依达拉奉对脑出血大鼠神经保护作用的实验研究

目的 研究依达拉奉对脑出血后神经功能缺损、细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响.方法 应用立体定向技术,将自体不凝血注入大鼠尾状核区制备脑出血模型.110只Wistar雄性大鼠,随机分成4组:正常组、假手术组、ICH对照组、依达拉奉治疗组,后3组分为7个亚组.应用免疫组织化学法及原位细胞凋亡检测脑出血灶周围组织Bcl-2、Bax表达及凋亡细胞.结果 与对照组比较,依达拉奉干预后48～168 h大鼠神经行为学评分明显减少(P＜0.05),ICH对照组及依达拉奉治疗组术后6 h血肿周围皮质原位末端标记(TUNEL)、Bcl-2、Bax阳性细胞明显增加,并持续增多,72 h达到高峰,120 h阳性细胞数下降,各时间点与假手术组比较差异有显著性(P＜0.01).依达拉奉治疗组6～168 h TUNEL、Bax阳性细胞数明显少于同时点ICH对照组(P＜0.01).依达拉奉治疗组术后6～68 h Bcl-2阳性细胞数较同时点ICH对照组明显增加(P＜0.01).Bax蛋白表达与细胞凋亡呈正相关(r=0.865,P＜0.01),Bax/Bcl-2与细胞凋亡呈正相关(r=0.453,P＜0.01). 结论凋亡机制参与了脑出血后继发性损伤的过程,依达拉奉可能通过上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,减轻脑出血后的细胞凋亡,对脑出血后神经损伤起保护作用.     

依达拉奉对脑出血大鼠血肿周围组织Bcl-2与Bax蛋白表达的影响

目的探讨依达拉奉对脑出血大鼠血肿周围组织Bcl-2与Bax蛋白表达的影响。方法 108只健康雄性Wistar大鼠,随机分为正常组、假手术组、脑出血组和依达拉奉治疗组。后二组又分为3h、6h、12h、1d、2d、3d、5d、7d 8个亚组,每组6只。采用大鼠尾动脉自体不凝血50μl注入尾状核区建立脑出血模型。免疫组化法检测Bcl-2与Bax蛋白表达变化。结果与脑出血组相比,依达拉奉治疗组于出血后6h、12h、1d、2d、3d、5d、7d血肿周围组织Bcl-2增加,Bax蛋白表达减少（P〈0.05或P〈0.01）。结论依达拉奉能通过上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,对脑出血后血肿周围脑组织损伤有保护作用。     

依达拉奉对急性脊髓损伤大鼠的抗细胞凋亡和神经保护作用的实验研究

目的 探讨依达拉奉对急性脊髓损伤大鼠的抗细胞凋亡和神经保护作用机制.方法 将120只SD大鼠随机分为3组:假手术组(n＝20)、对照组(n＝50)和治疗组(n＝50),采用改良的Allen法,制成中度脊髓损伤大鼠模型.假手术组行椎板切除,不用任何药物;治疗组注射依达拉奉3 mg·kg-1,每隔12 h重复一次,直至相应时点;对照组仅给予等量生理盐水.各组于术后6、24、48、72、120 h 5个时点分别取样检测脊髓组织含水量及丙二醛(MDA)的含量;TUNEL法检测各组脊髓中的神经细胞凋亡数;免疫组化检测各组脊髓组织Bcl-2基因表达.结果 治疗组各时点脊髓组织含水量、MDA含量及细胞凋亡数均低于对照组(P<0.05或P＜0.01),Bcl-2蛋白表达显著高于对照组(P<0.01).结论 依达拉奉能降低脊髓组织MDA含量,减轻脊髓水肿,上调Bcl-2表达,抑制细胞凋亡,减轻脊髓继发损伤,从而达到其对大鼠脊髓损伤的抗细胞凋亡和神经保护作用.     

福州市某综合性医院城镇老年患者住院费用调查与分析

目的:研究依达拉奉对急性脑缺血大鼠脑自由基水平变化和脑源性神经生长因子(BDNF)表达的影响,并探讨其可能机制.方法:采用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血-再灌注模型,分为假手术组、生理盐水对照组和依达拉奉组.每组分为6、12、24、48 h 4个亚组.检测各组脑组织不同时间点丙二醛(MDA)、过氧化物歧化酶(SOD)含量,用RT-PCR和Western-blot检测皮层BDNF mRNA和蛋白质表达变化.结果:依达拉奉干预组显著降低MDA含量(P<0.01),增加SOD活性(P<0.05),与对照组比较有统计学差异.依达拉奉组BDNF mRNA表达水平明显高于对照组,表达时相延长.BDNF蛋白表达亦较对照组明显增加.结论:依达拉奉能显著降低MDA含量,增加SOD水平,具有明显的清除自由基作用,并能显著增加缺血再灌注后脑皮层BDNF的表达,推测依达拉奉还具有清除自由基以外的脑保护作用.     

依达拉奉对大鼠急性脊髓损伤后Caspase-3、Bcl-xl表达影响

目的:研究依达拉奉对大鼠急性脊髓损伤后Caspase-3、Bcl-xl表达影响,探讨其对脊髓损伤后神经细胞的保护作用机制。方法:80只SD大鼠,随机分为假手术组(n=16),ASCI盐水组(n=32)和ASCI治疗组(n=32),采用改良的Allen法,制成中度脊髓损伤大鼠模型;各组按术后3h、6h、24h、48h随机分为4个亚组;检测各亚组脊髓组织MDA的含量;以免疫组化检测各亚组脊髓组织Caspase-3表达和Bcl-xl基因表达。结果:ASCI盐水组MDA含量、Caspase-3阳性细胞表达和Bcl-xl蛋白表达水平均明显高于假手术组;与盐水组相比,依达拉奉治疗组MDA含量和Caspase-3阳性细胞表达水平均下降,而Bcl-xl蛋白表达水平显著增高。结论:依达拉奉可抑制脊髓损伤后神经细胞凋亡,此作用可能与其减轻氧化激化、减弱Caspase-3表达和增强Bcl-xl表达水平有关。     

依达拉奉对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后JAK2/STAT3信号通路的影响

目的 探讨依达拉奉对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后神经功能损伤、细胞凋亡及P-JAK2,P-STAT3蛋白表达的影响.方法 雄性SD大鼠40只,随机分为假手术组、脑缺血再灌注组、生理盐水治疗组、依达拉奉治疗组,采用大脑中动脉线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,治疗组于脑缺血开始时及再灌注后12 h分别腹腔注射依达拉奉3 mg/kg或等量生理盐水,于24 h后进行大鼠神经行为学评分;应用免疫组织化学及Western b1otting检测P-JAK2,P-STAT3蛋白表达水平的变化;利用原位缺口末端标记法(TUNEL法)研究神经细胞凋亡的变化.结果 与假手术组及生理盐水治疗组相比,依达拉奉治疗组大鼠神经行为学评分明显减少(P＜0.01);P-JAK2,P-STAT3免疫阳性细胞及蛋白表达明显减少(P＜0.01);凋亡细胞也减少(P＜0.01).结论 依达拉奉尚能通过抑制与炎性细胞因子及氧化应激有密切关系的JAK2/STAT3信号转导通路显著减轻脑缺血再灌注损伤后神经损伤.     

依达拉奉对脑出血大鼠细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的研究依达拉奉对脑出血大鼠血肿周围脑组织细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响，探讨其对脑出血后脑组织损害的保护作用。方法36只SD大鼠随机分为依达拉奉组、脑出血组和假手术组，每组12只。用尾状核注射自体血法建立脑出血模型；检测丙二醛（MDA）含量，以TUNEL法及免疫组化法检测神经细胞凋亡数及Bcl-2、Bax蛋白表达的变化。结果出血组脑组织MDA含量、细胞凋亡数和Bcl-2、Bax蛋白表达水平均明显高于假手术组；与出血组相比，依达拉奉组MDA含量、细胞凋亡数与Bax蛋白表达水平均下降，而Bcl-2蛋白表达水平显著增高。结论依达拉奉可抑制出血后神经细胞凋亡，此作用可能与其减轻氧化应激、上调Bcl-2和下调Bax蛋白表达水平有关。     

依达拉奉对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经保护作用的研究

目的 通过制造大鼠缺血模型,探讨缺血及再灌注后氧自由基清除剂依达拉奉(Edaravone)对大鼠脑皮质内谷氨酸含量的影响.方法 线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型,分假手术组、盐水组、依达拉奉组,缺血30 min再灌注120 min,应用微透析技术观察大鼠脑内谷氨酸含量的变化.结果 脑缺血后30 min及再灌注20 min盐水组和依达拉奉组皮质内谷氨酸含量有显著增加.以盐水组最明显;两者与假手术组比较差异均有极显著性意义(均P<0.01),其余时间点与假手术组比较差异无显著性意义(均P>0.05).且依达拉奉组在以上时间内测得谷氨酸含量低于盐水组(P<0.05).其余时间点两者比较差异无显著性意义(均P>0.05).结论 依达拉奉对大鼠脑缺血再灌注致脑损伤有保护作用,其机制可能与拮抗氧自由基及抑制谷氨酸的释放有关.     

依达拉奉对实验性蛛网膜下隙出血后脑损伤的保护作用

目的 观察依达拉奉对蛛网膜下隙出血后脑组织丙二醛(MDA)含量及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响.方法 采用血管内穿刺法建立蛛网膜下隙出血(SAH)模型,将24只雄性成年大鼠随机分为假手术组、SAH组、SAH+依达拉奉组(依达拉奉组),72 h后处死大鼠.处死前每天统计大鼠神经功能缺损评分;处死后采用硫代巴比妥酸法检测大鼠脑组织中MDA含量,运用Westernblot方法检测大鼠脑组织中iNOS蛋白的表达.结果 依达拉奉组大鼠神经功能评分高于SAH组,而MDA含量明显低于SAH组(P<0.05);Westernblot检测显示,依达拉奉可降低脑组织iNOS的表达.结论 依达拉奉可改善蛛网膜下隙出血后脑损伤,具有一定的神经保护作用.     

依达拉奉对缺氧缺血性脑病新生大鼠脑水肿及CD163/HO-1信号通路的影响

目的探究依达拉奉对缺氧缺血性脑病(HIE)新生大鼠脑水肿及CD163/HO-1信号通路的影响。方法 7日龄SD新生大鼠120只,其中90只双结扎左颈总动脉并缺氧制作缺氧缺血性脑损伤(hypoxic ischemic brain damage,HIBD)模型,并随机分为模型组、依达拉奉组,另外30只仅穿线不结扎不缺氧作为假手术组。依达拉奉组在造模后立即腹腔注射依达拉奉2 mg/kg,每日1次,连续5 d;模型组和假手术组分别在同一时间给予腹腔注射等量生理盐水。术后注意观察各组SD新生大鼠的生物学行为。造模后24 h,TTC染色观察各组SD新生大鼠脑组织形态。造模后在6 h、12 h、24 h、2 d、3 d、5 d分别检测各组SD新生大鼠脑组织含水量变化;荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测CD163、HO-1 mRNA表达水平;Western blot技术检测CD163、HO-1蛋白表达水平。结果术后90只SD新生大鼠出现嗜睡、精神萎靡、抽搐等症状,依达拉奉治疗后症状较模型组明显减轻,3 d内症状改善。TTC染色发现造模后24 h模型组新生大鼠左脑半球出现水肿、颜色苍白,体积比右半球稍大,依达拉奉治疗后脑组织损伤程度显著降低。模型组、依达拉奉组新生大鼠大脑左半球梗死面积均显著大于假手术组(P0.05),依达拉奉治疗后脑梗死面积显著小于模型组(P0.05)。脑组织含水量检测结果显示:造模后6 h,模型组、依达拉奉组新生大鼠脑组织含水量均显著高于假手术组(P0.05),2 d时脑含水量最高。依达拉奉治疗后新生大鼠脑组织含水量明显低于模型组(P0.05)。qRT-PCR和Western blot结果显示,与假手术组相比,模型组、依达拉奉组新生大鼠脑组织CD163、HO-1 mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P0.05),依达拉奉治疗后新生大鼠CD163、HO-1 mRNA和蛋白表达水平显著高于模型组(P0.05)。结论依达拉奉能明显减轻HIBD新生大鼠脑水肿、脑梗死程度,其机制可能与CD163/HO-1信号通路受到活化有关。