大承气汤中大黄酸在大鼠体内的药动学研究

目的:研究大鼠灌胃给予大黄及大承气汤后,大黄酸在大鼠体内药动学过程。方法:大鼠分别灌胃给予大黄及大承气汤,高效液相色谱法测定大黄酸经时血药浓度变化。色谱柱为Diomansil C18(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相甲醇-水-冰醋酸(77∶22∶1),检测波长428 nm,流速1.0 mL.min-1。血药浓度-时间数据用3P97药动学软件处理。结果:大黄酸血药浓度在1.0～15 mg.L-1线性关系良好。大鼠灌胃给予大黄及大承气汤后大黄酸血浆浓度-时间曲线均符合二房室模型,大黄及大承气汤的主要药动学参数AUC和Cmax均存在显著性差异(P<0.05)。结论:大承气汤中大黄与其他成分配伍后,使大黄酸在大鼠体内的血药浓度降低。     

小承气汤中大黄酸在大鼠体内的药动学研究

目的 研究小承气汤中大黄与厚朴、枳实配伍对大黄酸在大鼠体内药动学过程的影响.方法 大鼠分别给予大黄及小承气汤,高效液相色谱法测定大黄酸在大鼠体内血药浓度变化.色谱柱为Diomansil C18(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-水-冰醋酸(77∶22∶1);检测波长为428 nm;流速为1.0 mL/min.血药浓度数据采用3P97药动学软件进行分析.结果大黄酸血药浓度在1.0～15 μg/mL范围内线性关系良好.大鼠给予大黄及小承气汤后,大黄酸血药浓度-时间曲线均符合二房室模型,其主要药动学参数AUC、Cmax和CL均存在显著性差异(P＜0.05).结论 大黄与厚朴、枳实配伍后,使大黄酸在大鼠体内的血药浓度降低.     

固相萃取-高效液相色谱法测定大黄酸血药浓度 及在大鼠体内的药动学规律

目的:建立测定大鼠血浆中大黄酸的固相萃取-高效液相色谱方法,研究大黄酸在大鼠体内的药动学规律。方法:单次给予SD大鼠不同剂量的大黄酸,于不同时间点采集大鼠血浆。以固相萃取法处理血浆样品,用HPLC内标法测定血药浓度,色谱柱为Venusil XBP C18(L)(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸水(75∶25),柱温为30℃,检测波长254 nm,以DAS2.0软件拟合计算药动学参数。结果:大黄酸的血药浓度在0.019 2～11.72 mg.L-1线性关系良好(R2=0.999 1),检测限为0.009 6 mg.L-1,定量限为0.019 2 mg.L-1,提取回收率均大于80%,日内、日间精密度RSD均小于6%。结论:大鼠灌胃给药大黄酸血药浓度-时间曲线呈二室模型。该法操作简便、快速、灵敏,适用于大黄酸在大鼠体内的药物动力学研究。     

高效液相色谱法测定大鼠血浆中水合橙皮内酯的浓度及药动学研究

目的建立快速、灵敏的HPLC法测定大鼠血浆中水合橙皮内酯(Meranzin hydrate)的血药浓度,并比较灌胃枳壳与水合橙皮内酯单体后大鼠体内水合橙皮内酯的药动学行为。方法色谱条件:色谱柱为Dikma Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),保护柱为Dikma guard柱(8 mm×4 mm,5μm),流动相为乙腈-水(体积比78∶22),流速为1 ml/min,柱温为25℃。用此HPLC法测定枳壳与水合橙皮内酯单体在大鼠体内的血药浓度,估算二者的药代动力学参数。结果线性范围12.5~1000 ng/ml(r=0.9997),最低检测浓度10 ng/ml,回收率分别为90.53%~93.45%,日内和日间精密度RSD均小于10%。与枳壳大鼠灌胃相比,灌胃水合橙皮内酯单体后的药动学参数Tmax和t1/2的值显著变小(P0.01),而Cmax和AUC0-24则显著增大(P0.01)。结论该方法可用于水合橙皮内酯的药动学研究。同时与灌胃枳壳相比,给予水合橙皮内酯单体的消除半衰期长,达峰时间长,消除速率慢,生物利用度更高。     

断血流皂苷A的药动学研究

目的 研究断血流皂苷A在大鼠体内的药动学.方法 建立柱切换高效液相色谱法测定血浆中断血流皂苷A浓度的方法.色谱条件:预处理柱(PC):大连装Kromasil C18(20 mm×4 mm,5 μm);预处理流动相:甲醇-水;预处理流动相流速:1.0 ml·min-1;分析柱(AC):Lichrospher 100 RP-18e(250 mm×4 mm,5 μm);分析流动相:甲醇-0.01 mol·ml-1磷酸盐缓冲液(磷酸调pH =3.0)(60∶40);分析流动相流速:0.6 ml·min-1;分析柱柱温:45℃;检测波长:250 nm.健康大鼠禁食24 h后,尾静脉注射断血流皂苷A溶液,测定不同时间的血药浓度.用3P87药动学程序对血药浓度一时间数据进行拟合.结果 大鼠在尾静脉注射断血流皂苷A后,其主要药动学参数为:Vt(0.31±0.05)L·kg-1,CL(1.13±0.32)ml·min-1,Ke(0.90±0.18)h-1,t1/2(0.76±0.11)h,曲线下面积AUC(24.98±4.82)( μg·h) ·ml-1.结论 断血流皂苷A在大鼠体内呈一室开放模型,进入体内迅速分布,代谢消除也较快.     

丹皮酚在肝癌模型大鼠体内的药动学研究

目的:建立测定肝癌模型大鼠血浆中丹皮酚浓度的超高效液相色谱(UPLC)法,并用于丹皮酚灌胃给药后在大鼠体内的药动学研究。方法:大鼠分成3组,分别单次灌胃给予高、中、低剂量259.2,194.4,129.6 mg.kg-1丹皮酚,于给药后不同时间点采集血样,UPLC测定血药浓度。选用C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相甲醇-水(70∶30),流速0.3 mL.min-1,检测波长274 nm,柱温25℃,进样量2.1μL。结果:丹皮酚在血浆样品中标准曲线线性范围为0.323～41.4mg.L-1,r=0.999 9,其血药浓度数据用WinNonlin软件处理,丹皮酚在肝癌模型大鼠体内的血药浓度-时间过程符合二房室模型,AUC,Cmax随给药剂量增加而显著增加,Tmax,T1/2β,CL随给药剂量增加无明显改变。结论:该方法简便,快速,重复性好,适用于丹皮酚在肝癌模型大鼠体内的药动学研究。肝癌模型大鼠灌胃不同剂量丹皮酚后的药动学参数存在一定差异。     

调胃承气汤中大黄酸在大鼠体内的药动学研究

目的:研究大鼠给予大黄及调胃承气汤后,大黄酸在大鼠体内药动学过程。方法:大鼠分别给予大黄及调胃承气汤,高效液相色谱法测定大黄酸的血药浓度。色谱柱为Diomansil C18(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-水-冰醋酸(77∶22∶1);检测波长为428 nm;流速为1.0 ml/min。血药浓度数据采用3P97药动学软件进行分析。结果:大黄酸血药浓度在1.0～15μg/ml范围内线性关系良好。大鼠给予大黄及调胃承气汤后,大黄酸血浆浓度-时间曲线均符合二房室模型,大黄及调胃承气汤的主要药动学参数AUC分别为12.06±1.34和4.19±0.48μg.h/ml、Cmax分别为7.53±1.13和2.58±0.21μg/ml,均存在显著性差异(P<0.05)。结论:调胃承气汤中大黄与甘草、芒硝配伍后,使大黄酸在大鼠体内的血药浓度降低。     

甘草与大黄配伍对大黄酸在大鼠体内药动学的影响

目的:研究甘草与大黄配伍时,甘草对大黄酸在大鼠体内药动学的影响。方法:大鼠分别灌服大黄和大黄甘草汤,高效液相色谱法测定大黄酸血药浓度。色谱柱为Zorbox SB C18(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-水-冰醋酸(77∶22∶1);检测波长为428 nm;流速为1.0 mL·min-1;柱温为室温。血药浓度数据采用3P97药动学软件进行分析。结果:大黄酸血药浓度在0.1～15μg·mL-1范围线性关系良好。大鼠灌服大黄和大黄甘草汤后,大黄酸血浆浓度-时间曲线均符合二房室模型。大黄和大黄甘草汤相比较,两者的AUC,Tmax,Cmax,均存在显著性差异(P0.05)。结论:甘草与大黄配伍,可降低大黄酸在大鼠体内的血药浓度,降低大黄酸对肝脏的损伤。     

SPE-HPLC测定复方吴茱萸巴布膏中吴茱萸碱和吴茱萸次碱血药浓度及药动学研究

目的:建立大鼠血浆中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的SPE-HPLC测定方法,并用于透皮给药后的药动学研究.方法:Kromasil C_(18)(4.6mm×250 mm,5μm),以乙腈-水-四氢呋喃-冰醋酸(51:48:1:0.1)为流动相,流速1 mL·min~(-1),检测波长为225 nm,柱温35℃,以氯氟舒松为内标溶液,崮相萃取后采用HPLC法测定吴茱萸碱和吴茱萸次碱的血浆浓度.结果:透皮给药后,药-时曲线符合一室模型,吴茱萸碱主要药动学参数Ka 224 h~(-1),Ke0.114 h~(-1),C_(max).0.211 mg·L~(-1),L~(-1),T_(peak)6.132h,吴茱萸次碱主要药动学参数K_a0.220 h~(-1),Ke0.118 h~(-1),C_(ma)×0.272 mg·L~(-1),T_(peak)6.102 h.结论:本方法简便、准确、灵敏度高,适用于大鼠透皮给药后吴茱萸碱和吴茱萸次碱的血药浓度测定及其药动学研究.     

LC-MS-MS方法测定大鼠血浆中蝉翼素的 药代动力学及代谢物

目的:建立测定蝉翼素血浆药物浓度的液相色谱-电喷雾离子化-质谱(LC-MS-MS)联用的分析方法,探讨其在大鼠体内的药动学及其在体内的代谢产物。方法:大鼠灌胃蝉翼素后不同时间点采血,LC-MS-MS法测定血药浓度,拟合药动学模型并计算相关药动学参数。结果:蝉翼素在0.132 5～53.00μg.L-1线性关系良好(r=0.999 2),方法学考察均符合要求。日内、日间变异系数(RSD)均<10%,精密度和准确度等均符合生物样品分析的要求。结论:该法准确、灵敏、特异,适用于蝉翼素的体内定量分析,蝉翼素在大鼠体内药动学过程属于二室模型,蝉翼素吸收后经过胃肠道转化为代谢产物2-甲基丁酸。     

大鼠血浆中的银杏内酯B的液相色谱-电喷雾串联质谱法测定

目的 建立快速、灵敏、简单的液相色谱-串联质谱( LC-MS/MS)法测定大鼠血浆中的银杏内酯B.方法 血浆样品经乙酸乙酯液-液萃取后,采用Symmetry C18(3.9 mm×150 mmID,5μm)柱分离,以甲醇-乙酸铵溶液(10 mmol·L-1) (85:15,V/V)为流动相,流速为0.8 ml·min-1.采用电喷雾离子化源(ESI)三重四级杆串联质谱,在负离子多反应监测(MRM)模式下进行检测.结果 血浆中银杏内酯B的线性浓度范围为1.0～200 ng·ml-1,定量下限为1.0ng·m1-1,日内、日间精密度(RSD)均小于4.88％,准确度(RE)在±2.61％范围内.未观察到GB明显的基质效应.结论 该方法操作简便、快速、灵敏度高,分析时间短,适用于银杏内酯B的大鼠药代动力学研究.     

全自动在线固相萃取-高效液相色谱法快速测定中药复方中小檗碱的含量

目的:建立在线固相萃取-HPLC方法测定中药复方中小檗碱的含量.方法:通过双梯度高效液相系统中的一个泵(上样泵)实现净化,再经过阀切换将目标物从固相萃取柱中切换至分析柱中进行测定.上样泵以乙腈-500 mmol· L-1醋酸铵溶液为流动相,采用硅胶基质强阳离子交换小柱(4.6 mm×50 mm,300(A))为在线固相纯化柱,采用梯度洗脱方式进行样品净化;分析泵以乙腈-30 mmo1·L-1磷酸二氢钾为流动相,采用Acclaim C18(4.6 mm×250 mm,5μm)柱,柱温35℃,流速1.0mL· min -,UV检测波长为345 nm.结果:小檗碱在1.24 ～ 124 mg·L-1线性关系较好(r =0.999),平均回收率99.5％.结论:方法快速、简便,专属性、重复性较好,测定结果准确.     

北豆根的HPLC指纹图谱研究

目的:建立同时测定承德产及其他主产区北豆根中蝙蝠葛苏林碱和蝙蝠葛碱的含量及其HPLC-UV指纹图谱.方法:采用ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,乙腈和-0.5％甲酸水溶剂系统梯度洗脱,检测波长为268 nm,流速1.0 mL· min-1,进样量10 μL.结果:蝙蝠葛苏林碱和蝙蝠葛碱的线性范围分别为0.072 ～2.29 g·L-1(r =0.999 6),0.053 ～ 1.70 g·L-1(r =0.999 9);平均回收率分别为98.7％ (RSD 1.5％),100.6％ (RSD 1.9％);确立了承德产北豆根的指纹图谱共有9个共有峰,其他主产区的指纹图谱共有13个共有峰.指纹图谱方法重复性、精密度良好,承德产5批北豆根(原药材)除2号样品为0.404外其他样品均＞0.9;其他主产区12批北豆根(饮片)除9号样品为0.716外其他样品均＞0.9.结论:方法重复性好,专属性强,为北豆根药材的质量控制提供科学依据.     

高效液相质谱联用法分析大鼠血浆中异鼠李素-3．0-新橙皮糖苷的浓度及其药代动力学研究

目的：建立LC-MS／MS方法测定异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷的浓度并研究其在大鼠体内的药代动力学。方法：8只大鼠分别尾静脉注射异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷5mg·kg^-1。建立并确证高灵敏度的液质联用法分析大鼠血浆中异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷的浓度,采用芦丁作为内标。采用甲醇蛋白沉淀法提取血浆中的异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷和芦丁。然后用10mmol·L^-1的乙酸铵／甲醇（20：80,v／v）的流动相在C18色谱柱（150mm×2．1mm,I．D.,5μm）上进行洗脱并采用多反应检测的方式进行质谱分析。结果：异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷的在大鼠血浆中的线性范围为0．01-10μg·mL^-1。其定量下限为0.01μg·mL^-1。结论：该方法可以用于测定大鼠血浆中异鼠李素-3-O-新橙皮糖苷的浓度。     

气质联用法同时测定人血浆中4种非胆固醇类固醇含量

 目的 建立同时测定人血浆中植物固醇和胆固醇合成前体物质的气相色谱-质谱（GC-MS）定量分析方法,为研究患者胆固醇代谢提供检测手段。方法 色谱柱为HP-5MS石英毛细管柱（30 m×0.25 μm×0.25 mm）,初始柱温200 ℃,保持2 min,程序升温15 ℃·min^-1至280 ℃,保持30 min,不分流进样。血浆经碱性醇溶液皂化后用正己烷萃取,再用衍生化试剂（BSTFA+1%TMCS）衍生后进样,采用全扫描（Scan）定性,选择离子监测（SIM）内标法定量。结果 胆固醇、2,4-脱氢胆固醇、7-烯胆固醇、菜油固醇、β-谷固醇线性关系良好,日内日间精密度均分别小于7.9%与9.8%,加样回收率分别在89.5%~106.3%之间。应用本方法分别测定20名高血脂患者中非胆固醇类固醇的含量,其中2,4-脱氢胆固醇的含量为（0.39±0.08） mg·L^-1,7-烯胆固醇的含量为（3.41±0.83） mg·L^-1,菜油固醇的含量为（3.12±0.53） mg·L^-1,β谷固醇的含量为（4.22±0.67） mg·L^-1。结论 GC-MS法可同时测定人血浆中4种非胆固醇类固醇含量,并具有良好的准确度与精密性,适用于患者胆固醇代谢个体差异的分析。
     

UPLC-MS/MS测定大鼠血浆中奥拉帕利的浓度及其药动学研究

目的 建立一种具有高灵敏度和高选择性测定大鼠血浆中奥拉帕利药物浓度的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法,并研究奥拉帕利在大鼠体内的药动学特征。方法 大鼠血浆样品采用乙腈沉淀法去除蛋白,色谱柱为Acquity UPLC BEH C₁₈柱 (2.1 mm×50 mm,1.7 μm),流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱。质谱采用电喷雾离子源,多反应监测正离子模式,奥拉帕利定量离子对为m/z 435.19→m/z 367.1。以50 mg·kg^-1奥拉帕利经大鼠灌胃给药后于不同时间点采集血样,利用建立的方法进行检测分析,并用DAS2.0软件计算药动学参数。结果 血浆中奥拉帕利在(0.6~1 821) ng·mL^-1内线性关系良好,定量限为0.15 ng·mL^-1,日内、日间精密度RSD均小于5.5%,准确度在95.4%~99.2%内,平均提取回收率为84.2%~96.0%,基质效应在91.4%~108.8%内。结论 建立的方法灵敏度高、结果准确,可用于大鼠血浆中奥拉帕利质量浓度的测定及其药动学研究。     

体内、体外相结合测定及评价CYP2C19 酶活性研究的方法建立

目的:建立一种快速、准确的以奥美拉唑(Omeprazole,OPZ)作为“探针药物”评价或测定细胞色素P450 2C19(CYP2C19)酶活性的高效液相色谱(HPLC)-紫外检测(VWD)方法.方法:采用的色谱柱为Agilent Extend-C18柱(4.6 mm×100 mm,5μm),流速1.0 mL·min-1,紫外检测波长290 nm,柱温40℃.体内实验:大鼠静脉注射OPZ(20 mg· kg-1),按时间点眼眶取血,检测OPZ与其代谢产物5’-羟基奥美拉唑(5’-hydroxy omeprazole,5 '-OHOPZ)的血浆药物浓度.体外实验:不同浓度OPZ与大鼠肝微粒体温孵后,检测温孵体系中5’-OHOPZ的浓度,以其生成的速率来评价CYP2C19酶的活性.结果:体内实验:内标非那西丁、OPZ与5’-OHOPZ保留时间(tR)分别为8.91,10.26,14.93 min,OPZ线性范围为0.28 ～18.0 mg·L-1,最低定量限(lower limit of quantitation,LLOQ)为0.28 mg·L-1,高、中、低浓度提取回收率分别为91.13％,97.21％,96.55％,OPZ的日内、日间相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)小于10％;5’-OHOPZ线性范围为0.19 ～6.25 mg·L-1,LLOQ为0.19 mg·L-1,高、中、低浓度提取回收率分别为94.36％,97.57％,90.64％,5’-OHOPZ的日内、日间RSD小于10％.体外实验:内标非那西丁、OPZ与5’-OHOPZ的保留时间(tR)分别为8.91,10.26,14.93 min,5’-OHOPZ的线性范围为0.06 ～2.0 mg·L-1,LLOQ为0.06 mg·L-1,高、中、低浓度提取回收率分别为96.53％,99.40％,98.00％,日内、日间RSD差小于10％.结论:大鼠血浆及肝微粒体温孵体系中的其他内源性物质不干扰待测物的测定.该方法快速、稳定、灵敏度高,适合OPZ及其代谢产物5’-OHOPZ的测定,该文建立了体内、体外相结合测定及评价CYP2C19酶活性研究的方法.     

甲肿消制剂及其含药血清中哈巴俄苷的含量测定

目的 建立甲肿消制剂及灌胃给予甲肿消后大鼠血清中的哈巴俄苷含量测定方法.方法 采用RP-HPLC法测定哈巴俄苷的含量,色谱柱:Kromasil C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)和Easyguard保护柱,以乙腈和1%醋酸溶液为流动相,采用梯度洗脱;流速:1 ml· min~(-1);检测波长为278 nm;进样量:5 μl.结果 哈巴俄苷在1.46～146 μg·ml~(-1)的浓度范围内线性良好;低、中、高浓度哈巴俄苷的精密度(RSD)(n=5)分别为1.05%,0.59%,0.80%;日间差(RSD)(n=5)为1.00%;制剂和大鼠血清中哈巴俄苷的加样回收率(n=5)分别为(98.02±1.01)%和(101.03±1.64)%;测定其重现性(RSD)(n=6)分别为0.73%和0.96%;每克制剂中含哈巴俄苷的量为230.5 μg,每毫升含药血清中哈巴俄苷的量为1.88 μg.结论 该方法简便、快速、准确、重现性良好,可用于制剂和血清中哈巴俄苷的含量测定.     

HPLC对市售瓜蒌中5-羟甲基糠醛的含量测定

目的:建立常用中药瓜蒌中5-羟甲基糠醛(5-HMF)的高效液相色谱(HPLC)测定方法.方法:采用HPLC法,ODS色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇-水(15∶85)为流动相,流速0.8 mL· min -,检测波长284 nm,柱温30℃.结果:建立了瓜蒌饮片中5-HMF的HPLC测定方法,18批市售瓜蒌样品中5-HMF的含量范围为11.10 -193.6 μg·g-1.结论:各地的商品瓜蒌中5-HMF的含量差异较大,该方法可作为评价瓜蒌饮片质量的指标之一.     

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??OBJECTIVE To determine simultaneously the contents of xanthotoxin,bergaptol, and bergapten in cultivated Changium smyrnioides Wollf and its in vitro cultures by HPLC.METHODS Agilent-C₁₈ column (4.6 mm??250 mm,5 ??m) was used for chromatographic separation and PAD was applied as detector. The flow rate was 1.0 mL??min^-1with a mobile phase of methanol-water in gradient elution mode. The detection wavelength was set at 314 nm while the injection volume was 10 ??L.RESULTS The linear regression equations of xanthotoxin, bergaptol, and bergapten were Y=17 057??-87.689 (r=1.000 0), Y=23 828??-380.44 (r=0.999 9) and Y=37 123??-441.16(r=0.999 9), respectively. The contents of xanthotoxin and bergapten in cultivated and regenerated specimens were obviously higher than those in calli and suspension cells, while bergaptol was only detected in the latter two samples. A larger amount of furanocoumarins accumulated in the cells from leaves and petioles. CONCLUSION The established method is simple and effective with high sensitivity and good repeatability. It can be adopted in studies on the utilization of Changium smyrnioides, especially the regulation and induction of furanocoumarins.