一株产新型大环内酯抗生素海洋解淀粉芽孢杆菌的分离鉴定

目的 对分离自中国东海30 m深海泥的一株产新型大环内酯抗生素(macrolactin s,MLS)的菌株进行形态、生理生化特性及分子水平的分类学研究.方法 通过细菌培养特征观察,菌株生长条件测定、生理生化指标及全细胞脂肪酸成分分析,并特异性扩增其16S rDNA序列,测序比对及构建系统发育进化树,利用本实验室所建立的抗菌模型评价代谢产物的抗菌活性.结果 该菌株与芽孢杆菌属其他种共享97%～99%的保守序列,其中与解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)的16SrDNA序列保守度高达99.6%.15:1 iso H/13:0 3OH为该菌株的主要脂肪酸组分.结论 该菌株属于芽孢杆菌属,定名为解淀粉芽孢杆菌MS1721株,其所产大环内酯MLS表现出较强的抗菌活性.     

空间条件对芽孢杆菌的超氧化物歧化酶物和其它性质的影响

枯草芽孢杆菌３１４菌株是超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的产生菌，经过我国“９２１０６”科学返回式卫星搭载之后，生长速度加快，酶活性提高。出发菌株产生ＳＯＤ大约５６０单位／克细胞。而搭载后的菌株提高２倍多，产生ＳＯＤ大约１２６０单位／克细胞。     

空间条件对芽孢杆菌的超氧化物歧化酶和其它性质的影响

枯草芽孢杆菌３１４菌株是超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的产生菌，经过我国“９２１０６”科学返回式卫星搭载之后，生长速度加快，酶活性提高。出发菌株产生ＳＯＤ大约５６０单位／克细胞。而搭载后的菌株提高２倍多，产生ＳＯＤ大约１２６０单位／克细胞。     

条件致病菌及生物降解真菌的空间生物学效应研究

目的研究空间条件下几株条件致病菌及生物降解真菌的生物学效应。方法可能影响航天员身体健康及降解空间材料的几株微生物,包括细菌、真菌、放线菌,经搭载7d后,应用常规微生物检验技术对它们的一些生物学特性进行初步研究。结果空间条件下菌株的存活率有明显提高,普遍生长较快,多数菌株产生色素;形态特征也有不同程度的变化;某些菌株对个别药物的抗性有所减弱,对多数药物的抗性不变。结论微生物在空间条件下繁殖能力增强,搭载后生长加快,形态分化提前,对药物的抗性基本稳定。     

新疆奶牛乳房炎病例中金黄色葡萄球菌生物学特性研究

对新疆6个牛场采集的304份奶牛乳房炎阳性奶样进行了金黄色葡萄球菌分离鉴定,分离率为29.2%。挑选64株菌进行了生长特性、生化、药物敏感性、致病力以及免疫原性研究。结果显示,这些菌株菌呈现α或α、β溶血,过氧化氢酶和凝固酶阳性;多数菌株对常用抗生素不敏感;75%的菌株生化反应为733720型,染色体DNA为16512bp;不同菌株的免疫原性差异很大,而且存在较广泛的交叉凝集。     

利用返回式科学卫星选育优良双歧杆菌

为选育优良菌株，利用返回式科学卫星搭载了双歧杆菌，对搭载后的菌株进行了复壮和分离，从中筛选出一株空间变异菌株Ｓｐａｃｅ ＢｂＮＣ－８。经一系列生物学试验证明，它具有生长速度快，对高温、过氧化氢、乙醇耐受性明显提高，无耐药性质粒，对动物无毒副作用等良好生产性状。     

空间条件对棘孢小单孢菌的诱变效应

１９９０年１０月将庆大霉素产生菌一棘孢小单孢菌（Ｍ．Ｅｃｈｉｎｏｐｏｒａ）搭载“９０１０５”科学返地卫星，返地后进行观测筛选 。其主要结果：菌株生长周期发生变异，均出现生长周期缩短或延长的超亲类型，经自然分离得到一些稳定的生长周期短的突变体；菌株产抗生素能力变异幅度较大，平均水平提高，高产菌株提高，产量正突变纺为２７．２７％，负突变率不高。卫星搭载后的菌株中，初筛选时最优菌株比对照增产２７．５５％     

不同土壤中紫花苜蓿根瘤菌抗逆性的区别

紫花苜蓿的茎叶柔嫩鲜美,可广泛用于喂养牛羊、加工草粉、配置饲料或混合饲料,适合于各类畜禽,因其广泛的应用性被大量种植.为了可以精确收集紫花苜蓿根瘤菌抗盐性强弱数据,本次实验从新疆盐碱土和棕漠土地区取6个紫花苜蓿根瘤菌菌株样品,然后分别对各个样品进行耐盐性、耐酸碱性及其相应泌酸碱能力强弱的测定.结果表明:棕漠土土壤紫花苜蓿根瘤菌株S-c有着极强的耐盐性,因为该菌株可以在浓度为10%的NaCL培养基上正常生长;盐碱土壤紫花苜蓿根瘤菌株M-a和棕漠土土壤紫花苜蓿根瘤菌株S-b在所有菌株中耐酸性最强,这两个菌株可以在pH为4.0的酸性培养基上正常生长;而有着最强耐碱性的菌株是盐碱土壤菌株M-c,该菌株可以在pH为12.0的碱性培养基上正常生长.经过进一步实验得出:棕漠土土壤紫花苜蓿根菌株S-a不但可以在pH为4.0的酸性培养基中正常生长,还可以在pH为11.0的碱性培养基中正常生长.而根瘤菌菌株的泌酸能力与其抗碱性息息相关.     

炭疽芽孢杆菌突变株AP431与A16R的生物特性比较研究

目的 系统评价所构建的炭疽芽孢杆菌突变株AP431的生物特性,并与出发菌株A16R对比,为后续研究提供数据基础.方法 绘制生长曲线比较突变株AP431和A16R的生长性能;糖酵解实验分析二者生化特性的差异;免疫印迹和流式细胞术检测菌株的保护性抗原PA蛋白表达情况;连续传代共培养分析其竞争关系;过氧化氢灭菌实验和抑菌圈实验分析菌株对活性氧的耐受性;以C57小鼠为动物模型比较二者的毒力大小.结果 与A16R相比,突变株AP431生长稍慢,生化特性基本一致.突变株AP431的PA蛋白在S层呈现表达良好,并且在培养基上清、细胞内和外膜上的表达水平均比A16R高.共培养实验发现AP431的生存竞争能力明显减弱.过氧化氢敏感实验表明,突变株AP431对过氧化氢的敏感性比A16R显著增高.动物毒力实验结果显示,分别在两种注射剂量下,突变株的致死率显著降低,与A16R组相比差异显著(P＜0.01).结论 与A16R相比,炭疽菌突变株AP431保护性抗原PA表达水平明显提高,毒力明显降低,可作为新的疫苗候选株进行进一步研究.     

炭疽芽孢杆菌致病机制与疫苗研制策略研究进展

炭疽杆菌致病过程包括芽孢发芽、菌体繁殖和毒素分泌等多个环节。荚膜和毒素是公认的致病因子。毒素B亚单位（PA）可阻断ET、LT的致病作用，已用作疫苗，但繁殖体生长过程中产生的出血、蛋白溶解分子也是毒力分子。相应的抑制剂有治疗作用。现有炭疽粗制PA苗、芽孢苗安全有效，但仍存在不足。根据炭疽致病机制的研究进展，理想炭疽疫苗应同时靶向芽孢、荚膜和毒素及其他毒力因子等多个环节。     

metK、vhbS和adpA的串联表达提高红色糖多孢菌红霉素产量的研究

目的在红色糖多孢菌（S.erythraea,SE）中串联表达S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因metK、透明颤菌血红蛋白基因vhbS和多效调控蛋白基因adpA,构建红霉素高产的工程菌株。方法通过PEG介导的原生质体转化方法,将携带metK、vhbS和adpA基因片段的整合型质粒导入红霉素野生菌株SE的A226及工业菌株WB中,安普霉素抗性筛选与PCR鉴定获得工程菌株,并利用枯草芽孢杆菌抑菌实验与高效液相色谱分析比较出发菌株及其工程菌株的红霉素产量。结果与结论成功构建4株A226衍生菌株A226-P1～P4与3株WB衍生菌株WB-P1～P3。相比野生菌株A226,工程菌株A226-P1～P4的相对红霉素效价提高了8%～25%,其红霉素A产量增加了64%～94%。同样,工程菌株WB-P1～P3的相对红霉素效价与红霉素A产量较出发菌株WB都有明显提高,分别增加了6%～10%与31%～62%。说明metK、vhbS和adpA的串联表达提高SE的红霉素产量具有普适性。     

牛源大肠杆菌的分离鉴定与耐药性分析

【目的】新疆某牛场的犊牛发生严重腹泻，出现排血便、黄色水样稀便、精神萎靡、食欲不振等症状。为了确定此次发病的病原做了此实验。【方法】无菌采集了20份犊牛粪便样品，从粪便中分离纯化出1株细菌，并对其进行培养特性观察、PCR鉴定、黏附性基因检测、药敏试验和动物致病性试验。【结果】结果显示分离到了一株革兰氏阴性菌，根据形状和大小判断疑似大肠杆菌；PCR鉴定结果显示为大肠杆菌，分离菌株具有F41黏附性基因。该分离菌株对多黏菌素B、阿米卡星、头孢他啶、头孢哌酮等敏感；在致病性试验中，小鼠在15 h内陆续死亡，说明该菌株具有一定致病力。【结论】结果表明，此次牛场犊牛腹泻分离的菌株为产肠毒素性大肠杆菌，携带F41毒力基因，对多黏菌素B、阿米卡星等抗生素敏感，具有一定致病力。     

飞船搭载微生物对航天器材的霉腐实验

目的探讨空间环境对微生物功能性状的可能影响。方法采用空间搭载和地面对照实验的3种真菌作为霉腐实验标准菌，对9种航天器材的板材进行7个月的霉腐测试实验。结果空间搭载菌株与地面对照相比，搭载的烟曲霉菌株气生菌丝生长良好，分生孢子生长丰茂，霉腐板材重量损失较少。结论微生物在空间条件下繁殖能力增强，搭载后生长加快，形态分化提前，对材料的霉腐能力有所下降。     

空间飞行对稻田鱼腥藻遗传特性的影响

通过对具有高固氮酶活性的稻田鱼腥藻近地克隆株（ＡｏＳＲ１６）的回复再搭载及其返地样品的单克隆实验，发现空间飞行环境能导致该藻株再次出现性状分离现象，即部分单克隆朱仍保持高固氮酶活性（如ＡｏＳＲ１６－１７），而另一部分单克隆株则回复到原始出发株（ＡｎａｂａｅｎａｏｒｙｚａＨＢ２３）的固氮酶活性水平，对ＡｏＳＲ１６－１７进行近两年的地面保持培养发现，这种高固氮酶活性的性状是可以遗传的，进一步通过ＲＡＰ     

模拟微重力环境下细菌生物学效应的初步研究

目的 研究模拟微重力环境下细菌的生物学效应.方法 应用回转器处理实验菌株(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、鼠伤寒沙门氏菌),检测其生长曲线,抗生素敏感性,以及抗生素敏感性变化株与野生株间脂肪酸图谱的差别.结果 模拟微重力条件下,细菌对数期提前、生长曲线形状改变.回转器处理30 d后可检测到大肠杆菌抗生素敏感性突变株,并且突变株的数量与处理时间呈现正相关趋势;鼠伤寒沙门氏菌处理120 d后,检测到氨苄西林和左氧沙星耐受株突变为敏感株;脂肪酸图谱分析显示,突变株与对照株相比脂肪酸的种类和含量存在一定差异.结论 回转器模拟微重力条件下,细菌生物性状受到影响,抗生素敏感性的改变可能与细菌脂肪酸图谱的变化有关.     

淋病奈瑟球菌国家参考品菌株的分子生物学特征分析

目的：对中国医学细菌保藏管理中心收集保藏的淋病奈瑟球菌（ NG）国家参考品菌株进行分子生物学特征分析。方法对13株NG国家参考品菌株进行16S rRNA和隐蔽性质粒cppB基因扩增和分析,并采用多位点序列分型（ MLST）、NG多抗原序列分型（ NG-MAST）技术对菌株进行分子分型。结果13株菌种均扩增出预期大小的16S rRNA基因片段,与NG模式菌株参考序列（ X07714．1）的相似性均＞99％;13株菌种均扩增出预期大小的cppB基因;MLST结果显示,13株菌种共分为10个ST型,其中含7个新的ST型;NG-MAST结果显示,13株菌种含9个por等位基因和9个tbpB等位基因,配对后是10个不同的ST型,其中含6个新的ST型。结论该研究完善了NG国家参考品菌株的分子生物学方面的质控指标,为今后NG参考品候选菌株的选择提供了新的技术手段。     

姥鲨共附生微生物抗菌活性筛选及系统发育分析

目的 以深海姥鲨鱼鳃和胃肠道共附生微生物为研究对象,对可培养微生物进行分离、纯化和初步鉴定,筛选抗菌活性,为寻找天然活性产物奠定基础.方法 采用倍比稀释涂布和划线法结合分离纯化可培养微生物;以枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、产气肠杆菌、白色念珠菌为抗菌活性筛选模型,利用琼脂块法和滤纸片法筛选纯培养菌株抗菌活性;利用形态观察、生理生化反应和16S rRNA技术对抑菌活性进行初步鉴定.结果 从姥鲨鱼鳃和胃肠道分离得到的可培养微生物36株,其中来自鱼鳃5株,来自胃肠道31株;菌株统计表明:真菌7株,占19%;放线菌1株,占3%;细菌28株,占78%.对23株来自姥鲨胃肠道的细菌进行抗菌活性筛选,15种表现抗(抑)菌活性,占分离菌株的65%.他们分别隶属于芽孢杆菌属(Bacillus)5株,葡萄球菌属(Staphylococcus)6株,短波单胞菌属(Brevundimonas)2株,嗜冷杆菌属(Psychrobacter)2株.结论 利用常规微生物学技术可以对姥鲨胃肠道和鱼鳃等部位存在共附生微生物分离和纯化,其中超过50%的菌株表现抗(抑)菌效果.     

转座子插入失活法筛选霍乱弧菌色素产生相关基因

目的：克隆霍乱弧菌色素产生相关基因，阐明霍乱弧菌色素产生的机制。方法：利用转座子插入失活产色素霍乱弧菌的色素产生相关基因，获取不产生色素的突变株。采用质粒拯救法，将相关片段克隆于测序载体。测序后，序列在NCBI网站上进行同源性比较。结果：利用转座子插入失活法筛选到4株突变菌株，基因同源性分析的结果显示克隆到的色素产生基因为对羟基丙酮酸氧化物酶（HPD），该序列和标准菌株N16961的序列差异主要集中在启动子区；对羟基丙酮酸氧化物酶基因的启动子区显示了一定的菌群特异性。结论：霍乱弧菌产生的色素属于黑素类色素，对羟基丙酮酸氧化物酶是色素产生过程中的关键酶，但霍乱弧菌色素产生与否不是羟基丙酮酸过氧化物酶基因序列差异的直接结果。     

新疆传统奶疙瘩中乳酸菌的分离及筛选

以溴甲酚绿BCG牛乳营养琼脂为培养基,对采自新疆伊犁、塔城、乌鲁木齐白杨沟的传统奶疙瘩中的乳酸菌进行了分离,经形态学和生化试验,得到初步定为乳酸菌的菌株18株.将经牛乳传代试验筛选得到的遗传性能稳定的5株乳酸菌并组合应用于牛乳发酵,分析其成品的组织状态、风味和乳清析出状况,测定菌株的发酵活力、凝乳时间、乙醛以及双乙酰的含量,筛选出感官性状好、风味独特、产酸能力较强的乳酸菌组合2组,可应用于发酵乳制品的生产.     

航校飞行员飞行前后及运动前后血尿蛋白尿发生率分析

目的探讨航校飞行员飞行前后及运动前后血尿、蛋白尿发生率及在航空医学鉴定中的价值。方法212例航校飞行教员和学员为受试对象，用干化学法筛查飞行前后及运动前后血尿、蛋白尿。以镜检法红细胞≥3个／HP；加热醋酸法尿蛋白≥( )者为阳性判定值，统计其阳性发生率。结果血尿、蛋白尿阳性发生率特点是：运动后血尿、蛋白尿的发生率高于飞行后；运动后蛋白尿的发生率明显高于血尿的发生率；飞行学员运动后血尿、蛋白尿的发生率明显高于飞行教员。飞行后血尿、蛋白尿的发生率较低；飞行后发生血尿、蛋白尿者运动后同样产生血尿、蛋白尿。飞行前或运动前有轻度血尿者，在飞行后或运动后血尿仍为阳性，个别血尿程度加重。结论建议建立和完善尿液检测标准化方法和制度。飞行员无症状血尿、蛋白尿的防治以个体化防治为宜。运动试验可用做评价肾功能状态的客观方法。