胃腺癌组织中碱性成纤维细胞生长因子mRNA的表达

背景碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是一种强有力的血管生成因子,与肿瘤发生关系密切。目前有关bFGF与胃癌关系的研究不多。目的研究胃腺癌组织中bFGFmRNA的表达,探讨bFGF在胃腺癌发生、发展中的作用。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT鄄PCR)检测20例胃腺癌组织和相应癌旁组织(距肿瘤边缘5cm以上)中bFGFmRNA的表达,以恒定表达的GAPDH作为内参照。计算bFGFmRNA与GAPDHmRNA表达积分光密度值的比值(b/G),以反映组织中bFGFmRNA的相对表达量。结果胃腺癌组织的b/G比值显著高于癌旁组织(1.3173±0.1578对0.9427±0.1402,P<0.01);其中低分化腺癌的b/G比值显著高于高中分化腺癌(1.4232±0.1225对1.2013±0.1340,P<0.05),有淋巴结转移者的b/G比值显著高于无淋巴结转移者(1.4075±0.1375对1.1962±0.1286,P<0.05)。结论bFGF与胃腺癌的恶性程度和转移密切相关,对其发生、发展具有重要影响。     

核干细胞因子的研究进展

干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化增殖潜能的原始细胞，根据干细胞的来源及分化潜能，可将干细胞分为胚胎干细胞和成体干细胞，肿瘤细胞无限增殖特性与干细胞相似，肿瘤可能通常起源于正常干细胞的转化，相似的信号通路可能既调节干细胞也调节癌细胞的自我更新，且肿瘤细胞中可能包含有“肿瘤干细胞。（cancer stem cells）．它们是一些极少的具有自我更新不定潜能的驱使肿瘤形成的细胞。正是这群特异性细胞促使肿瘤的产生和发展。     

实时荧光定量RT-PCR和寡核苷酸芯片方法分析食管腺癌组织中基因的表达

目的采用实时荧光定量RT—PCR和寡核苷酸芯片技术分析食管腺癌基因表达的特征。方法应用寡核苷酸芯片筛选6例食管腺癌基因表达谱,实时荧光定量RT—PCR验证其中8个基因的表达变化。结果2倍差异表达基因（DEGs）中,上调基因共212个,下调基因共126个;涉及细胞周期相关基因、信号转导相关基因、血管生成相关基因、细胞增殖相关基因、凋亡抑制基因、抑癌基因、黏附和代谢等。实时荧光定量RT-PCR和寡核苷酸芯片技术对8个基因的检测结果一致,不仅变化方向相同,而且表达值非常接近。结论食管腺癌的发生、发展涉及多基因多步骤,是一个复杂的过程。寡核苷酸芯片和实时荧光定量RT-PCR分析基因表达变化都是可信的,基因芯片筛选基因表达谱具有高通量大规模的特点,而实时荧光定量RT-PCR则适合单个基因表达变化的研究,两者互为补充和印证。     

Syk基因在食管鳞癌组织中的表达及临床意义

目的:分析食管鳞癌组织及其对应癌旁组织中Syk蛋白和mRNA的表达,探讨其与食管鳞癌临床恶性生物学行为的关系.方法:采用免疫组织化学法检测48例食管鳞癌组织及其对应癌旁组织中Syk蛋白的表达;RT-PCR法检测143例食管鳞癌组织及其对应癌旁组织中PSyk mRNA的表达,并观察其与食管鳞癌患者肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移的关系.结果:食管鳞癌组织Syk蛋白表达阳性率显著低于癌旁组织(16.67% vs 89.58%,P<0.05);Syk蛋白表达与肿瘤删分期相关(X<'2>=6.713,P<0.05):Syk在淋巴结转移组中的阳性表达率显著低于无淋巴结转移组(3.03% vs 29.41%,P<0.05);Syk表达与肿瘤大小无关(X<'2>=0.017,P>0.05).食管鳞癌组织中Syk mRNA的表达量明显低于其在对应癌旁组织中的表达量(t=-11.27,P<0.05).结论:Syk蛋白和mRNA在食管鳞癌中表达缺失与其发生及转移倾向相关,Syk可能是食管鳞癌的肿瘤抑制基因,可能作为分子标记而用于食管鳞癌的早期诊治.     

Neuropilin-1在食管鳞癌中的表达及其意义

目的探讨Neuropilin-1(NRP-1)在食管鳞癌中的表达及其生物学和临床意义.方法取42例新鲜原发食管鳞癌和邻近正常食管粘膜标本,所有的标本均经病理诊断确诊.用RT-PCR方法检测每例患者癌组织和相应癌旁正常组织中NRP-1mRNA的表达.癌与癌旁正常组织表达值之间的比较采用配对t检验,癌组织的表达值与临床病理因素之间的关系采用成组t检验,检验结果以P＜0.05为有意义.结果在42例患者中,37例NRP-1mRNA表达强于相应癌旁正常组织,占89.00%,肿瘤直径≥3 cm组、外膜浸润组和淋巴结转移组的NRP-1mRNA表达明显增高.癌组织中NRP-1mRNA的表达与肿瘤分化程度和性别无关.结论在食管鳞癌中NRP-1mRNA的表达明显高于癌旁正常组织,并且与食管鳞癌的发展、浸润和转移有关.     

胃腺癌组织中CCAR1 mRNA、蛋白表达及其意义

目的检测细胞周期与细胞凋亡调控蛋白(CCAR)1 mRNA、蛋白在胃腺癌组织中表达及其临床意义。方法通过免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(SP)法、Western印迹法和实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)技术检测60例胃腺癌组织及40例癌旁正常胃黏膜组织中CCAR1 mRNA、蛋白表达。结果胃腺癌组织中CCAR1 mRNA、蛋白的表达量较癌旁正常胃黏膜组织明显升高(P0.05),表达水平随肿瘤分化程度的降低而显著增加(P0.05)。结论随分化程度的降低CCAR1 mRNA、蛋白的表达量增加,其表达的异常升高与胃腺癌的发生密切相关。     

Ghrelin在食管腺癌、Barrett’s食管黏膜中的表达

目的:研究Ghrelin在食管腺癌、Barrett’s食管(barrett esophagus,BE)和正常食管黏膜中的表达.方法:选取30例食管腺癌患者、35例BE患者及35例健康对照,所有受试者均行胃镜检查,记录内镜下表现,在食管部位四象限活检取材,标本经10%甲醛固定,石蜡包埋,连续切片,分别用于改良HE染色及免疫组织化学,采用免疫组织化学方法检测Ghrelin在食管黏膜组织中的表达水平.结果:Ghrelin在食管腺癌组食管黏膜中的表达水平低于健康对照组和BE组,在BE组食管黏膜中的表达高于健康对照组,差异有统计学意义(1.34±0.51vs4.86±0.82vs3.54±0.79,F=27.21,P<0.05).食管腺癌组中,Ghrelin在中高分化腺癌患者食管黏膜的表达水平高于低分化腺癌,差异有统计学意义(Z=4.60,P<0.05).结论:Ghrelin在BE、食管腺癌黏膜中的表达不同,提示了Ghrelin在食管癌变前和癌变后的变化.食管腺癌组织恶变过程中其Ghrelin的分泌机制发生了改变,且与食管腺癌细胞分化程度有关.     

RT-PCR半定量检测外周血单个核细胞中fgl2凝血酶原酶基因的表达

目的：探讨逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)半定量检测fgl2凝血酶原酶在正常人外周血单个核细胞(PBMNC)中的表达及其规律。方法：根据genbank中fgl2凝血酶原酶基因序列设计一对引物，以β—actin的表达为内参照，采用RT—PCR方法半定量检测体外培养体系中不同时点的PBMNC中fgl2凝血酶原酶mRNA的表达及变化规律。结果：fgl2凝血酶原酶mRNA的表达水平在新鲜分离的PBMNC中表达最高，随着培养时间的延长而逐渐降低，至72h几乎不能检测出。结论：RT—PCR方法半定量检测PBMNC中fgl2凝血酶原酶mRNA灵敏度高；PBMNC中的fg12凝血酶原酶在体外培养体系中不能持续表达。     

αB-crystallin基因在食管癌组织中的表达及其意义

目的 探讨αB-crystallin基因在食管癌组织中的表达及其与食管癌临床病理的关系.方法 采用RT-PCR方法检测食管癌组织及其正常组织黏膜中αB-crystallin基因的表达.结果 αB-crystallin基因在食管癌组织中表达阳性率明显高于正常组织黏膜,深层浸润者的表达阳性率明显高于浅层浸润者,较大肿瘤者中的表达阳性率明显高于较小肿瘤者,有淋巴结转移者中的表达阳性率明显高于无淋巴结转移者(P均＜0.05);αB-crystallin 基因表达与患者年龄及肿瘤的分化程度无关(P＞0.05).结论 αB-crystallln基因的高表达可能与食管癌的癌变及侵袭转移的发生有关.     

Barrett食管和食管腺癌组织中Bcl-2和p53蛋白表达及其相关性研究

目的:探讨Barrett食管和食管癌组织中Bcl-2和p53蛋白的表达与预后的关系。方法:经胃镜取材,用免疫组织化学方法检测Barrett食管和食管癌组织中Bcl-2和p53蛋白的表达。结果:40例患者分为无、轻、中、重度不典型增生及食管腺癌5组,各组中Bcl-2蛋白表达阳性率分别为9.1%、14.3%、30.0%、60.0%、71.4%,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。各组中p53蛋白表达阳性率则分别为9.1%、28.6%、30.0%、80.0%、71.4%,除重度不典型增生与食管癌组间差异无显著性意义外,其它各组间差异有显著性意义(P<0.05)。结论:Barrett食管组织中Bcl-2和p53蛋白的表达程度和食管癌的发生率有一定关系。     

RNAi对结肠癌SW480细胞Nucleostemin基因表达的影响

目的:探求RNA技术干扰人结肠癌SW480细胞Nucleostemin(NS)基因后,结肠癌SW480细胞NucleosteminmRNA和蛋白水平的表达,及细胞增殖情况变化.方法:构建Nucleostemin特异性真核表达载体,和脂质体共同转染SW480细胞后,采用Real-timePCR和Westernblot方法检测NS基因mRNA和蛋白变化,MTT法检测细胞的增殖情况.结果:与对照组相比较,RNAi干扰细胞后NSmRNA表达明显下降;NS蛋白表达亦明显下降(1.069±0.368,1.003±0.313,1.901±0.817,P<0.05;1.069±0.368,1.003±0.313,2.035±0.665,P<0.05),空白对照组(仅加入脂质体)和阴性对照组(RNAi错义序列)间无显著差异(2.035±0.665,1.9001±0.817,P>0.05).MTT显示RNA干扰后细胞增殖明显受到抑制.结论:通过特异性RNA干扰NS基因后,结肠癌SW480细胞增殖受到抑制.     

Nucleostemin基因沉默对食管癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨RNA干扰沉默Nucleostemin(NS)基因后对食管癌Eca-109细胞株增殖和凋亡的影响。方法用NS基因特异性siRNA表达载体转染食管癌Eca-109细胞株,通过绘制细胞生长曲线和克隆形成实验检测细胞增殖能力;CCK-8法测试细胞增殖抑制率;RT-PCR法检测NS基因表达量的变化,TUNEL法和DNA Ladder检测细胞凋亡情况。结果与对照组相比,S组细胞的增殖速率降低,24、48及72h细胞增殖抑制率分别为60.32%、72.29%和86.00%;NS基因表达量下降;细胞凋亡指数增加(18.28%),可见梯状DNA降解带。结论 NS基因沉默导致食管癌Eca-109细胞株增殖抑制,凋亡增加。     

Notchl信号在食管癌中的表达

目的检测Notchl和JAGl在食管癌的表达,分析Notch在食管癌中的作用和意义。方法应用RT-PCR检测126例食管癌组织和52例癌旁正常食管组织中Notchl和JAG1的表达,分析两者的表达水平与临床病理特征的关系。结果癌组织与癌旁组织中Notchl表达率分别为21．4％（27／126）和61．5％（32／52）,两者比较差异有显著性（P〈0．05）;癌组织中Notchl标准化系数低于癌旁组织,标准化系数中位数分别0．63和0．82,两者比较差异有显著性（P〈0．05）。JAGl在癌旁组织的表达率为10％（5／52）,在癌组织中无表达。Notchl表达与肿瘤大小、分化程度的相关性均有显著性差异（P〈0．05）。结论Notchl表达失调可能与食管癌发生发展相关。     

胶原含量变化在食管支架术后再狭窄形成中的意义

目的 研究食管支架术后再狭窄组织中胶原纤维含量的变化及其意义。方法 选择16只成年健康实验犬，均分为4组，采用“自体阔筋膜移植固定法”植入“Z”型食管支架，分别于术后1、2、4、8周处死动物，取出置架部位的食管组织，进行大体形态，光学显微镜，电子显微镜观察；经特殊染色，计算胶原纤维的体积密度，同时采用放免方法检测组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量；氨基酸成分分析法检测组织中羟脯氨酸及氨基酸总量。结果 术后1、2周，食管组织炎性反应明显，局部有广泛肉芽组织形成及部分纤维化，某些部位组织开始向管腔内生长；组织中成纤维细胞处于旺盛的增殖及分泌状态，羟脯氨酸及氨基酸总量较正常明显升高，术后4、8周，管腔明显狭窄，局部出现大量的纤维结缔组织，炎性细胞显著减少，术后4周内组织中胶原纤维的染色强度呈上升趋势，4周后胶原含量则趋向于稳定，与再狭窄的病理过程基本一致，Ⅰ型胶原羧基端肽（PICP），Ⅲ型胶原氨基端肽（PⅢNP）的检测结果变化与胶原染色基本一致，术后4周组织的氨基酸含量较术后2周升高显著，术后8击与4周的氨基酸水平基本一致。结论 再狭窄主要表现为纤维化，术后4、8周随着炎性反应的减弱，纤维化过程渐趋稳定，组织中胶原纤维尤其是Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量在支架术后4周内呈上升趋势，4周后逐渐稳定，与再狭窄的病理过程基本一致。     

Limited value of overhead films in esophageal studies

In 200 barium examinations of the esophagus, the routine use of three overhead films made no substantive contribution to better diagnosis. These data suggest that except as requested by the fluoroscopist, overhead films may be omitted from esophageal studies.     

NI—Ti网状食管支架术后局部血流量变化分析

目的 研究实验犬食管支架术后0．5、24小时局部粘膜血流量的变化。方法 选择成年、健康犬12只,分别置入NI－Ti网状自扩张食管支架,采用多普勒血流仪检测支架术后0．5、24小时局部粘膜血流量的变化,与正常食管粘膜进行比较。结果 支架术后0．5、24小时食管局部粘膜血流量较正常食管均明显减少。结论 支架置入可导致食管局部粘膜血流量明显降低,从而促进粘膜的损害,说明支架对食管壁具有明显的损伤作用。     

Esophageal intramural pseudodiverticulosis associated with cervical esophageal web

A case of esophageal intramural pseudodiverticulosis (EIPD) is reported in which a cervical esophageal web was responsible for dysphagia. A review of previous reports indicates an increased incidence of webs among patients with EIPD, suggesting a true association. A cervical web should be considered in patients with EIPD when no other esophageal stricture accounts for their dysphagia.     

多巴胺调控实验性梗阻性黄疸围手术期肾髓质水通道蛋白2表达

目的:探讨梗阻性黄疸围手术期应用小剂量多巴胺对肾髓质水通道蛋白2(aquaporin 2)蛋白表达影响.方法:♂wistar大鼠70只随机分为4组,分别为对照组(n=10)、梗阻性黄疸组(n=20)、多巴胺5μg组(n=20)和多巴胺10μg组(n=20).梗阻性黄疸组及多巴胺组大鼠全身麻醉后建立梗阻性黄疸动物模型;对照组大鼠行假手术.7d后全麻下解除胆管梗阻,对照组再次行假手术.多巴胺组于胆管再通手术之前于股静脉套管针穿刺泵入多巴胺,剂量分别为5μg/(kg·min)和10μg/(kg·min);而假手术组及梗阻性黄疸组大鼠泵入9g/L生理盐水,泵注持续2h,并将各组动物随机均分为立即取材组和24h后取材组.腔静脉血离心后收集血清冻存检测胆红素、肌酐和尿素氮;分离肾脏髓质冻存,免疫印迹法(Western blotting)法检测aquaporin 2的表达.结果:解除梗阻早期鼠血清胆红素水平下降.血尿素氮及肌酐未见明显改变.通过Western blotting对肾髓质aqp2表达测定发现,梗阻性黄疸组解除梗阻0h取材组aqp2表达较对照组明显下降(15 665±1181 vs 21 966±1544,P<0.01),而解除梗阻24h后aqp2表达出现明显上升(36 490±1822 vs 21 917±2661,P<0.01).多巴胺5μg组0与24h aqp2表达更接近CO组(16 010±646,22 715±575 vs 21 966±1544,21 917±2661);10μg组各时间点aqp2表达与梗黄组接近(13 581±1662,32 313±1453 vs 15 665±1181,36 490±1822),未见多巴胺有明显调节aqp2表达作用.结论:胆管梗阻损伤肾脏集合管上皮细胞结构并抑制水重吸收功能;低浓度多巴胺可调控集合管水通道蛋白2表达.