标本溶血对乙肝表面抗原检测的影响

在ＨＢｓＡｇ的林测中，常常遇到有溶血的标本，笔者用机械溶血的方法北照检测了溶血和非溶血标本的ＨＢｓＡｇ，现将结果报告如下．１ 临床资料 样本：３０例血液标本取自本院就诊病人。抽取静脉血３ｍｌ，凝固后离心分离部分血清标本；再用机械法造成溶血，离心后取其溶血血清．另在ＨＢｓＡｇ常砚检测中留取１０份ＯＤ值附近的血清及机械溶血后离心取其溶血血清． 试剂：ＨＢｓＡｇ试剂盒由深圳月弯湾生物工程公司提供，批弓：９９０８０１１，有效期内使用，操作按说明书． 仪器：ＤＥＮＬＥＹ　ＤＲＡＧＯＮ　ＮＫ２酶标仪．２ 结 果 …     

乙型肝炎病毒DNA疫苗的免疫效果

用已构建的不同载体乙型肝炎。基因疫苗（ＰＣＲ３．１－Ｓ，ｐｃＤＮＡ３－Ｓ）和乙型肝炎Ｃ基因疫苗（ＰＣＲ３．１－Ｃ０分别给Ｂａｌｂ／ｃ小鼠多点肌肉注射，２周后追加免疫一次，用ＥＬＩＳＡ法及ＭＴＴＩ地分别检测小鼠血清抗－ＨＢｓ、抗－ＨＢＣ抗体及地ＨＢｓＡｇ或ＨＢｃＡｇ的特异性增殖反应。结果：免疫接种２周后小鼠血清抗－ＨＢＳ及抗－ＨＢＣ抗体ＯＤ值分别为０．８３７３和０．７９６１均明显高于对照组（０．１２     

ELISA法、RPHA法检测HBsAg质量控制

由于检测ＨＢＳＡｇ的方法不同，各厂家试剂灵敏度的差异，加之国内缺少统一的标准参考试剂供应，方法和操作又没有规范化，即是同一厂家的试剂，各批间误差也不尽一致等原因，致使实验结果误差较大。为了使实验室内各工作人员技术水平一致，我们采用了自制室内质控物作为实验的参考值，取得初步效果，介绍如下：１　材料与方法１．１　材料１．１．１　阳性血清　分别收集门诊、住院、体检中ＨＢｓＡｇ用ＥＬＩＳＡ法测定ＯＤ值＞２．１倍以上的血清（大于５倍以上为最理想），加入防腐剂，放－３０°保存备用。１．１．２　临界值血清　卫…     

血球对乙肝血清标志物检测的干扰

运用ＥＬＩＳＡ法对有无血球存在的血清标本中乙肝标志物的检测、以了解血球存在对乙肝血清标志物测定的影响。通过３０例正反对照的检测结果显示，血球存在造成ＨＢｓＡｇ及ＨＢｅＡｇ阳性率显著增高，而对ＨｂｓＡｂ、ＨＢｅＡｂ及ＨＢｃＡｂ测定无影响，报道如下。１　材料与方法１．１　材料　来自于广元市人民医院门诊及住院病人３０例血清标本。试剂为上海科华ＥＬＩＳＡ试剂盒。１．２　检测方法　ＥＬＩＳＡ法，并严格按说明书进行。１．３　结果判断　酶标仪和肉眼判断相结合。２　结果　　３０例病人标本以无溶血血清按说明书检测…     

承德市高校无偿献血学生五项血液指标分析

对１９９９年１－６月份承德市高校１６０５名无偿献血大学生的乙肝表面抗原（ＨＢｓＡｇ）丙肝抗体（ＨＣＶ）,血清转氨酶（ＡＬＴ）,爱滋病（ＡＩＤＳ）,梅毒,血比重,血型等七项血液指标中主要指标的检测结果进行了统计学分析。结果：ＨＢｓＡｇ阳性率为４．１％（１．５％－５．１％）,ＡＬＴ阳性率为８．２％（３．７％－１１．１％）,发现４例ＨＣＶ阳性者,ＡＬＴ（＋）合并ＨＢｓＡｇ（＋）者１０例。未发现ＡＩＤＳ,     

瘀胆型肝炎70例血清学分析

我院于１９９３年４月至１９９８年４月收治瘀胆型肝炎７０例，分别进行了甲、乙、丙、戊型肝炎的病毒标志的血清学检测，现将结果报告如下。１　材料与方法１－１　临床资料：７０例瘀胆型肝炎临床诊断按１９９５年（北京）全国传染病寄生虫病学术会议制订的诊断标准，其中急性瘀胆型肝炎５３例，慢性瘀胆型肝炎１７例，病程３７～１８２天。男４２例，女２８例，年龄１５～６２岁，平均年龄３９岁。１－２　检测项目与方法：抗—ＨＡＶ—ＩｇＭＥＬＩＳＡ法，试剂由厦门新创科技有限公司提供；ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｓ、ＨＢｅＡｇ、抗－Ｈ…     

HBV polyK—A增加信号序列反义寡核苷酸对病毒抗原表达的抑制作用

目的：为了研究硫代寡核苷酸（ＡＳＯＮ）的抗乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）作用。方法：以２．２．１５细胞为靶细胞，在ｐｏｌｙＡ增加信号序列设计了１段ＡＳＯＮ，用酶联免疫吸附法检测了作用细胞的ＨＢＶ病毒抗原的分泌情况。结果：ＡＳＯＮ在每天给予２μｍｏｌ／Ｌ的浓度情况下能抑制７７％的ＨＢｓＡｇ和７１％ＨＢｅＡｇ的产生，无关序列的寡核苷酸无明显抑制作用，同时未见ＡＳＯＮ的细胞毒作用，结论：提示ＡＳＯＮ可能成为抗Ｈ     

ELISA一步法检测HBsAg漏检分析

目的：一步法检测ＨＢｓＡｇ的漏检分析。方法：运用ＥＬＩＳＡ二步法、稀释后一步法、一步法对乙肝“两对半”如下模式①ＨＢｅＡｇ、ＨＢｃＡｂ②ＨＢｅＡｂ、ＨＢｃＡｂ③ＨＢｅＡｂ④ＨＢｃＡｂ阳性的ＨＢｓＡｇ进行检测。结果：在１７０例标本中,二步法ＨＢｓＡｇ检出率为２１．１％,稀释后一步法为１０％。结论：一步法受ＨＯＯＫＳ效应影响明显,敏感性低,ＨＢｓＡｇ阳性漏检明显,ＨＢｓＡｇ检测宜用二步法。     

蛋白激酶C在热休克基因表达中的作用

热休克（４２℃，２ｈ）或Ｈ２Ｏ２预处理，均能在蛋白翻译合成水平使牛肺动脉内皮细胞（ＢＰＡＥＣｓ）中的ＨＳＰ７０增多；在基因围录水平使ＢＰＡＥＣｓ中ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ含量增加。蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂－－Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（ＳＴＰ）能显著减少热休克和Ｈ２Ｏ２诱导的ＨＳＰ７０合成及ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ转录的增加。提示ＰＫＣ在热休克和Ｈ２ＯＳ诱导的热休克基因表达的信息传递中具有重要作用。     

ELISA法检测献血者HBsAg、抗-HCV、抗-HIV室内质控初探

近年来 ,对献血者进行乙肝表面抗原 (ＨＢ ｓＡｇ)、丙型肝炎病毒抗体 (抗—ＨＣＶ)及艾滋病病毒抗体 (抗—ＨＩＶ)的检测 ,主要采取酶联免疫吸附实验 (ＥＬＩＳＡ)的方法 ,此方法特异性强、灵敏度高、操作简便 ,但检测过程中影响质量的因素较多 ,为保证质量 ,提高检测结果的准确性 ,我中心除参加卫生部临检中心血站血液检验室间质量评价外 ,在加强实验室内部管理的同时 ,亦开展了ＨＢｓＡｇ、抗—ＨＣＶ、抗—ＨＩＶ的室内质控 ,取得了良好的效果 ,现将结果报告如下。材料与方法1　试剂　厦门新创公司提供的ＨＢｓＡｇ ,批号 :2 0 0 110 0 …     

献(输)血者乙肝疫苗的应用及效果

自ＨＢｓＡｇ被Ｂｌｕｍｂｅｒｙ于１９６３年发现［１］，迄今为止，全世界至少有３亿以上的ＨＢｓＡｇ携带者，这些人中约２０％有不同程度的肝硬化［２］，约７０／３４５４演变为肝癌［３］。有些地方的个体卖血者ＨＢｓＡｇ阳性率高达３０％～９０％［４］，曾使我国的输血后肝炎（ＰＴＨ）的６２．２％～１００％为乙型肝炎［５］，在美国，１９７６～１９８５年输血死亡病例中，乙型肝炎死亡占７．９％［２］，尽管使用较敏感的放射免疫（ＲＩＡ）或酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ），检测血清中ＨＢｓＡｇ筛选献血者，输血后乙型肝炎的…     

1000名无偿献血人员乙肝病毒感染调查分析

为了解无偿献血人员乙型肝炎病毒感染情况，防止不合格的血液通过输血输入患者体内，严把质量关，因此我们对１０００名无偿献血者体检情况进行了调查分析，报告如下。１对象和方法１．１对象即墨市无偿献血人员１０００名。１．２检测方法待检人员每人静脉采血３ｍｌ，分离血清待检。用固相放射免疫测定法（ＳＰＲＩＡ）检测，严格按试剂说明书操作及判定结果。ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗一ＨＢｓ和抗一ＨＢｃＩｇＭ均采用夹心法，其结果为样品脉冲数，与阴性对照平均值之比为２．１即为阳性。抗一ＨＢｃ采用竞争法，其结果为样品脉冲数，…     

蛋白激酶C在热休克基因表达中的作用

热休克（４２℃，２ｈ）或Ｈ＿２Ｏ＿２预处理，均能在蛋白翻译合成水平使牛肺动脉内皮细胞（ＢＰＡＥＣｓ）中ＨＳＰ７０增多；在基因转录水平使ＢＰＡＥＣｓ中ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ含量增加。蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂──Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ（ＳＴＰ）能显著减少热休克和Ｈ＿２Ｏ＿２诱导的ＨＳＰ７０合成及ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ转录的增加。提示ＰＫＣ在热休克和Ｈ＿２Ｏ＿２诱导的热休克基因表达的信息传递中具有重要作用。     

肝癌发生中乙肝病毒感染与黄曲霉毒素暴露的作用

目的研究肝癌发生中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）与黄曲霉毒素（ＡＦ）的作用。方法在肝癌高发区,对７３７例乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阳性和６９９例ＨＢｓＡｇ阴性人群进行了１０年前瞻性研究,同时按１∶５的病例对照模式,随机对队列中３０例肝癌和相应的１５０例非肝癌人群进行血清中黄曲霉毒素Ｂ１白蛋白加成物（ＡＦＢ１Ａｌｂ）测定。结果（１）ＨＢｓＡｇ阳性组平均年肝癌发生率为８２４．１３／１０万,明显高于对照组的７０．９７／１０万,相对危险度（ＲＲ）为１１６１,其他肿瘤发病率两组间差异无显著意义（Ｐ＞０．０５）。（２）肝癌组人群血清中ＡＦＢ１Ａｌｂ阳性率为７６．７％,明显高于对照组的４８．７％,比值比（ＯＲ）为３４７,肝癌组人群血清中ＡＦＢ１Ａｌｂ的浓度也明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）。结论ＨＢＶ感染及ＡＦ暴露是肝癌发生的重要病因因素,两者可能具有协同致癌作用     

费县乙型肝炎感染标志的血清学调查

我们于１９９８年３月对费县正常人群进行了ＨＢｓＡｇ、ＨＢｓＡｂ和ＨＢｃＡｂ三项血清学调查，结果如下。１　材料和方法１．１　标本来源及研究方法　用整群系统抽样方法随机抽取８２１人进行体格检查，询问有关病史，剔除乙肝疫苗接种者，并填写调查表，同时采静脉血分离血清置－２０℃下保存待检。１．２　检测方法与判定　应用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测ＨＢｓＡｇ、ＨＢｓＡｂ和ＨＢｃＡｂ，试剂盒由上海科华生物技术有限公司生产，结果用９６０酶标仪检测，三项指标中有一项阳性即判定为ＨＢＶ感染。２　结果见表１、表…     

天津地区269例乙肝疫苗接种后效果分析

目的：了解本地区乙肝疫苗免疫效果。方法：取自天津市传染病院咨询门诊，２６９例均为ＨＢｓＡｇ、ＨＢｓＡｂ阴性、肝功能正常之接种者，按“０，１，６”免疫程序于上臂三角肌肌内注射拉种，除道剂量分为１０μｇ与５μｇ。结果：（１）￣１０岁组ＨＢｓＡｂ最高，￣４０岁组最低，两者均值相差６倍以上，但从总体趋势分析，随年龄升高，抗体应答能力逐渐下降。（２）有ＨＢＶ感染只者接种乙肝疫苗，其ＨＢｓＡｂ应管能力较乙肝系     

硫代反义寡脱氧核苷酸在树体内对HDV复制与表达的抑制作用

目的：在树（Ｔｕｐａｉａ）体内观察硫代反义寡脱氧核苷酸（Ｓ－ＡＳＯＤＮ）对ＨＤＶ复制、表达的抑制作用。方法：树同时接种ＨＢＶ阳性血清０．１ｍｌ、ＨＤＶ阳性血清０．３ｍｌ后，将１６只ＨＤＶ／ＨＢＶ感染成功的树随机分为两组，给药组８只树按每只每次经尾静脉注射Ｓ－ＡＳＯＤＮ３ｍｇ，隔日１次，共７次。对照组中２只注射等量生理盐水，另６只不作处理。注射后５、１０、１５、２５ｄ取血及肝组织采用免疫组化、斑点杂交及原位杂交法检测ＨＤＶＡｇ及ＨＤＶＲＮＡ。结果：于注射结束时（１５ｄ）给药组有７只树肝内ＨＤＶＡｇ及ＨＤＶＲ－ＮＡ转为阴性，对照组８只树中仅１只转为阴性。停止使用Ｓ－ＡＳＯＤＮ１０ｄ后，给药组２只阴转树肝内又可检出ＨＤＶＡｇ和ＨＤＶＲＮＡ，对照组仍有７只可检出。结论：Ｓ－ＡＳＯＤＮ在树体内能有效抑制ＨＤＶ复制及表达，但作用并不完全，可能与用药剂量不足，时间不够长及仅用硫代修饰尚不能直接导向靶基因有关     

催化信号放大系统的制备及其在免疫组化和原位杂交中的应用

目的：应用本实验室制备的催化信号放大（ｃａｔａｌｙｚｅｄ　ｓｉｇｎａｌ　ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ,ＣＳＡ）试剂,提高免疫组化（ＩＨＣ）和原位杂交（ＩＳＨ）的敏感性。方法：ＣＳＡ法应用于ＩＨＣ检测５０例１０种不同类型的肿瘤切片中４０种不同的抗原和ＩＳＨ检测６种不同的ＲＮＡ成分,并与相应的常规方法进行敏感性比较。同时分析了存在的问题。结果：ＣＳＡ－ＩＨＣ法较传统的ＰＡＰ法、ＡＢＣ法和 ＬＳＡＢ法敏感 ５００～１０００倍,较 ＥｎＶｉｓｉｏｎ法敏感 ２０～１００倍。 ＣＳＡ－ＩＳＨ法可使探针浓度从 ３ μｇ／ｍｌ降到 ０． ５～１μｐ／ｍｌ,杂交时间从 ２ ｄ缩短到 １ｄ,杂交阳性率明显提高。结论：本实验室制备的 ＣＳＡ系统与常规方法相比具有较高的敏感性、稳定性和低背景等优点,完全可取代进口试剂,非常适合于一抗昂贵、抗原性弱的ＩＨＣ检测,还可作为常规ＩＳＨ染色方法。     

套式PCR技术检测肝细胞癌患者血清HBV DNA

应用套式聚合酶链反应（套式ＰＣＲ）技术检测了１６例肝细胞癌（ＨＣＣ）患者血清中ＨＢＶＤＮＡ，并与ＰＣＲ结合Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交（ＰＣＲ－ＳＢＨ）的方法作了比较。２种方法灵敏度均可达１０￣（－５）ｐｇ。套式ＰＣＲ无需制备探针，试验周期短，更适于推广。１６例ＨＣＣ患者检出ＨＢＶＤＮＡ９例（５６．２５％）。ＨＢｓＡｇ阳性组９例检出４例，ＨＢｓＡｇ阴性组４例检出２例。３例未测ＨＢＶ血清标记物均检出ＨＢＶＤＮＡ。结果表明ＨＣＣ患者血清中仍有ＨＢＶＤＮＡ低水平复制，仍具传染性。     

ELISA测定HBsAg室内质控问题的探讨

室内质控是采用一系列的方法连续评价检测过程的稳定性 ,并保证检测结果的可靠性。目前 ,ＥＬＩＳＡ测定ＨＢｓＡｇ(还有其他一些测定 )结果以定性方式报告 ,本文对可否采用Ｌｅｖａｙ -Ｊｅｎｎｉｎｇｓ质控图及Ｗｅｓｔｇａｒｄ多规则进行探讨[1] ,报告如下。1　材料与方法1.1　材料　应用美国雅培ＡＸＳＹＭ自动免疫分析仪 ,ＭＥＩＡ法测定 2ｎｇ/ｍｌ的ＨＢｓＡｇ质控血清 30次 (北京市临检中心提供 ) ,并对样本荧光速率值 /阴性对照荧光速率值 (Ｓ/Ｎ)进行Ｗ检验[2 ] 。1.2　方法　用科华试剂、伯乐 5 5 0酶标仪 ,ＥＬＩＳＡ法测定2ｎ…