O157:H7大肠杆菌腹泻的研究与发展

近年来发现大肠杆菌Ｏ１５７：Ｈ７可以引起腹泻,是人类腹泻的一个重要病原菌〔１,２〕。Ｏ１５７：Ｈ７大肠杆菌的命名是由于此大肠杆菌存在第１５７号菌体Ｏ抗原和第７号鞭毛Ｈ抗原。Ｏ１５７：Ｈ７大肠杆菌可以产生志贺外毒素,并可造成腹泻后溶血性尿中毒综合征（Ｈ...     

肠出血性大肠杆菌O157:H7研究进展

大肠杆菌是寄居肠道的优势菌丛之一,大多数对人体无害,但如远离肠道,侵入其他组织和血液,就可引起化脓性炎症或败血症等,但对其肠道致病性的认识相对较晚.     

用多糖间接血凝试验检测肠出血性大肠杆菌O157抗体的初步研究

目的：探讨多糖间接血凝（IHA）检测感染肠出血性大肠杆菌（EHEL）O157：H7患血清中抗O157抗体的价值。方法：用酚－水法提取O157：H7脂多糖和醋酸水解法制备多糖抗原，致敏绵羊红细胞后以IHA检测各种肠道致病菌抗血清及健康人和非腹泻患血清的抗体反应。结果：制备的多糖抗原糖含量为33％，不含核酸，蛋白质＜0．3％，具有鲎试剂凝集活性。以O157多糖IHA检测O157单克隆抗体呈高效价凝集（1：1280），H7多克隆抗体呈低效价凝集（1：8），其它各种肠道致病菌抗血清的凝集效价均小于1：2，从30名健康人和30名非腹泻患儿的血清中未查出O157抗体；204名非腹泻成人患中，有1人的凝集效价为1：8，其余的均小于1：2，吸收抑制试验表明凝集反应为特异性。结论：以多糖IHA检测抗O157抗体可试用于人群O157：H7感染的抗O157抗体流行率调查及肾溶血性尿毒综合征的免疫诊断。     

大肠杆菌O157：H7生物学特性研究

血清型O157－H7大肠杆菌,可引起人类出现散发和暴发流行出血性结肠炎（HC）和溶血性尿毒综合症（HUS）,本文对5株大肠杆菌O157：H7的生物学特性进行了研究,结果研实：本菌为革兰氏阴性杆菌,电镜下观察可见细菌表明具有鞭毛,荚膜和菌毛,5菌具有典型大肠杆菌的生化反应,并有其独特的生化特性,不发酵山梨醇,对棉子糖,赖氨酸,鸟氨酸呈100％阳性反应。山梨醇－麦康凯培养基（SMAC）可用于分离大肠杆菌O157：H7,但SMAC至少不能区分大肠杆菌O157：H7和宋内氏痢疾杆菌,除个别抗生素外,此菌对常用的抗生素都敏感。5株大肠杆菌在D－甘露糖存在或不存时,均不能引起人A型红细胞和豚鼠红细胞发生凝集反应,5株菌均能产生一种特殊的肠溶血素,并且培养基对其溶血环的产生有很大影响,所有检测的大肠杆菌O157：H7都产生Vero细胞毒素,不产生不耐热肠毒素和耐热肠毒素,也不具有侵袭力,小鼠毒力试验（LD50）显示毒力远远大于肠毒原性大肠杆菌和宋内氏痢疾杆菌,DNA G＋C Mol%测定表明5株菌之间及其与作为标准大肠杆菌的E.coilK12之间具有很近的亲缘关系,质粒图谱分析结果表明：3株菌携带分子量为2．55MD,4．32MD和59．6MD的3个质粒,一株菌携带两个质粒：分子量为2．09MD和59．6MD,另一株菌也携带两个质粒：分子量为3．98MD和59．6MD。用紫外线照射法从5株大肠杆菌O157：H7中诱导出5种噬菌体,本文提取了大肠杆菌O157：H7的O－特异性多糖,其对小鼠有一定的免疫保护力。     

大肠杆菌O157:H7感染的临床分析

1999年及2000年夏秋季江苏省苏北某地及其接壤地区出现感染性腹泻患者,且有肾功能衰竭（肾衰）发生,病死率高,经检验证实该组病例系由大肠埃希菌（Escherichia coli）O157：H7引起的出血性肠炎（HC）和溶血性尿毒综合征（HUS）。该菌又称肠出血性大肠埃希菌（EHEC）O157：H7,简称大肠杆菌O157：H7,我们就该病流行期间76例临床诊断患者的临床表现作一分析。     

出血性大肠杆菌O157:H7四株菌株的vero细胞毒性比较

目的:研究出血性大肠杆菌四株菌株的vero细胞毒性,从而筛选出vero细胞毒性强的菌株,为进一步研究vero细胞毒素(VT)提供基础。方法:用超声法破碎菌体,用倒置显微镜观察法检测vero细胞毒性,并用毒素中和试验检测毒素提取液中的vero细胞毒素。结果:国际菌株933和中国流行菌株882364的毒素提取液的vero细胞毒性最强,其毒素提取液的vero细胞毒性可以被VT1抗体和VT2抗体部分中和。结论:在出血性大肠杆菌中国流行菌株中,882364茵株vero细胞毒性最强,并含有多种vero细胞毒素。     

应用酶联免疫吸附实验检测肠出血性大肠杆菌O157∶H7

目的制备和纯化O157∶H7抗原,免疫家兔和豚鼠,获得高效价的抗O157∶H7免疫血清并进行纯化及酶标记。建立对O157∶H7感染患者快速诊断方法,做到早期发现及时治疗,有效控制疫情的蔓延。 方法ELISA双抗体夹心法检测O157∶H7抗原。步骤包被特异性抗体,加处理后的粪便等标本,然后加入抗O157∶H7酶结合物,最后加入底物显色。结果本课题所研制的抗O157∶H7酶结合物只对O157∶H7呈阳性反应,而与其他相关细菌无交叉反应。结论应用酶联免疫吸附试验（即双抗体夹心法）对肠出血大肠杆菌O157∶H7抗原的检测较常规法实验程序简捷、快速、敏感。临床和现场验证结果表明,其方法具有灵敏度高,特异性强操作简单等特点,为肠出血性大肠杆菌O157∶H7的鉴定及快速诊断提供了一种新的检测手段。     

应用酶联免疫吸附实验检测肠出血性大肠杆菌O157:H7

目的:制备和纯化O157:H7抗原,免疫家兔和豚鼠,获得高效价的抗O157:H7免疫血清并进行纯化及酶标记.建立对O157:H7感染患者快速诊断方法,做到早期发现及时治疗,有效控制疫情的蔓延. 方法ELISA双抗体夹心法检测O157:H7抗原.步骤:包被特异性抗体,加处理后的粪便等标本,然后加入抗O157:H7酶结合物,最后加入底物显色.结果本课题所研制的抗O157:H7酶结合物只对O157:H7呈阳性反应,而与其他相关细菌无交叉反应.结论应用酶联免疫吸附试验(即双抗体夹心法)对肠出血大肠杆菌O157:H7抗原的检测较常规法实验程序简捷、快速、敏感.临床和现场验证结果表明,其方法具有灵敏度高,特异性强操作简单等特点,为肠出血性大肠杆菌O157:H7的鉴定及快速诊断提供了一种新的检测手段.     

肠出血性大肠杆菌O157：H7的快速可视化检测

目的应用环介导等温扩增（loop-mediated isothermal amplification,LAMP）技术和羟基萘酚蓝（Hydroxynaphthol blue,HNB）指示剂建立肠出血性大肠杆菌（EHEC）O157∶H7快速可视化检测方法。方法针对EHEC O157∶H7脂多糖编码基因rfbE保守区设计LAMP引物及环引物,反应体系加入染料HNB作为LAMP扩增的指示剂,结合LAMP浊度仪优化扩增条件,根据HNB的颜色变化进行结果判定,并评价检测方法的特异性和灵敏度。结果本方法最低检出限约为100拷贝/反应管,高于普通PCR;检测特异性高,仅EHEC O157∶H7反应管HNB颜色由紫罗兰变成天蓝色,而肠产毒性大肠杆菌（ETEC）、肠致病性大肠杆菌（EPEC）、肠侵袭性大肠杆菌（EIEC）、肠聚集性大肠杆菌（EAEC）、宋内志贺菌、福氏志贺菌均不发生变色反应;体系的扩增效率高于普通PCR,40 min内出结果。结论建立的基于颜色判定的EHEC O157∶H7 LAMP检测方法具有特异、灵敏、设备要求简单等特点,适用于EHEC O157∶H7现场快速检测。     

夏季轮状病毒肠炎与大肠杆菌肠炎60例临床分析

现就我院收治的60例腹泻患儿,对其临床特征和诊断分析如下:1 临床资料1.1 一般资料:我院1998年4月-7月住院患儿60例,其中轮状病毒感染者30例,大肠杆菌感染者30例(均为单一感染)。其中男33例,女27例。轮状病毒感染者年龄为23天-5.5岁。大肠杆菌肠炎为12天-9岁。     

大肠杆菌O157∶H7实验感染动物排菌动态检测

目的 检验大肠杆菌O157∶H7胶体金免疫层析检测试纸条在感染动物排菌中的应用效果.方法 将牛和小鼠采用灌胃攻毒方式实验感染大肠杆菌O157∶H7,用大肠杆菌O157∶H7胶体金免疫层析检测试纸条与细菌鉴别培养基分别培养检测感染动物粪便中的O157∶H7的排菌量和持续时间.结果 牛在感染大肠杆菌O157∶H7后的第2天开始从粪便排菌,第4～6天达到峰值,排菌时间可持续28 d;小鼠在感染O157∶H7后的第4小时开始从粪便排菌,第6小时达到峰值,排菌时间可持续15 d.结论 大肠杆菌O157∶H7胶体金免疫层析检测试纸条与细菌鉴别培养基培养计数的检测结果一致,试纸条更简便、快捷、直观,在1 ～5 min内可得出检测结果.     

2～5岁儿童种接大肠杆菌O157O特异性多糖结合疫苗的安全性和免疫原性

大肠杆菌O157：H7可引起严重肠炎和溶血性尿毒病，尤其对幼儿和老年人。与志贺菌的情况相似，血清抗大肠杆菌O特异性多糖IgG抗体能通过裂解肠道细菌而提高免疫力。成人Ⅰ期临床试验显示，大肠杆菌O157O特异性多糖与重组绿脓杆菌外毒素A结合制成的疫苗（O157-rEPA）安全且具有免疫原性。此项Ⅱ期临床试验旨在确认2～5岁儿童接种O157-rEPA的安全性和免疫原性。     

大肠杆菌O157：H7实验感染动物排菌动态检测

目的检验大肠杆菌O157：H7胶体金免疫层析检测试纸条在感染动物排菌中的应用效果。方法将牛和小鼠采用灌胃攻毒方式实验感染大肠杆菌O157：H7,用大肠杆菌O157：H7胶体金免疫层析检测试纸条与细菌鉴别培养基分别培养检测感染动物粪便中的O157：H7的排菌量和持续时间。结果牛在感染大肠杆菌O157：H7后的第2天开始从粪便排菌,第4～6天达到峰值,排菌时间可持续28 d;小鼠在感染O157：H7后的第4小时开始从粪便排菌,第6小时达到峰值,排菌时间可持续15 d。结论大肠杆菌O157：H7胶体金免疫层析检测试纸条与细菌鉴别培养基培养计数的检测结果一致,试纸条更简便、快捷、直观,在1～5 min内可得出检测结果。     

大肠杆菌O157:H7多糖蛋白结合疫苗重复肌肉注射对大鼠的长期毒性研究

目的:考察大肠杆菌O157:H7多糖蛋白结合疫苗(简称O157疫苗)对大鼠重复肌肉注射的长期毒性,为临床试验提供安全性依据。方法:48只SD大鼠随机分为疫苗组和对照组(均n=24),疫苗组每只每次给予O157疫苗0.5mL(含多糖25μg),对照组给予等体积磷酸盐缓冲溶液,均间隔2周免疫1次,共3次。第1次免疫后2周、第3次免疫后1、3、5周每组每次处死大鼠6只,进行血液学指标、血液生化学指标、组织器官病理、血清特异性抗体、骨髓组织、给药部位组织等的观察和检测。结果:与对照组比较,疫苗组各指标检查未出现有病理意义的改变,部分血液学指标因免疫诱导所致出现动态规律变化,但未见免疫系统损伤。结论:大鼠重复肌肉注射O157疫苗后未发现明显长期毒性和局部刺激性。     

哥科学家发现“超级大肠杆菌”

据哥斯达黎加大学玛丽亚·劳拉博士领导的哥斯达黎加大学微生物系水和食品实验室科研小组近日发现,在人类食用的肉类、鸡、蔬菜、苹果汁和低温灭菌奶制品等食品中存在着一种严重威胁人类健康和生命的O157:H7型大肠杆菌。     

侵袭性大肠杆菌肠炎12例分析

我院于 2 0 0 1年 9月～ 2 0 0 2年 9月 ,从入院诊断急性菌痢病人粪便培养中分离EIEC12株 ,血清型为 0 2 8ac。年龄最小为 12个月 ,3岁以下 6例 ,5 6岁 1例 ,婴幼儿感染并非少见。 0 2 8ac:K73,5例 ,为国内小儿感染多见血清型。本病与志贺氏痢疾杆菌痢疾发病季节一致 ,其临床状也类似 ,故应注意鉴别。1　临床资料1 1　一般资料 :在这 12例病患中 ,经生化反应、血清学鉴定及以豚鼠角膜毒力试验等检查 ,确定为分侵袭性大肠杆菌 ,共血清分型如前所述。1 2　临床表现 :一般发烧在 39℃左右 ,呕吐、腹痛、里急后重常见。腹泻粘液便、浓性便、浓…     

聚合酶链反应检测O157：H7大肠杆菌方法的引进及应用

本文介绍了应用ＰＣＲ技术检测Ｏ１５７：Ｈ７大肠杆菌，并对３６株疑似Ｏ１５７：Ｈ７大肠杆菌感染的菌株进行检验鉴定，同时设阳性，阴性对照，结果较为满意，此项技术填补了省内空白，且方法可靠，快速，简便，特异性强，非常适合于基层单位对Ｏ１５７：Ｈ７大肠杆菌的检测。     

中国四地区凉拌菜中E.coli O157∶H7调查分析

目的通过对我国中南、华东、东北和西北各地区凉拌菜E.coli O157∶H7监测,了解我国凉拌菜E.coli O157∶H7的污染状况,为食源性疾病的控制提供良好的科学依据。方法采集各地区凉拌菜样本,经mEC肉汤、改良麦康凯肉汤增菌、mini-VIDAS免疫检测快速筛选和免疫磁珠富集后,接种改良山梨醇麦康凯琼脂和CHROmagar O157显色培养基分离,最后进行生化和血清学鉴定。结果在采集的1080份凉拌菜样本中检出3株E.coli O157∶H7阳性或疑似菌株。结论肉类和果蔬类凉拌菜均存在E.coli O157∶H7污染的潜在威胁;县乡级食品卫生监督工作亟需加强。