作用于Bcl-2家族抗凋亡亚族蛋白的小分子抑制剂的研究进展

细胞的凋亡是维持机体平衡的重要因素。细胞凋亡由一系列细胞因子调控。Bcl-2蛋白家族是细胞凋亡的关键性调节因子。Bcl-2家族分为抗凋亡和促凋亡两个亚族，他们的相互作用对细胞凋亡信号传导起调控作用。很多肿瘤细胞高表达Bcl-2抗凋亡亚族成员Bcl-2/Bcl-xL。近年来，随着Bcl-2家族各成员的晶体结构相继阐明，人们开始寻找作用于Bcl-2家族抗凋亡亚族蛋白的小分子抑制剂。本文从药物设计角度对该方面的进展作一综述。     

抗凋亡因子Bcl-2/Bcl-XL蛋白小分子抑制剂研究进展

Bcl-2蛋白家族是细胞凋亡过程中重要的调控因子。Bcl-2、Bcl-XL蛋白的过度表达是肿瘤发生及产生耐药性的重要原因之一,因此其抑制剂的开发已经成为当前抗肿瘤药物研究的热点。本文在简要介绍Bcl-2蛋白家族结构和功能的基础上,对迄今已报道的抗凋亡因子Bcl-2、Bcl-XL蛋白的小分子抑制剂按其结构类型（主要包括BH3类、苯并吡喃类、三联苯及对苯二甲酰胺类、酰胺磺酰胺类、抗霉素类、棉酚类、三酚类、喹唑啉-2(1H)-硫酮类、三吡咯环类及8-氧-8H-苊并[1,2-b]吡咯-9-腈等）进行综述,阐述各类抑制剂的发现、结构修饰、构效关系及活性研究。     

抗癌药物的研究进展

最近，有关肿瘤发生发展分子机制的研究表明，在恶性肿瘤细胞中，细胞内的各种基本过程是调节失控。这些过程包括：细胞周期的调控，信号传递通路的阻断，细胞凋亡等。研究者将注意力转向癌的病因学与病理过程中起作用的特异的分子及生物靶点。如细胞凋亡诱导剂、信号传导阻滞剂、血管生成抑制剂、化疗与放疗保护剂的寻找。     

鱼腥草地下茎提取物诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡机制的研究

目的对鱼腥草不同部位提取物诱导SGC-7901细胞凋亡及其机制进行研究。方法将鱼腥草地上茎(AS)、地下茎(SS)、叶(L)的粉末经乙醇提取得浸膏;处理SGC-7901细胞48 h后,采用Alamar blue法检测其对SGC-7901细胞增殖的影响;筛选出较高活性浸膏,光学显微镜、Hoechst33258染色观察细胞形态;DNA Ladder琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡情况;Caspase-3活性检测试剂盒测定Caspase-3酶活性。Western blot检测凋亡相关因子的表达;Caspase-9抑制剂(Z-LEHD-FMK)验证浸膏调控的信号转导通路。结果各部位浸膏对SGC-7901细胞均有一定的增殖抑制活性,其中SS提取物活性最强;不同浓度的SS提取物作用SGC-7901细胞48 h后,细胞明显凋亡;DNA ladder条带也明显;Caspase-3的活性明显高于对照组;Bax、Bid、Bak、p53、Caspase-9表达上调,Bcl-2表达下调;Caspase-9抑制剂(ZLEHD-FMK)能够逆转SS对SGC-7901细胞的增殖抑制活性。结论 SS对SGC-7901细胞的增殖抑制作用最强,且是通过Caspase-9介导的线粒体凋亡信号转导通路来调控细胞凋亡的。     

DISC与肿瘤细胞TRAIL凋亡信号调节

近年来,凋亡已成为当代生物学研究的一个广泛而深入的领域，作为细胞生理性死亡的最常见的形式，凋亡与增生共同调控着组织器官的发生、发展和消亡。肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TNF-related apoptosis-indueing ligand。TRAIL）是近年来发现的凋亡分子之一．其最显著特征是能够选择性诱导肿瘤细胞和转化细胞的凋亡。并对正常组织没有明显的毒性作用。早期认为,细胞对TRAIL敏感还是耐受,与细胞表面TRAIL受体的表达和分布有关。     

Bcl-2家族对线粒体质量控制的调控研究

线粒体质量控制是维持细胞生存及生存状态的重要机制,通过对线粒体形态、数量与质量的多维调控,维持细胞内稳态。研究发现Bcl-2家族与线粒体多种功能的调控密切相关,并参与调控线粒体自噬/细胞凋亡互调节及线粒体分裂、融合的动态变化,是线粒体质量控制的关键调控因子。该文主要综述Bcl-2家族对线粒体质量控制的影响及其主要调控机制。     

Bcl-2家族对线粒体质量控制的调控研究北大核心CSCD

线粒体质量控制是维持细胞生存及生存状态的重要机制,通过对线粒体形态、数量与质量的多维调控,维持细胞内稳态。研究发现Bcl-2家族与线粒体多种功能的调控密切相关,并参与调控线粒体自噬/细胞凋亡互调节及线粒体分裂、融合的动态变化,是线粒体质量控制的关键调控因子。该文主要综述Bcl-2家族对线粒体质量控制的影响及其主要调控机制。     

高糖致大鼠视网膜神经细胞凋亡的PI3K-AKT通路机制及PKA/PKC的调控作用研究

目的对高糖致大鼠视网膜神经细胞凋亡的磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶(PI3K-AKT)通路机制及PKA/PKC的调控作用进行研究,为相关疾病治疗提供参考。方法细胞随机分为4组:对照组、高糖组、蛋白激酶A(PKA)抑制剂H89组和蛋白激酶C(PKC)抑制剂H7组(n=9)。除对照组外,其余各组细胞给予10 mmol·L~(-1)高糖溶液处理6 h,PKA抑制剂H89组和PKC抑制剂H7组细胞分别于最后4 h加入H89(10 mmol·L~(-1))和H7(10 mmol·L~(-1)),共培养,免疫印迹法或免疫细胞化学法分析细胞凋亡状态及PI3K-AKT和结缔组织生长因子(CTGF)的表达。结果高糖组细胞发生明显的细胞凋亡,且PI3K-AKT和CTGF的表达明显增强,而PKA抑制剂H89组上述异常显著恢复(P<0.05)。结论激活的PI3K-AKT通路及CTGF参与了高糖诱导的视网膜神经细胞凋亡过程,且其是由PKA调控的。     

福辛普利对平滑肌细胞凋亡及凋亡调控基因的影响

目的：探讨血管紧张素Ⅱ在不同浓度和不同作用时间下对血管平滑肌细胞凋亡及凋亡调控基因表达的作用，并研究福辛普利对其的影响。方法：采用流式细胞技术测定在不同浓度和不同作用时间血管紧张素Ⅱ作用下血管平滑肌细胞凋亡率及凋亡调控基因Fas、Bcl-2表达的变化和福辛普利对其的影响。结果：血管紧张素Ⅱ对血管平滑肌细胞凋亡和凋亡调控基因表达有较明显的诱导作用。福辛普利可抑制AngⅡ作用，对细胞凋亡有一定的影响，同时可影响凋亡调控基因的表达。结论：血管紧张素Ⅱ具有一定的的促进血管平滑肌细胞凋亡作用和调节凋亡调控基因表达的作用，尤其大剂量作用较明显。而福辛普利可明显抑制AngⅡ对血管平滑肌细胞的作用。     

DNA结合抑制因子4在肿瘤发生发展中的作用

DNA结合抑制因子4(Id4)是Id转录因子的成员之一,Id4基因的表达受多种调控元件的调控,在正常组织及肿瘤组织中均有表达。Id4蛋白在细胞增殖,细胞分化及细胞凋亡的调控中起着重要的作用,并在肿瘤的发生和发展过程中起着不同的作用。     

蛋白酶体抑制剂的抗肿瘤作用及其临床应用

泛素．蛋白酶体通路介导细胞蛋白质的降解，在细胞周期、基因转录及表达、抗厚提呈和炎症演进等方面发挥调控作用。蛋白质酶体抑制剂可抑制肿瘤细胞的生长和增殖，诱导凋亡，逆转肿揎细胞的多药耐药性，增加其他化疗药物和放疗的敏感性，具有良好的抗肿瘤作用，是一个极有前是的抗肿瘤药物。现综述其作用机制、分类、抗肿瘤作用及临床应用进展。     

心血管疾病与细胞凋亡

细胞凋亡(apoptosis)是指细胞在某些生理或病理情况下发生的有序的主动性死亡,又称程序化死亡(programmedcelldeath)。细胞凋亡是人体组织细胞普遍存在的一种生理现象。某些致病因子可使细胞凋亡发生异常,从而破坏了机体细胞的自稳态而表现为疾病的发生。细胞凋亡的异常在心血管疾病中也有重要的作用。1细胞凋亡的形态学特征、发生机制及调控1972年,Kerr等提出细胞凋亡的概念,以区别于细胞坏死(necrosis)的死亡过程。细胞坏死是指病理刺激导致的被动性细胞死亡,其过程无基因调控参与,受累细胞成灶状。而凋亡是局部环境生理或病理刺激引起的…     

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白抑制剂的开发

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)是细胞生长和代谢的中心调控因子,雷帕霉素等作为mTOR抑制剂,具有免疫抑制、抗癌等疗效,临床上应用不断拓展。本文综述mTOR的信号通路及mTOR抑制剂开发。     

吴茱萸碱诱导人子宫颈癌HeLa细胞凋亡的机制研究

目的研究吴茱萸碱(evodiamine)诱导人子宫颈癌HeLa细胞凋亡的分子生物学机制。方法用结晶紫法和琼脂糖凝胶电泳法以及用两种caspase的蛋白酶抑制剂测定细胞凋亡过程中caspase的信号传导路径。结果吴茱萸碱可诱导HeLa细胞的细胞膜皱缩、细胞质浓集及凋亡小体的形式,并清晰可见以180 bp倍数裂解的DNA梯形电泳带的出现。抑制剂VAD-fmk(caspase家族总抑制剂)和DEVD-fmk(caspase-3抑制剂)能部分抑制HeLa细胞的凋亡。结论Evodiamine诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡;caspase cascade信号传导路径与凋亡密切相关。     

赛特铂对人卵巢癌细胞A2780的凋亡诱导作用

目的：观察赛特铂对人卵巢癌细胞A2780的凋亡诱导作用及对细胞周期的影响。方法：MTT法观察药物对细胞增殖的抑制作用，碘化丙锭染色分析细胞周期变化，电镜和荧光显微镜观察细胞形态学变化，多参数流式细胞术及TUNEL法检测细胞凋亡率，并测定caspase-3的活性变化及caspase抑制剂对细胞存活率的影响。结果：赛特铂可抑制A2780细胞的增殖并诱导凋亡，具有明显的剂量依赖性，作用与顺铂相当。赛特铂主要导致A2780细胞S期细胞明显增加，G2／M期细胞少许增加。经赛特铂作用后漂浮细胞呈现典型凋亡细胞形态学改变。caspase-3活性随着细胞凋亡率增加而增加，caspase抑制剂不完全抑制细胞死亡。结论：赛特铂影响A2780细胞周期分布，可体外诱导A2780细胞凋亡。caspase依赖性和caspase非依赖性途径参与了其凋亡过程，其中caspase依赖性途径又包括caspase-3依赖性和非easpase-3依赖性途径。     

NF-κB在细胞凋亡中调节作用的研究进展

细胞凋亡是由基因控制的细胞自主有序的主动死亡过程,主要有3条通路参与引起细胞凋亡,即细胞内的线粒体通路、内质网通路和细胞外的死亡受体通路。近年研究表明,NF-κB与细胞凋亡关系密切,具有抑制凋亡和促进凋亡的双向调节作用,其在细胞凋亡中调节作用与凋亡抑制蛋白家族、B细胞淋巴瘤/白血病-2家族、肿瘤坏死因子受体相关因子家族、c-Jun氨基端激酶、肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体和Fas相关死亡域蛋白样白细胞介素1β转化酶抑制蛋白等有关。探索NF-κB在细胞凋亡中的调控机制,对凋亡相关疾病的药物开发具有重要意义。本文就NF-κB在细胞凋亡中的调节作用进行综述。     

分泌性白细胞蛋白酶抑制剂研究进展

分泌性白细胞蛋白酶抑制因子（secretory leucocyte protease inhibitor,SLPI）也叫抗白细胞蛋白酶或分泌性蛋白酶抑制剂,为粘膜上皮细胞分泌的非糖基化单链多肽蛋白,是一种嗜中性弹性蛋白酶阳离子抑制剂,具有抗菌、抗病毒、抗炎和诱导细胞增殖分化等多方面生物学活性,还可通过生长增殖、细胞凋亡、组织改建等多种途径来调控创伤微环境,从而影响创伤愈合进程。本文将其近年来主要研究进展综述如下。     

水飞蓟宾通过诱导活性氮生成增多介导人表皮癌A431细胞死亡

目的采用天然药物提取物水飞蓟宾作用于人表皮癌A431细胞,考察药物诱导细胞内生成活性氮(reactive nitrogen species,RNS)的来源及其在诱导细胞凋亡过程中所起的调控作用。方法采用噻唑蓝比色法、流式细胞术及一氧化氮(nitric oxide,NO)试剂盒检测法等方法考察药物对细胞的生长抑制、RNS生成、线粒体损伤及凋亡等影响。结果及结论水飞蓟宾可浓度依赖性诱导A431细胞生长抑制;在此过程中细胞内RNS及NO水平增高,一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)抑制剂或NO抑制剂的加入可逆转这一现象的发生;同时,N-硝基-L-精氨酸甲酯(Nnitro-L-arginine methyl ester,L-NAM E)及一氧化氮清除剂PTIO可显著逆转水飞蓟宾诱导的细胞凋亡。说明水飞蓟宾可能是通过激活内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,e NOS)而诱导细胞内NO水平增高,并通过线粒体途径促进了细胞凋亡的发生。     

NS-398诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

目的 :研究选择性环氧化酶 2 (COX 2 )抑制剂NS 398对人肝癌细胞HepG2 凋亡的影响 ,及其相关蛋白Bcl 2在细胞凋亡中的作用。方法 :通过体外细胞培养 ,应用荧光显微镜、透射电镜、流式细胞仪观察NS 398对HepG2 的凋亡诱导作用 ,应用免疫细胞化学法观察Bcl 2在人肝癌细胞HepG2 凋亡中的表达。结果 :NS 398处理HepG2 细胞后 ,电镜下可见到细胞核固缩、染色质凝集成新月型紧靠核膜周边 ,核碎裂、染色质片断化等典型的细胞凋亡形态变化。荧光显微镜及流式细胞检测则未见凋亡征象。免疫细胞化学分析显示 ,NS 398处理后的HepG2 细胞 ,其Bcl 2表达较对照组明显下降。结论 :COX 2选择性抑制剂NS 398对人肝癌HepG2 细胞有显著的凋亡诱导作用 ;抗凋亡基因Bcl 2在NS 398诱导的HepG2 细胞凋亡中有重要的调控作用。     

Hsp90抑制剂FS-108抑制癌基因依赖肿瘤细胞增殖及运动的机制研究

目的探讨Hsp90抑制剂FS-108抑制癌基因依赖的肿瘤细胞EBC-1和A375的增殖及运动能力的作用机制。方法采用磺酰罗丹明B法检测FS-108对细胞增殖的影响;采用蛋白免疫印迹法检测FS-108对Hsp90客户蛋白、周期调控蛋白及凋亡调控蛋白的变化;采用流式细胞术检测FS-108作用后细胞周期分布及凋亡情况;采用Transwell小室方法检测FS-108对细胞运动能力的影响。结果 FS-108对EBC-1和A375均有明显的增殖抑制作用,IC_(50)分别为25.53 nmol·L~(-1)和30.02 nmol·L~(-1)。FS-108能有效降解肿瘤细胞中的客户蛋白c-Met和B-Raf并进而抑制下游AKT及ERK信号通路。FS-108能诱导细胞产生G_2/M期阻滞及凋亡。同时,FS-108还能明显抑制EBC-1和A375细胞的运动能力。结论 Hsp90抑制剂FS-108主要通过诱导肿瘤细胞产生G_2/M期阻滞和细胞凋亡,发挥其抑制增殖的细胞生物学效应,同时,FS-108也具有一定抗转移潜能。