汉防己甲素和维拉帕米对环孢素A肾毒性的防护作用

了解中药汉防己甲素（Ｔｅｔ）和维拉帕米（Ｖｅｒ）对环孢素Ａ肾毒性（ＣｓＡ－ＮＴ）的防护作用。方法一组大鼠用ＣｓＡ５０ｍｇ·ｋｇ－１／ｄ灌胃７天导致急性ＣｓＡ中毒，另二组在给ＣｓＡ前，分别给Ｖｅｒ及Ｔｅｔ。结果ＣｓＡ中毒大鼠表现为血清肌酐升高３４．８％，Ｃｃｒ下降３９．４％，并出现近曲小管大片空泡变性。同时，肾皮质丙二醛（ＭＤＡ）含量显著升高，超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性显著下降。给予Ｔｅｔ或Ｖｅｒ均能使上述肾功能和脂质过氧化指标明显改善，Ｔｅｔ还能减轻ＣｓＡ所致的组织学损害。结论Ｔｅｔ能有效地保护ＣｓＡ对肾的毒害     

汉防己甲素防护环孢素A肾毒性的实验研究

本文观察了中药钙拮抗剂汉防己甲素对大鼠环孢素A肾毒性（CsA－NT）的防护作用。雄性Wistar大鼠用CsA50mg·kg－1／d灌胃7天导致急性CsA－NT，表现为血清肌酐（Cr）升高34．8％，内生肌酐清除率（Ccr）下降39．4％，组织学检查发现近曲小管大片空泡变性。同时，肾皮质丙二醛（MDA）含量显著升高，超氧化物歧化酶（SOD）活性显著下降。大鼠每日用CsA灌胃前30分钟，给予汉防己甲素10mg／kg腹腔注射，能使上述指标明显改善，组织学损伤也明显减轻。实验结果提示汉防己甲素能从功能和形态上防护大鼠急性CsA－NT。     

汉防己甲素对肾病综合征大鼠肾小球细胞外基质的作用

目的探讨中药汉防己甲素(Tetrandrine)对单侧肾切除加两次注射阿霉素肾病综合征大鼠肾小球细胞外基质(ECM)的作用.方法将实验动物分为(1)正常对照组、(2)汉防己甲素治疗组、(3)氨氯地平治疗对照组和(4)模型组,于第12周留取尿标本,肾组织病理学检查和图像分析肾小球细胞外基质变化,计算ECM/肾小球面积(GA).结果汉防己甲素治疗组和氨氯地平组肾小球ECM均明显减少(ECM/GA为0.24±0.02、0.29±0.01比(4)组0.39±0.02)(P＜0.05)、球囊粘连减轻.结论汉防己甲素能减少肾病综合征大鼠肾小球ECM沉积,延缓肾小球硬化.     

汉防己甲素对大鼠急性脊髓损伤的作用及意义

目的：探讨汉防己甲素（Tet）对急性脊髓损伤（ASCI）的保护作用及作用机制。方法：81只大鼠随机分为三组：生盐水对照组（NS组）、汉防己甲素治疗组（Tet组）和甲基强松龙治疗组（MP组），每组27只，用加速型Allen′s打击法制成脊髓急性损伤模型，监测大鼠ASCI后及用药后的血压变化，测定损伤区脊髓Ca^2 、MDA含量；采用氢清除法测定脊髓伤区血流量（SCBF）的变化；连续观测6周ASCI后运动功能评分情况，ASCI后4h,8h、6周取伤区标本进行组织病理检查，结果：ASCI后10s各组动物的MABP显著升高，1min内迅速降至正常水平，之后Tet组舒张压，平均动脉明显降低（P＜0．05），而收缩压降低不明显（P＞0．05）；ASCI后SCBF下降，但Tet组和MP组的SCBF较NS组高（P＜0．05）；损伤区Ca^2 及MDA含量Tet组和MP组均较NS组低，神经功能评分均较NS组高。结论：Tet能改善微循环，防止SCBF的减少；抗脂质过氧化损伤，减少脂质过氧化物MDA的生成；减轻Ca^2 的局部积聚，防止钙超载，阻断继发性损伤的链式反应，减轻组织继发性损伤。对实验性急性脊髓损伤有保护作用。     

汉防己甲素、川芎嗪和苦杏仁甙对人肾成纤维细胞的影响

目的 观察汉防己甲素、川芎嗪和苦杏仁甙３种中药成分对人肾成纤维细胞（ＫＦＢ）的影响。方法 采用ＥＬＩＳＡ法、四甲基偶氮唑蓝（ＭＴＴ）法、流式细胞仪、免疫组织化学法分别检测汉防己甲素、川芎嗪、苦杏仁甙对人ＫＦＢ分泌的Ｉ型胶原酶活性、人ＫＦＢ增殖、凋亡、Ｉ型胶原表达的影响。结果 汉防己甲素、川芎嗪、苦杏仁甙３种中药提取成分在各自的最佳浓度范围和作用时间内均能提高人胚ＫＦＢ分泌的Ｉ型胶原酶活性、抑制人胎     

汉防己甲素治疗急性脊髓损伤的实验研究

目的 探讨汉防己甲素(Tetrandrine，Tet)对急性脊髓损伤(Acute spinal cord injuries，ASCI)的保护作用。方法 74只Wistar大鼠随机分为4组，用改良Allen’s打击法制备大鼠截瘫模型，造模前各组分别投给相应的药物，伤后1h、4h取损伤区脊髓组织进行形态学观察和生化指标测定。结果 汉防己甲素能明显降低组织钙总量和MDA含量，防止镁总量和SOD含量的下降，稳定6-Keto-PGFla／TXB2的比值，减轻组织病损。结论 Tet对ASCI有保护作用，其作用机制为①扩张微血管，改善微循环，逆转ASCI后早期缺血倾向；②抗氧自由基，减轻组织过氧化损伤，稳定生物膜性结构；③减少ASCI后钙内流，从而阻断继发性损伤的链式反应。     

汉防己甲素对马兜铃酸A诱导的人近端肾小管上皮细胞转分化的干预作用

目的：探讨汉防己甲素（tetrandrine,rret）对马兜铃酸A（aristoloehic acid Ⅰ,AAⅠ）诱导的人近端肾小管上皮细胞（HK-2）转分化的拮抗效应。方法：将正常培养的HK-2随机分组：正常组、模型组、汉防己甲素高浓度组、汉防己甲素中浓度组、汉防己甲素低浓度组、泼尼松龙对照组（糖皮质激素组）。48h后观察各组细胞形态的变化,逆转录-聚合酶链式反应方法检测各组E—cadherin、TGF-β1、α-SMA mRNA表达水平,双抗体夹心酶联免疫吸附法测定各组细胞培养液中TGF-β1浓度,流式细胞技术测定各组E—cadherin阳性表达细胞的百分率。结果：汉防己甲素干预组及泼尼松龙对照组E—cadherin mRNA表达水平明显高于模型组（P〈0．05）,相反,其TGF-β1、α-SMA mRNA表达水平明显低于模型组（P〈0．05）;汉防己甲素干预组及泼尼松龙对照组TGF-β1浓度亦明显低于模型组（P〈0．05）;汉防己甲素干预组（中、低浓度）E—cadherin阳性表达细胞的百分率明显高于模型组（P〈0．05）,但汉防己甲素高浓度组和泼尼松龙对照组E—cadherin阳性表达细胞的百分率较之模型组增高不明显（P〉0．05）。结论：一定浓度（10μg／ml）的AAⅠ能诱导体外培养的HK-2转分化,适当浓度的Tet对AAi诱导的HK-2转分化具有明显的拮抗作用;AAI亦能上调TGF-β1的表达,而适当浓度的Tet能拮抗AAI引起的TGF-β1的高表达。     

汉防己甲素对成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白合成的影响

目的探讨汉防己甲素预防和治疗增生性瘢痕的可行性.方法对增生性瘢痕中的成纤维细胞进行培养,然后加入不同浓度的汉防己甲素,培养后继续观察成纤维细胞合成胶原蛋白的能力的变化.结果汉防己甲素可以抑制成纤维细胞合成胶原蛋白.结论汉防己甲素对成纤维细胞胶原蛋白的合成具有抑制作用,因此它可能对增生性瘢痕具有预防和治疗作用.     

汉防己甲素对成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白合成的影响

目的　探讨汉防己甲素预防和治疗增生性瘢痕的可行性。方法　对增生性瘢痕中的成纤维细胞进行培养 ,然后加入不同浓度的汉防己甲素 ,培养后继续观察成纤维细胞合成胶原蛋白的能力的变化。结果　汉防己甲素可以抑制成纤维细胞合成胶原蛋白。结论　汉防己甲素对成纤维细胞胶原蛋白的合成具有抑制作用 ,因此它可能对增生性瘢痕具有预防和治疗作用     

吉西他滨与胰腺癌化疗耐药

目的探讨胰腺癌对吉西他滨化疗产生耐药性的相关机理。方法复习近年国、内外相关文献，对介导胰腺癌吉西他滨耐药性的主要基因及信号通路加以综述。结果癌基因c—Src与bcl—X1、NF-κB炎症信号通路、细胞因子IL-1β及NO等与介导胰腺癌对吉西他滨的耐药性密切相关；多药耐药基因MDR1／P-gP与胰腺癌吉西他滨耐药的相关性仍有待研究。结论癌基因c—Src与bcl—X1、NF-κB炎症信号通路等可能成为新的治疗靶点以增加胰腺癌的化疗敏感性；介导胰腺癌化疗耐药的关键基因与中心信号通路尚有待阐明。     

Multidrug Resistance

Zusammenfassung Im letzten Jahrzehnt wurde durch die erfolgreiche Anwendung gentechnischer Verfahren Einblick in den spezifischen Charakter der Krebszelle geschaffen. Im Falle der Vielfachresistenz (multidrug resistance) führte die Aufkl?rung der Resistenzgene zu neuem und unerwartetem Wissen über die Tumorphysiologie und er?ffnet m?glicherweise Behandlungsoptionen durch überwindung der klinischen Chemoresistenz. Die Ergebnisse bei Tumoren des urologischen Gebiets sind experimentell inzwischen relativ ausgereift und gestatten eine erste Einsch?tzung von definierten Resistenzfaktoren wie P-Glykoprotein (Pgp), Multidrug-resistance-associated-Protein (MRP), Topoisomerase (topo), oder Glutathion-S-Transferase (GST). Klinische Studien zu einigen dieser Konzepte wurden begonnen und müssen sorgf?ltig beobachtet werden. Weiterentwicklungen dieses forschungsintensiven Bereichs lassen breitere Anwendungsm?glichkeiten in der Urologie erwarten.      

乳腺癌多药耐药性研究进展

目的：综述乳腺癌多药耐药性研究的最新进展。方法：采用文献回顾的方法，对目前国内、外有关乳腺癌多药耐药性的研究状况加以分析与综述。结果：乳腺癌多药耐药是多基因、多阶段、多步骤、多因素共同作用的结果。如何早期明确化疗药物的敏感性并选择适宜的个体化治疗方案，是避免化疗失败，提高患者生存率和生活质量的一个重要环节。结论：深入研究乳腺癌多药耐药的发生、发展机理，有助于临床预测化疗疗效．分析患者预后，并为最终解决多药耐药这一难题提供有益的帮助。     

Treatment Resistance in Stem Cells and Breast Cancer

Cancer stem cells are resistant to current chemotherapy and radiation regimens available for breast cancer, making it imperative to study the mechanisms of resistance and development of therapeutic strategies that targets the tumor initiating cell population. One of the difficulties in identifying new drug targets has been that our current high throughput drug screens look for tumor shrinkage and do not incorporate the impact of compounds on the cancer stem cell population. In this review we discuss the literature on treatment resistance in breast cancer and the design of new clinical trials for test compounds which will allow us to determine both the reduction in tumor size and decrease in cancer stem cell population. In order to detect the effect of target compounds on cancer stem cells in a clinical setting, we will need to do multiple assays which include high throughput flow sorting analysis to determine the total number of CD44⁺/CD24^−/low/Lin⁻ and ALDH1 positive cells, as well as in-vitro mammosphere formation assay which is a functional assay dependent on the self renewal and anchorage independent growth properties of these cells.     

胰腺癌细胞survivin表达RNAi抑制载体的构建及其抑制作用的研究

目的构建胰腺癌细胞生存蛋白（survivin）表达的RNA干扰（RNAi）抑制载体，并研究其对survivin表达的抑制作用。方法用免疫荧光技术和RT-PCR检测胰腺癌细胞PANC-1中survivin及其mRNA的表达，并把survivin基因克隆到T载体进行测序；构建针对survivin缺失碱基基因和survivin基因的RNAi载体si-svv-1和si—SVV-2，用脂质体转染胰腺癌细胞PANC-1后，用RT—PCR、DNA梯状电泳及流式细胞术分析比较2种干扰载体对survivin mRNA表达的抑制情况和检测细胞凋亡。结果survivin在胰腺癌细胞PANC-1中高表达；si—svv-2对survivin mRNA的表达抑制率达（72．43±8．04）％，而si—svv-1为0；si—svv-2能诱导胰腺癌细胞PANC-1的凋亡，72h细胞凋亡率达（12．36±1．44）％。结论本研究成功建立胰腺癌细胞survivin表达RNAi抑制载体，该载体可特异有效地抑制胰腺癌细胞PANC-1survivin的表达并诱导胰腺癌细胞PANC-1凋亡。     

肺耐药蛋白在胰腺癌细胞中的表达及意义

目的探讨肺耐药蛋白(lungresistanceprotein,LRP)在胰腺癌细胞株中的表达及意义。方法采用反转录多聚酶链反应(RT-PCR)和免疫细胞化学方法检测8株胰腺癌细胞株(SW1990、PCT-2、PCT-3、PCT-4、Aspc-1、Capan-1、Mia-PaCa-2及Panc-1)中LRP在基因水平和蛋白水平的表达。结果RT-PCR结果显示,在胰腺癌细胞株PCT-2中未检测到LRPmRNA的表达,在PCT-4、Aspc-1和Panc-1中,LRPmRNA表达条带较强;在SW1990、PCT-3、Capan-1和Mia-PaCa-2中LRPmRNA表达条带较弱;半定量平均表达水平为0.56±0.33。免疫细胞化学结果证实,在PCT-2细胞中无LRP蛋白表达,PCT-3细胞中LRP蛋白弱表达,SW1990、Aspc-1和Capan-1细胞中LRP蛋白中度表达,而在PCT-4、Mia-PaCa-2和Panc-1细胞中可见LRP蛋白的过度表达。结论在胰腺癌细胞中存在LRP的先天性表达,LRP过表达可能是介导胰腺癌细胞先天性耐药的重要机理之一。     

Inhibition of Proliferation by Omega-3 Fatty Acids in Chemoresistant Pancreatic Cancer Cells

Background Pancreatic cancer-gemcitabine (GEM) chemoresistance has been demonstrated to be associated with enhanced NF-kB activation and antiapoptotic protein synthesis. The well-known capacity of omega-3 fatty acids (n-3 FAs) to inhibit NF-kB activation and promote cellular apoptosis has the potential to restore or facilitate gemcitabine chemosensitivity. Methods Four pancreatic cancer cell lines (MIA PaCa-2, BxPC-3, PANC-1, and L3.6), each with distinct basal NF-kB and differing GEM sensitivity profiles, were administered: 100 uM of (1) n-3FA, (2) n-6FA, (3) GEM, (4) n-3FA + GEM, or (5) n-6FA + GEM for 24 and 48 hours. Proliferation was assessed using the WST-1 assay. To define the mechanism(s) of altered proliferation, electron mobility shift assay for NF-kB activity, western blots of phoshoStat3, phosphoIκB, and poly(ADP-ribose) polymerase (PARP) cleavage were performed in the MIA PaCa-2 cell line. Results All cell lines demonstrated a time/dose-dependent inhibition of proliferation in response to n-3FA. For MIA PaCa-2 cells, n-3FA and n-3FA + GEM treatment resulted in reduction of I-kB phosphorylation and NF-kB activation when compared with n-6FA control. n-3FA and combination treatment also significantly decreased Stat3 phosphorylation, whereas GEM alone had no effect. n-3FAs and n-3FA + GEM groups demonstrated increased PARP cleavage, mirroring NF-kB activity and Stat3 phosphorylation. Conclusions n-3 FA treatment is specifically associated with inhibition of proliferation in these four pancreatic cell lines irrespective of varied gemcitabine resistance. An experimental paradigm to screen for potential contributory mechanism(s) in altered pancreatic cancer cellular proliferation was defined, and using this approach the co-administration of n-3 FA with GEM inhibited GEM-induced NF-kB activation and restored apoptosis in the MIA PaCa-2 cell-line. Supported by: NIDDK K08 DK DK60778 (Espat)     

缺血-再灌注损伤对大鼠急性胰腺炎胰腺细胞凋亡的影响

目的探讨缺血一再灌注(I／R)损伤对大鼠急性胰腺炎(AP)胰腺细胞凋亡的影响。方法将SD大鼠54只按编号法随机分为对照组(n=6)、胰腺炎组(n=24)和I／R损伤组(n=24)。经胆胰管逆行加压注入3％牛磺胆酸钠建立大鼠AP模型，在此基础上，I／R损伤组通过暂时阻断脾下动脉造成局部胰腺I／R模型，对照组于术后lh，其余两组于术后1h、3h、6h和12h采取断颈方法分批处死动物，应用末端脱氧核苷酸转换酶(TdT)介导的原位末端标记(TUNEL)法检测缺血一再灌注区胰腺细胞凋亡。并观察其病理改变。结果胰腺炎组大鼠术后1h、3h胰腺组织仅为充血、水肿性改变，6h出现出血、坏死性改变；而1／R损伤组大鼠术后1h缺血一再灌注区胰腺呈现出血、坏死性改变，病变持续加重；AP后胰腺凋亡细胞明显增多，I／R损伤组和胰腺炎组的凋亡细胞高峰值分别在术后3h和6h；I／R损伤组术后1h、3h缺血一再灌注区胰腺凋亡细胞显著高于相应时相的胰腺炎组(P＜0．01，P＜0．05)．而6h、12h明显低于胰腺炎组(P＜O．05，P＜O．01)。结论I／R损伤在促发胰腺炎从水肿型向出血坏死型转化过程中，同时诱导胰腺细胞凋亡，细胞凋亡可能是阻止AP病变加重的一个有利反应。     

ABC Transporters, Drug Resistance, and Cancer Stem Cells

The protection of the body’s stem cells from damage or death due to toxins is a critical function of an organism, as the stem cells need to remain intact for the entire life of the organism. One of the principal mechanisms for protecting stem cells is through the expression of multifunctional efflux transporters from the ATP-binding cassette (ABC) gene family. These same transporters have been known for over 25 years to also play a role in multidrug resistance of tumor cells. An exciting outcome of the concept of the cancer stem cell is that the tumor initiating cell may be innately resistant to many standard therapies. This provides one mechanism in which cancer stem cells could survive cytotoxic or targeted therapies and lead to tumor regrowth or relapse. Gaining a better insight into the mechanisms of stem cell resistance to chemotherapy might therefore lead to new therapeutic targets and better anti-cancer strategies.