HIF-1?在高原地区胃癌及胃黏膜癌前病变组织中的表达及临床意义

目的探讨缺氧诱导因子-1a(hypoxia inducible factor-1a,HIF-1a)在高原地区胃癌及癌前病变患者中的表达与胃黏膜恶变过程中的临床联系及预后评价.方法利用RT-PCR检测7株胃癌细胞系及其27对胃癌和配癌旁正常组织中HIF-1a的表达;进一步利用组织微阵列和免疫组织化学染色检测37例萎缩性胃炎,34例胃黏膜肠化组织,146例胃癌和57例癌旁正常组织中HIF-1a的表达情况.结果RT-PCR检测显示,HIF-1a在7株胃癌细胞系存在差异表达.同时在胃癌组织的表达水平66.6%(18/27)高于癌旁正常组织14.8%(4/27)(P0.001).免疫组织化学显示,HIF-1a在癌旁正常组织中表达阳性率为26.3%(15/57);萎缩性胃炎组织为64.8%(24/37);肠化生组织为61.7%(21/34);胃癌组织为56.8%(83/146).并且HIF-1a的表达与年龄相关(P0.05),而与性别、胃癌的分化程度、胃癌患者临床分期等无关.Kaplan-Meier法和COX多因素回归分析提示HIF-1a高表达是术后胃癌患者独立的危险因素(P0.001),RR=3.229(95%CI:2.024-5.151).结论HIF-1a表达在胃黏膜恶变过程中表达增加,并且与高原地区胃癌患者不良预后的密切相关.     

非甾体抗炎药物活化基因-1的表达水平与胃癌发生发展的相关性研究

[目的]研究正常黏膜、癌旁正常组织、胃癌上非甾体抗炎药物活化基因-1(NAG-1)的表达情况及胃癌的发生发展与NAG-1的关系。[方法]测定正常胃黏膜、癌旁组织正常黏膜及胃癌组织上的mRNA及NAG-1的表达情况,可分别采用RT-PCR、免疫组化SP法测定。[结果]NAG-1蛋白在正常胃黏膜组织、癌旁正常组织、胃癌组织上的表达水平均不同,其中在癌旁正常组织的表达水平最高,明显高于其他2种组织中NAG-1蛋白的表达水平(P<0.01)。其次为正常黏膜的NAG-1蛋白的表达水平;而胃癌组织中的NAG-1蛋白的表达水平是最低的。同时NAG-1mRNA的表达水平也具有相同的规律,NAG-1mRNA在癌旁组织中表达最高,在正常组织黏膜中次之,而在胃癌黏膜上的表达最低。NAG-1mRNA在分化水平不同的胃癌组织中的表达水平也是不同的,在低分化胃癌中的NAG-1表达要低于高分化胃癌组织(P<0.01)。且可发现,NAG-1蛋白质表达与肿瘤大小,胃癌的浸润程度、TNM分化无明显的关联(P>0.05)。[结论]胃癌的发生发展过程中NAG-1起着重要的作用,其正常水平的表达可能对癌细胞的增殖起着抑制的作用,而NAG-1表达减弱或丢失会使其抑癌作用减弱或者丧失。     

胃癌组织中LIN28B和c-myc的表达及其临床意义

目的检测胃癌组织中LIN28B和c-myc的表达,分析其临床意义,并初步探讨其可能的作用机制。方法应用免疫组化SP法检测90例胃癌和30例癌旁正常胃黏膜石蜡组织中LIN28B和c-myc蛋白的表达水平;应用实时荧光定量PCR方法和Western blotting法检测23例新鲜胃癌组织及相应癌旁正常组织中LIN28B和c-myc mRNA及蛋白的表达量。结果胃癌组织中LIN28B mRNA(△Ct:6.33±2.54)及蛋白(0.601±0.22)的表达水平显著高于癌旁正常组织(△Ct:1.05±0.64,0.124±0.088,P0.05);LIN28B在胃癌组织中表达阳性率(76.7%,69/90)较癌旁正常胃黏膜石蜡组织中阳性率(66.7%,20/30)高,差异有统计学意义(H=4.195,P0.05);c-myc在胃癌组织中表达阳性率(81.1%,73/90)较正常胃黏膜石蜡组织中阳性率(60.0%,18/30)高,差异有统计学意义(H=3.887,P0.05);LIN28B蛋白表达与胃癌分化程度、淋巴结转移、浸润深度、临床分期有相关性(P0.05),与年龄、性别、肿瘤大小、部位无相关性(P0.05);LIN28B与c-myc在胃癌组织中的表达有显著相关性(r=0.252,P0.05)。结论LIN28B和c-myc基因的表达及相互作用与胃癌的发生、发展及生物学行为密切相关,对判断预后有参考作用,其机制可能与胃癌干细胞及LIN28B/let-7/c-myc信号环路有关。     

P16在胆汁反流性胃炎、胃癌组织中的表达及意义

目的探讨P16在胆汁反流性胃炎中的表达及胆汁反流与胃癌的相关性。方法应用过氧化物酶标记的SP染色法进行免疫组化染色,检测抑癌基因P16在正常胃黏膜、胆汁反流性胃炎、癌旁组织、胃癌中的表达。结果 P16表达从正常胃黏膜、胆汁反流性胃炎、癌旁组织、胃癌阳性表达率逐渐降低(P0.05),在胆汁反流性胃炎中的阳性表达率显著低于正常胃黏膜组织(P0.05)。但P16表达在胆汁反流性胃炎、癌旁组织中的表达差异无统计学意义(P0.05)。结论胆汁反流性胃炎可能属于癌前病变,且P16可能参与了其向胃癌发生、发展的过程。     

Notch1及COX2在人胃癌组织中的表达及意义

[目的]探讨Notch1及COX2在胃癌组织中的表达及意义。[方法]收集我院胃癌及癌旁正常胃组织标本115例,采用免疫组化EnVision法测定Notch1和COX2在胃癌和癌旁正常胃组织中的表达,分析其表达水平与胃癌各临床病理指标之间的关系。[结果]Notch1在胃癌和癌旁正常胃组织中的表达分别为73.91%(85/115)和3.48%(4/115),COX2在胃癌和癌旁正常胃组织中的表达分别为89.57%(103/115)和6.96%(8/115),两者差异有统计学意义(P0.01)。Notch1和COX2在胃癌组织中的表达与胃癌的淋巴结转移及TNM分期有关(P0.05)。[结论]Notch1-COX2信号轴可能参与了胃癌的发生、发展和转移。     

三叶因子1与胃癌发生发展过程中血管生成的关系

目的:观察三叶因子1(TFF1)和血管内皮生长因子(VEGF)在正常胃黏膜组织、癌旁组织和胃癌组织中的表达,并探讨TFF1与胃癌发生发展过程中血管生成的关系.方法:采用SP免疫组化方法检测142例正常组织、66例癌旁组织和66例胃癌组织中TFF1和VEGF的表达,以CD34标记血管内皮,测定MVD.结果:TFF1表达在正常胃黏膜组织→癌旁组织→胃癌组织中呈逐渐减弱趋势(209.40±16.00,199.12±16.68,189.17±16.20),差异具有显著性(P<0.01),而VEGF的表达和MVD呈逐渐上升趋势(69.7%,40.9%,35.7%;38.90±6.74,28.68±5.08.25.13±4.46).MVD值与TFF1灰度值呈正相关(r=0.811,P<0.01),即MVD值与TFF1的表达呈负相关.结论:TFF1作为一种胃癌特异性抑制因子,在胃癌发生发展过程中并未促进新生血管的生成.     

胃癌患者血清及癌组织中CD44v6表达及意义

[目的]检测胃癌患者血清及胃癌组织中CD44v6的表达及其与胃癌临床病理特征间的关系,进一步阐述CD44v6在胃癌发生发展中的作用。[方法]收集40例经病理证实的胃癌患者,20例正常健康体检者为对照组,20例取自距癌组织边缘5cm以上癌旁胃黏膜标本。采用双抗体夹心-酶联免疫吸附法检测40例胃癌患者术前和20例正常健康者血清中CD44v6水平,免疫组化SP法测定40例经手术切除的胃癌组织标本和20例癌旁胃黏膜标本中CD44v6的表达。[结果]①胃癌患者血清中CD44v6[(177.21±46.48)μg/L]高于正常健康者(P<0.01)。②癌组织中CD44v6的阳性表达率为77.5%,显著高于癌旁胃黏膜中的表达(P<0.01),CD44v6在血清和组织中的表达随组织学分级、临床分期的增高及有无淋巴结转移而升高,呈正相关性。[结论]CD44v6参与了胃癌的发生,并且可反映机体肿瘤的负荷状态及预测肿瘤的进展;检测CD44v6的血清含量可能为胃癌的诊断提供依据。     

Wnt-5a基因在胃癌中的表达及意义

目的:探讨Wnt-5a基因在胃癌发生发展过程中的表达及意义.方法:采用实时定量RT-PCR方法对10例胃癌和癌旁组织Wnt-5a mRNA进行检测;免疫组织化学SP法检测84例胃癌、癌旁组织及20例正常胃黏膜Wnt-5a和β-catenin蛋白的表达.结果:胃癌和癌旁组织中Wnt-5a mRNA表达的相对含量分别为5.9194±1.869和1.281±0.744(P<0.05);Wnt-5a蛋白在胃癌和癌旁组织的表达阳性率分别为40.54%(34/84)和14.29%(12/84),差异具有统计学意义(P<0.01),肿瘤中Wnt-5a上调表达相关于高的TNM分期和淋巴结转移(P<0.0 1).β-catenin在胃癌及癌旁组织中异常表达率分别为70.23%(59/84)、38.1%(32/84),两者差异表达具有统计学意义(P<0.01),癌组织中β-catenin的异常表达相关于肿瘤的TNM分期和淋巴结转移(P<0.05).胃癌中Wnt-5a和β-catenin蛋白表达呈负相关关系(P<0.05).结论:Wnt-5a在胃癌中可能发挥癌基因样作用,其异常活化可能部分参与了胃癌发生的始动过程,并可能相关于肿瘤差的预后.Wnt-5a与β-catenin在胃癌发生过程可能经由不同的信号途径在胃癌进展中发挥作用.     

胃癌患者血清中骨桥蛋白水平及其在胃癌组织中的表达

[目的]检测胃癌患者血清中骨桥蛋白（OPN）水平及其在胃癌组织中的表达,分析其与胃癌临床病理特征之间的关系,进一步阐述OPN在胃癌发生发展中的作用。[方法]收集2010年1～7月经病理证实的胃癌患者40例,术前均未行任何治疗。对照组20例正常血清来自正常健康体检者,20例癌旁胃黏膜标本取自距癌组织边缘5cm以上。采用双抗体夹心—酶联免疫吸附法检测40例胃癌患者术前血清,20例正常健康者血清中OPN水平,免疫组化SP法测定40例经手术切除的胃癌组织标本和其中20例癌旁胃黏膜标本中OPN的表达。[结果]①胃癌患者血清中OPN[（105.54±62.52）μg/L]高于正常健康者（P〈0.05）。②癌组织中OPN的阳性表达率为75.0%,显著高于癌旁胃黏膜中（10.0%）的表达（P〈0.05）。③OPN在血清和组织中的表达随着组织学分级、临床分期的增高及淋巴结转移而升高,呈正相关性。[结论]胃癌患者血清和组织中OPN的表达高于对照组,且随着组织学分级、临床分期的增高及有无淋巴结转移而升高,呈正相关性。表明OPN参与胃癌的发生,并且可反映机体肿瘤的负荷状态及预测肿瘤的进展。     

非小细胞肺癌组织中let-7、K-ras基因的表达变化及意义

目的观察非小细胞肺癌组织中let-7、K-ras基因的表达变化,并探讨其意义。方法采用实时定量PCR技术检测30例非小细胞肺癌组织及其癌旁正常组织中的let-7、K-ras基因。结果 let-7基因在非小细胞肺癌组织中的表达量为0.761 6±0.388 3,低于癌旁正常组织的2.279 0±1.163 1（P〈0.01）,K-ras基因在非小细胞肺癌组织中的表达量为3.296 6±1.328 4,高于癌旁正常组织的1.387 3±0.681 2（P〈0.01）。非小细胞肺癌组织中let-7与K-ras基因的表达呈负相关（r=-0.834 3,P〈0.01）。结论非小细胞肺癌组织中let-7表达下降而K-ras基因表达上升,两者共同参与了非小细胞肺癌的发生、发展过程。     

泛素表达和蛋白酶体活性在胃癌及癌旁组织中的研究

目的研究26S蛋白酶体水解活性及泛素在胃癌、癌旁组织与正常胃黏膜组织中的差异。方法对75例胃癌患者分别在胃癌、癌旁及远端正常黏膜组织取样进行研究。采用免疫印迹方法分析泛素表达,免疫荧光方法分析26S蛋白酶体活性。结果泛素表达及26S蛋白酶体活性在胃癌及癌旁组织中增强,均高于正常胃黏膜组织。胃癌中泛素水平(4.24vs3.27)及26S蛋白酶体活性(628.3vs431.8)均高于癌旁组织,差异有统计学意义。结论胃癌中泛素-蛋白酶体系统被异常活化,与胃癌的发生与进展有关。     

miR-181a及其靶基因Atg5在胃癌中的表达及临床意义

目的研究miR-181a及其靶基因Atg5在人胃癌细胞株和胃癌组织中的表达及其与临床病理参数的关系。方法体外培养人胃癌细胞株(MGC-803、SGC-7901、BGC-823)和正常胃黏膜细胞株(GSE-1),收集30例胃癌血清和手术切除的癌组织及癌旁正常组织,并以30名正常人血清标本为对照,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测血清、细胞株、组织中miR-181a及细胞株、组织中Atg5 mRNA的表达情况。结果胃癌细胞株、组织、血液中miR-181a的表达较正常细胞、癌旁正常组织及正常人血清明显升高(P0.05);Atg5 mRNA相对表达量在胃癌细胞株和胃癌组织中均分别低于正常胃黏膜细胞株和癌旁正常组织(P0.05)。在胃癌组织和癌旁正常组织中,miR-181a与Atg5 mRNA表达呈负相关。结论 miR-181a在胃癌细胞株、胃癌组织和血清中显著高表达,提示其有望成为潜在的胃癌标志物。Atg5在胃癌中低表达并与miR-181a表达呈负相关,提示其可能是miR-181a在胃癌中的潜在作用靶基因。     

胃癌和正常胃黏膜上NAG-1表达的比较

目的探索NAG-1在胃癌、癌旁正常组织和正常胃黏膜上的表达情况及在胃癌发生发展中的作用。方法采用免疫组化SP法、RT-PCR法检测胃癌组织、癌周正常组织及正常胃黏膜上NAG-1蛋白及mRNA的表达。结果 NAG-1蛋白在癌旁正常组织表达较强,高于正常胃黏膜及胃癌NAG-1蛋白表达量,NAG-1蛋白在正常胃黏膜表达量高于胃癌;NAG-1mRNA在癌旁正常组织的表达量高于正常胃黏膜及胃癌,NAG-1mRNA在正常胃黏膜表达量高于胃癌;NAG-1蛋白在中高分化胃癌表达量高于低分化胃癌;相关性分析发现:NAG-1蛋白表达与胃癌的浸润程度、TNM分期及肿瘤大小无明显相关性。结论 NAG-1在胃癌的发生发展中可能扮演抑癌基因的角色,其表达的减弱或缺失可能导致胃癌发生。     

细胞周期蛋白D1、p16蛋白在胆汁反流性胃炎中的表达及意义

目的 探讨细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、p16蛋白在胆汁反流性胃炎(BRG)中的表达,探寻BRG与胃癌的相关性。方法 应用过氧化物酶标记的SP染色法进行免疫组织化学染色以检测癌基因CyclinD1及抑癌基因p16蛋白在正常胃黏膜、BRG、癌旁组织、胃癌中的表达。结果 CyclinD1在正常胃黏膜、BRG、癌旁组织、胃癌中的阳性表达率逐渐升高,在BRG中的阳性表达率显著高于正常胃黏膜组织,差异有统计学意义(P0.05)。p16在正常胃黏膜、BRG、癌旁组织、胃癌中的阳性表达率逐渐降低,在BRG中的阳性表达率显著低于正常胃黏膜组织,差异有统计学意义(P0.05)。但CyclinD1、p16蛋白在BRG、癌旁组织中的表达差异无统计学意义(P0.05)。结论 BRG可能有癌变倾向,且CyclinD1、p16蛋白可能参与了其向胃癌发生发展的过程。     

肝细胞癌患者血清和肝组织microRNAlet-7水平及其与临床预后的关系

目的研究肝细胞癌(HCC)患者外周血和癌组织microRNAlet-7(let-7a和let-7b)水平变化及其临床意义。方法 2015年4月～2016年6月在我院治疗的54例HCC患者和同期来我院进行体检的52例健康人,取血清,并取患者手术后癌组织和癌旁肝组织,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测let-7a和let-7b水平。结果 qRT-PCR检测结果显示,HCC患者血清let-7a水平为(0.6±0.4),显著低于健康人[(1.1±0.4),P0.05],血清let-7b水平为(0.3±0.1),也显著低于健康人[(0.7±0.2),P0.05];HCC患者癌组织let-7a水平为(0.3±0.1),显著低于癌旁组织[(0.6±0.1),P0.05],let-7a在HCC组织水平比癌旁组织下调了2.17倍,HCC组织let-7b水平为(0.4±0.2),也显著低于癌旁组织[(1.3±0.4),P0.05],let-7b在HCC组织水平比癌旁组织下调了3.33倍;20例有癌栓形成患者血清let-7a水平为(0.4±0.2),显著低于34例无癌栓形成患者的[(0.8±0.5),P0.05],血清let-7b为(0.1±0.1),也显著低于无癌栓形成患者的[(0.5±0.1),P0.05],而不同年龄、不同性别、血清AFP水平高低、肿瘤大小、不同细胞分化程度和TNM分期及有无肿瘤血管浸润患者血清let-7a和let-7b水平无显著性差异(P0.05);不同年龄、性别、血清AFP水平、肿瘤大小、细胞分化、TNM分期和有无血管浸润或癌栓形成的HCC患者癌组织let-7a和let-7b水平均无显著性差异(P0.05)。结论 HCC患者血清和肿瘤组织let-7a和let-7b呈异常低水平状态,肿瘤组织let-7a和let-7b水平也远低于癌旁肝组织,其临床意义还有待进一步探讨。     

胃癌组织中CTGF蛋白表达及其临床意义

目的探讨结缔组织生长因子（CTGF）蛋自在胃癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化法检测10份正常胃黏膜组织、50份胃癌组织及其癌旁组织中CTGF蛋白表达情况。结果胃癌组织中CTGF阳性表达高于癌旁组织及正常胃黏膜组织,P〈0．05;癌组织CTGF阳性表达率明显高于正常黏膜组织（P〈0．01）,CTGF的高表达与胃癌分化程度、淋巴结转移密切相关（P均〈0．05）;与肿瘤浸润的深度无明显关系。结论CTGF蛋白可作为胃癌前病变及胃癌早期诊断和预后判断的指标。     

细胞周期蛋白D1在胆汁反流性胃炎和胃癌中的表达及其意义

背景:胆汁反流性胃炎是由过多的十二指肠胃反流引起的胃黏膜化学性炎症,与萎缩、肠化生等胃黏膜癌前病变有关。细胞周期蛋白D1(cyclin D1)是细胞周期调节因子,研究显示其与胃癌的发生关系密切。目的:探讨cyclin D1在胆汁反流性胃炎和胃癌中的表达及其意义。方法:收集胃癌组织标本、癌旁非癌组织标本、胆汁反流性胃炎组织标本各50例,以50例正常胃黏膜组织标本作为正常对照。观察胆汁反流性胃炎胃黏膜病变情况;以免疫组化法检测cyclin D1表达。结果:胆汁反流性胃炎组肠上皮化生和异型增生的比例显著高于正常对照组(P0.05)。Cyclin D1阳性率在正常对照组、胆汁反流性胃炎组、癌旁非癌组和胃癌组中逐渐升高,胃癌组显著高于其余三组(P0.05),胆汁反流性胃炎组显著高于正常对照组(P0.05),癌旁非癌组与胆汁反流性胃炎组间差异无统计学意义(P0.05)。结论:Cyclin D1在胃癌的恶性演变过程中发挥重要作用,且可能参与了胆汁反流性胃炎发展为胃癌的过程。     

DNA甲基转移酶在胃癌中的表达及其意义

背景:DNA甲基化在胃癌发生、发展中起重要作用,但DNA甲基化需要DNA甲基转移酶(DNMTs)的修饰。目的:探讨DNMTs在胃癌发生、发展中的作用及其临床意义。方法:采集80例胃癌组织及其癌旁正常组织,以免疫组化法检测DNMT1、DNMT3a、DNMT3b蛋白表达,并分析其与胃癌临床病理特征的关系。采用qRT-PCR和蛋白质印迹法分别检测4种胃癌细胞株和正常胃黏膜上皮细胞株中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b mRNA和蛋白表达。结果:与癌旁组织相比,胃癌组织中DNMT1阳性表达率显著升高(68.8%对10.0%,P0.01)。胃癌组织中DNMT1阳性表达率显著高于DNMT3a和DNMT3b(68.8%对38.8%、40.0%,P0.05),而癌旁组织中DNMT1阳性表达率显著低于DNMT3a和DNMT3b(10.0%对60.0%、52.5%,P0.05)。DNMT1阳性表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移以及TNM分期明显相关(P0.05),而DNMT3a和DNMT3b与胃癌临床病理特征均无关。与正常胃黏膜上皮GES-1细胞相比,胃癌细胞株中DNMT1 mRNA和蛋白表达明显增加,而DNMT3a和DNMT3b mRNA和蛋白表达明显降低。DNMT1表达与胃癌细胞分化程度有关(P0.05)。结论:DNMT1可能在胃癌的发生、发展中起有重要调节作用。     

巨噬细胞抑制因子-1 mRNA在胃癌及癌前病变黏膜组织中的表达及其临床意义

目的 研究巨噬细胞抑制因子-1(MIC-1)mRNA在胃癌及胃癌前病变黏膜组织的表达,及其与临床病理特征间的关系.方法 采用半定量RT-PCR法检测MIC-1 mRNA在58例胃癌组织、30例对应的癌旁组织、19例胃癌前病变黏膜组织和8例胃慢性炎性反应黏膜组织的表达;对比分析其与胃癌临床病理特征的关系.结果 ①MIC-1 mRNA在胃癌中的表达阳性率和相对表达量分别为91.4%和0.751±0.222,均显著高于癌旁5 cm内组织(60.0%和0.546±0.287)和癌旁10 cm外组织(43.3%和0.481±0.209),P值均＜0.01.而癌旁5 cm内及癌旁10 cm外组织表达阳性率和相对表达量间差异无统计学意义(P＞0.05).②胃癌组织中MIC-1 mRNA的表达与肿瘤临床分期、侵袭深度,淋巴结转移及有无远处转移有关(P值均＜0.05),与患者性别,年龄、肿瘤分化程度、肿瘤直径无关(P值均＞0.05).③MIC-1 mRNA在胃癌组织的表达阳性率和相对表达量为91.4%和0.751±0.222,显著高于胃癌前病变黏膜组织(52.6%和0.528±0.077,P＜0.01).胃慢性炎症黏膜组织无表达.结论 MIC-1可能在胃癌的发生发展、侵袭和转移过程中起重要的作用.     

胃癌发生过程中Survivin促血管生成作用的研究

目的探讨胃癌发生过程中Survivin促进血管生成的作用。方法用免疫组化方法检测慢性非萎缩性胃炎、胃癌癌前病变、胃癌组织中Survivin的表达及MVD情况,分析Survivin的表达与胃癌临床病理参数之间的关系,分析Survivin的表达与MVD的关系。结果 Survivin蛋白在胃癌组织中的表达率为71.67%,显著高于慢性非萎缩性胃炎的3.33%及胃癌前病变组织的30.00%,三组间差异有统计学意义(P0.05);Survivin蛋白表达与肿瘤分化程度、胃癌局部浸润、淋巴结转移和TNM分期有关(P0.05)。Survivin表达阳性的胃癌组织及癌旁组织中MVD表达高于Survivin表达阴性的胃癌组织及癌旁组织(P0.05)。结论 Survivin的过度表达是胃癌发生过程中的早期事件,可能可以促进胃癌血管形成。