线联合治疗方案具有良好的应用前景。     

经门静脉注射重组p53腺病毒治疗肝转移肿瘤的实验研究

目的观察经门静脉注射重组p53腺病毒(Adv-p53)对肝转移肿瘤的治疗作用。方法通过门静脉注射2×105个MCA-205肿瘤细胞建立小鼠肝转移肿瘤模型,同时将脾脏移植到皮下,作为反复多次向门静脉注射的途径。经门静脉注射不同剂量Adv-p53,注射等体积的平衡盐水或相同剂量的对照腺病毒Adv-CMV作为对照,第21天检查肝脏重量和肝脏转移结节数。结果经门静脉注射1×108 pfu Adv-p53组的肝脏重量为(1.20±0.34)g,明显低于门静脉注射同剂量Adv-CMV组(P<0.05);肝脏转移结节数目为(9.0±9.9)个,明显少于Adv-CMV组(P<0.05)。Adv-p53抑制肝转移肿瘤形成的作用具有剂量效应。在门静脉注射肿瘤细胞的第5天,肝转移肿瘤已经形成,门静脉注射1×108 pfu Adv-p53组的肝脏重量为(1.22±0.09)g,明显低于Adv-CMV组(P<0.05),肝脏转移结节数目(5.5±3.5)明显少于Adv-CMV组(113.2±5.8,P<0.05)。反复多次门静脉注射Adv- p53,可以加强这一抗肿瘤效果。结论通过门静脉系统应用Adv-p53是治疗肝转移肿瘤的有效方法。     

p53基因治疗晚期肝癌的初步生物学监测研究

目的观察晚期肝癌患者动脉灌注人重组腺病毒p53介入治疗前后的生物学改变。方法采用流式细胞术、人体内微核实验检测介入治疗前后患者外周血中突变型p53表达及自发微核形成的改变。结果经p53基因动脉灌注介入治疗后,患者突变型p53平均表达率明显下降,和治疗前相比较（治疗前平均23．74％,治疗后平均11．81％）差异有统计学意义（P〈0．01）;介入治疗后患者的平均微核率（MNF）与治疗前的比较（0．144％VS0．205％）,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论动脉灌注人重组腺病毒p53介入治疗晚期肝癌中的生物学研究对治疗剂量的选择、治疗效果的判断有积极的指导和监测作用。     

HPV E6,p53与宫颈癌的关系及其在基因治疗中的应用

目前宫颈癌的发病率仍居全世界妇女常见恶性肿瘤的第二位.高危型人乳头瘤病毒（high-risk Human Papillomavirus,HR-HPV）感染是宫颈癌及其癌前病变最主要的诱因之一.抑癌基因p53能够有效地抑制细胞增殖和促进细胞凋亡,人类近半数的肿瘤都与p53基因的突变和失活有关,HPV E6蛋白降解p53蛋白,是宫颈癌发生的前提.选择性杀伤p53功能缺失的肿瘤细胞,同时保护正常细胞,发展HPV疫苗及联合用药是临床肿瘤免疫学家进行宫颈癌基因治疗的目标.     

E1B缺陷腺病毒对鼻咽癌CNE-2细胞杀伤作用及其机理研究

为总结我国肿瘤内科临床与基础研究成果 ,促进肿瘤内科学发展 ,由中华医学会、中华医学杂志编辑委员会主办的“首届中国肿瘤内科论坛” ,定于 2 0 0 2年第三季度召开 (具体时间、地点另行通知 )。本次会议将由出版社出版正式专著《中国肿瘤内科学研究进展》和光盘版。一、征文内容 :(1)肿瘤化疗与化疗药物的合理应用 ;各种恶性肿瘤化疗方案的制定与临床应用 ;化疗并发症的防治等。(2 )肿瘤耐药与耐药逆转剂的研究与临床应用。 (3)各类抗肿瘤药物的研究及进展。 (4 )肿瘤的生物治疗、免疫治疗与基因治疗等。 (5 )实体瘤和白血病高剂量化疗及…     

p53基因治疗与放射治疗联合应用于肿瘤研究

野生型p53基因的导入不仅可诱导肿瘤细胞凋亡,而且还可以提高肿瘤细胞对放射线的敏感性,从而增强放射治疗对肿瘤细胞的杀伤作用,但其作用机制尚未完全明了。野生型p53基因和放射线的协同作用有助于提高肿瘤疗效,从而使针对p53基因的基因治疗和放射线联合治疗方案具有良好的应用前景。     

肺癌p53基因治疗临床研究进展

肺癌是当前世界上对人类健康与生命危害最大的恶性肿瘤之一 ,发病率呈不断上升趋势。虽然近年来化学、放射、生物和外科治疗手段不断发展 ,但肺癌患者总的生存率仍然没有明显的改善 ,迫切需要有新的有效治疗手段的出现。由于分子生物学和分子遗传学的迅速发展 ,对肺癌分子机制的认识也不断深入 ,利用DNA重组和基因转移技术的肺癌基因治疗成为极有发展前景的治疗方法。本文对 p5 3基因治疗策略应用于肺癌临床治疗的研究情况做一介绍 ,并探讨其在肺癌治疗中的潜在应用价值。1　肺癌 p5 3基因治疗的体外实验p5 3基因已成为基因治疗最主要和最…     

重组人p53腺病毒联合治疗晚期恶性肿瘤的临床观察

目的：探讨重组人p53腺病毒注射液（rAd-p53）治疗恶性肿瘤的疗效及安全性。方法：对67例晚期无法行手术切除的恶性肿瘤患者,或术后肿瘤转移、无法再手术的患者,采用瘤内注射、血管介入和静脉滴注rAd-p53联合化疗和放疗,至少1个疗程以上,通过临床观察、KPS评分、CT或MRI检查以及随访,评价rAd-p53联合化、放疗的临床疗效。结果：67例患者治疗有效率为47.8%,疾病控制率为89.6%,其中CR患者4例,分别为卵巢癌1例,皮肤癌1例,鼻咽癌2例。rAd-p53联合放疗41例,联合化疗26例,有效率分别为56.1%和34.6%（P〈0.05）,疾病控制率分别为95.1%和80.8%（P〈0.05）。全组中位生存时间为60个月（6～117个月）;联合治疗后,全组中位生存时间为24个月（2～34个月）。不良反应主要为自限性发热,另有个别胃肠道反应及肌肉酸痛。结论：rAd-p53对多种恶性肿瘤具有一定疗效,临床应用安全;局部给药联合放疗可能比联合化疗更能提高肿瘤的局控率。     

肿瘤细胞p53突变状况对p53基因治疗的影响

目的探讨肿瘤细胞p53突变状况对p53基因治疗的影响。方法PCR-SSCP及DNA测序分析MCA-205和Panc-02细胞的p53基因突变状况;流式细胞计数了解腺病毒载体对这两种细胞的转导情况;TUNEL方法分析转导p53基因后的细胞凋亡情况,培养细胞计数分析对离体肿瘤细胞生长的影响;利用小鼠肝转移肿瘤模型,分析Adv-p53对于在体肿瘤的抗肿瘤作用。结果MCA-205细胞p53基因的第769个碱基由G突变为T,Panc-02细胞未发现p53基因突变。腺病毒载体在Panc-02细胞有较高的转导率,而Adv-p53在MCA-205细胞诱导更明显的细胞凋亡。Adv-p53在离体细胞培养试验中抑制MCA-205细胞的生长,而没有明显抑制Panc-02细胞的生长。在小鼠肝转移肿瘤模型中,门静脉注射Adv-p53明显抑制MCA205肝转移肿瘤的生长,而在Panc-02肝转移肿瘤中抗肿瘤作用不明显。结论Adv-p53的抗肿瘤作用在有p53基因突变的肿瘤细胞中效果明显,肿瘤细胞p53突变状况对p53基因治疗有一定影响。     

重组人p53腺病毒治疗结肠腺癌腹壁转移1例

患者,男,65岁。2002年11月行乙状结肠癌根治术术后病理:腺癌,Ⅱ级,侵及深度不详,淋巴结1/3转移。     

腺病毒载体转染p53基因提高肿瘤放射敏感性的实验研究进展

几十年来,许多放射生物学和放射肿瘤学专家致力于寻找提高肿瘤放射敏感性的理想药物,试用了生物还原剂、亲电子化合物、修复抑制剂等诸多药物,均因效果欠佳或毒性大而未能广泛应用于临床［１］。近年来分子生物学迅猛发展,为肿瘤学和放射肿瘤学研究提供了新的线索。癌...     

p53基因治疗肺癌及p53与mdm2基因相互调控的实验研究

p53基因是一种重要的抑癌基因,mdm2是P53肿瘤抑制蛋白的一个靶基因,mdm2能和P53酸性活化区域结合,导致p53基因的失活.p53和mdm2在调节细胞分裂、增殖方面存在一相互调控作用.我们将pDOR-wp53重组载体通过LiPofetimin转染GLG-82细胞,观察野生型p53对GLC-82细胞的生物学效应,并将pDOR-mdm2表达载体转染进含有野生型p53的GLC-82细胞,研究mdm2基因对野生型p53的拮抗作用.     

鼻咽癌中EB病毒潜伏膜蛋白1对p53表达的调控

目的 探讨EB病毒潜伏膜蛋白1（LMP1）是否通过NF-kB在鼻咽癌细胞中促进p53蛋白的表达,为阐明LMP1促进细胞凋亡的机制提供实验依据。方法 利用四环素诱导表达系统,建立受四环素调控表达LMP1的鼻咽癌细胞系,用报道基因检测法和Western印迹技术,观察LMP1过量表达对NF-kB的功能性活化及p53、bcl-2表达的影响。结果 在鼻咽癌细胞中,LMP1能活化NF-kB。过量表达的LMP1促进p53基因的表达,这种促表达可以被硫代磷酸化修饰的LMP1及p65反义寡聚脱氧核苷酸阻断,LMP1和p65地bcl-2的表达则没有影响,LMP1过表达对bcl-2的表达无影响。结论 鼻咽癌中LMP1通过活化核转录因子NF-kB调节p53的表达;而在LMP1过表达时,bcl-2介导的抗凋亡机制未被启动,至少是未被上调的。     

重组人p53腺病毒治疗原发性肝癌的血清p53蛋白检测及其临床意义

目的:初步观察重组人p53腺病毒注射液(recombinant adenovirus-p53,rAd-p53)治疗肝癌临床疗效,和治疗前后血清p53蛋白的变化及其临床意义。方法:对38例原发性肝癌患者,采用瘤内注射、血管介入和静脉滴注rAd-p53联合化疗和放疗,行至少1个疗程以上的治疗,治疗结束一个月后评价疗效。应用ELISA检测患者治疗前和治疗后血清p53蛋白。结果:38例患者总的疾病控制率为94.74%,其中CR7例,PR11例,SD18例,PD2例。38例肝癌患者经人p53腺病毒注射液治疗后血清p53蛋白含量比治疗前明显升高(P<0.01)。治疗前血清p53蛋白较高的患者比p53蛋白低的对人p53腺病毒注射液的治疗反应较好。结论:人p53腺病毒注射液治疗对肝癌具有一定疗效,临床应用安全;治疗前血清p53蛋白含量以及动态变化可能是预测rAd-p53治疗肝癌疗效的有价值指标,并对人p53腺病毒注射液的临床应用具有一定的指导作用。