纯化前后海藻硫酸多糖体外清除自由基的电子自旋共振技术研究

目的对比研究纯化前后海藻硫酸多糖(sulfated polysaccharide from Laminaria japonica,SP)体外自由基清除作用。方法按照不同反应体系分别产生羟自由基·OH、超氧阴离子自由基O2·-与脂质自由基RO·,分别在各体系中加入纯化前后SP,采用电子自旋共振技术(electron spin resonance,ESR)对比研究其自由基清除作用。结果纯化前SP 1.25mg/ml对·OH的清除率为60.78%,但随浓度增加清除作用明显减小;0.8mg/ml基本能够全部清除O2·-;对RO·清除作用不明显。纯化后,SP在一定浓度范围内对·OH的清除作用呈量效关系,12mg/ml基本能全部清除O2·-,4 mg/ml对RO·的清除率为23.65%。结论纯化前低浓度SP虽表现活性氧(ROS)自由基清除作用,但由于成分复杂,其机制难以解释;纯化后SP成分均一性提高,具有一定的ROS和RO·清除作用。     

牙釉质电子自旋共振(ESR)信号强度与质量关系的研究

目的研究牙釉质样品不同的质量对牙釉质样品ESR信号强度的关系，在牙釉质样品量不足的情况下正确进行辐射剂量重建。方法对无射线照射史成年人臼齿用机械方法进行处理，制备牙釉质样品。用^60Coγ射线照射相同剂量后，利用电子自旋共振（ESR）仪测定不同质量样品的ESR信号。比较分析其信号强度、灵敏度，从而寻求样品质量的合适范围，以及对质量偏少样品ESR信号的处理分析方法。结果在10～200mg范围内，牙釉质样品的ESR信号强度与其质量并非完全的线性关系，但在40～120mg范围内有很好的线性关系。结论40～120mg范围内的牙釉质样品，ESR信号强度与其质量之间的线性相关系数较好，在剂量重建中应首先满足这一条件。     

电子自旋共振技术及其对红细胞膜脂损伤的研究

电子自旋共振(Electron Spin Resonance,简称ESR)技术是磁共振技术的一种,它可以对不成对的电子体系进行研究,而且对于不成对电子体系,可以采用“自旋标记”技术进行ESR的研究。在研究金属硫蛋白对红细胞膜、脂的保护作用时,用PBN为自旋标记物,来对它们进行ESR的研究。     

电子自旋共振波谱法对鲍鱼的辐照鉴定研究

目的建立检测鉴定辐照鲍鱼的电子自旋共振(ESR)波谱法。方法采用电子自旋共振波谱法研究辐照鲍鱼ESR波谱特征和定量特征峰。结果未经辐照和辐照鲍鱼ESR图谱差异明显;未经辐照鲍鱼的g值范围:g=2.0055～2.0060;辐照鲍鱼的g1值范围:g1=(2.0027±0.0001),g2值范围:g2=(1.9994±0.0001);在0.5～10kGy范围内,ESR特征峰信号强度与吸收剂量成正相关,左侧峰为定量特征峰,检测限≤0.5kGy;吸收剂量高于10kGy时则难以定量;ESR特征峰和g值可定性判定鲍鱼是否经过辐照处理。结论 ESR波谱法是鉴定辐照鲍鱼的有效方法。     

香烟中自由基的电子自旋共振检测及自由基与焦油含量的相关性研究

目的 研究香烟烟气中自由基的检测及样品处理方法,分析香烟烟气中自由基成分,探讨各种有害成分之间的相关性。方法 用电子自旋顺磁共振仪(ESR)及自制的配套装置对香烟烟气中的气相及粒相自由基含量进行分析检测。结果 无论香烟类型或品牌,烟气中自由基的主体是气相自由基,含量是粒相自由基的10—30倍;国产香烟样品中气相自由基含量低于进口品牌,而粒相自由基的含量水平较低且相近。结论 ESR及配套装置可以方便地应用于香烟烟气自由基成分的分析检测：香烟烟气中的自由基成分主要为气相自由基;同品牌香烟中自由基含量与焦油、烟碱的含量呈正相关。因此,一般不能依据香烟焦油含量推断香烟中的自由基,特别是气相自由基含量水平;使用活性炭滤嘴对气相、粒相自由基均有降低作用。     

硒对镉引发氧自由基的清除作用研究

目的：了解环境毒物镉作为氧自由基诱导剂,引发动物脏器及组织的系列毒性反应。方法：利用电子自旋共振技术（ESR）,采用PBN捕获剂本对镉引发氧自由基的清除作用。结果：一定剂量的硒能有效降低镉引发的氧自由基含量。本实验条件下的自由基清除率为65．5％,ESR图谱及参数显示自由基为脂质过氧自由基。结论：硒具有清除体内氧自由基的作用。     

ESR技术在电离辐射事故剂量分析中的应用

本文讨论了ESR技术应用于辐射事故剂量分析的基本原理,研究现状和发展前景。骨、牙组织及人身携带的许多有机和无机材料可以用于事故剂量的实际测量。     

药疹临床分析及生物共振技术在药疹诊断中的应用研究

目的 分析药疹的致敏药物、临床特征及治疗,探讨生物共振技术在药疹诊断中的应用.方法 回顾性分析本院皮肤门疹及住院确诊的药疹患者270例临床资料,将270例分为重症组及非重症组,比较两组药疹患者年龄、性别、黏膜损害、肝肾损害、激素用量等的差异,分析主要的致敏药物、最常见的临床类型及两者之间的关系.同时对其中30例明确致敏药物并使用生物共振技术检测的患者的检测结果进行分析,从而了解生物共振技术检测致敏药物的阳性率.结果 270例药疹病例中最常见的致敏药物是抗生素类、解热镇痛药及中成药;最常见的药疹类型是麻疹型或猩红热型药疹、多形红斑型药疹及荨麻疹型药疹,引起以上三种药疹最常见的药物分别是头孢菌素类、青霉素类及中成药;重症与非重症药疹患者相比在年龄分布、性别及潜伏期差异无统计学意义,在发热、肝肾功能损害及激素用量方面差异有统计学意义.生物共振技术检测药疹患者致敏药物的阳性率为100%.结论 抗生素、解热镇痛药及中成药是引起药疹常见的致敏药物,中成药引起的药疹逐渐增多,磺胺引起的药疹减少,引起重症药疹最常见的药物为头孢菌素及抗癫痫药,生物共振技术可协助临床医师明确药疹的致敏药物.     

活性氧自由基在ARDS发病机制中作用的实验研究

目的 探讨活性氧(ROS)自由基在急性呼吸窘迫综合征(ARDS)发病机制中的作用。方法 采用电子自旋共振(ESR)技术直接测量ROS,并结合超微弱发光法、化学发光法等技术分析鉴定了RPS的种类。结果 ESR结果显示,大鼠注射OA后10min ROS含量即升高,30min达到高峰,以后逐渐下降;利用超微弱发光法,投用不同ROS的清除剂得出OA型ARDS发病中起主要作用的ROS是超氧阴离子(02^-),而化学发光法定量检测结果与ESR波谱显示的结果完全一致。结论 ROS的改变早于肺毛细血管内皮(PCEC)损伤和病理形态的发生,ROS可能是ARDS启动的主要病因;OA型ARDS发病中起主要作用的ROS是02^-,今后在临床上可针对性应用SOD或SOD类似物来进行治疗。     

葡多酚对活性氧自由基的清除作用研究

目的 :　探讨葡多酚 ( GPC)对活性氧自由基的清除作用。方法 :　采用电子自旋共振 ( ESR)和自旋捕集技术直接测定不同浓度 GPC对 Fenton反应体系产生的羟自由基 (· OH)、光照核黄素 /EDTA体系产生的超氧阴离子 ( O·2 )及 Fe2 + 启动线粒体膜脂质过氧化产生的脂类自由基 ( LOO· )清除作用。结果 :　 GPC浓度为 1 mg/L、1 0 mg/L、1 0 0 mg/L、1 0 0 0 mg/L对·OH的清除率 ( % )依次为 9.0、2 0 .6、47.7、57.7,对 O·2 的清除率 ( % )分别为 1 0 .9、1 7.0、50 .9、72 .1 ,对LOO·的清除率 ( % )依次为 39.8、49.6、65.9、71 .4。葡多酚对· OH、O·2 及 LOO· 50 %的清除浓度 ( IC50 值 )分别为 1 2 8.9mg/L、89.4mg/L、1 0 .4mg/L。结论 :　葡多酚对三种活性氧自由基均有不同程度的清除作用 ,其中 LOO· >O·2 >· OH。     

烹调油烟提取物和燃煤颗粒物对豚鼠肺泡巨噬细胞自由基的体外诱导作用

目的 探讨烹调油烟提取物和燃煤颗粒物对豚鼠肺泡巨噬细胞内源性自由基的体外诱导作用.方法 采集北京市民用菜油油烟提取物和蜂窝煤燃烧颗粒物(PM10),制备样品,分别以终浓度为0、0.5、1.0、2.0mg/ml和0、1.25、2.50、5.00 mg/ml的各4个剂量组染毒豚鼠肺泡巨噬细胞,每次实验设3个平行样,实验重复1次.以豆蔻酰佛波醇乙酯为阳性对照.采用电子自旋共振(ESR)自旋捕捉技术对烹调油烟提取物和燃煤颗粒物刺激豚鼠肺泡巨噬细胞产生活性氧自由基进行了实验研究.结果 烹调油烟提取物、燃煤颗粒物及颗粒物丙酮提取后的剩余物均可刺激豚鼠肺泡巨噬细胞,引起呼吸爆发,产生羟自由基(·OH).0、0.5、1.0 mg/ml剂量组烹调油烟提取物的刺激作用比较,差异有统计学意义(P＜0.05).燃煤颗粒物及丙酮提取后剩余物的刺激作用,各剂量组比较,差异有统计学意义(P＜0.001).燃煤颗粒物的刺激作用明显大于丙酮提取后剩余物的刺激作用,差异有统计学意义(P＜0.05).表明颗粒物诱导自由基的作用来源于颗粒物中有机成分的化学刺激和颗粒物的颗粒组分的机械刺激两部分.结论 烹调油烟提取物和燃煤颗粒物可诱导豚鼠肺泡巨噬细胞产生活性氧自由基,产生的自由基可能参与这些污染物的肺损伤及致突变、致癌作用.     

维生素A干预对大鼠抗氧化能力及细胞膜流动性影响的研究

目的　通过对大鼠补充不同剂量维生素A(VA)观察机体抗氧化能力及对红细胞膜流动性的影响 ,了解抗氧化活性的最佳剂量。方法　将Wistar大鼠随机分为 4组 ,分别为维生素A缺乏组 (VA1组 )补充1 1 4 3(VA2组 )、4 2 86 (VA3组 )和 1 4 2 86 μgRE·kg- 1 ·d- 1 (VA4组 )维生素A三个剂量组。测定各组大鼠血浆VA含量、SOD、MDA和GSH Px的含量和活性 ,用荧光偏振度P值和微粘度 η值评价红细胞膜的流动性。 结果　各组血浆中VA水平随补充剂量的增加而增加。血浆中SOD、GSH -Px和MDA的结果显示 ,补充剂量为VA2、VA3组SOD的水平较VA缺乏组和VA4组明显偏低 (P <0 0 1 )。VA3组的MDA较其它 3个剂量组明显下降 (P <0 0 1 )。VA4组的SOD、MDA含量明显高于其它三个剂量组 (P <0 0 1 )。VA3组血浆中GSH -Px的活性明显升高 ,P <0 0 1。细胞膜流动性的结果显示 :VA3组P值最小 (P <0 0 1 ) ;VA4组P值明显增高 (P<0 0 1 )。微粘度 η在VA3组与VA缺乏组和VA2组之间未见明显差异 ,与VA4组相比明显下降 (P <0 0 1 )。结论　维生素A补充剂量为 4 2 86 μgRE·kg- 1 ·d- 1 时 ,能够发挥较好抗氧化作用 ,红细胞膜的流动性明显增加 ,过量摄入维生素A可造成机体的中毒反应 ,增加机体的氧化损伤     

锗—132对氧自由基清除作用的研究

用ＦｅＳＯ４－ＮＡＤＰＨ引发大鼠肝微粒体产生羟自由基（ＯＨ），用黄嘌呤／黄嘌呤氧化酶（Ｘ／ＸＯ）系统产生超氧阴离子自由基（Ｏ２），分别用电子自旋共振技术（ＥＳＲ）和比色法研究了羧乙基锗倍半氧化物（锗—１３２）对ＯＨ和Ｏ２产生量的影响。结果表明分别向产生ＯＨ和Ｏ２的反应体系中加入锗—１３２后，可使ＯＨ和Ｏ２的产生量显著减少，且随加入锗—１３２剂量的增加，ＯＨ和Ｏ２的产生量减少也越显著。本研究结果说明锗—１３２对ＯＨ和Ｏ２具有直接清除作用。     

硒、锗对羟自由基的联合清除作用

在以FeSO4 还原型辅酶Ⅱ引发大鼠肝微粒体产生羟自由基体系中 ,加入不同剂量Na2 SeO3、Ge 132和Na2 SeO3与Ge 132混合物 ,以N 特丁基 2 苯硝酮作为捕获剂 ,采用电子自旋共振技术检测羟自由基。结果表明在本实验剂量范围内 ,随着Na2 SeO3,Ge 132和其混合物浓度增加而羟自由基清除率提高 ,且在低剂量条件下 ,Na2 SeO3与Ge 132有协同增效清除作用。     

荧光共振能量转移技术在激光共聚焦显微镜中的应用

荧光共振能量转移（FRET）技术广泛用于活细胞中生物大分子构象变化和分子间动态相互作用的实时研究.受体光漂白法和敏化发射测量方法是激光共聚焦显微镜研究FRET的两类常用方法,在实验中应注意FRET荧光对样品选择的要求及FRET技术的局限性等问题.FRET技术作为活细胞研究强有力的工具在生命科学领域具有广阔的应用前景.     

荞麦蛋白和类黄酮提取物清除自由基的ESR研究

目的:探讨荞麦蛋白质提取物(BWPr)和类黄酮提取物(BWF)清除活性氧自由基的作用。方法:采用电子自旋共振(ESR)及自旋捕获技术。结果:BWPr可清除O2,且呈明显的量效关系,在1.4～_?6.0mg/ml浓度范围内,随着蛋白液浓度的增加,清除率近乎直线升高,而再增加蛋白液的浓度,清除率增加幅度下降,甜荞蛋白和苦荞蛋白的IC50分别为4.1mg/ml、3.2mg/ml。而BWF清除O2的作用高于_?甜荞蛋白和苦荞蛋白,当其浓度为58mg/L时清除率就达77.89%,而浓度为293mg/L时清除率达到98.56%。BWPr对·OH也有一定的清除效果,但不及BWF。结论:BWPr和BWF都有清除活性氧自由基的作用,提示除荞麦类黄酮外,荞麦蛋白质也是一种自由基清除剂。     

中草药与自由基的清除

在正常情况下,身体内的自由基虽不断地产生,同时也不断地被清除,这是因为我们的身体内存在许多清除自由基和抑制自由基反应的酶体系,如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶等,它们可以清除     

硒对人心肌缺血/再灌注期间红细胞膜分子流动性的保护机理研究

对象：将３２名患有房间隔或室间隔缺损的病人分为服硒组及对照组各１６名。材料及方法：分别用ＥＳＲ、显微红外等技术对心肌缺血／再灌注期间的冠脉窦血中抗坏血酸自由基（Ａ°）、脂质过氧化代谢产物（ＭＤＡ）、抗氧化酶类活性（血浆超氧化物歧化酶ＳＯＤ、红细胞内谷胱甘肽过氧化物酶ＧＳＨ－Ｐｘ、红细胞膜脂质及蛋白分子相对旋转时间（τｌ、τｐ）、红细胞膜脂质及蛋白分子的构象（蛋白分子的α螺旋和β折叠）及化学结构进行了动态观察和组间比较。结果：１．与对照组相比，服硒并未表现出对再灌注时心脏自由基的产生有抑制作用，但却使再灌注５分钟后的Ａ°自由基水平较对照组大幅度降低，并使服硒组于再灌注期间保持了较低的ＭＤＡ水平和正常ＧＳＨ－Ｐｘ活性以及较好的红细胞膜分子流动性；２．对照组于再灌注后的２０分钟内，其红细胞膜蛋白分子的α螺旋先减少后渐回复和β折叠渐增加并伴有羧基（ＣＯＯＨ）和氨基（ＮＨ３）减少，而其红细胞膜脂质分子的磷氧双键（Ｐ＝Ｏ）、羰基（Ｃ＝Ｏ）和多不饱和键（Ｃ＝Ｃ）则增加，说明再灌注期间自由基造成的上述分子化学结构及构象的改变是对照组红细胞膜分子流动性明显恶化的根本原因；３．服硒组的红细胞膜蛋白分子的α螺旋结构尽管于再灌注开?     

表面等离子体共振传感器技术在检测甲型流感病毒中的应用研究

目的 建立一种基于表面等离子体共振传感器技术检测人类甲型流感病毒的方法,并进行初步诊断应用.方法 分别设计基于甲型流感M基因的引物和探针,制备RT-PCR扩增产物,优化并确定基于传感技术的实验条件,建立高灵敏度和高特异度的表面等离子体共振传感器方法.结果 缓冲液的盐离子强度和pH值是影响杂交效果的关键因素,对其优化后标...     

铬对克山病病区粮致心肌损伤的保护机理探讨

方法：采用克山病病区粮分别加Ｃｒ３＋、加Ｓｅ喂养大鼠，以荧光偏振法测定心肌细胞线粒体膜流动性，低温顺磁共振技术直接测定心、肝自由基含量，同时观察ＧＳＨ－Ｐｘ及ＳＯＤ活性变化。结果：在缺Ｓｅ状态下膜流动性降低，心、肝自由基水平升高，ＧＳＨ－Ｐｘ及ＳＯＤ活性降低，加Ｃｒ３＋或加Ｓｅ喂养的大鼠膜流动性明显改善，自由基水平显著降低，ＧＳＨ－Ｐｘ及ＳＯＤ活性亦有改善。结论：增强抗氧化功能可能是Ｃｒ３＋抗心肌损伤的重要机理之一。