ABO亚型B(A)04鉴定及家系调查

目的对罕见的ABO亚型标本进行ABO血型鉴定及家系调查分析。方法采用血型血清学方法对家系标本进行ABO血型鉴定,同时采用PCR-SSP方法检测红细胞ABO血型基因及ABO cisAB与B(A)血型基因分型,并分析血型遗传规律。结果该家系调查发现2例血清学结果正反定型结果不符,均为血清学结果为正定型AB型,反定型B型,ABO基因型为B(A)04/O2型。结论对ABO血型血清学正反定型不符的标本,可以用家系调查和分子生物学方法进行辅助验证,并能阐述ABO血型弱表达现象的分子基础。     

基因分型结合血清学方法鉴定ABO血型亚型

目的准确鉴定红细胞ABO亚型。方法采用血清学方法鉴定12例ABO血型正反定型不符标本,结合PCR-SSP基因定型方法作检测鉴定,并对其中9例作基因测序确定基因型。结果 ABO基因分型结果与血型血清检测结果一致率为66.67%(8/12);其余不相符的4例:2例为B(A),1例为Cis AB,1例为新基因(新基因血型血清学结果不确定,PCR-SSP结果为A1/O02,测序结果为A102/O02型)。结论 ABO血型基因分型技术结合血清学定型可用于ABO亚型鉴定及ABO血型的正确定型。     

幼儿罕见Ax14亚型血清学及基因检测结果分析

目的对ABO正反定型不符的幼儿标本进行血清学鉴定和基因检测分析。方法常规血清学检测,PCR-SSP进行ABO基因初步分型,再使用ABO血型-A亚型基因分型试剂盒进行A亚型分型鉴定。结果血清学结果显示标本正定型为A型(抗A:1+~W),反定为O型(Ac2+,Bc4+);PCR-SSP A亚型分型鉴定结果显示标本基因型为Ax14/O2型。结论疑难血型鉴定有时需要结合血清学和分子生物学方法才能准确定型,此例血清学正反定型不符标本表型为Ax,其基因型为Ax14/O2。     

A型和AB型红细胞表面A抗原类型调查

目的调查ABO血型正反定型相符的A和AB型患者红细胞表面A抗原类型,探讨用分子生物学方法检测A_2抗原的必要性。方法 2020年1月至8月天津市第一中心医院正反定型相符A型和AB型的患者3 024例,用血清学试管法与抗A_1试剂反应,用序列特异引物聚合酶链反应(PCR-SSP)、1～7外显子直接测序法确定与抗A_1试剂反应阴性标本的血型基因型。结果 ABO血型正反定型相符的3 024例A和AB型中,血清学检出A_2和A_2B 48例(1.59%);基因型检出A_2和A_2B 16例(0.53%),PCR-SSP与基因测序结果相符,A_2B发生率高于A_2(P0.01)。11例A_2和A_2B输血患者作为观察组,输血当日同病种输血患者23例作为对照组,输血不良反应发生率差异有统计学意义(P0.01)。结论正反定型相符A和AB型患者红细胞表面A抗原具有多态性,运用分子生物学方法检测A_2和A_2B血型有利于提高输血安全。     

番禺地区ABO亚型基因分型研究

目的对广州番禺地区人群开展ABO亚型筛查和基因分型研究,了解该地区ABO亚型的分布频率和基因分型的特征。方法随机抽取本地区参加献血和临床体检样本,采用96孔微量板法快速筛查ABO血型正定型和反定型,凡是正反定型不一致的进一步做亚型鉴定;采用抗-A_1试剂对经单克隆ABO正定型试剂确定为A型和AB型的样本进行A_2和A_2B亚型筛查,采用试管法进行血清学鉴定;采用PCR-SSP法对上述鉴定为亚型样本的进行基因分型,对特殊样本进行测序分析。结果在39 106例ABO正反定型检测中,检出2例A_3亚型、基因分型均为A102/O01,1例B_3亚型、基因分型B303/O02。在6 664例经单克隆试剂定型A型中筛检出16例A_2亚型,发生频率约为0.24%(16/6 664);基因分型4例A205和2例A201,发生频率约为0.09%(6/6 664)。在834例经单克隆试剂定型AB型中筛检出44例A_2B亚型,发生频率约为5.28%(44/834),基因分型检出15例A205/B01、4例A201/B01,发生频率约为2.28%(19/834)。结论本地区人群中发现A_2、A_2B、A_3、B_3等亚型,使用PCR-SSP方法结合血清学检测更能准确鉴定ABO亚型。     

疑难ABO血型标本的表型与相应等位基因的检测

目的探讨分析疑难ABO血型标本与其等位基因的检测,为临床遇到的疑难ABO血型标本提供可靠的血型鉴定方法。方法选取2013年8月到2014年8月期间在笔者就职医院各科室送检的临床病人血液样本9例,首先按照常规血型检测技术进行ABO血型血清学试验,确定ABO正反定型,再采用盐酸胍/蛋白酶K裂解提取法对ETDA抗凝处理后的静脉外周血进行DNA提取,再使用聚合酶链反应-序列特异性引物法(PCR-SSP)对9例血样进行ABO血型基因分型检测。结果 9例临床病人血清学表型为:AxB 2例、AB亚1例、A亚B亚1例,Ax 2例,B亚3例,9例患者基因型分别为为:A/B 4例,A/O 2例,B/O 3例,通过PCR-SSP检测所得基因型与血清学表型结果相一致。结论利用聚合酶链反应-序列特异性引物法(PCR-SSP)对血清学方法鉴定ABO血型结果为正反不定型的疑难血型标本进行基因型检测,能准确地确定患者的血型抗原,为临床疑难ABO血型患者制定安全有效的用血方案提供保障。     

一例B(A)血型的血清学及分子生物学鉴定

摘要：目的?对1例血型血清学正反定型不符的标本进行ABO血型鉴定。方法?运用血型血清学方法鉴定标本ABO血型；用PCR-序列特异性引物(SSP)基因定型和ABO基因直接测序的方法确定该标本的基因型。结果?血型血清学检测结果表现为B(A)亚型的特点；PCR-SSP分型结果定为B(A)04/O1型；测序发现标本ABO基因的第6和第7外显子存在变异：第6外显子存在261delG、297A>G；第7外显子存在526C>G、640A>G、657C>T、703G>A、796C>A、803G>C、930G>A，判断该样本血型为B(A)04/O01血型。结论?该血型血清学初步鉴定为B(A)的标本用PCR-SSP法和ABO基因直接测序法确认为B(A)04/O01型。     

B(A)04亚型血清学与分子生物学鉴定及与其他AB亚型的鉴别要点

目的对3例血清学定性为A_(weak)B亚型的血标本进行ABO基因检测,探讨其分子遗传学特点,并探讨B(A)亚型与CisAB、A亚B型的鉴别要点。方法用PCR-SSP对常规血清学方法定型困难的3例标本进行ABO基因分型,并对其ABO基因第6、7外显子扩增后进行直接测序及单倍型测序,确定其基因型。结果 3例标本血型血清学结果均为A_(weak)B型,存在不规则抗A抗体。基因分型均为B(A)04型,其B等位基因在第7外显子存在nt640AG突变,标本1为B(A)04/O02,标本2、3为B(A)04/O01。结论当血清学检测结果正反定型不一致时,应采用分子诊断技术进行辅助诊断,并采用配血相合输血策略,可确保临床输血安全。     

33例无偿献血者ABO血型正反定型不符原因分析

目的分析无偿献血者ABO血型正反定型不符的原因。方法应用血清学方法检测ABO血型正反定型不符标本,并辅以ABO基因分型方法。结果 205 744例无偿献血者标本,其中33例正反定型不符,经进一步鉴定抗体筛查阳性13例,ABO亚型12例,血型反定型抗体减弱8例。结论当无偿献血者ABO血型正反定型不符时,应换人多次重检排除人为因素,同时进一步进行血清学试验及序列特异引物引导的PCR(PCR-SSP)基因分型,确保无偿献血者的ABO血型鉴定正确,使临床输血更加安全和有效。     

cisAB03血型鉴定及家系分析

目的对罕见的ABO亚型标本进行ABO血型鉴定及家系调查分析。方法采用血型血清学方法对家系标本进行ABO血型鉴定,正反定型不符的标本采用ABO血型基因检测及cisAB与B(A)血型基因分型等分子生物学方法,并分析血型遗传规律。结果该家系调查发现2例血清学结果正反定型结果不符,1例血清学正定型为AB型,反定型为O型,ABO基因型为cisAB03/O2型。另1例标本正定型为AB型,反定型为B型,ABO基因型为cisAB03/B型。结论对ABO血型血清学正反定型不符的标本,可以用家系调查和分子生物学方法进行辅助验证,并能阐述ABO血型弱表达现象的分子基础。     

肿瘤患者ABO亚型血清学与基因分型检测结果分析

目的使用血型血清学和分子生物学方法对肿瘤患者ABO亚型标本进行分析。方法 2014年7月~2019年12月在中国医学科学院肿瘤医院进行治疗的实体肿瘤患者,经输血科常规血型血清学鉴定为ABO亚型标本32例,标本分别采用序列特异性引物-聚合酶链式反应(PCR-SSP)法及基因测序(PCR-SBT)技术进行血型分子生物学鉴定;PCR-SSP检测5例,PCR-SBT检测28例,其中1例同时进行PCR-SSP和PCR-SBT检测;对比分析血清学和基因分型结果。结果本研究中66%(21/32)标本经基因分型检测确认为ABO亚型或存在突变,包含:7例B(A).04, 2例B(A).02,1例cisAB.01, 3例为BW.12, 4例为BEL.03, 1例AEL.02, 1例B型974GC, 1例A型797insT, 1例A型617CG;21例亚型或存在突变标本中,15例血型血清学与基因分型结果一致,6例为血清学吸附放散试验未检出A或B抗原。另34%(11/32)分子生物学分析未检出导致ABO亚型基因变异。结论分子生物学技术能够很好的解决实体肿瘤患者抗原或抗体减弱以及亚型所致的ABO疑难血型鉴定,是准确鉴定疑难ABO血型的重要辅助方法。     

41例ABO亚型检测与血清学分析

目的加强ABO亚型血型安全输血管理,防范亚型不符造成的输血安全隐患。方法对输血科41例正反定型不符血液标本进行ABO正反定型、吸收释放试验、唾液血型物质测定等血清学检查。结果 41例ABO血型亚型中共检出12个种类,其中A亚型17.07%(7/41),B亚型78.05%(32/41)。结论安全输血中ABO血型准确鉴定是一项重要内容,应及时采用多种血清学方法进行检测和分析,保障临床安全输血。     

血型血清学ABO亚型95例的分子机制研究

目的研究95例中国人群血型血清学ABO亚型个体的分子机制。方法 2013年11月—2017年10月采用血型血清学方法对ABO正反定型不符标本进行检测;采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)及第6、7外显子基因测序方法进行基因分型,其中部分标本采用了第1—7外显子的测序。结果对血型血清学方法确认的95例(73例先证者,22例家系成员)ABO亚型标本。经PCR-SSP和基因测序检测,73例ABO亚型先证者中检出A亚型基因的个体13例(17.8%),检出B亚型基因的个体17例(23.3%),检出B(A)型基因的个体22例(30.1%),共52例(71.2%,52/73);22例家系成员中检出ABO亚型基因者18例。先证者中未检出ABO亚型基因者21例(28.8%,21/73),且21例中5例(6.8%,5/73)检出O基因但表达弱A或弱B抗原;22例家系成员中4例未检出ABO亚型基因,共25例(25/95)。结论 ABO亚型的基因型与表型不完全符合,且同1个血型血清学表型对应不同的基因型,同1个基因型又表现为不同的血型血清学结果。     

血型血清学和PCR-SSP方法在ABO疑难血型鉴定中的互补性应用

目的探讨血型血清学技术和聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)方法在ABO疑难血型鉴定中的互补性应用。方法采用血型血清学方法对14例ABO疑难血型标本做正反定型(必要时进一步做吸收放散试验),同时采用PCR-SSP方法对其做ABO基因分型。结果 14例ABO疑难血型标本的血清学检测:Bx型3例,B(A)、AB3型各2例,Bend、B3、AxB、ABx和Bel型各1例;另有2例为AB型伴抗原减弱(不排除疾病等因素影响)。PCR-SSP方法分型:得到7例ABO亚型基因,分别为Bx02O01、B(A)02O02、AB305、AB303、ABw12、Bw12O02和Bw12O01;7例正常的ABO基因,AB1、B1O01各3例,B1O02型1例。结论 PCR-SSP方法在疑难血型鉴定中的应用有助于输血前检查中ABO血型血清学结果的补充。     

B(A)血型鉴定及其临床输血策略研究

目的:通过血清学及分子生物学检测分析1例先证者ABO血型正反不符的原因,以明确其血型及遗传规律并制定合理的输血策略。方法:根据血清学结果,利用PCR-SSP方法对1例患者及其家庭5位成员的外周血进行ABO基因外显子测序,综合分析血型结果。结果:先证者血型正反不符,分子生物学检测结果与B101对比多一个c.700C>G,符合B(A)02亚型,基因型为B(A)02/O02型;其哥哥检测结果同先证者;先证者侄子亦检测出c.700C>G,基因型为A102/B(A)02型。结论:标准血型血清学鉴定ABO血型出现正反定型不符时,利用分子生物学检测技术发现突变点是证实ABO亚型的有效方法,为临床输血提供安全保障。     

献血者ABO正反定型不合原因分析

目的探讨本地区献血者ABO正反定型不合的原因和特点,为准确的血型鉴定和临床输血安全提供依据。方法对2008年1月~2015年12月健康献血者进行血型鉴定,将正反定型不合的血液标本送血型参比室做进一步鉴定,并分析原因和特点。结果 285 282例血液标本中,共检出ABO正反定型不合375例,阳性率0.131%,其中男性阳性率0.104%,低于女性阳性率(0.163%),差异有统计学意义(P0.01);ABO正反定型不合的原因分析中,特异性抗体引起的295例,占78.7%;冷凝素干扰28例,占7.5%;非特异性抗体21例,占5.6%;抗-M(26.1%)、冷抗体(23.4%)及ABO亚型(20.7%)等是引起ABO正反定型不合的常见特异性抗体;AB型中的A_xB亚型(27.9%)、A_2B亚型(13.1%)和B型中的B3亚型(11.5%)等是引起ABO正反定型不合的常见ABO亚型。结论献血人群有一定的ABO正反定型不合发生率,多种原因可导致ABO正反定型不合的发生,通过准确的血型鉴定和原因分析,才能为临床输血安全提供重要的建议。     

献血者ABO血型正反定型不符检测结果分析

目的分析献血者ABO血型正反定型不符的情况,采用分子生物学技术准确鉴定血型,为安全输血提供保障。方法收集2016年6月至2017年6月本血站73例ABO血型正反定型不符标本,采用血型血清学方法检测ABO血型,PCR-SSP法及直接测序方法确定基因型。结果 73例正反定型不符标本中ABO血型正定型为A型,抗-B减弱标本56例,检出4种基因型分别为19例AO1、21例AO2、15例AA、1例A205O2为A2亚型;正定型为B型,抗-A减弱9例,检出2种基因型分别7例BO1、2例BO2;正定型为O型,抗-B减弱7例,检出3种基因型分别为2例BO1为B亚型、4例O1O2、1例O1O1;正定型为O型,抗-A减弱1例,检出基因型AO1为A亚型。其中,4例ABO亚型经基因测序结果分别为A205/O02、Bel03/O01、Bw17/O01、Ax01/O01。结论对于献血者正反定型不符时,应通过血清学与基因检测及DNA测序相结合的方法,正确鉴定血型,为临床提供安全的血液。     

B(A)04血型鉴定及家系分析

目的鉴定1例B(A)血型并对其进行家系调查分析。方法采用血型血清学方法对10例家系样本进行ABO血型鉴定,正反定型不符的样本采用ABO血型基因检测及cis AB与B(A)血型基因分型等分子生物学方法检测,并分析血型遗传规律。结果 10例样本中8例ABO正反定型相符,2例样本ABO血型正反定型结果不相符,均是正定型为AB型,反定型一个是O型,另一个是B型。这2例ABO基因型为B(A)04/O1型和B(A)04/B型。结论对ABO血型血清学正反定型不符的样本,可以采用家系调查和分子生物学方法进行辅助验证,阐述ABO血型抗原弱表达现象的分子基础。     

A×B亚型1例报道

目的通过对1例A×B亚型的鉴定,说明血型鉴定中正反定型及ABO亚型对输血的重要性。方法按照试剂所提供的操作方法进行血型血清学检测,进行ABO血型正反定型,抗人球蛋白检测。结果血清学试验表明,被检者的红细胞与A抗体发生凝集,与B抗体不发生凝集,与抗-AB发生凝集,被检者的血清与A1型红细胞、B型红细胞、O型红细胞不发生凝集,初步判定为A×B亚型。结论 ABO亚型是ABO抗原以外的抗原性较弱的亚型或变异,主要是由糖基转移酶基因突变或单碱基因缺失等原因导致A抗原或B抗原表达减弱,是导致正反定型不符,血型误判及配血不合的主要原因,给血型鉴定及患者输血带来困难。在临床工作中,应重视ABO血型亚型的存在,提高输血安全性。     

1例A3B亚型的血清学和分子生物学结果分析及家系调查

目的 分析1例ABO血型A亚B型标本的血清学和分子生物学特征,探讨ABO亚型鉴定的准确方法。方法 采用常规血清学方法分析了1例标本ABO表型,首先使用PCR-SSP方法对样本进行ABO基因分型,再采用直接测序的方法对样本的第6、第7外显子测序确定其基因型。结果 血型血清学检测结果为A亚B型;PCR-SSP分型结果为A₁B型;测序发现标本ABO基因的第6和第7外显子存在突变：第6号外显子发生297A>G突变,第7号外显子发生467C>T、526C>G、657C>T、703G>A、745C>T、796C>A、803G>C及930G>A突变,该样本基因型为A307/B01。先证者母亲血型血清学检测结果疑似为A亚型;基因测序结果为A₃型。先证者父亲血型血清学检测结果为B型。结论 血清学实验结合分子生物学方法可准确鉴定ABO亚型,分子生物学方法还有助于探索ABO亚型的形成机制。