大剂量γ线照射对小鼠免疫功能近期、远期的影响

目的 :观察大剂量γ线照射对小鼠免疫功能近期、远期的影响。方法 :将 2 2 5只清洁级C5 7小鼠 ,随机分为 0、6、9、12、15和 2 0Gy 6个剂量组 ,经γ线全身 1次照射后 ,于照后 1～2 8d和 3～ 12月活杀取材 ,用原位末端标记 (TUNEL)和May Grunwald Giemsa(MGG)染色 ,检测细胞凋亡并观察其与照射剂量的关系。用流式细胞仪检测外周血T细胞亚群的变化。结果 :(1)照后早期 (1～ 14 )d外周血淋巴细胞的凋亡率即出现明显升高 ,随着照射剂量的增加凋亡率的升高更为显著 ;而T细胞亚群经不同剂量照射后持续下降 ,剂量为 2 0Gy时降至最低 ,其中以CD8 T细胞对辐射的敏感性最高 ,因而推测早期的严重损伤是急性辐射免疫损伤的重要特点之一。 (2 )照射后 1月淋巴细胞的凋亡率降低 ,T细胞及其亚群也逐渐恢复。然而直至照后 6～ 12月 ,无论是淋巴细胞的凋亡率还是CD3 T细胞及CD8 T细胞亚群 ,均未恢复到对照的水平 ,提示大剂量辐射对机体免疫系统的损伤呈现较重的远期效应。 (3)本实验还发现 ,12≤Gy照射后 ,外周血淋巴细胞的凋亡率与照射剂量呈明显的剂量效应关系 ,15～ 2 0Gy照射后未观察到明显的量效关系。结论 :照射后早期外周血淋巴细胞的大量凋亡 ,可能是导致T细胞亚群的百分率急剧下降和后期免疫功能受损的重要原     

辐射引起的小鼠外周血淋巴细胞凋亡及其机理

用原位末端标记、ＤＮＡ电泳和免疫组化技术，观察了经２，４，６和８Ｇｙ不同剂量γ－射线照射后，小鼠外周血淋巴细胞的凋亡和与凋亡有关的Ｂａｘ和Ｂｃｌ－２蛋白在其中的作用。结果表明：（１）在照射后早期（４ｈ～７ｄ），淋巴细胞凋亡率迅速增加，如２，４，６和８Ｇｙ照射后４ｈ，凋亡率分别为对照值的２．６，３．８，５．５和１０．４倍，显示出较好的剂量效应关系。（２）随着照射剂量的增加，淋巴细胞绝对数急剧降低，如２，４，６和８Ｇｙ照射后４ｈ，淋巴细胞的绝对数分别为对照值的８２％，６３％，４７％和２２％，与淋巴细胞凋亡呈相反趋势，提示凋亡可能是急性照射后淋巴细胞减少的主要原因之一。（３）ＤＮＡ凝胶电泳显示，６Ｇｙ照射后３ｄ，淋巴细胞出现特征性的梯形谱；末端标记法显示，６Ｇｙ照射后７ｄ，凋亡率达到峰值，为照前值的１６倍，这些结果与Ｍａｙ－Ｇｒｕｎｗａｌｄ－Ｇｉｅｍｓａ染色所得数据基本符合。（４）照射后Ｂａｘ和Ｂｃｌ－２蛋白的异常表达证实，二者在淋巴细胞凋亡的调控中起重要作用。上述结果为阐明淋巴细胞辐射损伤与修复的机制，以及急性放射病的防治提供了重要的依据。     

单次高剂量率辐射和持续低剂量率辐射对外周血淋巴细胞培养的对比研究

目的:通过外周血淋巴细胞培养,对比研究单次高剂量率外放射和持续低剂量率内放射的辐射生物效应。方法:应用直线加速器对外周血淋巴细胞分别进行1、2、4、8、16、32Gy的单次辐射;应用P-32胶体0.01、0.1、0.5、2.7MBq,分别进行持续的外周血淋巴细胞辐射,培养3d后进行制片染色,对比分析研究细胞核的形态大小和染色体形成率。结果:单次1、2、4、8、16、32Gy的外放射后,外周血淋巴细胞染色体形成率分别为4.7%、5.5%、3.6%、1.7%、0.1%、0.02%;P-32胶体0.01、0.1、0.5、2.7MBq,连续3d的内辐射后,染色体形成率分别为3.3%、2.6%、1.7%、0.004%,未辐射对照组淋巴细胞形成率为3.5%。结论:单次小剂量(1、2、4Gy)辐射对外周血淋巴细胞培养可能有促进作用,单次高剂量(8、16、32Gy)辐射有明显抑制作用,高活度的P-32胶体(0.5、2.7MBq)对外周血淋巴细胞生长有明显抑制作用,对比认为,P-32胶体0.5MBq持续3d辐射的生物效应近似单次8Gy的外放射生物效应。     

还原型辅酶NADH对辐射后小鼠外周血及脾组织学改变的影响

目的探讨NADH对小鼠受照后,外周血白细胞和免疫器官脾组织学改变.方法采用6.0 Gy 60Co一次性辐射小鼠,尾静脉采血计数外周血白细胞,观察受照后第7天脾组织学改变和30d小鼠存活率.结果NADH能够对抗受照后小鼠外周血白细胞减小,增加脾重量和脾指数,减小脾中央动脉出血,提高小鼠30d存活率.结论NADH具有明显的抗辐射作用,但还需进一步研究.     

低剂量辐射对TCR／CD3和CD25在小鼠胸腺细胞浆膜表达的影响

本文首次报道低剂量Ｘ射线全身照射促进胸腺细胞表面ＴＣＲ＿（α．β）、ＣＤ３和ＣＤ２５等分子的表达。已知低剂量辐射可加速胸腺细胞更新和增殖。为了探讨低剂量辐射对胸腺细胞成熟过程的影响，用免疫荧光流式细胞术检测了７５ｍＧｙＸ射线全身照射后ＴＣＲ／ＣＤ３和ＣＤ２５的表达。发现照射后４～２４ｈＴＣＲ／ＣＤ３的表达随时间推移逐步增升，表明低剂量辐射促进胸腺细胞成熟。照射后２４ｈ丝裂原激活的胸腺细胞表达ＣＤ２５显著增强，提示胸腺细胞的功能活性增高。讨论了胸腺细胞表面上述分子表达变化在促进细胞信息传递中的意义。     

损伤脑垂体对小鼠子宫内膜T淋巴细胞亚群影响的实验研究

采用免疫组化荧光单克隆抗体方法 ,酶组化及透射电镜等方法对损伤脑垂体 (P组 )、腹腔注射HCG组 (H组 )、正常对照组 (N组 )小鼠子宫内膜 T淋巴细胞亚群的分布及变化进行研究。结果显示 :在小鼠正常动情周期内 ,子宫内膜 CD4/CD8比值动情期为 0 .35± 0 .15 ,动情前期 0 .5 4± 0 .13,间期则几乎见不到阳性细胞 ;P组小鼠子宫内膜 CD4/CD8比值为 1.0 7± 0 .15 ;而 H组小鼠的比值则明显下降 ,并且 ,P组小鼠子宫内膜出现明显的结构及酶活性的变化。综上结果提示 :小鼠正常动情周期内子宫内膜 T淋巴细胞亚群的分布有变化 ,其变化与激素水平相关 ;损伤脑垂体可致子宫内膜 CD4/CD8比值的明显升高 ,且对结构及功能有显著影响 ,以致子宫内膜局部正常免疫机制的改变。     

氨肽素对^60 C0γ辐射小鼠免疫损伤的保护作用

氨肽素是从哺乳动物毛爪中经高科技工艺提取分离的水溶性蛋白质，临床上作为治疗原发性血小板减少性紫癜、慢性型再生障碍贫血、过敏性紫癜及白细胞减少等血液疾病。近年来临床用于肿瘤手术、放疗、化疗后的机体免疫治疗及血液治疗。为探讨氨肽素免疫增强机理，我们以^60 C0γ辐射小鼠引起免疫损伤为模型，结果如下。     

盐酸小檗胺对辐射小鼠的免疫防护作用的实验研究

实验观察了盐酸小壁胺对射损伤小鼠免疫系统夜用并对体内脂质过氧化反应进行检测。结果显示：电镜观察预防用药照射组小鼠胸腺，脾淋巴细胞损伤显著轻于盐水照射组；胸腺及脾指数、体内淋巴细胞转及外周血白细胞计数减少速度与与盐水照射组有明显差异。体内脂质过氧化反应边实验表明：盐酸小壁胺对辐射引起的免疫损伤有良好的防护作用而有延长射小３０ｄ存活率的功效。     

白芍总甙对免疫系统的影响

白芍总甙(TGP)对羊红细胞免疫的小鼠脾淋巴细胞体外诱生溶血素(IgM)抗体和刀豆素A诱导小鼠脾淋巴细胞体外增殖反应均呈现低浓度(<0.4μg/ml)促进和高浓度(>0.4μg/ml)抑制的双向调节作用。TGP(5mg/kg,ip)可明显促进辐照加输注受训胸腺细胞体内诱导抗原特异性Th细胞。以上结果提示,TGP对免疫系统的影响有明显的浓度与机能依赖性特征。     

新疆家蚕抗菌肽CecropinXJ对荷瘤小鼠免疫系统的影响

目的:抗菌肽是生物防御系统中产生的一类对抗外源性病原体的肽类物质,是生物体内固有的、非特异性免疫系统的重要组成部分。在动物模型及人体中,免疫系统在控制肿瘤方面具有重要作用。本文通过建立BALB/c荷瘤小鼠模型,探讨新疆家蚕抗菌肽CecropinXJ对人食管癌Eca109细胞荷瘤小鼠是否通过影响机体免疫应答发挥抗肿瘤作用。方法:通过免疫组化和流式细胞术等方法检测免疫应答相关细胞因子和DC表面分子的表达。结果:10 mg/kg CecropinXJ对Eca109细胞移植瘤具有显著的抑制作用。10 mg/kg CecropinXJ给药组肿瘤体积和肿瘤重量与生理盐水对照组相比,具有显著差异(P<0.05)。同时,CecropinXJ可抑制肿瘤组织癌细胞的浸润生长而对小鼠体内脏器无影响。在CecropinXJ抑制肿瘤生长过程中,VEGF和b FGF上调表达。与对照组相比,CecropinXJ对荷瘤小鼠的抑瘤作用不能够显著促进CD4、IL-4和IFN-γ的表达,同时也不涉及脾脏中DCs表面分子的表达(P>0.05),但对TNF-α的表达具有显著的促进作用(P<0.01)。结论:CecropinXJ可以显著抑制荷瘤小鼠体内肿瘤的生长,在该过程中,可能并不通过影响机体免疫应答发挥抗肿瘤作用。     

辅酶NADH对放射后外周血免疫细胞的影响

目的研究辐射后淋巴细胞亚群变化及其 NADH对免疫细胞表型的影响。方法分离 8例健康人群外周血淋巴细胞 ,每例分 3组 ,第一、二、三组分别为不照射组、照射后不加药组和照射后加入 NADH组。采用 FCM分析细胞亚群及IL- 2受体表达率。结果实验 组与实验 、 组相比 CD4/ CD8比值减小 ,CD3、CD4、NK细胞百分率下降 ,CD8百分率增加 ,IL- 2受体表达下调 (P<0 .0 5 )。结论 NADH体外能够提高机体的免疫功能     

miR-147对老龄小鼠巨噬细胞表达促炎性细胞因子的影响

目的探讨miR-147对老龄化小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响。方法腹腔注射LPS,用ELISA方法检测老年小鼠和年轻小鼠血清中白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平。分离的老年和年轻小鼠腹腔巨噬细胞经LPS刺激,用实时定量PCR方法检测miR-147的表达水平。在巨噬细胞中过表达和抑制表达miR-147,用ELISA方法检测细胞培养上清中IL-6和TNF-α的表达水平。结果腹腔注射LPS后,老年小鼠血清中促炎性细胞因子IL-6和TNF-α均显著高于年轻小鼠(P0.05)。分离出的腹腔巨噬细胞经LPS刺激后,年轻小鼠细胞中miR-147的表达水平显著上调(P0.05),而在老年小鼠中没有明显变化。巨噬细胞中过表达miR-147后,IL-6和TNF-α的表达水平均显著下降(P0.05),而抑制miR-147的表达,两者均显著上升(P0.05)。结论老年小鼠巨噬细胞中miR-147的表达异常可能是老龄化小鼠表达促炎性细胞因子异常的重要机制。     

低剂量辐射对外周血单个核细胞体外抗肿瘤活性的影响

目的：观察低剂量γ射线辐照的外周血单个核细胞对体外培养人胃癌细胞系MKN-28细胞的杀伤作用的影响。方法：实验设MKN-28肿瘤细胞对照组、外周血单个核细胞对照组、照射和未照射的外周血单个核细胞与肿瘤细胞共培养组，照射组的照射剂量为1Gy。利用吖啶橙／溴化乙锭（AO／EB）荧光双染色法，定期观察外周血单个核细胞对肿瘤细胞的杀伤情况。结果：外周血单个核细胞照射后培养至144h时有大量细胞死亡，存活细胞明显少于未照射组，培养至240h时．照射与非照射组中存活的外周血单个核细胞均减少，但是在照射组中减少更明显一些，在外周血单个核细胞与MKN-28肿瘤细胞共培养组中，照射组在共培养96h-240h时，外周血单个核细胞对胃癌细胞的杀伤作用比未照射组明显增强。结论：γ射线辐照对某些外周血单个核细胞有损伤作用，低剂量辐射的外周血单个核细胞杀伤肿瘤细胞活性增强，但肿瘤细胞对辐照后的外周血单个核细胞有趋化及细胞毒作用。     

褪黑素对电离辐射诱导小鼠淋巴细胞凋亡的影响

目的:探讨褪黑素(MLT)对电离辐射诱导小鼠胸腺细胞和脾细胞凋亡的影响及其机制。方法:采用流式细胞术(FCM)和荧光分光光度法分别检测离体和在体小鼠淋巴细胞凋亡小体百分率和DNA裂解率。结果:在离体研究中,小鼠胸腺和脾淋巴细胞体外接受(0.5-6.0)Gy X射线照射前预先加入2 mmol/L MLT,细胞凋亡小体百分率和DNA裂解率均显著低于单纯照射组,胸腺和脾淋巴细胞凋亡小体百分率分别为单纯照射组的86.25％和89.44％,DNA裂解率分别为单纯照射组的87.23％和89.16％。在体研究中,2 Gy X射线全身照射前60 min腹腔注射MLT,小鼠胸腺和脾淋巴细胞凋亡小体百分率和DNA裂解率显著低于单纯照射组,接近或低于假照水平,MLT剂量在0.1-2.5 mg／kg范围内均有作用,但无明显剂量依赖性。结论:MLT在体内和体外均可减轻电离辐射诱导的小鼠淋巴细胞损伤,且体内比体外作用更明显。     

肿瘤切除对肺癌患者外周血淋巴细胞表型影响的研究

为探讨肿瘤切除对肺癌患者抗肿瘤免疫活性的影响，用间接免疫荧光染色流式细胞计数分析技术检测了３６例肺癌患者外周血淋巴细胞表型和ＮＫ细胞的治疗变化。结果患者ＣＤ３、ＣＤ４细胞、ＮＫ细胞数量及ＣＤ４／ＣＤ８比值均低于正常对照，ＣＤ２０细胞增多。手术切除肿瘤后、肺癌无转移的患者ＣＤ３、ＣＤ４细胞、ＮＫ细胞数量及ＣＤ４／ＣＤ８明显增高，接近正常水平，肿瘤有转移的病例ＮＫ细胞升高较少，与术前无统计学差异。提示     

黏膜免疫系统的淋巴细胞归巢

黏膜在人体内分布十分广泛,在呼吸道、肠道及泌尿生殖道都有分布。黏膜免疫是免疫系统中的一个特殊组成部分,不同的黏膜部位可通过淋巴细胞归巢发生关联,产生共同的免疫效应。淋巴细胞归巢是一个多步骤的过程,涉及一系列的整合素、选择素、趋化因子及其受体家族等。不同部位不同淋巴细胞的归巢可能由不同的归巢受体所介导。     

乌索酸对小鼠免疫功能影响的实验研究

乌索酸((Ursolic acid又名熊果酸、乌苏酸)是从忍冬科接骨木属植物陆英(Sambucus Chinensis Lindl)中提取得到的单一化合物[1].研究表明, 乌索酸对BCG LPS免疫性肝损伤有明显的保护作用[2],本实验为进一步研究乌索酸的保肝作用机理,建立不同的小鼠免疫模型,从多角度研究乌索酸对小鼠免疫功能的影响.     

坐骨神经预损伤对脊髓损伤后小鼠神经功能恢复的影响

目的研究坐骨神经预损伤对脊髓损伤后小鼠神经功能恢复的影响。方法以C57BL/6小鼠为研究对象,分为假手术组(对照组,Control),脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)组和坐骨神经预损伤(sciatic nerve injury,SNI)组。假手术组仅移除小鼠T8-T10椎骨上棘暴露胸髓,SCI组移除小鼠T8-T10椎骨上棘暴露胸髓给予外力打击造成标准损伤,SNI组小鼠手术切断右腿坐骨神经,在预损伤7d后进行脊髓损伤。在恢复期(即脊髓损伤14d后),通过电生理实验检测运动神经传导功能,通过组织病理学检验检测组织缺损恢复、髓鞘再生及小胶质细胞的募集活化。结果电生理实验表明SNI组小鼠运动传导功能恢复明显强于SCI组;HE染色结果说明SNI组脊髓组织缺损恢复情况明显强于SNI组;以MBP为指标的免疫荧光结果显示SNI组髓鞘含量明显多于SCI组,髓鞘再生能力明显增强;以IBA-1为指标的免疫荧光结果显示SNI组小胶质细胞明显增多,坐骨神经预损伤明显增强了小胶质细胞的募集活化作用。结论坐骨神经预损伤处理可促进小鼠脊髓损伤后组织形态恢复、小胶质募集活化作用、髓鞘再生作用和神经传导功能的恢复。     

银杏酮酯预处理减轻辐射所致模型小鼠的急性肠损伤

背景:高剂量的胸部、骨盆、腹部和全身放疗均可能触发急性肠损伤.已有研究表明,银杏酮酯(GBE50)具有抗氧化和抗炎作用,而其对放疗性辐射导致急性肠损伤的作用尚不清楚.目的:探讨GBE50预处理对辐射导致的急性肠损伤的保护作用和机制.方法:将27只小鼠随机分为对照组、辐射组、GBE50治疗组,每组9只.采用苏木精-伊红染...     

X射线对人外周血淋巴细胞DNA损伤修复和凋亡的影响

目的 研究不同时间诱导X射线照射的淋巴细胞进入细胞周期DNA损伤修复与凋亡的影响.方法 X射线(0.5 Gy)作用于正常人外周血淋巴细胞,以照射后不同时间点(0、4 h)分别加入PHA并分成两组,即照射后0 h加PHA组(A组)和照射后4 h加PHA组(B组),再分别培养0、0.5、2 h,用流式细胞术和免疫印迹法检测A组和B组γ-H2AX蛋白的表达,Annexin-V/PI法分析A、B两组的细胞凋亡率.结果 流式细胞术及免疫印迹结果均显示A组的γ-H2AX蛋白表达高于B组(P＜0.05),且均先升高后降低.A组细胞凋亡率亦大于B组.结论 不同时间诱导被打击的淋巴细胞进入周期其可能发生DNA修复并同时伴随细胞凋亡的发生.