三氧化二砷和四乙铵对人肺腺癌细胞株AGZY-83-a增殖和凋亡影响的研究

目的研究三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)和四乙铵(tetraethylammonium,TEA)对人肺腺癌细胞AG-ZY-83-a增殖和凋亡的影响,探讨As2O3诱导人肺腺癌细胞株凋亡的机制。方法体外细胞培养人肺腺癌AGZY-83-a细胞株,采用MTT法检测As2O3和TEA对细胞增殖的影响。透射电镜(TEM)、流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡情况。比色法检测细胞内Caspase-3活性改变。结果As2O3和TEA对AGZY-83-a细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.01)。As2O3组对AGZY-83-a细胞增殖抑制率低于TEA+As2O3组(P<0.05)。As2O3和TEA使AGZY-83-a细胞凋亡率,Caspase-3增加,单用As2O3组的细胞凋亡率、Caspase-3活性分别高于TEA+As2O3组(P<0.05)。结论应用TEA部分抑制了As2O3诱导AGZY-83-a细胞凋亡;As2O3诱导AGZY-83-a细胞凋亡可能和As2O3对细胞膜不同的钾离子通道作用有关系。     

银杏内酯、4-AP和TEA对AGZY-83-a细胞的作用研究

目的研究中药银杏内酯A、B及钾离子通道阻滞剂4．氨基吡啶（4-AP）和四乙胺（TEA）对人肺腺癌细胞株AGZY-83-a的抑制作用。方法应用体外培养的人肺腺癌细胞株AGZY-83-a,首先采用MTT法测定不同剂量银杏内酯A、B和4-AP、TEA对肿瘤细胞生长的抑制作用,于酶标仪测OD值（λ=490nm）,计算其抑制率;同时进一步绘制药物作用7天的生长曲线以观察其抗肿瘤作用。结果应用不同剂量银杏内酯A和B48h后测得的OD值与正常对照组无显著差异,1μmol／L银杏内酯A和B对肿瘤细胞增殖的抑制率分别为5．05％和2．52％（n=6,P〉0．05）;不同剂量4-AP、TEA对人肺腺癌细胞有明显的抑制作用,呈浓度依赖关系。1mmol／L4-AP和5mmol／LTEA对肿瘤细胞增殖的抑制率分别为15．40％和30．69％（n=6,P〈0．001）。不同作用时间的银杏内酯A、B对人肺腺癌细胞生长亦无抑制作用;不同作用时间的4-AP和TEA对人肺腺癌细胞有抑制作用。结论银杏内酯A、B对人肺腺癌细胞株AGZY-83-a的生长无抑制作用。4-AP和TEA对人肺腺癌细胞株AGZY-83-a有明显的抑制作用,与药物浓度正相关。     

人肺腺癌细胞系AGZY-83A敏感药物体外检测

采用微量核酸前体掺入试验(MINI-Assay)对人肺腺癌细胞系AGZY-83A进行七种抗癌剂的敏感性检测。结果显示:丝裂霉素(MMC)、阿霉素(ADM)、甲氨蝶呤(MTX)及5-氟尿嘧啶(5-Fu)对受试的人肺腺癌细胞有较明显的抑制作用,抑制率分别为95%、92%、87%及63%。     

LncRNA FAM83A-AS1调控FAM83A表达对乳腺癌细胞增殖、侵袭与迁移的影响

目的 探讨长链非编码RNA序列相似家族83成员A-反义核糖核酸1(lncRNA FAM83A-AS1)在乳腺癌(breast cancer, BC)中的作用及潜在机制。方法 免疫组织化学(IHC)染色检测BC组织中FAM83A的表达;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测BC组织/细胞中lncRNA FAM83A-AS1、FAM83A mRNA表达水平;Pearson法分析BC组织中lncRNA FAM83A-AS1、FAM83A mRNA表达水平的相关性。细胞转染建立基因过表达和沉默MDA-MB-231细胞模型,qRT-PCR检测MDA-MB-231细胞中lncRNA FAM83A-AS1、FAM83A mRNA表达水平;CCK-8法检测MDA-MB-231细胞增殖活力;Transwell实验检测MDA-MB-231细胞迁移、侵袭能力;Western blot检测MDA-MB-231细胞中FAM83A、ERK1/2及其磷酸化蛋白、Ki-67、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达;核质分离实验检测lncRNA FAM83A-AS1的亚细胞分布,...     

乳腺癌高表达基因FAM83A的生物信息学分析

目的筛选乳腺癌高表达基因,用生物信息学方法预测FAM83A生物学功能。方法使用肿瘤基因组解剖计划数据库的数字基因表达演示工具,在乳腺癌组织和乳腺良性肿瘤组织中筛选差异表达的基因。生物信息学方法预测FAM83A基因及其编码蛋白的序列同源性、理化性质、亚细胞定位、结构和表达谱。RT-PCR方法测定FAM83A在乳腺癌、乳腺纤维瘤和正常乳腺组织中的表达。结果筛选出差异表达基因FAM83A。发现其有3个不同的剪接体,基因进化保守,亚细胞定位于线粒体的可能性大。预测有PK,PKA等磷酸化位点,MAPK作用识别位点,SH2、SH3,RPEL和WH2结合基序。二级结构主要是α螺旋和无规则卷曲。RT-PCR证实FAM83A在乳腺癌组织中高表达,而在乳腺良性肿瘤和正常乳腺组织中均无表达。结论 FAM83A是一个乳腺癌高表达基因,可能作为乳腺癌分子机制研究的靶点。     

P糖蛋白和Ki-67抗原表达对肺癌T/NT的影响

目的:研究肺癌放射导向手术中肿瘤及正常组织P糖蛋白(P-gp)、Ki-67抗原表达与放射性核素摄取比(T/NT)的关系.方法:采用免疫组化方法和显微图像分析技术,测定32例接受放射导向手术的肺癌病人P-gp和Ki-67抗原表达,分析P-gp和Ki-67的标记指数(LI)与T/NT之间的相关性.结果:P-gp和Ki-67的LI和肺癌病人T/NT之间均有相关性(r=-0.61,P=0.0002; r=0.75,P=0.0001).结论:Ki-67的LI越高(肿瘤增殖越旺盛),T/NT值越高;P-gp阳性的肿瘤,T/NT值较低.     

全反式维甲酸对A549细胞株增殖和Caspase-3蛋白表达的影响

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对A549肺腺癌细胞增殖和凋亡相关蛋白Caspase-3表达的影响.方法:①取对数生长期的人肺腺癌细胞株A549细胞,消化后于96孔板上按1×10-5 mol/L,1×10-6 mol/L,1×10-7 mol/L 3组ATRA药物浓度组和空白对照组培养,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察ATRA作用2 d,4 d,6 d对A549细胞增殖的影响.②用Hoechest33258荧光染色观察1×10-5 moL/LATRA培养24 h后A549细胞胞核形态变化.③利用免疫印迹法(Western blot)检测经1×10-7 mol/L,1×10-6 mol/L,1×10-5 mol/L ATRA作用12 h,24 h后A549细胞中Caspase-3蛋白表达的变化.结果:ATRA处理组与空白对照组相比细胞的增殖活性明显受到抑制(P＜0.05);经1×10-5 mol/L ATRA处理后的细胞呈典型的凋亡核固缩表现,胞核呈致密浓染的颗粒状或块状荧光.ATRA处理组的Caspase-3蛋白表达与空白对照组相比明显增高.结论:ATRA可抑制人肺癌细胞株A549的增殖,并通过上调Caspase-3蛋白表达诱导细胞的凋亡.     

槲皮素对肺腺癌A549细胞生长的影响

目的 观察槲皮素对肺腺癌A549细胞生长及对hTERT基因表达的影响. 方法以台盼蓝拒染法计数肺腺癌细胞的生长抑制率,透射电镜和DNA Ladder实验了解A549细胞凋亡的发生;PCR-TRAP法检测端粒酶活性,实时RT-PCR检测hTERT mRNA表达.结果 台盼蓝拒染法计数显示槲皮素抑制肺腺癌A549细胞增殖的作用明显,且呈剂量和时间依赖性,槲皮素处理48 h后的IC50为22.5 μmol/L.DNA Ladder实验和透射电镜形态学检测显示出细胞凋亡的特征性变化,细胞呈现核固缩、染色质边集、凋亡小体形成等典型凋亡表现.经槲皮素处理后肺腺癌A549细胞hTERT mRNA表达降低,端粒酶活性受抑制. 结论槲皮素能抑制肺腺癌细胞的生长,呈时间、剂量依赖性,能诱导A549细胞凋亡,其抑制增生与诱导凋亡的机制可能与下调hTERT 基因表达,抑制端粒酶活性,破坏端粒稳定性有关.     

苯乙酸钠对肺癌A549细胞生长的影响

目的:研究抗肿瘤药物苯乙酸钠(NaPA)对体外培养的人肺腺癌细胞株A549抑制率、细胞周期和凋亡的影响。方法:应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色、流式细胞仪等方法,观察不同浓度NaPA对人肺腺癌A549细胞株生长、细胞周期和凋亡的影响。结果:NaPA对A549有明显的生长抑制作用,且呈剂量时间依赖性,最大抑制率可达79%。NaPA可阻滞A549细胞的细胞周期,使G1/G0期细胞增多,S期细胞减少,同时诱导A549细胞的凋亡,凋亡率最高可达30.5%。结论:苯乙酸钠抑制A549细胞生长,其抑制作用可能是通过NaPA使细胞周期抑制于G1/G0期和诱导细胞凋亡而实现。     

人肺腺癌细胞A549放射治疗前后Dystrobrevin蛋白表达的变化

目的射线诱导肺腺癌A549细胞凋亡,于凋亡高峰时检测放疗前后dystrobrevin的表达,探讨其与放射剂量及凋亡的关系。方法人肺腺癌A549细胞株培养24 h后用10 Gy X线照射,分别培养6 h、14 h、23 h、40 h,应用Hoechest33258荧光染色在荧光显微镜下观察细胞形态变化——细胞的凋亡,并计算凋亡率。采用Western blot检测0 Gy、6 Gy、10Gy照射A549细胞14 h后dystrobrevin蛋白表达水平的变化。结果 10 Gy X射线照射A549细胞株后14 h凋亡率达到高峰。Western blot检测显示,随着放射剂量的增加,α-dystrobrevin有下降的趋势,而ε-dystrobrevin有升高的趋势。结论人肺腺癌A549细胞株在能量为6-MV,剂量率为300 cGy/分,接受10 Gy X线照射后14 h出现明显的凋亡;并且在此时间点上随着放射剂量的增加α-dystrobrevin和ε-dystrobrevin变化趋势不同。     

外源性3’,5’环腺苷酸对人肺腺癌细胞系及裸小鼠移植瘤的作用

用外源性3′,5′环腺苷酸(3′,5′cAMP)对人肺腺癌细胞系的连续作用,观察到癌细胞的增殖受到明显抑制,同时观察到在3′,5′cAMP作用下的癌细胞在裸小鼠体内移植瘤生长受到一定的抑制,但7周抑制作用基本消失。     

CD83、Ki-67在大肠癌中的表达及预后意义

目的 探讨CD83、Ki-67在大肠癌组织中的表达及对预后的意义.方法 收集大于或等于5年生存组和小于3年死亡组大肠癌病例各30例,用免疫组化和流式细胞术检测大肠癌组织中CD83、Ki-67的表达,分析其与大肠癌临床病理特点和预后的关系.结果 免疫组化检测显示,CD83的表达随着Dukes分期的升高而降低,≥5年生存组表达明显高于小于3年死亡组(P＜0.05);Ki-67的表达随着Dukes分期的升高而增高,≥5年生存组表达明显低于小于3年死亡组(P＜0.05).流式细胞术检测显示,CD83在A期和B期中的表达明显高于C期和D期(P＜0.05);Ki-67在A期和B期中的表达明显低于C期和D期(P＜0.05).结论 大肠癌中CD83、Ki-67表达与预后相关,可以作为检测大肠癌预后的参考指标.     

TK1、Ki-67在非小细胞肺癌组织中的表达及预后意义

目的:探讨细胞质胸苷激酶1(thymidine kinase 1,TK1)和Ki-67在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达水平及其对NSCLC患者预后的意义?方法:将202例NSCLC及63例癌旁肺组织标本制作成组织芯片,采用免疫组织化学EnVision法检测TK1和Ki-67的表达,探讨其表达水平与临床病理特征及预后的关系?结果:NSCLC组织中TK1(60.89%)和Ki-67(55.45%)的阳性表达率均显著高于癌旁肺组织(P < 0.01);Spearman等级相关分析显示二者的表达呈正相关(r = 0.518, P < 0.001);NSCLC中,TK1和Ki-67的表达均与肿瘤分化程度和TNM分期显著相关(P < 0.05);Kaplan-Meier生存分析显示随TK1表达的增强和Ki-67指数的增高,NSCLC患者的总体生存期逐渐降低(P < 0.01);Cox 回归分析提示肿瘤TK1表达和TNM分期是影响NSCLC患者预后的独立危险因素(P < 0.05)?结论:TK1在NSCLC的表达与肿瘤的分化?进展有关,TK1表达有助于对患者预后的评价?     

建立CT影像组学标签预测非小细胞肺癌Ki-67表达水平

目的：建立基于CT图像特征的影像组学标签,预测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的 Ki-67表达水平。方法：回顾性收集2014年1月至2017年11月行肺部CT平扫及增强扫描并在检查后2周内经病理证 实、行Ki-67表达水平检测的108例NSCLC患者。在MaZda软件中分别手动勾画出病灶CT平扫及增强的三维立体结 构影像,提取感兴趣区的纹理特征参数。经过多种特征选择方法[交互信息(mutual information,MI)、Fisher系数 (fi sher coeffi cient,Fisher)、分类错误概率联合平均相关系数(classifi cation error probability combined with average correlation coefficients,POE+ACC)以及联合方法(Fisher+POE+ACC+MI,FPM)]和分析方法[原始数据分析(raw data analysis, RDA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)、线性分类分析(linear discriminant analysis,LDA)和非线性分类 分析(nonlinear discriminant analysis,NDA)]组合建立影像组学标签,以误判率评价其诊断效果。结果：108例患者中 Ki-67高表达组50例,Ki-67低表达组58例。Ki-67高表达与低表达两组间性别、年龄和病理类型差异均有统计学意义 (P<0.05)。基于CT平扫图像纹理特征的FPM特征选择和NDA特征分析方法建立的影像组学标签预测Ki-67表达水平效 果最佳,错判率为14.81%。基于CT增强图像纹理特征建立的影像组学标签错判率并未低于基于CT平扫图像纹理特征 建立的影像组学标签错判率。结论：基于常规CT图像纹理特征建立的影像组学标签有助于预测NSCLC病灶Ki-67的表 达水平,可为评估肿瘤侵袭性和预后情况提供一种无创性技术手段。     

肺癌组织中胸苷酸合酶与细胞增生核抗原蛋白的表达

目的研究胸苷酸合酶(TS)、细胞增生核抗原(Ki-67)在非小细胞肺癌(NSCLC)癌组织中的表达及临床意义;观察TS、Ki-67在NSCLC癌组织表达水平的相关性。方法应用免疫组化SP染色法检测了51例不同临床特征的NSCLC癌组织标本的TS和Ki-67的表达水平。结果TS与Ki-67蛋白总阳性率分别为68.6%(35/51)、72.5%(37/51),在不同组织类型癌组织的表达差异均无显著性;TS与癌组织分化程度差异有显著性(P<0.05),与TNM分期、淋巴结转移差异无显著性(P>0.05);Ki-67与分化、TNM分期、淋巴结转移差异有显著性(P<0.05);TS与Ki-67两者之间的表达水平呈显著正相关(r=0.84),TS各组别的Ki-67表达具有显著差异性。结论TS、Ki-67是判断NSCLC分化及增殖程度有价值的指标。