肿瘤抗原NY-ESO-1研究进展

肿瘤抗原NY-ESO-1是肿瘤-睾丸(cancer-testis,CT)抗原,其编码基因是一基因家族,目前发现的主要包括NY-ESO-1、LAGE-1和ESO3三个成员。NY-ESO-1是迄今发现的最具免疫原性的肿瘤抗原之一,可以在NY-ESO-1表达阳性的肿瘤患者体内引起自发性体液免疫反应和T细胞免疫反应,因此在抗原特异性肿瘤免疫治疗中具有广泛的应用前景。     

MAGE-A家族与NY-ESO-1在乳腺癌中的表达及免疫治疗前景

以肿瘤特异性抗原为基础的肿瘤免疫治疗已经成为乳腺癌的新的治疗模式,癌睾丸抗原(CTA)是肿瘤免疫治疗研究的热点.MAGE-A家族与NY-ESO-1作为癌睾丸抗原家族的重要成员,在乳腺癌的诊断、治疗、预后等各个方面发挥重要作用.MAGE-A家族不同成员在乳腺癌组织中有不同程度的阳性表达,其表达机制可能和DNA甲基化和组蛋白去乙酰化相关.目前MAGE-A的肿瘤疫苗研究尚处于起步阶段,而且其应用也有一定的局限性.有人认为通过去甲基化药物激活MAGE-A表达,可以增加MAGE-A的免疫原性,增强免疫治疗疗效.NY-ESO-1在不同类型肿瘤组织中均有阳性表达,它也是判断肿瘤预后的重要指标.基因甲基化可能是调控NY-ESO-1在肿瘤中表达的机制.以NY-ESO-1为基础的多种疫苗已相继进入临床研究阶段.综上,MAGE-A和NY-ESO-1可成为现在以及将来免疫治疗的理想靶标.     

黑色素瘤相关抗原MAGE-C2:肿瘤免疫治疗新靶点

癌睾丸抗原(Cancer testis antigen,CTA)是一类在多种肿瘤组织表达、而在睾丸或胎盘以外的正常组织几乎不表达的抗原。CTA其表达的独特性,被认为是一类能用于肿瘤免疫治疗的理想抗原。目前一些CTA疫苗已用于临床试验,并收到了一定的疗效,显示了良好的开发前景,如NY-ESO-1[1]、MAGE-A3[2]等。黑色素瘤相关抗原(Melanoma-as-     

卵巢上皮癌相关肿瘤抗原新基因的研究

目的探讨卵巢癌相关肿瘤抗原新基因在卵巢癌诊断和免疫治疗中的应用价值。方法利用网上生物信息学分析软件对筛选到的55个克隆的核苷酸序列进行分析,并检测其中8个新基因在卵巢癌患者和正常女性血清中的抗体。结果55个克隆的核苷酸序列代表45个卵巢癌抗原基因,其中8个是国内外首次发现的在GeneBank中尚未登记的新基因,是具有免疫原性的功能基因。其中OCY-142新基因是抑癌基因BARD1的可剪切变异体,可被CD4+和CD8+T细胞识别。8个卵巢癌肿瘤抗原新基因中7个在卵巢癌患者血清中的阳性率显著高于正常人,7个卵巢癌肿瘤抗原新基因对卵巢癌患者和正常女性进行联合检测,其敏感性和特异性达到96.9%和95.2%。CAl25异常的卵巢癌41例患者中,OCY-142单独检测的阳性率为95.12%,而CA125正常的卵巢癌57例患者中,OCY-142检测发现21例(36.9%)阳性。结论这些卵巢癌相关肿瘤抗原新基因在卵巢癌患者血清中产生的相应抗体可能成为卵巢癌的新的血清学标志物,可能是卵巢癌免疫治疗理想的新靶点。     

肿瘤-睾丸抗原SSX、NY-ESO-1、MAGE-A1在胰腺癌中的表达及其生物学意义

目的 检测肿瘤-睾丸抗原(CTA)SSX、NY-ESO-1、MAGE-A1在正常胰腺组织、慢性胰腺炎以及胰腺癌中的表达情况,寻找胰腺肿瘤中高表达的CTA.方法 应用免疫组织化学SP法检测8例正常胰腺组织、15例慢性胰腺炎组织、52例胰腺癌组织中SSX、NY-ESO-1、MAGE-A1的表达.Western blotting检测52例胰腺癌组织中SSX、NY-ESO-1、MAGE-A1的表达.结果 正常胰腺组织、慢性胰腺炎中SSX、MAGE-A1和NY-ESO-1均不表达,SSX、NY-ESO-1、MAGE-A1在52例胰腺癌的阳性表达率分别为48.08%(25/52)、7.69%(4/52)、5.77%(3/52);经相关分析,SSX、NY-ESO-1和MAGE-1的阳性表达与患者的年龄、性别、病变部位、分化程度均未见明显相关关系(P＞0.05); SSX的表达与肿瘤的浸润转移呈负相关(r=-0.306,P=0.028); 52例胰腺癌病例中55.77%(29/52)有1种以上的CTA表达.结论 不同种类的CTA在胰腺癌中的表达存在显著差异,SSX的阳性表达率最高;胰腺癌中SSX的高表达与肿瘤的转移呈明显的负相关关系;CTA在胰腺癌中的表达呈现簇生现象.     

NY-ESO-1/GST融合蛋白在大肠杆菌的表达、纯化及鉴定

目的:构建肿瘤-睾丸抗原NY-ESO-1与GST融合基因的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并对融合蛋白NY-ESO-1/GST进行纯化和初步鉴定。方法:设计针对NY-ESO-1的特异性引物,采用聚合酶链反应(PCR)从睾丸组织的cDNA文库扩增NY-ESO-1基因片段,经上下游引物所引入的EcoR I和Xho I双酶切后克隆入原核表达载体pGEX-4T1中GST标签的下游,构建重组表达载体pGEX-4T1-NY-ESO-1,并将该载体转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中,IPTG诱导表达NY-ESO-1/GST融合蛋白,经不同浓度尿素洗脱纯化后,表达产物通过SDS-PAGE和Western blot法进行鉴定。结果:重组质粒经限制性内切酶EcoR I和Xho I双酶切鉴定和IPTG诱导表达NY-ESO-1/GST的SDS-PAGE分析表明,表达产物的相对分子质量(Mr)为44 000,与理论值相符,并主要以包涵体形式存在,灰度扫描分析显示融合蛋白表达量占菌体蛋白总量的90%,Western blot结果证实该NY-ESO-1/GST可与抗GST单克隆抗体(mAb)发生特异性结合反应,提示为融合蛋白。结论:成功构建了NY-ESO-1基因原核表达载体pGEX-4T1-NY-ESO-1,利用大肠杆菌表达系统,获得了较高纯度的包涵体形式NY-ESO-1/GST融合蛋白。     

SSX基因家族研究进展

SSX基因家族由9个成员组成，其中SSX-1、SSX-2和SSX-4经常出现在滑膜肉瘤t(X：18)染色体易位的SYT-SSX融合基因中。SSX基因家族可编码肿瘤，睾丸抗原，在睾丸以外的正常组织中，除甲状腺微弱表达外，没有发现它们的存在。HOM-MEL-40是最早用重组cDNA表达库血清学分析技术确定的由SSX-2基因表达的抗原。近来的研究发现蛋白SSX-2 41-49是CD8^ ctl免疫识别的优势表位，而SSX-2 37-58和SSX-2 19-34分别是CD4^ T细胞识别相关的HLA-DR及HLA-DP限制表位。日本学也发现SYT-SSX基因融合蛋白断裂点衍生肽是MHC Ⅰ分子HLA-A24和HLA-B7限制的CTL识别的表位。所有这些研究，证明SSX基因家族编码蛋白是肿瘤免疫治疗有前景的靶标之一。     

肿瘤免疫与肿瘤免疫治疗中一些新的思考

随着免疫学、分子生物学与基因工程技术发展 ,以肿瘤免疫治疗为代表的肿瘤生物治疗已成为继手术治疗、化疗和放疗后肿瘤治疗的第四种模式[1] 。本文欲对肿瘤免疫及肿瘤免疫治疗 ,特别是其中一些新的思路和进展作一简要探讨和评述。1　肿瘤免疫从免疫学的角度看 ,肿瘤细胞就是一种能不断表达“正常”抗原 (基因过度表达 )和 /或“异常”抗原 (基因修饰、突变或缺失 )的宿主体内自身组织细胞。因此肿瘤可以被视为一种特殊的自体抗原。在正常情况下 ,机体对自体抗原不产生免疫应答 ,即呈现出免疫耐受。因此 ,肿瘤抗原与肿瘤免疫耐受就构成了肿…     

癌-睾丸抗原SSX-2抗原肽的鉴定及功能分析

SSX基因又称滑膜肉瘤X断裂点基因（Synovial Sarcoma Xbreakpoint，SSX），是个多成员的基因家族，其中一些成员编码的产物被认为是癌-睾丸抗原（Cancer-Testis Antigen，CTA）。CTA是一类可在多种肿瘤组织中表达，而在睾丸以外的其它正常组织中几乎不表达的抗原。因此，CTA非常适用于肿瘤免疫治疗。目前对SSX基因家族中的SSX-2抗原的研究显示，SSX-2抗原分子作为肿瘤免疫治疗的靶物质有着潜在的应用前景。现将其研究进展综述如下。     

SEREX在肿瘤抗原分析中的研究进展

重组cDNA表达文库的血清学分析(SEREX)为一种新的寻找抗原的方法,即利用患者自体血清对重组表达的cDNA克隆进行筛选,以获得相关抗原基因.这类抗原在荷瘤患者体内能诱导出多重免疫反应,且其核苷酸序列和蛋白质结构较易在分子水平确定,这一方法的运用,为发现新的肿瘤抗原开辟了一个崭新的领域,为肿瘤的免疫治疗的发展提供了一个现实的基础.     

转染NY-ESO-1特异性TCR增强人PBMC对NY-ESO-1阳性肿瘤细胞的特异性细胞毒性

 目的：将具有肿瘤抗原NY-ESO-1特异性的T细胞受体(T Cell Receptor,TCR)转导至人外周血淋巴细胞(Peripheral Blood Lymphocytes,PBLs)中,提高转导后细胞表面特异性TCR表达效率,特异性增强转导后细胞识别肿瘤抗原及分泌IFN-γ的能力, 为下一步进行肿瘤杀伤实验奠定基础。方法：将实验室保存的NY-ESO-1特异性T细胞受体质粒（pCDNA3.1-ESO-TCR）体外电转入新分离的正常人PBLs中,RT-PCR法鉴定转导是否成功;通过流式细胞仪对转导后的PBLs细胞进行表型分析;用特异性NY-ESO-1b抗原肽 (p157-165) 刺激转导阳性的PBLs,ELISPOT法检测转导后PBLs细胞分泌IFN-γ的能力。结果：RT-PCR检测到电转后PBLs能够扩增出特异性TCR片段;流式检测结果显示电转pCDNA3.1-ESO-TCR质粒的PBLs细胞表面特异性TCR表达率高于未电转质粒的PBLs的表达率(P<0.05);经多肽刺激后,与未电转质粒的PBLs相比,电转质粒的PBLs分泌IFN-γ的斑点数明显增多(P<0.05)。结论：通过体外转导的方式提高NY-ESO-1特异性TCR 在PBLs表面的表达,能够特异性增强PBLs分泌IFN-γ的效率,为下一步进行肿瘤杀伤实验奠定基础。     

基于超抗原的肿瘤基因治疗研究进展

超抗原是一些细菌的外毒素和病毒编码的蛋白质分子 ,它的一端与抗原提呈细胞上的主要组织相容性复合体Ⅱ类分子相结合 ,另一端识别TCR的Vβ片段 ,不需加工处理 ,能激活比普通抗原更多的T细胞。超抗原抗肿瘤的机制包括T细胞的直接杀伤作用和细胞因子的作用。基于超抗原的肿瘤基因治疗模式有单用单克隆抗体片段导向的超抗原抗肿瘤、超抗原基因转染抗肿瘤、超抗原基因联合其他基因抗肿瘤和膜锚定超抗原瘤苗抗肿瘤。基于超抗原的肿瘤基因治疗是一种新的肿瘤生物治疗模式 ,将为肿瘤的治疗带来新的希望     

从卵巢癌cDNA表达文库筛选肿瘤抗原基因的研究

目的：利用肿瘤患者自体血清筛选患者肿瘤cDNA表达文库（SEREX）,寻找肿瘤特异性抗原是肿瘤免疫学研究的新策略,由此方法所获B细胞抗原肽可为进一步寻找T细胞抗原肽,开展肿瘤免疫治疗和诊断提供线索。方法采用SEREX方法,筛选中国人卵巢癌cDNA表达文库,对获得的阳性克隆片段测序鉴定和进行BLAST同源性比较。采用RT－PCR,分析政党组织和肿瘤组织及肿瘤细胞株中6个新的EST片段的表达。结果,所获基因片段大多数为已知抗原基因（20／27）。根据其来源又可归类为结构基因。线粒体基因和调控基因。另外,获6个未知的EST片段。RT－PCR的结果表明,4个EST（EST87888、1750、1754和3533）片 肿瘤和正常组织中均有表达,2个EST在正常组织中未见表达,而在肿瘤组织中有表达,可能是与肿瘤相关或特异的EST片段。结论SEREX方法不失为一种有效筛选卵巢癌肿瘤抗原的新方法。所获肿瘤抗原候选基因,可进一步进行结构和功能的研究。     

癌-睾丸抗原基因在神经胶质瘤干细胞中的表达

背景：癌-睾丸抗原基因在胶质瘤干细胞表达还不甚清楚。 目的：检测癌-睾丸抗原基因在神经胶质瘤干细胞中的表达。 方法：通过神经球培养的方法而分离干细胞。以半定量PCR及实时荧光定量PCR检测癌-睾丸抗原基因在母细胞、干细胞与分化细胞中的表达。 结果与结论：以神经球培养方式从胶质瘤细胞系中可分离出肿瘤球,将肿瘤球培养在含血清的培养基中,它的形态呈贴壁分化,且与母细胞没有区别。半定量PCR及实时荧光定量PCR检测发现与母细胞和分化细胞相比,癌-睾丸抗原基因在干细胞中的表达最高。提示癌-睾丸抗原基因可能为肿瘤干细胞的表面抗原。     

SSX基因家族研究进展

SSX基因家族由9个成员组成,其中SSX-1、SSX-2和SSX-4经常出现在滑膜肉瘤t(X18)染色体易位的SYT-SSX融合基因中.SSX基因家族可编码肿瘤/睾丸抗原,在睾丸以外的正常组织中,除甲状腺微弱表达外,没有发现它们的存在.HOM-MEL-40是最早用重组cDNA表达文库血清学分析技术确定的由SSX-2基因表达的抗原.近来的研究发现蛋白SSX-241-49是CD8+CTL免疫识别的优势表位,而SSX-237-58和SSX-219-34分别是CD4+T细胞识别相关的HLA-DR及HLA-DP限制表位.日本学者也发现SYT-SSX基因融合蛋白断裂点衍生肽是MHC Ⅰ分子HLA-A24和HLA-B7限制的CTL识别的表位.所有这些研究,证明SSX基因家族编码蛋白是肿瘤免疫治疗有前景的靶标之一.     

非自身肿瘤热休克蛋白可用作抗肿瘤疫苗

科学研究业已证明。免疫系统能识别和破坏癌细胞是毋庸置疑的。事实上，大量肿瘤相关抗原或肿瘤特异性抗原都已经得到了鉴定，通常是在通过癌症患者T细胞的识别基础上得出结论的。细胞毒性T淋巴细胞(CIL)杀灭肿瘤细胞的能力被人们认为是肿瘤免疫疗法中最重要的发现之一。     

T细胞识别的肿瘤抗原

在人类肿瘤中已鉴定出很多能为肿瘤特异性ＣＴＬ所能识别的抗原，在它们之中，有的由在肿瘤中表达但处于隐性状态下的基因所编码；有的则由肿瘤中的突变编码。多数人类肿瘤细胞上带有这种能为Ｔ细胞识别的抗原，应用这些抗原进行免疫接种将有一定的临床意义。     

腺病毒介导的B7—1基因转移对小鼠肝癌成瘤性的影响

腺病毒介导的Ｂ７－１基因转移对小鼠肝癌成瘤性的影响黄洪莲王小宁钱其军沈峰谢天培施乐华陈汉吴孟超郭亚军肿瘤免疫基因治疗的主要目的之一是诱导具有杀伤活性的肿瘤特异性Ｔ淋巴细胞，增强其抗肿瘤排斥反应。许多肿瘤都存在肿瘤抗原或肿瘤相关抗原，但缺乏Ｔ细胞激活所...     

B7／BB1分子的生物学特性及其在肿瘤基因治疗中的作用

Ｂ细胞激活抗原Ｂ７／ＢＢ１的基因导入黑色素瘤细胞株、转染的细胞失去了在体内形成肿瘤的能力。本文对Ｂ７／ＢＢ１分子的发现及生物学特性和在肿瘤免疫、基因治疗中的概况作一综述。     

肿瘤免疫——在确立人类肿瘤抗原的基础上面临新的飞跃

1　人类肿瘤抗原的确立1991年比利时科学家Ｂｏｏｎ和同事们经过 2 0年的不懈努力 ,首次报道分离人类恶性黑色素瘤抗原ＭＡＧＥ 1成功 ,是肿瘤免疫学研究的划时代转折。从此 ,一个个肿瘤抗原相继被确定。如今已知ＭＡＧＥ 1属于至少有 17个相关成员的基因家族 ,包括ＭＡＧＥ Ａ1～Ａ12、ＭＡＧＥ Ｂ1～Ｂ4、ＭＡＧＥ 1。之后 ,美国国立癌症研究所Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ也从黑色素瘤分离到ＭＡＲＴ 1、ｇｐ10 0等肿瘤抗原。ＭＡＧＥ系列肿瘤抗原虽是从黑色素瘤分离到的 ,其成员在其他肿瘤也有一定的表达阳性率 ,因而可以认为是肿瘤共同抗原。除…