中药循经敷贴抗豚鼠实验性哮喘的作用机理初探

目的：探讨中药循经敷贴治疗哮喘的作用机理。方法：采用Hutson法豚鼠模型,治疗组隔日诱喘后用中药敷贴30min,对照组诱喘后隔日采用0．9％氯化钠溶液浸润纱布敷贴,比较记录诱喘潜伏期时间。2周后处死,取肺组织,用放射配基竞争结合法比较β受体含量。结果：中药循经敷贴能显著延长哮喘豚鼠诱潜伏期,减轻发作程度,上调哮喘豚鼠肺组织β受体含量。结论：二次实验结果提示,提高β受体含量是中药循经敷贴治疗哮喘的重要机制之一。     

中药外敷治疗哮喘对β受体的影响

目的:探讨中药外敷治疗哮喘的作用机制。方法:采用Hutson法豚鼠模型,治疗组致敏豚鼠隔日诱喘后用中药敷贴30min,对照组隔日诱喘后采用9 g·L~(-1)NS溶液浸润纱布敷贴,2 wk后处死豚鼠,取肺组织;哮喘患者30例,发作期16例,缓解期14例,治疗前后取外周血,用放射配基竞争结合法比较豚鼠肺组织及患者外周血淋巴细胞β受体表达状态。结果:中药透皮治疗能上调哮喘豚鼠肺组织及患者外周血淋巴细胞β受体含量。结论:上调β受体含量可能是中药循经敷贴治疗哮喘的重要机制之一。     

平喘灵对哮喘大鼠IL-4 mRNA和IFN-γ mRNA表达及IgE含量的影响

目的探讨平喘灵对哮喘大鼠IL-4 mRNA和IFN-γ mRNA表达及IgE含量的影响.方法SD大鼠分为空白对照组、模型组、平喘灵大、小剂量组(剂量分别为5.76,2 88 g·kg-1)、地塞米松组(0.81 mg·kg-1)和平喘灵小剂量(2.88 g·kg-1)加地塞米松小剂量组(0.405 mg·kg-1),每组10只.用卵蛋白雾化吸入致敏法制备大鼠哮喘模型,于每天激发前12 h分别灌胃相应剂量的药物,共7 d.采用免疫放射法、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量法分别检测各组大鼠血清和肺泡灌洗液(BALF)中的IgE含量以及肺组织IL-4 mRNA和IFN-γ mRNA的表达量.结果与空白对照组比较,模型组大鼠IgE含量、IL-4 mRNA表达显著升高,IFN-γ mRNA表达显著降低,IL-4/IFN-γ比值明显升高,且引喘潜伏期明显缩短,差异均有显著性(P＜0.05).与模型组比较,平喘灵组血清IgE的含量、IL-4的表达明显降低,IFN-γ的表达明显升高,IL-4/IFN-γ比值明显降低;呼吸状态明显改善,且引喘潜伏期明显延长,均有统计学差异(P＜0.05);地塞米松小剂量加平喘灵小剂量组对上述各项指标的改善作用较平喘灵小剂量组更明显,且在对血清及肺灌洗液IgE含量的调节方面也优于大剂量平喘灵.结论平喘灵可能是通过调节IL-4/IFN-γ平衡,继而调节IgE的产生,从而达到治疗哮喘的目的,且平喘灵与激素具有协同效应.     

麻辛平喘汤对哮喘豚鼠肺组织中IL-5 mRNA表达影响的实验研究

目的研究麻辛平喘汤对哮喘豚鼠肺组织中IL-5 mRNA表达的影响。方法将56只符合实验标准的豚鼠随机分为7组,采用卵蛋白(OVA)腹腔注射致敏与雾化吸入激发的方法建立豚鼠哮喘模型。2周后处死豚鼠,取肺组织,采用RT-PCR法检测IL-5 mRNA的表达情况。结果麻辛平喘汤高、中、低剂量组及正常对照组肺组织IL-5 mRNA表达量较低,与模型对照组相比差异有高度统计意义(P0.01)。高剂量组的IL-5 mRNA表达与正常对照组之间差异无统计意义(P0.05)。结论麻辛平喘汤可以从基因水平上调控IL-5 mRNA转录。     

地氯雷他定对过敏性哮喘豚鼠模型肺组织IL-4R mRNA表达的影响

目的：研究地氯雷他定对过敏性哮喘豚鼠模型肺组织IL-4R mRNA表达的影响。方法：用卵蛋白制备过敏性哮喘豚鼠模型，观察地氯雷他定对过敏性哮喘豚鼠肺组织病理及IL-4R mRNA表达水平的影响。结果：地氯雷他定能显著改善过敏性哮喘豚鼠肺组织病理变化，明显降低肺组织IL-4R mRNA表达水平。结论：降低肺组织IL-4R mRNA的表达可能是地氯雷他定防治哮喘的基因机制。     

秦氏循经敷贴对实验性哮喘豚鼠的作用

目的：探讨中药秦氏循经敷贴对哮喘豚鼠的作用。方法：30只健康豚鼠随机分为空白对照组（A组）、哮喘模型组（B组）和秦氏循经敷贴组（C组）,每组10只。以鸡卵蛋白攻击致敏。C组敷贴秦氏循经敷贴;B组敷贴含生理盐水的医用纱布。于末次敷药后检测豚鼠外周血嗜酸性粒细胞百分比、中性粒细胞百分比和白细胞总数,肺组织和支气管HE染色后观察病理改变。结果：与A组相比,B组外周血嗜酸性粒细胞百分比显著升高（P〈0.05）,C组较B组显著降低（P〈0.05）;中性粒细胞百分比和白细胞总数3组间无显著性差异（P〉0.05）。B组肺组织大量炎症细胞浸润,部分肺泡腔阻塞、实变,肺泡间隔明显增宽,支气管管壁血管扩张、管壁增厚;C组炎症细胞浸润较少,肺泡充气,无间隔增宽;A组炎症细胞浸润程度较轻,无支气管壁增厚。结论：秦氏循经敷贴能改善实验性哮喘豚鼠的肺及支气管的炎症反应,减少外周血嗜酸性粒细胞百分比,对哮喘豚鼠具有治疗作用。     

截喘汤对哮喘模型小鼠外周血浆IL-5、TNF-α及Eotaxin的影响

目的:研究中药截喘汤对哮喘模型小鼠外周血浆白细胞介素-5(IL-5)、肿瘤坏死因子(TNF-α)及嗜酸细胞活化趋化因子(Eotaxin)的影响,探讨其治疗支气管哮喘的作用机制。方法:将84只小鼠随机均分为7组,即正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组、联合用药组及中药低、中、高剂量组,通过中药血清药理学,体内观察不同剂量截喘汤对哮喘模型小鼠外周血IL-5、TNF-α及Eotaxin含量的影响。结果:截喘汤能通过抑制IL-5和TNF-α的合成而阴滞气道变应性炎症(AAI)产生、发展和持续的各个环节,抑制气道高反应性(BHR),并可通过抑制Eotaxin的表达而减少嗜酸性粒细胞(EOS)在肺部的聚集和活化,从而减轻气道EOS浸润性AAI及BHR。结论:截喘汤可为临床用药提供理论依据。     

地塞米松对哮喘豚鼠气道白介素-5、白介素-10mRNA表达及嗜酸性粒细胞凋亡的影响

目的：检测地塞米松对哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中白介素-5（IL-5）mRNA及IL-10 mRNA表达水平及嗜酸性粒细胞（EOS）凋亡率。方法：健康雄性Hartley系豚鼠随机分为地塞米松组、哮喘组和正常对照组。采用原位细胞凋亡（TUNEL）、RTPCR技术检测BALF中EOS凋亡、IL-5 mRNA及IL-10 mRNA表达水平。结果：地塞米松组BALF中的EOS较哮喘组明显下降，EOS凋亡明显上升（P〈0．01）；IL-5 mRNA水平较哮喘组明显下降，IL-10 mRNA水平较哮喘组明显升高（P〈0.05）。结论：地塞米松可以通过减少IL-5 mRNA的表达，增加IL-10 mRNA的表达有效抑制哮喘豚鼠气道EOS的上升，增加EOS的凋亡。     

孟鲁司特对哮喘豚鼠肺血管通透性的影响

目的 研究孟鲁司特（montelukast,MK）对哮喘豚鼠肺血管通透性和肺泡灌洗液（BALF）中一氧化氮（NO）水平的影响,探讨MK拮抗哮喘气道炎症的机制。方法 制备卵白蛋白致敏豚鼠哮喘模型。通过豚鼠引喘潜伏期和跌倒率的变化评价MK对哮喘的拮抗作用;苏木精-伊红（HE）染色观察肺组织炎症的改变;伊文思蓝分光光度法测定哮喘豚鼠肺血管的通透性;硝酸还原酶法测定BALF中NO的含量。结果 MK治疗组致敏豚鼠引喘潜伏期延长,跌倒率降低,肺组织炎症减轻;肺组织提取液中伊文思蓝含量及BALF中NO含量显著降低,与模型组相比差异有显著性。结论 降低BALF中NO水平和肺毛细血管通透性,是MK拮抗哮喘气道炎症的重要机制。     

氮卓斯汀对豚鼠哮喘的拮抗作用及相关机制

目的:研究组胺H1受体拮抗剂——氮卓斯汀(azelastine,AZT)对豚鼠哮喘的拮抗作用,探讨氮卓斯汀拮抗哮喘的可能机制。方法:以卵白蛋白致敏豚鼠,制备哮喘模型,通过豚鼠引喘潜伏期和跌倒率的变化评价氮卓斯汀对哮喘的拮抗作用;分别计数外周血和支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞的数量;采用ELISA法检测血清和BALF中IL-4和IL-5的质量浓度。结果:与模型组相比,氮卓斯汀能显著延长致敏豚鼠的引喘潜伏期,降低跌倒率;氮卓斯汀显著减少哮喘豚鼠血清和BALF中嗜酸性粒细胞的数量,降低血清和BALF中IL-4和IL-5的水平。结论:降低IL-4和IL-5的水平,减少血中嗜酸性粒细胞的数量及其在气道中的浸润,可能是组胺H1受体拮抗剂——氮卓斯汀拮抗哮喘的机制之一。     

三伏咳喘膏治疗支气管哮喘的实验研究

摘要： 目的 观察三伏咳喘膏贴敷治疗对哮喘豚鼠白细胞介素-18(IL-18)、 嗜酸性粒细胞 （EOS） 及肺组织病理的影响, 并探讨其作用机制。方法 将 60 只豚鼠随机分为对照组、 模型组、 治疗 1 组（穴位贴药 1 h）, 治疗 2 组（穴位贴药 3 h） ,治疗 3 组 （穴位贴药 6 h）, 治疗 4 组 （注射地塞米松） ,每组 10 只。对照组腹腔注射生理盐水 1 mL, 其余组均腹腔注射 10%的鸡卵清白蛋白 1 mL 致敏, 饲养 14 d 后, 于第 15 天起将对照组之外的所有豚鼠置于 4 L 密闭玻璃罐中, 用 1%的鸡卵清白蛋白生理盐水对豚鼠雾化吸入, 30～60 s/次, 1 次/d, 连续 1 周。模型建立后第 2 天, 对照组及模型组于肺腧、 心腧、 膈腧处涂抹生理盐水, 纱布包扎固定; 治疗 1～3 组, 于同样穴位贴敷三伏咳喘膏（5 mm×5 mm×1 mm）, 3 组分别贴治 1 h、 3 h、 6 h; 治疗 4 组于腹腔注射地塞米松磷酸钠注射液, 相应穴位处涂抹生理盐水固定;各组均是每天贴敷 1 次, 6 h/次, 共 7 d。结果 与模型组比较, 咳喘膏穴位贴敷各组血 IL-18、 EOS 水平明显下降, 病理学改变明显减轻, 穴位贴药 3 h 组效果最好。结论 咳喘膏穴位贴敷对哮喘豚鼠血 IL-18、 EOS 有明确影响, 可减轻哮喘豚鼠模型气道炎性损伤。     

氨茶碱对哮喘豚鼠嗜酸细胞IL-3、IL-5及GM-CSF受体表达的影响

目的　观察氨茶碱(AM)对嗜酸细胞(Eos)上白介素 5受体α(IL 5Rα)、白介素 3受体α(IL 3Rα)、粒 巨噬细胞集落刺激因子受体α(GM CSFRα)及共同β链(βcR)mRNA表达的影响,探讨茶碱促进哮喘Eos凋亡的机制。方法　 18只健康豚鼠随机分为正常组、哮喘组、茶碱组,每组 6只,以卵蛋白致敏激发制作豚鼠哮喘模型,密度梯度分离法分离支气管灌洗液(BALF)中的低密度Eos(HEos)及正常密度Eos(NEos),以末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡,原位杂交检测各受体mRNA表达,RT PCR法检测EosIL 5Rα、IL 3Rα相对含量。结果　哮喘组HEos及NEos凋亡 (4±2, 3±2)明显低于正常组(8±2, 7±2,P<0 01),而哮喘组细胞数 (75±13, 51±11 )明显高于正常组(5±2, 10±3,P<0 01)。用AM 24h后不同密度Eos数量 ( 36±14, 33±8 )均明显低于哮喘组 (P<0 01, 0 05),AM组Eos凋亡 ( 15±5, 14±4 )明显高于哮喘组(P<0 01);哮喘组Eos表达IL 5、IL 3及GM CSFα受体mRNA,明显低于正常组 (P<0 01, 0 05 ),AM组中低密度Eos表达各受体mRNA均明显高于哮喘组 (P<0 05 );而哮喘组βcR表达(41±6, 39±7)表达显著高于正常组 (28±5,26±5,P<0 01),AM组βcR表达与哮喘组比较差异无显著性(P>0 05)。HEos表达各受体与NEo     

火把花根片对哮喘豚鼠抗炎机制及其对肺泡灌洗液IL-5受体mRNA表达的影响

目的　探讨火把花根片对哮喘豚鼠抗炎作用机制及其对肺泡灌洗液 (BALF)白介素 5(IL 5)受体mRNA表达的影响。方法　 3 2只健康豚鼠随机分为 4组 :正常对照组 ,哮喘组 ,地塞米松治疗组 ,火把花根片治疗组。后 3组制作成哮喘豚鼠模型 ,再激发用药。测定肺泡灌洗液的细胞总数和细胞分类 ,观察肺组织的病理改变 ,进行BALF的IL 5受体mRNART PCR半定量分析。结果　火把花根片治疗组BALF的嗜酸性粒细胞 (Eos)数较正常组和哮喘组 ,差异均有显著性 ,分别为P <0 0 5和P <0 0 1。肺组织病理切片 ,火把花根片组充血水肿明显 ,但Eos肺组织浸润较哮喘组有明显减少。BALF的IL 5受体mRNART PCR半定量分析显示 ,火把花根片治疗组与地塞米松治疗组差异无显著性 ,P >0 0 5,但和正常组与哮喘组比较差异有显著性 ,P <0 0 1。结论　火把花根片能抑制哮喘豚鼠的气道炎症 ,为临床治疗哮喘提供初步的理论基础     

雷公藤内酯醇诱导哮喘豚鼠嗜酸性粒细胞凋亡的作用研究

本文研究了雷公藤内酯醇诱导哮喘豚鼠肺内嗜酸性粒细胞（EOS）凋亡的作用,结果发现,雷公藤内酯醇能诱导哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液中的EOS凋亡和EOS的数量减少,并抑制EOS的bcl-2表达,以上提示雷公藤内脂醇能改善哮喘豚鼠肺内的EOS浸润,具有潜在的临床应用价值。     

Decreased serum IgE level, decreased IFN-gamma and IL-5 but increased IL-10 production, and suppressed cyclooxygenase 2 mRNA expression in patients with perennial allergic rhinitis after treatment with a new mixed formula of Chinese herbs.

A new mixed formula of Chinese herbs containing Shin-yi-san + Xiao-qing-long-tang + Xiang-sha-liu-jun-zi-tang by the weight of 9 + 3 + 3 g/day was prescribed for the treatment of patients with perennial allergic rhinitis for 3 months (the composition of each herb is shown in the tables of the article). We classified the patients into high (H-IgE) and low IgE (L-IgE) groups according to the titer of serum total IgE (> 200 KIU/l in H-IgE vs. < 200 KIU/l in L-IgE) and the presence of house dust mite-specific IgE. The nasal symptomatic score in the high IgE group was significantly improved from 7.19 +/- 0.18 before treatment to 2.67 +/- 0.37 after treatment. In addition, the serum total and house dust mite-specific IgE level were also decreased after treatment. For elucidating the working mechanism of the mixed formula, the Th1 (IFN-gamma) and Th2 (IL-4, IL-5, IL-10 and IL-13) cytokine production by phytohemagglutinin (PHA)-stimulated mononuclear cells (2 x 10(6) cells/ml) and cyclooxygenase type 2 (COX-2) mRNA expression in LPS or IL-13-stimulated PMN were compared before and after 3 months of treatment. We found that the mixed formula treatment significantly enhanced IL-10 but decreased IFN-gamma and IL-5 production by PHA-stimulated mononuclear cells. The IL-5 production was also decreased by PHA-stimulated lymphocyte. In addition, the COX-2 mRNA expression in stimulated PMN was significantly suppressed after treatment. These results suggest that the new mixed formula treatment is beneficial to the patients with perennial allergic rhinitis via modulating the function of lymphocytes and neutrophils.     

孟鲁司特对哮喘豚鼠气道嗜酸性粒细胞凋亡及Fas mRNA表达的影响

目的研究白三烯受体拮抗剂孟鲁司特(montelukast,MK)对哮喘豚鼠气道嗜酸性粒细胞(eosinophil,Eos)凋亡和Fas mRNA表达的影响。方法以卵白蛋白致敏豚鼠制备哮喘模型。用密度梯度离心法分离并计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中的嗜酸性粒细胞；采用TUNEL技术原位检测嗜酸性粒细胞凋亡；通过逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测嗜酸性粒细胞Fas mRNA的表达。结果孟鲁司特能显著降低哮喘豚鼠BALF中Eos的数量；在孟鲁司特治疗组，嗜酸性粒细胞凋亡指数明显升高，Fas mRNA的表达显著增强，与模型组比较均有显著性差异。结论嗜酸性粒细胞凋亡与Fas mRNA表达增加高度相关；增强气道嗜酸性粒细胞Fas mRNA的表达，促进其凋亡，可能是孟鲁司特拮抗哮喘气道炎症的一个重要机制。     

异丁司特对哮喘豚鼠气道嗜酸性粒细胞凋亡的作用及其机制

研究异丁司特 (ibudilast) 对哮喘豚鼠气道嗜酸性粒细胞 (eosinophil, EOS) 凋亡的作用及其机制。采用卵白蛋白致敏法制备豚鼠哮喘模型。收集支气管肺泡灌洗液 (BALF) 并进行白细胞计数及分类计数, TUNEL技术原位检测EOS凋亡, RT-PCR技术检测EOS的Fas mRNA表达, 酶联免疫吸附 (ELISA) 法测定BALF中粒细胞-巨噬细胞刺激因子 (GM-CSF) 及白介素-5 (IL-5) 的含量。结果表明, 异丁司特可明显减少哮喘豚鼠的白细胞总数和EOS数目; 在异丁司特剂量组, EOS凋亡细胞明显增多, Fas mRNA的表达显著增强, BALF中GM-CSF、IL-5含量显著降低, 与模型组比较有显著性差异。因此, 异丁司特抑制哮喘豚鼠气道EOS数目的增加、诱导EOS凋亡、增强Fas mRNA的表达、降低GM-CSF、IL-5含量可能是其拮抗哮喘的重要机制。