血管生成素1通过LXRα途径调节THP-1源性泡沫细胞ABCA1、ABCG1表达及胆固醇流出

目的观察血管生成素1(Ang-1)通过LXRα调节THP-1源性泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)、ABCG1表达和胆固醇流出。方法 160 nmol/L佛波酯诱导人THP-1单核细胞分化为巨噬细胞,50 mg/L氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)共孵育,使其荷脂形成泡沫细胞,常规体外培养细胞;实验分为对照组和Ang-1处理组;液体闪烁计数仪检测细胞胆固醇流出水平,高效液相色谱检测细胞内脂质成分,实时荧光定量PCR和Western blot检测ABCA1、ABCG1表达;LXRα激动剂T0901317或抑制剂GGPP分别处理THP-1源性泡沫细胞。结果Ang-1显著抑制THP-1源性泡沫细胞胆固醇流出,下调ABCA1、ABCG1表达;LXRα激活剂拮抗Ang-1对ABCA1、ABCG1表达及胆固醇流出的抑制作用。结论 Ang-1可能通过抑制LXRα表达,降低ABCA1和ABCG1表达水平,减少THP-1源性泡沫细胞内胆固醇流出。     

缺氧对RAW264.7细胞ABCA1的表达及胆固醇流出的影响

目的 探讨缺氧对RAW264.7细胞ABCA1的表达及胆固醇流出的影响.方法 将小鼠巨噬细胞株RAW264.7细胞分别在缺氧(37℃,5% CO2,1%O2)及常氧(37℃,5% CO2,20% O2)条件下培养不同时间(0、6、12、24 h和48 h),在相应时间点收集细胞总RNA及蛋白,用实时定量PCR和免疫印迹法分别检测ABCA1mRNA的表达及其蛋白质水平的变化.利用氧化型低密度脂蛋白及3H-胆固醇荷脂RAW264.7细胞结合液闪仪检测缺氧条件下ApoA-Ⅰ诱导的胆固醇流出,计算胆固醇流出率.结果 与常氧培养相比,缺氧48 h的RAW264.7细胞中ABCA1的表达水平显著降低(P＜0.05),ApoA-Ⅰ诱导的胆固醇流出也明显降低(P＜0.05).结论 缺氧能抑制RAW264.7细胞ABCA1的表达以及ApoA-Ⅰ诱导胆固醇流出,此作用可能与动脉粥样硬化的发生发展密切相关.     

胆固醇逆向转运关键蛋白介导药物和小分子调控脂代谢的机制研究

胆固醇逆向转运(RCT)异常导致脂代谢紊乱是动脉粥样硬化发病重要环节,探讨介导RCT的关键蛋白在脂代谢中的作用及调控机制对阐明动脉粥样硬化发病的分子机制具有重要意义。本期专题收集的论文探讨了利拉鲁肽、苦瓜素以及生长分化因子11对细胞胆固醇流出及介导RCT中关键蛋白三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)、ABCG1和B类Ⅰ型清道夫受体表达的影响,分别从不同角度阐释RCT关键蛋白参与药物或小分子物质调控胆固醇流出的分子机制。     

miR-19b靶向沉默ABCA1调控巨噬细胞胆固醇流出

目的 探讨miR-19b对三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ABCA1）介导巨噬细胞胆固醇流出的影响及其机制。方法 将miR-19b mimic或miR-19b inhibitor转染入THP-1源性巨噬细胞,液体闪烁计数仪检测细胞内胆固醇流出,油红O染色观察细胞内脂滴情况,生物信息学分析miR-19b与ABCA1 3′UTR的结合关系,荧光素酶报告基因检测miR-19b与ABCA1的结合情况,Western blot检测ABCA1 蛋白水平。结果 miR-19b抑制巨噬细胞胆固醇流出,增加胞内脂质蓄积和泡沫细胞形成,而anti-miR-19b则刚好出现相反的结果。miR-19b与ABCA1 3′UTR的3110-3116位结合,且二者结合的自由能较低。miR-19b显著抑制荧光素酶活性及其巨噬细胞中ABCA1蛋白的表达。结论 miR-19b靶向沉默ABCA1进而抑制其介导的胆固醇流出,增加巨噬细胞内脂质蓄积。     

微小RNA-146a靶向沉默三磷酸腺苷结合盒转运体A1调控THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出

背景 抑制巨噬细胞脂质蓄积(泡沫化)和炎症因子释放是防治动脉粥样硬化(AS)的重要途径.微小RNA(miR)-146a是否通过三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)等膜蛋白以三磷酸腺苷(ATP)为能源将细胞内游离胆固醇转运到细胞膜表面,进而减少细胞内胆固醇蓄积尚未知.目的 探讨微小RNA(miR)-146a是否通过靶...     

利拉鲁肽对高糖条件下HepG2细胞胆固醇流出的影响

目的研究利拉鲁肽对高糖条件下HepG2细胞胆固醇流出的影响,检测相关蛋白表达并探讨其分子机制。方法体外培养HepG2细胞,以高糖刺激并以不同浓度利拉鲁肽干预,采用BODIPY-胆固醇荧光法检测利拉鲁肽对高糖条件下HepG2细胞胆固醇流出的影响,通过Western blot法分析三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)、ABCG1与清道夫受体B1蛋白表达及细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)信号通路变化。结果利拉鲁肽可显著降低高糖(50 mmol/L)条件下HepG2细胞内荧光密度,增加ABCA1蛋白的表达,且增强ERK1/2的磷酸化水平。结论利拉鲁肽增强高糖条件下HepG2细胞中胆固醇流出,其机制可能与调控ERK1/2信号通路进而上调ABCA1表达有关。     

烟酸对3T3-L1脂肪细胞胆固醇流出的影响

目的观察烟酸对分化成熟的3T3-L1脂肪细胞胆固醇流出的影响,并探讨其机制。方法3T3-L1细胞促分化成熟后,给与不同浓度的烟酸(0～1.0mmol/L)干预24h后,收集细胞,逆转录聚合酶链反应测定脂肪细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1、B族Ⅰ型清道夫受体和过氧化体增殖物激活型受体γmRNA表达,采用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出。结果烟酸呈剂量依赖性增加脂肪细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1mRNA的表达,并促进载脂蛋白AⅠ介导的胆固醇流出,但对B族Ⅰ型清道夫受体表达无影响。过氧化体增殖物激活型受体γ在分化成熟的3T3-L1脂肪细胞有较高水平的表达,与空白组(0.38±0.29)比较,在1.0mmol/L浓度的烟酸干预时过氧化体增殖物激活型受体γ表达明显升高(3.15±0.96),为空白组的8.3倍。结论烟酸可通过上调过氧化体增殖物激活型受体γ表达,促进脂肪细胞载脂蛋白AⅠ—三磷酸腺苷结合盒转运体A1通路,加速细胞内胆固醇流出。这可能为解释烟酸升高高密度脂蛋白胆固醇的机制提供有用的线索。     

ABCA1促胆固醇流出防治动脉粥样硬化的机制及调控

动脉血管的炎症反应和胆固醇的积累是动脉粥样硬化形成的高危因素,因此抑制巨噬细胞炎症反应和促进胆固醇流出已成为治疗动脉粥样硬化的有效途径。三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ATP binding cassette transporter A1,ABCA1）能将细胞内游离胆固醇转运给贫脂的载脂蛋白A-I,从而促进高密度脂蛋白的形成,介导胆固醇的流出。miRNA（microRNA,miRNA） 作为一种非编码的微小RNA,通过降解靶基因mRNA或阻碍其翻译,发挥ABCA1转录后的调控作用。因此探究ABCA1的作用机制及调控有利于动脉粥样硬化的有效防治。     

亲环素A对THP-1源性泡沫细胞ABCA1表达及胆固醇流出的影响及机制

目的观察亲环素A(CypA)对THP-1源性泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)表达和胆固醇流出的影响及机制。方法 160 nmol/L佛波酯诱导人THP-1单核细胞分化为巨噬细胞,与50 mg/L氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)共孵育,使其荷脂形成泡沫细胞,常规体外培养细胞;实验分为对照组和Cyp A处理组;液体闪烁计数仪检测细胞胆固醇流出水平,高效液相色谱检测细胞内脂质成分,实时荧光定量PCR和Western blot检测ABCA1表达,Western blot检测核因子κB(NF-κB)核转位水平;NF-κB抑制剂小白菊内酯抑制NF-κB活化;脂质体2000转染CD147 siRNA至THP-1源性泡沫细胞。结果 CypA显著抑制THP-1源性泡沫细胞胆固醇流出,促进NF-κB核转位,下调ABCA1表达;NF-κB抑制剂小白菊内酯拮抗CypA对ABCA1表达及胆固醇流出的抑制作用;用siRNA干扰CD147后,显著抑制Cyp A诱导的NF-κB核转位,上调ABCA1表达,促进胆固醇流出。结论 CypA可能通过CD147激活NF-κB,下调ABCA1表达,抑制THP-1源性泡沫细胞胆固醇流出。     

白细胞介素4对THP-1巨噬细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1表达和胆固醇流出的影响

目的探讨白细胞介素4(IL-4)对人类单核细胞株THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)表达及细胞内胆固醇流出的影响及机制。方法 THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞加入不同浓度的IL-4,处理不同时间,以及加入肝X受体α(LXRα)激动剂T0901317处理后,采用半定量RT-PCR和Western blot分别检测细胞ABCA1及LXRαmRNA和蛋白质的表达,采用油红O染色观察细胞内脂质蓄积情况,使用液体闪烁计法检测细胞内胆固醇流出,采用高效液相色谱法检测细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯的量。结果 IL-4能呈浓度和时间依赖性地降低THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1表达(P0.05),并减少细胞内胆固醇流出。加入T0901317后能使IL-4对ABCA1的抑制作用减弱(P0.05)。结论 IL-4能抑制THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1的表达及胆固醇的流出。LXRα激活能逆转IL-4对ABCA1的抑制作用。     

肥胖对外周血白细胞胆固醇逆转运相关基因表达的影响

目的 研究肥胖者外周血白细胞胆固醇逆转运相关基因表达的情况。方法 采用实时荧光定量PCR方法,测定肥胖组和对照组外周血白细胞胆固醇逆转运相关基因ABCA1、ABCG1和ApoAI mRNA表达水平。结果 肥胖组ABCG1 mRNA表达水平较对照组显著降低（0.536±0.271 vs 6.243±1.511,p<0.05）, ApoA1mRNA表达水平较对照组升高（0.385±0.188 vs 0.206±0.062,p<0.05）。单因素相关分析显示ABCG1mRNA表达与体重指数BMI呈负相关（r=-0.403, p=0.012）,多元线性回归分析提示ABCG1mRNA表达与体重指数BMI呈独立相关性（β=-0.488,p=0.004）。结论 肥胖者外周血白细胞ABCG1 mRNA表达下调,且ABCG1 mRNA与体重指数BMI呈负相关,这可能是肥胖参与动脉粥样硬化发生、发展的机制之一。     

结核分枝杆菌ATP结合盒超家族外排泵的研究进展

近年来,结核分枝杆菌的耐药菌株日益增多,使得治疗难度也在加大.其耐药主要是通过细胞壁的阻碍作用和基因突变所导致.但是仅凭这两种因素不能够完全解释分枝杆菌的耐药机制.据研究,分枝杆菌的主动外排是另一种重要的耐药机制.主动外排泵对结核分枝杆菌的耐药方面的影响也越来越受人们的关注,而外排泵的类型有很多,其中ATP结合盒超家族是外排泵家族中的大家族,在外排作用中起到了重大影响,通过总结近年来发表的文献,现对结核分枝杆菌ATP结合盒超家族的抑制剂和作用底物的研究进行了综述.     

Reverse cholesterol transport in type 2 diabetes mellitus

High-density lipoprotein (HDL) plays an important protective role against atherosclerosis, and the anti-atherogenic properties of HDL include the promotion of cellular cholesterol efflux and reverse cholesterol transport (RCT), as well as antioxidant, anti-inflammatory and anticoagulant effects. RCT is a complex pathway, which transports cholesterol from peripheral cells and tissues to the liver for its metabolism and biliary excretion. The major steps in the RCT pathway include the efflux of free cholesterol mediated by cholesterol transporters from cells to the main extracellular acceptor HDL, the conversion of free cholesterol to cholesteryl esters and the subsequent removal of cholesteryl ester in HDL by the liver. The efficiency of RCT is influenced by the mobilization of cellular lipids for efflux and the intravascular remodelling and kinetics of HDL metabolism. Despite the increased cardiovascular risk in people with type 2 diabetes, current knowledge on RCT in diabetes is limited. In this article, abnormalities in RCT in type 2 diabetes mellitus and therapeutic strategies targeting HDL and RCT will be reviewed.     

Biliary cholesterol secretion: more than a simple ABC

Biliary cholesterol secretion is a process important for 2 major disease complexes, atherosclerotic cardiovascular disease and cholesterol gallstone disease. With respect to cardiovascular disease, biliary cholesterol secretion is regarded as the f inal step for the elimination of cholesterol originating from cholesterol-laden macrophage foam cells in the vessel wall in a pathway named reverse cholesterol transport. On the other hand, cholesterol hypersecretion into the bile is considered the main pathophys...     

ABCA1基因多态性与冠心病的相关研究

目的探讨三磷酸腺苷结合盒转运子A1(ATP binding cassette transporter1,ABCA1)基因R219K多态性与冠心病(coronary heart disease,CHD)易感性的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测了162例冠心病患者和186名对照的ABCA1基因R219K基因型和等位基因的分布。结果两组基因型频率均符合Hardy-Weinberg平衡。对照组的RK和KK基因型的频率显著高于CHD组(73.66%比56.17%,P<0.05),同样,对照组K等位基因的频率显著高于CHD组(48.66%比36.11%,P<0.01)。调整年龄、性别、体重指数、吸烟和高血压等因素后,携带至少1个219K等位基因的个体显著减少患冠心病的危险(OR=0.38;95%CI=0.22-0.65)。结论ABCA1基因R219K多态性与中国温州汉族人群冠心病的遗传易感性相关,其中K等位基因可能是冠心病的保护因子。     

ATP结合盒转运子A1基因R219K多态性与冠心病的关系

目的:检测冠心病患者及健康对照者ATP结合盒转运子A1(ABCA1)R219K基因多态性,探讨其与中国人冠心病以及血脂水平的关系。方法:选择234例冠心病患者(冠心病组)和198例正常对照者(对照组)为研究对象,用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性方法研究R219K基因多态性与冠心病和血脂水平的关系。结果:与对照组比较,冠心病组RR基因型频率(46·2%)明显高于对照组(33·8%)(P<0·05),而KK型频率(8·9%)显著低于对照组(15·2%)(P<0·05);与RR型患者相比,KK基因型患者血浆高密度脂蛋白(HDL)水平较高。基因型与血脂水平Logistic回归分析结果表明,三酰甘油、HDL、载脂蛋白A1与基因型相关。结论:ABCA1基因R219K变异可能具有动脉硬化保护作用。