黑地黄丸改善5/6肾切除大鼠肾衰竭模型微炎症状态的免疫调节机制研究

目的：通过黑地黄丸对5/6肾切除肾衰竭大鼠（ CRF大鼠）的免疫器官胸腺、脾脏（指数）及血清IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10、CRP水平的影响，探讨黑地黄丸改善CRF大鼠“微炎症状态”的免疫调节机制，并寻求最佳剂量。方法：将50只Wistar大鼠随机分为空白组，模型组，黑地黄丸高、中、低剂量组5组，除空白组外其他各组大鼠均行5/6肾切除术，建立CRF大鼠模型，连续给药12周后测定免疫器官胸腺、脾脏指数，采用ELISA法测定血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10、CRP的含量。结果：黑地黄丸各剂量组均能明显升高 CRF大鼠胸腺、脾脏指数，同时降低血清 IL -1β、TNF -倩、IL-6、CRP的水平，升高IL-10水平，提示黑地黄丸对CRF大鼠胸腺和脾具保护作用，并可有效调节CRF大鼠细胞因子紊乱。结论：黑地黄丸对CRF大鼠“微炎症状态”改善机制与其调节大鼠的免疫功能密切相关，具体表现在保护CRF大鼠胸腺、脾脏，抑制炎性因子IL-1β、TNF-倩、IL-6的合成与分泌，下调CRP水平，上调IL-10水平等方面。且以黑地黄丸高剂量组效果最佳。     

δ阿片受体激动剂DADLE对脓毒症大鼠神经内分泌免疫网络的影响

目的研究δ阿片受体激动剂DADLE对脓毒症大鼠神经内分泌-免疫网络的调节作用。方法选用72只SD大鼠随机分为假手术组(SO)、脓毒症组(SEP)、DADLE组[制模后腹腔内注射DADLE(5mg/kg)],每组24只。盲肠结扎穿孔(CLP)建立脓毒症模型,制模后于6小时,12小时,24小时各取8只处死取材,ELISA法检测血清ACTH、CORT浓度。CLP后24小时处死的8只大鼠,取脑组织进行α7nAChR定量检测。结果脓毒症组(SEP)及DADLE组6小时,12小时,24小时后血清ACTH水平均显著高于假手术组(SO)(P0.05),DADLE组血清ACTH及CORT水平各时间点均低于脓毒症组(SEP)(P0.05)。SEP组12小时、24小时血清ACTH及CORT均显著高于6小时(P0.05),SEP组24小时血清ACTH浓度高于12小时,但CORT浓度较12小时降低(P0.05)。DADLE组24小时血清ACTH、CORT浓度显著低于12小时,但仍高于6小时(P0.05)。DADLE处理组α7nAChR量明显高于假手术组和脓毒症组(P0.05)。结论 DADLE激活胆碱能抗炎通路,增加α7nAChR的表达,减少炎症因子释放;并通过降低血清ACTH、CORT水平来干预下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴,减轻脓毒症大鼠的过度应激状态。     

高迁移率族蛋白B1 mRNA在脓毒症大鼠脾脏中的表达

目的：探讨高迁移率族蛋白B1（HMGB1）mRNA在脓毒症大鼠外周免疫器官脾脏的表达规律及其与血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）的关系。方法：采用盲肠结扎穿孔（CLP）方法制备大鼠脓毒症模型。83只大鼠随机分为正常对照组（10只）、盲肠结扎穿孔组（38只）,盲肠结扎穿孔丙酮酸乙酯治疗组（35只）。分别于CLP术后4、12、24、48、72h或CLP术后丙酮酸乙酯治疗12、24、48、72h活杀动物,留取脾脏组织和血清标本,用半定量逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）技术检测脾脏组织HMGB1mRNA的表达规律,用放射性免疫方法检测血清TNF-α和IL-6的浓度。结果：HMGB1mRNA在正常大鼠脾脏组织有轻度表达,CLP术后表达显著增强（P〈0.05）。CLP术后24h和72h分别出现两个高峰。丙酮酸乙酯液治疗可显著降低CLP术后大鼠脾脏组织HMGB1mRNA的表达（P〈0.05）。CLP术后大鼠血清TNF-α和IL-6浓度显著增高（P〈0.05）,丙酮酸乙酯治疗可显著降低CLP术后大鼠TNF-α和IL-6的浓度（P〈0.05）。结论：HMGB1在脓毒症大鼠外周免疫器官脾脏的表达显著增高,并与血清TNF-α和IL-6等炎症因子的增高有重要关系;HMGB1参与了失控性炎症反应的发展过程。     

脓毒症大鼠来源的外泌体对WJ-MSC的免疫调控能力的影响

目的探究脓毒症大鼠外周血来源外泌体对人脐带华通胶来源间充质干细胞(WJ-MSC)免疫调控能力的影响。方法采用盲肠穿孔结扎(CLP)方法建立脓毒症大鼠模型,分别提取对照组(假手术组)和实验组(CLP模型组)大鼠外周血的外泌体,鉴定其表面标志物及形态特征,并分别处理WJ-MSC,CCK8检测WJ-MSC的细胞活性,Annexin-VFITC/PI检测凋亡细胞比例,q PCR检测细胞因子(IL-10、TNF-α)的mRNA水平;分别将两组外泌体处理后的WJ-MSC与LPS刺激后的人单核巨噬细胞(THP-1)共培养,q PCR检测THP-1细胞中细胞因子(IL-6、IL-10、TNF-α、IL-1β)的mRNA水平变化。结果两组外泌体在表面标志物和形态特征上无明显差异;实验组外泌体不影响WJ-MSC的增殖活性,但可抑制其凋亡,同时能够上调IL-10的mRNA表达,下调TNF-α的mRNA表达;经过两组外泌体处理后的WJ-MSC,均能够降低LPS刺激下THP-1细胞中促炎性细胞因子(IL-1β,TNF-α)的表达,两组无明显差异。结论脓毒症大鼠外周血来源的外泌体能够上调WJ-MSC中IL-10的表达,下调TNF-α的表达,可增强其免疫调控能力。     

丙酮酸乙酯对脓毒症大鼠肠组织保护和HMGB1表达的影响

目的:通过观察丙酮酸乙酯对脓毒症大鼠肠组织HMGB1表达的影响,进一步揭示丙酮酸乙酯治疗脓毒症的分子作用机制。方法:将96只SD大鼠随机分为假手术组、脓毒症组、低剂量丙酮酸乙酯治疗组(LET组)、高剂量丙酮酸乙酯治疗组(ET组),以盲肠结扎穿刺法复制大鼠脓毒症模型。LET组(20 mg/kg)及ET组(40 mg/kg)即刻腹腔内注射EP注射液4 mL,每6 h重复注射一次,直至实验结束,假手术组及脓毒症组在相同时间用相同剂量的生理盐水腹腔内注射。各组大鼠分别于术后2 h、8 h、24 h、48 h 4个时间点随机处死6只大鼠,经腹主动脉取血,用ELISA方法检测血浆TNF-α、IL-6、HMGB1水平。术后24 h,取大鼠末端回肠,用RT-PCR法检测回肠组织HMGB1mRNA表达水平,用免疫组织化学两步方法观察肠组织HMGB1蛋白表达,在光镜下观察大鼠肠组织的病理变化。结果:与假手术组相比,脓毒症组血浆HMGB1在术后8 h、24 h、48 h显著增高,脓毒症组回肠组织HMGB1mRNA及蛋白表达在术后24 h显著增高(P0.05)。与脓毒症组相比,ET组、LET组血浆HMGB1在术后8 h、24 h、48 h显著降低,ET组、LET组回肠组织HMGB1mRNA及蛋白表达在术后24h显著降低(P0.05)。结论:脓毒症大鼠血浆HMGB1出现时间晚,作用时间长,提示HMGB1是脓毒症的重要晚期炎症介质。丙酮酸乙酯可抑制脓毒症大鼠血浆及肠组织HMGB1的表达,提示丙酮酸乙酯对脓毒症的治疗机制可能与其直接或间接抑制HMGB1的表达有关。     

血红素加氧酶-1在脓毒症大鼠炎性反应中的作用

目的 评价血红素加氧酶-1(HO-1)在脓毒症大鼠炎性反应中的作用.方法 雄性Wistar 大鼠72只,10～ 14周龄,体重250～ 300 g,以盲肠结扎穿孔法(CLP)建立脓毒症模型.采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=18):对照组(C组)、脓毒症组(CLP组)、钴原卟啉Ⅸ组(Co组)及锌原卟啉Ⅸ组(Zn组).于术后6、12、24 h(T1-3)时随机取6只大鼠采集血样,采用ELISA法检测血清TNF-α、IL-6和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的浓度.于T3时采集血样后取肺组织,采用RT-PCR法测定肺组织HMGB1 mRNA表达.另取40只相同条件的Wistar大鼠,按照上述方法分组,绘制生存曲线.结果 与C组比较,CLP组、Co组和Zn组血清TNF-α、IL-6和HMGB1浓度升高,肺组织HMGB1 mRNA表达上调,生存率降低(P＜0.05).与CLP组比较,Co组血清TNF-α、IL-6和HMGB1浓度降低,肺组织HMGB1 mRNA表达下调,生存率升高(P＜0.05),Zn组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 诱导HO-1表达有助于减轻脓毒症大鼠炎性反应.     

甲基强的松龙对重症急性胰腺炎大鼠脑组织神经细胞凋亡的影响

目的 探讨甲基强的松龙对重症急性胰腺炎大鼠脑组织神经细胞凋亡的影响.方法 将36只SD大鼠分为3组,假手术组、重症急性胰腺炎组、甲基强的松龙组,每组12只.逆行胰胆管注射5%牛磺脱氧胆酸钠建立重症急性胰腺炎模型.观察各组血清淀粉酶、IL-6、TNF-α水平、腹水量和胰腺组织的病理学改变.RT-PCR法分析脑组织Bcl-2、Bax mRNA的表达水平,TUNEL法检测神经细胞凋亡.结果 重症急性胰腺炎组血清IL-6、TNF-α升高,腩组织Bcl-2 mRNA表达减少,Bax mRNA表达上调,Bcl-2/Bax比值降低,脑组织神经细胞凋亡增加;甲基强的松龙组血清IL-6、TNF-α表达明显下降,脑组织Bcl-2 mRNA表达变化不明显,但Bax mRNA表达下调明显,Bcl-2/Bax比值升高,脑组织神经细胞凋亡显著减少.结论 重症急性胰腺炎时脑组织神经细胞凋亡可能是胰性脑病的发病机制之一;甲基强的松龙可抑制细胞因子的释放,促进脑组织Bcl-2和Bax基因表达的平衡,降低脑组织神经细胞凋亡指数,使脑组织损伤得以改善.     

温盐水腹腔灌洗减轻大鼠急性坏死性胰腺炎及机制

目的：探讨温盐水腹腔灌洗对大鼠急性坏死性胰腺炎（ANP）的影响及机制。 方法：75只SD大鼠随机分均为假手术组、ANP模型组（模型组）、温盐水腹腔灌洗预处理+ANP模型组（预处理组）,术后6 h处死大鼠,检测各组大鼠血清血清淀粉酶与细胞因子含量,PCR法检测胰腺组织HSP70、p38MAPK的mRNA表达,免疫组化法检测胰腺中NF-κB的表达。 结果：与假手术组比较,模型组与预处理组大鼠血清淀粉酶、TNF-α、IL-6、IL-8水平均明显升高,但预处理组各指标的升高程度明显低于模型组,模型组与预处理组胰腺组织HSP70、p38MAPK的mRNA表达均明显升高,但预处理组HSP70 mRNA表达量高于模型组,p38MAPK mRNA表达量低于模型组,差异均有统计学意义（均P<0.05）。假手术组大鼠胰腺组织NF-κB呈弱阳性表达,模型组呈强阳性表达,而预处理组呈中等阳性表达。 结论：温盐水腹腔灌洗可能通过诱导HSP70表达而抑制p38MAPK及NF-κB活性、下调细胞因子的表达,进而改善大鼠ANP病理生理过程。  

     

创伤弧菌脓毒症大鼠肝脏基质金属蛋白酶及其抑制基因的表达

目的观察创伤弧菌脓毒症大鼠肝脏组织基质金属蛋白酶（MMP-2、MMP-9）及其抑制基因（TIMP-2、RECK）表达水平的变化,探讨它们在创伤弧菌脓毒症中的作用。方法清洁级Sprague-Dawley雄性大鼠60只,随机分为6组,每组10只。第1组为健康对照组,第2—6组为创伤弧菌脓毒症模型组。观察大鼠行为学改变,提取各组大鼠肝脏组织总RNA,半定量RT-PCR法检测MMP-2、MMP-9以及TIMP-2、RECK基因mRNA水平表达的变化。结果染菌4h后,大鼠出现呼吸急促,皮温升高,下肢肿胀,且症状进行性加重;染菌12h后,大鼠出现紫绀、间断抽搐等症状。染菌2、6和9h后,大鼠肝脏组织中MMP-2及MMP-9基因mRNA水平表达明显上调,TIMP-2和RECK表达水平下调。结论MMP-2和MMP-9表达上调,以及TIMP-2和RECK表达水平下调提示它们可能参与了创伤弧菌脓毒症的病理生理过程。     

环氧合酶-2对脓毒症大鼠肝损伤的影响

目的研究环氧合酶-2（COX-2）在脓毒症大鼠的肝组织炎症反应中的表达，探索脓毒症中保护肝细胞的新途径。方法选择质量相近的Wistar大鼠54只随机分为3组：假手术组、脓毒症组及NS398组，建立盲肠结扎穿孔（CLP）脓毒症动物模型；用RT—PCR方法检测肝组织中COX-2mRNA的表达；酶联免疫吸附法（ELISA法）检测血清IL-6、TNF-α及IL-10水平变化；同时检测肝功能（ALT、AST）和肝脏病理变化。结果①肝组织中COX-2mRNA在假手术组呈低表达；脓毒症组CLP造模后3h表达明显增强，到6h达到高峰，12及24h时仍呈高表达；NS398组各时相点COX-2mRNA表达较脓毒症组明显降低（P〈0．05），但仍高于假手术组（P〈0．05）。②肝功能改变及IL-6、TNF-α水平在脓毒症组各时相点改变较假手术组和NS398组明显增高（P〈0.05）；IL-10水平NS398组高于假手术组（P〈0.05）和脓毒症组（P〈0．05）。③脓毒症组病理损伤重，NS398组肝脏病理损伤减轻。结论COX-2在脓毒症肝损伤中可能发挥重要作用。     

硫化氢在脓毒症大鼠结肠黏膜损伤中的作用

目的：探讨硫化氢（H2S）在脓毒症大鼠结肠黏膜损伤中的作用.方法：雄性SD大鼠随机分为5组：对照组、脓毒症组、脓毒症＋Naris组、脓毒症＋DL-炔丙基甘氨酸（PAG）组和脓毒症＋氨基-羟乙酸（AOAA）组.除对照组行假手术外,其余各组采用盲肠结扎穿孔（CLP）法制作大鼠脓毒症模型,术前30 min分别腹腔注射等量生理盐水、NariS（10 mg/kg）、PAG（50 mg/kg）、AOAA（20 mg/kg）.20 h后处死大鼠,取结肠组织,测定其H2S、肿瘤坏死因子-а（TNF-а）、白细胞介素-1β（IL-1β）含量,髓过氧化物酶（MPO）活性和胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）mRNA、胱硫醚-β-合成酶（CBS）mRNA表达水平,光学显微镜下观察结肠组织病理学变化.结果：①与对照组相比,脓毒症组结肠组织中H2S、TNF-а、IL-1β浓度增加,MPO活性明显增强（P〈0.01）,CBS mRNA、CSE mRNA表达水平提高（P〈0.01）,其组织结构遭到破坏,炎性细胞浸润增多.②与脓毒症组相比,脓毒症＋NariS组结肠组织中H：S、TNF-а、IL-1β浓度增加,MPO活性增强（P〈0.05）,CBS mRNA、CSE mRNA表达水平降低（P〈0.01）,结肠组织结构破坏加剧,更多炎性细胞浸润.与脓毒症组相比,脓毒症＋PAG组和脓毒症＋AOAA组结肠组织中H2S,TNF-а、IL-1β浓度降低,MPO活性减弱.但脓毒症＋PAG组各指标变化的差异无统计学意义,而脓毒症＋AOAA组各指标的变化差异有显著性（P〈0.01）;两组结肠组织结构破坏减轻.炎性细胞浸润减少.结论：脓毒症时,结肠组织内主要由CBS催化产生H2S,增多的H2S通过增强炎症反应加重结肠黏膜损伤.     

盐酸戊乙奎醚预先给药对脓毒症小鼠急性肺损伤时肺组织β-arrestin-2表达的影响

目的 探讨盐酸戊乙奎醚预先给药对脓毒症小鼠急性肺损伤时肺组织p抑制蛋白-2(β-arrestin-2)表达的影响.方法 健康雌性昆明小鼠30只,6周龄,体重18～20 g,采用随机数字表法,将其随机分为3组(n=10):假手术组(S组)、脓毒症组(CLP组)和盐酸戊乙奎醚预先给药组(PHC组).CLP组和PHC组采用盲肠结扎并穿孔法制备脓毒症模型.PHC组于模型制备前1h时腹腔注射盐酸戊乙奎醚0.45 mg/kg,S组和CLP组于模型制备前1h时腹腔注射等容量生理盐水.模型制备后12h时,采血和收集肺泡灌洗液测定肺通透性指数,采用化学比色法测定肺组织MPO活性,采用ELISA法测定肺组织IL-6含量,采用Western blot法测定肺组织β-arrestin-2蛋白表达,采用RT-PCR法测定肺组织β-arrestin-2 mRNA表达.结果 与S组比较,CLP组肺通透性指数、肺组织MPO活性和IL-6含量均升高,肺组织β-arrestin-2蛋白表达下调,β-arrestin-2 mRNA表达上调(p＜0.05),PHC组肺通透性指数、肺组织MPO活性和IL-6含量均升高,肺组织β-arrestin-2蛋白表达上调,β-arrestin-2 mRNA表达下调(p＜0.05).与CLP组比较,PHC组肺通透性指数、肺组织MPO活件和IL-6含量均降低,肺组织β-arrestin-2蛋白表达上调,β-arrestin-2 mRNA表达下调(P＜0.05).结论 盐酸戊乙奎醚预先给药减轻脓毒症小鼠急性肺损伤的机制可能与上调肺组织β-arrestin-2的蛋白表达有关.     

白细胞介素10对重症急性胰腺炎大鼠肾功能的保护作用

目的探讨白细胞介素10(IL-10)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肾功能障碍的保护作用。方法将SD大鼠54只随机分为3组,假手术组(SO)、SAP组、SAP加IL-10治疗组(SAP IL- 10),以5%牛磺脱氧胆酸钠逆行胰胆管注射建立SAP模型,观察各组术后12、24 h血清淀粉酶,肿瘤坏死因子α(TNF-a)、1L-6、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平,以及腹水量、胰腺和肾脏的病理改变,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析肾脏细胞间黏附分子1(ICAM一1)mRNA表达水平。结果SAP组制模后血清TNF-α、IL-6水平明显上升,肾脏ICAM-1 mRNA表达上调(P<0.01),BUN、Cr在12、24 h持续升高。与SAP组比较,SAP IL-10组血清TNF-α、IL-6、BUN、Cr水平明显下降,ICAM-1 mRNA表达下调(P<0.01),肾脏病理改变得到改善。结论IL-10可抑制TNF-α、IL-6血清水平,下调肾脏ICAM-1基因表达,改善SAP肾功能障碍。     

己酮可可碱对脓毒症大鼠肝组织生物蝶呤及其合成限速酶表达的影响

目的 探讨己酮可可碱对脓毒症大鼠肝组织生物蝶呤产生的影响及其意义。方法 采用大鼠盲肠结扎穿孔（CLP）致脓毒症模型,动物随机分为正常对照组、脓毒症组和己酮可可碱治疗组。分别于CLP后2,8,16h 处死动物,检测肝组织生物蝶呤及其合成限速酶－三磷酸鸟苷环水解酶Ⅰ（GTP－CHⅠ）mRNA及肿瘤坏死因子－α（TNF－α）mRNA表达的改变,同时监测血清肝功能酶学指标的变化。结果 脓毒症动物肝组织生物蝶呤含量显著升高,GTP－CHⅠ基因表达水平也显著增强,且共改变与局部TNF－αmRNA表达水平呈正相关。给予己酮可可碱治疗后2h,肝组织生物蝶呤含量、GTP－CHⅠ及TNF－αmRNA表达水平均明显下降（P＜0.05）,且血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶含量也显著降低（P＜0.05）。结论 脓毒症早期应用己酮可可碱能有效抑制肝组织生物蝶呤及其合成限速酶基因表达,并且明显减轻脓毒症动物肝损害。     

急性坏死性胰腺炎大鼠胰腺高迁移率族蛋白-1的表达及意义

目的探讨急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠模型胰腺组织高迁移率族蛋白-1(HMGB1)的表达及其意义。方法72只大鼠随机分成3组,即对照组、ANP组和正丁酸钠治疗组(治疗组)。逆行性胰胆管注射5%牛磺胆酸钠建立ANP模型。ELISA法检测血清TNF-α和IL-1β水平;RT-PCR法检测胰腺组织HMGB1 mRNA的表达,并观察其病理变化。结果ANP组血清TNF-α和IL-1β水平在ANP建模后6h达高峰,12h下降。ANP组大鼠胰腺组织HMGB1 mRNA表达水平在ANP后12h明显升高,至24h仍维持在较高水平。治疗组胰腺组织HMGB1 mRNA表达水平在ANP后12,24h明显低于ANP组(P<0.05),且同期胰腺损伤比ANP组轻(P<0.05)。建模后24h血清TNF-α和IL-1β水平ANP组与治疗组间差异无显著性。结论HMGB1作为晚期炎症因子参与了ANP的全身炎症反应。HMGB1抑制剂正丁酸钠能降低ANP大鼠胰腺组织HMGB1基因表达水平,减轻ANP胰腺组织的损伤。     

参附注射液对大鼠肢体缺血再灌注后肝脏损伤的保护作用

目的观察参附注射液对大鼠肢体缺血再灌注损伤后肝功能、血红素加氧酶-1（HO-1）表达的影响,并对其保护机制做一初步探讨。方法 64只清洁级SD雄性大鼠,用随机数字表法随机分为4组,每组16只,分别为假手术组、缺血再灌注组、参附干预组、参附＋锌原卟啉Ⅸ（Znpp）干预组。假手术组：大鼠麻醉后仅分离不夹闭股动脉,分离血管前10 min以7.5 mL/kg腹腔注射生理盐水;缺血再灌注组：夹闭股动脉前10 min以7.5 mL/kg腹腔注射生理盐水,夹闭股动脉缺血3 h,再灌注4 h;参附干预组：夹闭股动脉前10 min以7.5 mL/kg腹腔注射参附注射液,夹闭股动脉缺血3 h,再灌注4 h;参附＋Znpp干预组：术前30 min腹腔注射Znpp 5 mg/kg,余同参附干预组。再灌注完毕后取材,取外周静脉血测血清谷丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶（GOT）含量;取肝组织测定肝组织中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性;采用免疫组织化学法测定肝脏组织中HO-1蛋白表达;光镜下观察肝脏病理学改变。结果 1与假手术组比较,各肢体缺血再灌注造模组MDA含量均明显升高（P〈0.05）,SOD活性明显降低（除参附干预组外,P〈0.05）,GPT、GOT含量均明显升高（P〈0.05）,HO-1蛋白表达明显升高（P〈0.05）。2与缺血再灌注组比较,参附干预组MDA含量明显降低（P〈0.05）,SOD活性明显升高（P〈0.05）,血清GPT、GOT含量明显降低（P〈0.05）,肝组织中HO-1蛋白表达升高（P〈0.05）。3与参附干预组比较,参附＋Znpp干预组MDA含量明显升高（P〈0.05）,SOD活性明显降低（P〈0.05）,血清GPT、GOT含量明显升高（P〈0.05）,而肝组织HO-1蛋白表达差异无统计学意义（P〉0.05）。结论肢体缺血再灌注可造成肝脏功能损伤,给予参附注射液预处理可以减轻肝脏损害程度,这种保护作用可能与参附注射液预处理上调HO-1蛋白在肝组织中的表达、抑制氧自由基生成?     

免疫调理对脓毒症免疫功能和预后的作用

目的：探讨免疫调理对改善脓毒症大鼠和患者免疫功能及预后所起的作用。
方法：（1）实验部分：将大鼠分为3组：假手术组、对照组和实验组,每组20只。后2组采用大鼠盲肠结扎穿孔的方法制备大鼠脓毒症模型,对照组接受抗生素治疗,实验组接受抗生素加免疫调理。制作模后分别在3,12,24,48 h采血。各组大鼠按时点进行淋巴细胞计数和测定CD4+,CD8+ T淋巴细胞和CD4/CD8比值;观察胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡情况,计算脓毒症大鼠的存活率。（1）临床部分：前瞻性分析70例符合脓毒症患者,随机分成对照组和观察组。对照组接受经典治疗,观察组采用经典治疗联合蛋白酶抑制剂和胸腺肽α1治疗（经典治疗+免疫调理）,免疫调理疗程为7 d,分别观察治疗前和治疗后1,3,7 d临床和相关免疫学指标。
结果：（1）实验部分：CLP脓毒症造模成功后,实验组淋巴细胞,CD4+T淋巴细胞水平,CD4/CD8值均显著高于对照组明显（P＜0.05）。对照组胸腺和脾脏的淋巴细胞凋亡指数比实验组明显增高（P＜0.05）。实验组72 h存活时间比对照组明显延长（P＜0.05）。（2）临床部分：观察组CD4+T淋巴细胞,淋巴细胞计数及CD14+单核细胞HLA-DR水平较对照组显著升高（P＜0.05）。对照组死亡20例,观察组死亡13例（P＜0.05）。
结论：免疫调理可使脓毒症大鼠免疫功能提高,降低胸腺和脾脏淋巴细胞的凋亡率,提高脓毒症大鼠的存活率。免疫调理可提高脓毒症患者免疫调理的免疫功能,改善其免疫麻痹,延长近期生存率。     

白细胞介素6水平在大鼠深静脉血栓形成中的变化

目的：探讨白细胞介素6（IL-6）在深静脉血栓形成（DVT）中的变化与作用。 方法：60只雄性SD大鼠随机分为假手术组（n=10）与模型组（n=50）,模型组大鼠采用双侧股静脉钳夹联合后肢石膏制动诱导后肢DVT,并分别在造模后2、5、10、15、25 h各处死10只大鼠取材,观察股静脉血栓形成情况;用real-time PCR检测股静脉内皮组织IL-6 mRNA含量;ELISA法检测血清IL-6、纤溶酶原激活物抑制物（PAI）和纤溶酶原激活物（tPA）水平。 结果：模型组大鼠造模后2 h未见血栓形成,但从5 h开始出现血栓形成,并随着时间的延长,血栓形成逐渐增多。模型组大鼠股静脉内皮组织中的IL-6 mRNA水平在造模后逐渐升高,于15 h达高峰;模型组大鼠血清IL-6、PAI含量变化情况与IL-6 mRNA变化一致,但血清tPA浓度变化则与前两者相反。模型组以上各指标在各时间点与假手术组间的差异均有统计学意义（均P<0.05）。 结论：在大鼠DVT过程中IL-6水平升高,其可能通过促进PAI的产生、抑制tPA的活化来促进血栓的形成。     

黄柏碱改善脓毒症大鼠急性肾损伤的作用及机制研究

目的：考察黄柏碱对脓毒症大鼠急性肾损伤的保护作用及其机制。方法：取 50 只 SD 大鼠随机分为假手术组、模型组、黄柏碱低剂量组（100 mg/kg）、黄柏碱高剂量组（200 mg/kg）及氨苄青霉素钠组（150 mg/kg）,每组 10 只。除假手术组外,各组采用盲肠结扎穿孔术（CLP）建立脓毒症大鼠模型。术后 24 h,试剂盒检测血清肌酐（Cr）和尿素氮（BUN）的水平,ELISA 法检测血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）、肾损伤分子 1（KIM-1）、白细胞介素 -6（IL-6）、白细胞介素 -1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子 -α（TNF-α）,HE 染色法检测肾脏病变情况,免疫印迹法检测肾组织中 Toll样受体 4(TLR4) 及 Nod 样受体蛋白 3(NLRP3) 蛋白的表达。结果：与脓毒症大鼠比较,黄柏碱可明显降低大鼠血清中 Cr、BUN、NGAL 及 KIM-1 含量,抑制炎性因子（IL-6、IL-1β及 TNF-α）的释放,改善肾脏病理变化,同时可明显降低肾组织中 TLR4 及 NLRP3 的表达水平（P < 0.05）。结论：黄柏碱可通过调控 TLR4/NLRP3 信号通路降低体内炎症因子水平,从而对脓毒症所致急性肾损伤发挥保护作用。     

内毒素血症状态下生长激素不敏感的实验研究

目的：探讨内毒素血症状态下生长激素不敏感的发生机制。方法：采用雄性SD大鼠（n=180）,静脉分别注射内毒素（LPS）、TNF-α及IL-6,部分注射LPS大鼠同时皮下注射生长激素（GH）,不同时相处死大鼠。应用RT-PCR法测定肝组织胰岛素样生长因子I(IGF I)、生长激素受体（GHR）和细胞因子信号抑制子3（COCS-3）mRNA的表达;应用RIA测定血清GH水平;应用ELISA测定血清TNF-α和IL-6水平。结果：静脉注射LPS后各时相血清GH水平无明显变化,但肝组织IGF I和GHR mRNA的表达却明显下调,最多分别达53％和89％。正常大鼠肝组织SOCS-3mRNA微弱表达,但内毒素血症鼠其表达却明显上调,最高达7.84倍。大剂量LPS注射诱导更多GHRmRNA表达下调和SOCS-3mRNA表达上调。GH可使正常鼠肝组织IGF ImRNA的表达上调25％,但与LPS同时注射则不能阻止IGF I mRNA表达的下调。LPS刺激TNF-α和IL-6的产生,且升高的IL-6水平与SOCS-2mRNA表达上调成高度正相关。静脉注射TNF-α主要使肝组织GHRmRNA表达下调,而IL-6主要使肝组织SOCS-3mRNA表达上调。结论：静脉注射LPS可以诱导生长激素的不敏感,该不敏感可能与GHRmRNA表达下调和SOCS-3mRNA表达上调有关,TNF-α和IL-6可能从不同方面介导了LPS的部分生物效应。