防止免疫组化染色中脱片的方法和使用体会

开展免疫组化病理研究减少脱片是免疫组化实验工作中亟待解决的一个技术性问题。现将我们实验室的一些经验介绍如下。     

高压抗原修复方法在免疫组化染色的应用比较

目的:优化免疫组化高压抗原修复法染色效果。方法:同一组织分别采用高压抗原修复直接法或间接法,用柠檬酸缓冲液或EDTA抗原修复液进行抗原修复,检测10种常用抗体的免疫组化染色效果。结果:抗原修复间接法与直接法染色强度有明显差异,直接法优于间接法;两种抗原修复液间也存在差异,EDTA抗原修复液效果优于柠檬酸缓冲液。结论:高压抗原修复直接法并用EDTA抗原修复液对组织切片进行抗原修复效果更好。     

不同修复方法对免疫组化染色结果的影响

目前,免疫组化染色技术已成为病理学诊断中不可少的重要手段,而进行抗原修复使抗原决定簇暴露则是免疫组化染色成功的关键。本研究中,观察了高压加热法、微波加热法、胰酶消化和胃酶消化4种抗原修复方法对免疫组化染色结果的影响。1材料和方法1.1材料收集乳腺癌、淋巴瘤和大肠癌组织标本各12例,均由唐山市协和医院病理科提供。选用鼠抗人单克隆抗体(mAb)ER、PR、c-erbB-2、CK7、EMA、CEA、CK(pan)、MDR-1、P53、Ki67、GCDFP-15、LCA、CD3、CD20、CD45RO、CD79α及PV9000试剂盒,均购自北京中山生物技术有限公司。1.2方法按…     

高海拔地区不同抗原修复法对免疫组化染色的影响

抗原修复是免疫组化技术中最关键的步骤[1].近年随着各医院病例大幅增多,病理技术对免疫组化自动化的需求也日益显著.云南省为高海拔地区,我院地处海拔1900 m,常压下水的沸点为94.3 ℃.全自动免疫组化染色仪均无高压功能,抗原修复温度最高只能达到水的沸点.受高海拔和抗原修复温度影响,云南省免疫组化自动化发展较慢,使用...     

免疫组化染色的操作技巧和注意事项

自上世纪80年代免疫组化(IHC)技术在我国逐步开展以来,近20年有了快速发展,现已成为病理科工作的重要组成部分。IHC在部分疑难病例诊断和鉴别诊断中起到决定性作用,癌基因、肿瘤增殖指数、肿瘤耐药基因、个性化治疗靶向基因的检测对肿瘤的预后判断、治疗方法及药物的选择上具有重要指导作用。     

免疫组化和组织化学双重染色技术在组织芯片上的应用

组织芯片是从组织块中挑选典型部位的组织以获得数百个圆柱状的样本，并按次序排列在一个新的石蜡块上，制作成HE切片，然后按研究的需要进行免疫组化及原位杂交等研究。组织芯片技术最重要的特点是：一次可以同时对多个组织块检测研究而对原来的组织材料破坏很小。此外，利用组织芯片仪还可以进行组织切片的精确定位和多种类型的分子生物学分析。     

牙和骨切片的粘片剂防脱片效果及应用方法探讨

牙和骨切片HE尤其是免疫组织化学染色需多次更换试剂、改变温度、反复水洗,经常造成切片易皱褶、卷曲、与载玻片分离（脱片）。目前尚无理想的防止牙和骨切片染色脱片的方法,亦未见防止牙和骨切片染色脱片的报道。以下是我们探讨牙和骨切片的氨醛酸乙基硅（APES）、多聚-L-赖氨酸（PLLS）两种粘片剂的防脱片效果和应用方法。     

胎盘组织HMGB1免疫组化染色条件的优化

研究显示,HMGB1作为晚期炎症介质,在感染性早产孕妇的血清、胎盘等中的表达明显升高[1]。胎盘组织内细胞丰富,尤其是红细胞、炎细胞等,对HMGB1的免疫组化染色干扰较大。本文旨在从抗原修复、消除非特异性染色方面优化HMGB1的免疫组化染色。     

保温小室在组织芯片免疫组化中避免边缘效应的作用

目的 探讨保温小室在组织芯片免疫组化中避免边缘效应的作用.方法 采用常规免疫组化SP两步法,实验分为两组,一组采用保温小室,另一组采用免疫组化PAP笔,同时改良抗体滴加方法.结果 40例肺癌组织芯片采用保温小室,32例肝癌组织芯片、各40例胃癌及鼻咽癌组织芯片使用免疫组化PAP笔,分别计算边缘组织和中央组织平均光密度值.经统计发现不论是采用保温小室或免疫组化PAP笔,4种组织切片边缘与中央部位平均光密度值相比,差异无统计学意义.结论 采用保温小室较免疫组化PAP笔更为简单易行,在组织芯片免疫组化染色时避免边缘效应方面保温小室可取代免疫组化PAP笔.     

一种用APES处理载玻片防止免疫组化染色掉片的方法

无论是石蜡切片,还是冰冻切片,在进行常规H-E染色、组织化学染色、原位杂交、免疫组织化学染色时,都存在着掉片现象。特别是在需要连续冰冻切片时,如果在免疫组化染色的过程中,掉片就带来重复取材、切片、染色,因而影响整     

脱钙液在微波辐射下对骨组织作用效果及免疫组织化学染色的影响

骨组织脱钙常规多采用酸性液体（如硝酸、盐酸、甲酸等）进行脱钙，一般需较长时间，组织细胞结构很难保持完整清晰，有些甚至破坏组织结构很严重，从而影响病理学的诊断和研究。骨组织中的蛋白抗原得不到很好的保存，有时甚至丢失。为此我们对９例骨组织用乙二胺四乙酸二...     

脱细胞基质制备方法及其在涎腺组织工程中的应用

背景:由脱细胞基质组成的生物支架被广泛应用于动物及临床研究,以修复和重建组织与器官,但所有的脱细胞方法都会在一定程度上破坏基质结构与功能。目的:综述脱细胞基质制备方法、优缺点及其在涎腺组织工程研究中的应用。方法:应用计算机检索CNKI数据库、中国生物医学文献数据库、PubMed数据库及Elsevier数据库2008至2019年发表的相关文献,检索词为“脱细胞基质,制备方法,涎腺,组织工程,再生;decellularization,preparation method,parotid gland tissue engineering”,共纳入74篇文献。结果与结论:大部分组织与器官脱细胞基质制备方法需要化学、生物(酶)、物理及以上几种方法联合使用,具体方法取决于组织与器官的厚度、组成和性质。虽然不是所有脱细胞方法均可去除组织与器官中的细胞成分,但完全去除细胞的组织与器官具有重塑组织特异性的优势,为接种细胞的增殖和分化提供有利的微环境。由于涎腺结构复杂和组织工程化在临床应用中的挑战,应用于患者的临床移植进展有限,该领域的体内研究仅限于动物,而基于颌下腺脱细胞基质生物支架材料方面的应用有望为涎腺组织工程提供有利的来源。     

SF-1和EMA免疫组化染色在肾上腺皮质肿瘤与肾肿瘤鉴别诊断中的作用

肾上腺发生肿瘤时,首要要确定其良、恶性,如是恶性,就需要确定是原发还是转移。肾细胞癌常可转移到身体其他器官组织,其中肾上腺是最主要的转移部位,同时也可以直接累犯到同侧肾上腺,而区分原发性肾上腺和转移或浸润性肾恶性肿瘤对后期治疗和预后显得尤为重要,但这对于临     

甲状腺组织脱钙方式对HE染色、免疫组织化学检测结果及核酸质量的影响

目的探讨对组织蛋白与核酸损伤较小的合适的甲状腺脱钙方法。方法甲状腺钙化标本30例分成6组,每组5例,首先分析比较常规10%硝酸溶液过夜脱钙与表面脱钙之后,标本在伊红-苏木精(HE)染色、免疫组织化学、核酸质量及荧光聚合酶链反应(PCR)检测几个层面的区别;第二,比较多种脱钙液(10%硝酸、20%甲酸-盐酸、PLANK液、氯化钠盐酸甲醛液等)表面脱钙的效果是否不同。结果与过夜脱钙相比,表面脱钙之后各组HE染色质量、细胞角蛋白(CK)7免疫组织化学结果差异未见统计学意义(P>0.05),而甲状腺转录因子1(TTF1)免疫组织化学着色效果、DNA浓度与质量均明显提升(P<0.05)。各表面脱钙液之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论对于有免疫组织化学和分子病理检测需求的甲状腺钙化标本,表面脱钙可能是一种值得推荐的脱钙方式。     

组织工程化脱细胞神经基质移植体的研究进展

组织工程化的细胞外基质成分、细胞或通道的基底物质已经显示出支持轴突再生和功能恢复的巨大潜能。脱细胞处理的神经基质移植体具有良好的仿生性和生物相容性,包含较丰富的促进神经生长的蛋白等成分并适合于种子细胞在其内迁移生长,移植后免疫排斥反应较低,为轴突再生提供适宜的微环境,能够有效地促进轴突再生,是修复周围神经缺损的适宜移植物,将在周围神经损伤修复中占明显优势。     

脐动脉在搏动流作用下脱细胞制备小口径组织工程血管支架的研究

探索利用搏动流对小口径血管进行脱细胞的方法。首先将脐动脉连接到搏动流管道中进行灌注,结合0.25%胰蛋白酶和0.01%乙二胺四乙酸混合溶液的共同作用,以1%十二烷基硫酸钠为脱细胞试剂对脐动脉洗脱3h。洗脱3h后的病理切片显示脐动脉细胞被全部脱去;拉伸实验测定脐动脉脱细胞前极限应力为(3.55±0.42)N,脱细胞后其极限应力为(3.50±0.43)N(P0.05);在300mmHg压强作用下,脐动脉脱细胞前后两组(各30根血管)均有2根破裂,28根保持完好(P0.05)。此结果预示,脐动脉在脱细胞前后的力学特性无显著差异。成纤维细胞静态培养显示,成纤维细胞能在脱细胞脐动脉支架表面良好生长。研究结果表明利用搏动流将小口径血管脱细胞是一种简便、快速、有效的方法。