实验性膜迷路积水活体Ca~（2＋）浓度与内淋巴电位测定

为了探索Ｍｅｎｉｅｒｅ病发病机理，阻塞豚鼠内淋巴囊造成膜迷路积水模型。对膜迷路积水成功的１７只动物的左耳分别于术后１、２、３个月在耳蜗第三回开窗，用双管离子选择性微电极插入中阶，测Ｃａ￣（２＋）浓度及内淋巴电位（ＥＰ）；１４只豚鼠健耳（右耳）作为对照。结果证明积水后中阶Ｃａ￣（２＋）浓度增高，与对照耳比较差异有显著性，随积水时间延长Ｃａ￣（２＋）浓度逐渐增高，且１、２、３个月之间差异有显著性。对照耳ＥＰ为７２．７８±１．９ｍＶ，积水耳为５５．８２±３．２８ｍＶ，差异有显著性。积水时间越长ＥＰ下降越明显，与Ｃａ￣（２＋）浓度呈负相关，按Ｎｅｒｓｔｉａｎ方程计算电化学梯度的斜率。两者之间差有显著性。对Ｍｅｎｉｅｒｅ病听力下降的原因、Ｃａ￣（２＋）浓度与ＥＰ的关系进行讨论。     

实验性膜迷路积水活体Ca^2＋浓度与内淋巴电位测定

为了探索Ｍｅｎｉｅｒｅ病发病机理，阻塞豚鼠内淋巴囊造成膜迷路积水模型。对膜迷路积水成功的１７只动物的左耳分别于术后１、２、３个月在耳蜗第三回开窗，用双管离子选择性微电极插入中阶，测Ｃａ＾２＋浓度及内淋巴电位（ＥＰ）；１４只豚鼠健耳（右耳）作为对照。结果证明积水后中阶Ｃａ＾２＋浓度增高，与对照耳比较差异有显著性，随积水时间延长Ｃａ＾２＋浓度逐渐增高，且１、２、３个月之间差异有显著性。对照耳ＥＰ为７２     

豚鼠膜迷路积水模型耳蜗Ca2+-ATP酶的变化

目的了解Ｃａ２＋ＡＴＰ酶在耳蜗活动位点及膜迷路积水后耳蜗Ｃａ２＋ＡＴＰ酶的变化。方法选成年健康、Ｐｒｅｙｅｒ反射正常豚鼠１４只,左耳装圆窗电极后阻塞内淋巴,经声反应阈（ＣＡＰ阈值）证明膜迷路积水形成;右侧为对照耳。用枸橼酸铅细胞组化法测定Ｃａ２＋ＡＴＰ酶,在透射电镜下Ｃａ２＋ＡＴＰ酶以磷酸铅黑色颗粒显示。结果对照耳Ｃａ２＋ＡＴＰ酶活动部位在蜗管前庭膜内淋巴侧、内外毛细胞皮板及静纤毛、血管纹中间细胞指突膜等处;实验性膜迷路积水后,声反应阈提高,前庭膜、内外毛细胞等处之Ｃａ２＋ＡＴＰ酶颗粒明显减少。结论膜迷路积水后声反应阈提高,前庭膜、内外毛细胞等处Ｃａ２＋ＡＴＰ酶活性明显下降,两者呈负相关。     

豚鼠膜迷路积水模型耳蜗Ca^2＋ATP酶的变化

目的 了解Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶在耳蜗活动位点及膜迷路积水后耳蜗Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶的变化。方法 选成年健康、Ｐｒｅｙｅｒ反射正常豚鼠１４只，左耳装圆窗电极一阻塞肉淋巴，经声反应阈（ＣＡＰ阀值）证明膜迷路积水形成；右侧为对照耳。用枸橼酸铅细胞组化法测定Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶，在透射电镜下Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶以磷酸铅黑色颗粒显示。结果 对照耳Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活动部位在蜗管前庭膜内淋巴侧、内外毛细胞皮     

豚鼠壶腹嵴毛细胞内钙离子活动及ATP 的影响

目的　探讨离体前庭毛细胞（ｖｅｓｔｉｂｕｌａｒ ｈａｉｒｃｅｌｌｓ,ＶＨＣ）去极化时细胞内钙离子活动特征及内耳活性物质ＡＴＰ对离体ＶＨＣ内钙离子浓度的影响及其机制。方法　采用酶孵育后机械分离法分离豚鼠壶腹嵴ＶＨＣ,６ μｍｏｌ／Ｌ钙荧光探针Ｆｌｕｏ３ 染色,利用激光扫描共聚焦显微镜（ｌａｓｅｒ ｓｃａｎｎｉｎｇｃｏｎｆｏｃａｌ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ,ＬＳＣＭ） 记录静息状态下、加入高Ｋ＋ 液及不同浓度ＡＴＰ时代表ＶＨＣ内［Ｃａ２＋ ］ｉ 的荧光强度相对值的变化。结果　细胞外有Ｃａ２＋ 存在时,７５ ｍｍｏｌ／ＬＫ＋ 可引起所观察５ 个ＶＨＣ内［Ｃａ２＋］ｉ均升高,细胞体和皮板区的［Ｃａ２＋］ｉ 变化一致;在细胞外无Ｃａ２＋ 的情况下,所观察的５ 个ＶＨＣ 中,高Ｋ＋ 并不能引起细胞内［Ｃａ２ ＋］ｉ 升高。在细胞外存在Ｃａ２ ＋ 时,不同浓度（１ ．０ ｍｍｏｌ／Ｌ,０．１ ｍｍｏｌ／Ｌ）ＡＴＰ可引起绝大多数（１８／１９）ＶＨＣ 内［Ｃａ２＋ ］ｉ 迅速升高,达高峰后下降,恢复至静息时的水平;细胞外无Ｃａ２ ＋ 时,ＡＴＰ仅引起极少数（１／１０）ＶＨＣ内［Ｃａ２＋］ｉ 升高;而对照组加入与ＡＴＰ等体积的Ｈａｎｋ 液,不引起ＶＨＣ 内［Ｃａ     

听神经瘤患者离体前庭毛细胞的分离及胞内钙离子活动

目的进一步了解离体人前庭毛细胞的胞内钙离子（Ｃａ２＋）活动。方法从３例经迷路听神经瘤切除术患者中采取半规管壶腹中的前庭毛细胞，用倒置显微镜观察分离出的离体前庭毛细胞形态，用Ｃａ２＋敏感的荧光染料Ｆｕｒａ２和数字影像显微镜监测细胞内Ｃａ２＋浓度的变化。结果分离的前庭毛细胞主要为Ⅰ型毛细胞，可在体外存活２．５ｈ。用１５０ｍｍｏｌ／ＬＫ＋液灌流单离的前庭毛细胞引起胞内Ｃａ２＋的显著升高，荧光比率从０．５４升至１．１６；这种胞内Ｃａ２＋的升高在胞外液中Ｃａ２＋缺如的情况下消失。０．２５μｍｏｌ／ＬＩｏｎｏｍｙｃｉｎ可以引起前庭毛细胞内Ｃａ２＋的不可逆性升高，荧光比率保持在０．７３。结论人前庭毛细胞膜上存在电压敏感的Ｃａ２＋通道。     

三种神经活性物质对离体豚鼠耳蜗外毛细胞内游离钙浓度的影响

目的研究神经活性物质对耳蜗外毛细胞内游离钙离子浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）的影响。方法应用显微荧光测钙技术检测豚鼠耳蜗离体外毛细胞［Ｃａ２＋］ｉ在加入乙酰胆碱、ＡＴＰ、碳酰胆碱之后的变化。结果在含钙的细胞外液中，乙酰胆碱、ＡＴＰ和碳酰胆碱均可引起［Ｃａ２＋］ｉ升高，幅度分别为（０．７４±０．１２９）μｍｏｌ／Ｌ（乙酰胆碱），（０．６５±０．１１）μｍｏｌ／Ｌ（ＡＴＰ），（１．１６±０．２７）μｍｏｌ／Ｌ（碳酰胆碱）；而细胞外液中无钙时，ＡＴＰ仅可引起缓慢而小幅度（０．１８±０．０５）μｍｏｌ／Ｌ的［Ｃａ２＋］ｉ升高。结论同属胆碱能毒蕈碱受体激动剂的乙酰胆碱和碳酰胆碱可作用于受体，打开离子通道，使细胞外Ｃａ２＋进入细胞内，导致外毛细胞［Ｃａ２＋］ｉ升高；细胞外液有Ｃａ２＋时，ＡＴＰ引致的［Ｃａ２＋］ｉ升高，可能是因为引发了内向的Ｃａ２＋流，细胞外液无Ｃａ２＋时，［Ｃａ２＋］ｉ升高则可能源于细胞内钙库的释放。     

膜迷路积水豚鼠的内、外淋巴液钾、钠离子浓度

本研究测定手术阻断豚鼠内淋巴囊和前庭导水管后的内、外淋巴液Ｋ＋，Ｎａ＋离子的浓度。术后１个月，经组织学观察，８只豚鼠中的７只出现了膜迷路积水（８７．５％）。另一组１０只豚鼠于术后１个月用原子吸收光谱仪分别测定内、外淋巴液中Ｋ＋，Ｎａ＋的浓度。与对照耳组比较无明显差异（Ｐ＞０．０５）。     

实验性膜迷路积水耳蜗微循环的观察

阻塞豚鼠内淋巴管及内淋巴囊造成实验性膜迷路积水动物模型，分别观察积水后１、２、３个月耳蜗第三回外侧壁微循环改变，测定螺旋韧带血管（ＳＬＶ）及血管纹血管（ＳＶＶ）的管径及流速。发现积水三个阶段中，ＳＬＶ管径平均缩小０．８０μｍ、０．８７μｍ、１．２１μｍ（Ｐ＜０．０５），流速分别下降１００．８μｍ／ｓ、１４１．０μｍ／ｓ、１３６．０μｍ／ｓ（Ｐ＜０．０５）。ＳＶＶ管径至积水３个月扩张才有显著性，平均扩张０．９３μｍ，但ＳＶＶ管径有随积水时间延长而扩张增大趋势（Ｐ＜０．０５）。ＳＶＶ流速与对照耳比虽都有下降，但无统计学差异（Ｐ＜０．０５）。表明膜迷路积水后ＳＬＶ及ＳＶＶ均受影响，ＳＬＶ变化明显。对引起这种变化的机理进行了探讨。     

实验性膜迷路积水耳蜗微循环的观察

阻塞豚鼠内淋巴管及内淋巴囊造成实验性膜迷路积水动物模型，分别观察积水后１、２、３个月耳蜗第三回外侧壁微循环改变，测定螺旋韧带血管及血管纹血管的管径及流速。发现积水三个阶段中，ＳＬＶ管径平均缩小０．８０μｍ、０．８７μｍ、１．２１μｍ（Ｐ＜０．０５），流速分别下降１００．８μｍ／ｓ、１４１．０μｍ／ｓ、１３６．０μｍ／ｓ（Ｐ＜０．０５）。表明膜迷路积水后ＳＬＶ及ＳＶＶ均受影响，ＳＬＶ变化明显，对引起     

渗透浓度变化和电刺激诱发离体耳蜗外毛细胞运动的初步观察

观察细胞外环境改变对外毛细胞功能的影响，对揭示神经性耳聋的机理很有意义。用显微机械法分离豚鼠耳蜗外毛细胞，观察到细胞外环境渗透浓度降低（２８０Ｏｓｍｍｏｌ／Ｌ）１ｍｉｎ即可诱发离体外毛细胞短缩３．１４±０．７０％（ｔ检验，以下同，Ｐ＜０．０１），伴直径增加。外环境渗透浓度升高（３２０Ｏｓｍｍｏｌ／Ｌ）５ｍｉｎ可使离体外毛细胞伸长３．３４±１．０９％（Ｐ＜０．０５），伴直径缩小；交变电场（刺激电流Ｉ＜０．１ｍＡ，刺激频率ｆ＝１～１０Ｈｚ）的变化可使外毛细胞产生伸缩运动，在Ｋ￣＋１００ｍｍｏｌ／Ｌ，渗透浓度３２０Ｏｓｍｍｏｌ／Ｌ环境下外毛细胞随交变电场变化而产生的运动幅度，负相时减少４３．１４％（Ｐ＜０．０５），正相时减少４６．１７％（Ｐ＜０．０５）。外环境恢复正常后外毛细胞形状亦可恢复。讨论了外毛细胞的运动机制和生物学基础。     

听神经瘤患者离体前庭毛细胞的分离及胞内钙离子活动

目的 进一步了解离体人前庭毛细胞的胞内钙离子（Ｃａ＾２＋）活动。方法 从３例经迷路听神经瘤切除术患者中采取半规管壶腹中的前庭毛细胞，用倒置显微镜观察分离出的离体前庭毛细胞形态，用Ｃａ＾２＋敏感的荧光染料Ｆｕｒａ－２和数字影像显微镜监测细胞内Ｃａ＾２＋浓度的变化。结果 分离的前庭毛细胞主要为Ｉ型毛细胞，可在体外存活２．５ｈ。用１５０ｍｍｏｌ／Ｌ Ｋ＾＋液灌流单离的前庭毛细胞引起胞内Ｃａ＾２＋的显著升     

豚鼠阻尼旋转摆动试验

用２０只健康豚鼠进行阻尼旋转摆动试验（简称摆动试验）以Ｌ和Ｒ分别代表左、右向眼震，计算左、右向眼震的对称比。然后将其随机分成庆大霉素组和膜迷路积水级各１０只，观察每日肌大霉素（２５０ｍｇ／ｋｇ）３ｄ后和右内淋巴囊和淋巴管阻塞３０天后摆试验的眼震变化。结果显示：（１）健康豚鼠摆动试验的左向眼震对称比正常值为＜８．２５％；（２）庆大霉素组向左和向右摆动的眼震数均减少（Ｐ＜０．０１）；（３）膜迷路积水组     

豚鼠阻尼旋转摆动试验

用２０只健康豚鼠进行阻尼旋转摆动试验（简称摆动试验），以Ｌ和Ｒ分别代表左、右向眼震，计算左、右向眼震的对称比。然后将其随机分成庆大霉素组和膜迷路积水组各１０只，观察每日肌注庆大霉素（２５０ｍｇ／ｋｇ）３ｄ后和右内淋巴囊和淋巴管阻塞３０天后摆动试验的眼震变化。结果显示：①健康豚鼠摆动试验的左右向眼震对称比正常值为＜８．２５％；②庆大霉素组向左和向右摆动的眼震数均减少（Ｐ＜０．０１）；③膜迷路积水组向右摆动的眼震数明显减少（Ｐ＜Ｏ．０１），其中６只豚鼠的对称比＞８．２５％。内耳形态学观察，庆大霉素组部分毛细胞受损，膜迷路积水组球囊明显积水，证明动物造模成功。结论认为，阻尼旋转摆动试验是一种重要的评价豚鼠前庭功能的试验方法。     

肾上腺素α2受体在豚鼠血管纹的定位定量研究

用竞争蛋白结合分析法及放射自显影法对豚鼠血管纹肾上腺素α２受体进行了定性定位定量测定，结果显示：加入去甲肾上腺素组（Ａ组）中ｃＡＭＰ量仅为１．３８９±０．８５２ｐｍｏｌ／４０μｌ，较对照组（Ｃ组）７．７００８±０．８６７ｐｍｏｌ／４０μ显著低（Ｐ＜０．０５）；先加入育亨宾再加去甲肾上腺素组（Ｂ组）中ｃＡＭＰ量又复回升达６．９５４±０．９６２（Ｐ＜０．０５），但仍较对照组低（Ｐ＜０．０５）。在经３Ｈ－育亨宾孵育的切片中，血管纹中下部银粒数为９６±１４个／视野，呈条带状分布，与血管纹走向一致，血管纹之外的组织银粒散在均匀，银粒数为２８±７／视野。经细胞立体计量法计算，血管纹中α２受体的含量大约为１．２５×１０９个／ｍｍ３。作者认为，豚鼠血管纹边缘细胞存在α２受体，并推想该受体是通过膜受体－ｃＡＭＰ途径影响细胞膜上Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶的活性，从而参与内淋巴的平衡。     

速尿对壶腹嵴内电位及Ca^2＋活度的影响

为广探讨速尿试验改善梅尼埃病前庭功能的可能机理，应用钙离子选择性微电极观察速尿对正常及实验性膜迷路积水豚鼠的前庭壶腹嵴内电位（AEP）及其内淋巴Ca2＋活度的影响。结果表明，实验性膜迷路积水动物AEP显著下降（P＜0．001），Ca2 活度明显升高（P＜0．01）。经静注10mg／kg速尿约6min的潜伏期后，AEP评始下降，40min达最低，为3．04±0．53mV，但与注射前比较地显著性差异。Ca2 活度于60min上升至最高，为（710±1．32）×10－4M，80min开始回落。结果支持小剂量速尿对实验膜迷路积水前庭有直接作用。并就Ca2＋在速尿试验作用机理中的意义进行讨论。     

鼓膜电极检测有频率特性的—SP／AP

用短声（Ｃｌｉｃｋ）和短纯音（ｔｏｎｅｂｕｒｓｔ）作为声刺激，用鼓膜电极记录检测１０例正常人和１０例有眩晕症状患者双耳的耳蜗电图。当在屏蔽好、被检者处于良好的安静状态下，选择适合的滤波条件，能记录到有频率特性的ＳＰ；正常人的短声和０．５、１、２ｋＨｚ短纯音诱发的－ＳＰ／ＡＰ平均值较小，两者有显著性差异（Ｐ＜０．０５），而４、６和８ｋＨｚ短纯音诱发的－ＳＰ／ＡＰ值比较无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。正常人组８５％（１７／２０）短纯音诱发的为－ＳＰ，１５％（３／２０）为＋ＳＰ。提示眩晕患者的－ＳＰ／ＡＰ值有频率特性的差异，也反映了＋ＳＰ在诊断膜迷路积水中可能有特殊意义。     

正常清醒豚鼠的畸变产物耳声发射特性

目的 研究正常清醒豚鼠的畸变产物耳声发射（ＤＰＯＡＥ）的特性。方法 采用ＣＥＬＥＳＴＡ ５０３型耳声发射分析仪对２６只正常清醒豚鼠（３５耳）进行ＤＰ图及ＤＰ输入／输出曲线（ＤＰ－Ｉ／Ｏ）的测试，随机选择１１只正常清醒豚鼠（２０耳）进行ＤＰＯＡＥ的重复测试，用ＳＰＳＳ１０．０对数据进行统计分析。结果 在ＤＰ图中，当初始音强度Ｌ１／Ｌ２为 ７０／６５ ｄＢ ＳＰＬ时，正常清醒豚鼠的 ＤＰＯＡＥ幅值随测试频率ｆ０从０．７５－８ｋＨｚ的增加而逐渐升高（２７．９０±１．９６－5０．６５±０．７１）。在 ＤＰ－Ｉ／Ｏ中，当ｆ０分别为４、６、８ ｋＨｚ时，正常清醒豚鼠的ＤＰＯＡＥ幅值随Ｌ１／Ｌ２从７０／６５以５ｄＢ－挡降至１５／１０ ｄＢ ＳＰＬ而呈线性下降（Ｐ＜０．０１），在Ｌ１／Ｌ２为５５／５０或６０／５５ ｄＢ ＳＰＬ处出现饱和或低谷，同一Ｉ／Ｏ曲线上Ｌ１／Ｌ２分别从７０／６５及５５／５０ ｄＢ ＳＰＬ递减至阈值的Ｉ／Ｏ斜率（分别记为ＫＴ及ＫＬ）均接近于１，且ＫＬ大于ＫＴ（Ｐ＜０．０１）。重复测试的ＤＰＯＡＥ幅值差异小（＜ １ｄＢ ＳＰＬ）且无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论 正常清醒豚鼠ＤＰＯＡＥ测试充分表现了其捡出率高、反应幅值大     

乙状窦后径路前庭神经离断和内淋巴囊分流联合手术治疗梅尼埃病

１９８５年发表的美国耳鼻咽喉－头颈外科学会确定的梅尼埃病诊断标准如下：①２次或更多次自发性眩晕发作，每次持续２０分钟或更长；②至少有一次听力下降的记录；③伴有耳呜或耳胀感。梅尼埃病病因不明，病理上可见有内淋巴积水，膜迷路肿胀和弯曲。具某种特异性的检查方法为甘油脱水试验和耳蜗电图（ＥｃｏＧ）。ＥｃｏＧ包括ＡＰ，ＳＰ和ＣＭ，其中ＳＰ值增高（＞１０ｍＶ）是内耳功能障碍的典型表现，ＳＰ值升高使ＳＰ／ＡＰ比值增加，当比值＞３５％时，提示内耳有积水。梅尼埃病患者通常ＳＰ＞５ｍＶ，ＳＰ／ＡＰ比值常高于正常。Ｓ…     

梅尼埃病(MD)的远期疗效

虽多公认ＭＤ的病变实质是膜迷路积水、内淋巴液生化成分和膜通透改变，但未解决问题尚多，故疗效有待证实。对 １９７６～１９９８年间经治的 ７０例（女 ４５、男２５例；３７～７７岁，病程３～２０年以上）患者进行了手术与保守治疗效果的对比观察。５０例手术治疗，计内淋巴羹引流术（ＥＬＳＤ）２５例、内淋巴囊暴露减压术（ＥＬＳ－ＤＣ）６例、鼓索神经切断术（ＲＣＴ）１９例；另２０例仅予保守疗法作为对照。治前５７例（７９．８％）有Ⅱ～Ⅲ级重听。ＥＬＳＤ后 ２年时 ５例、５年时 ９例耳呜消失，１１例无变化或于血压升高（高…