亚砷酸钠对角质形成细胞增殖力和细胞周期的影响

目的　研究不同浓度亚砷酸钠 (NaAsO2 )对人皮肤永生化角质形成细胞 (HaCaT)增殖活力及细胞周期的影响。方法　以体外培养的HaCaT细胞株为对象 ,用不同浓度的NaAsO2 处理细胞 ,用AlamarBlue摄入法定量检测细胞增殖情况 ,用流式细胞仪测定细胞周期分布。结果　NaAsO2 浓度小于 10 μmol L时 ,AlamarBlue的还原率明显高于对照组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,5 0 μmol L时 ,还原率明显下降 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;10 μmol L组G0 G1 期比例减少 ,S期和G2 M期比例增高。各组凋亡率差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　低浓度NaAsO2 可促进HaCaT细胞的增殖 ,高浓度可抑制其增殖活力 ;一定浓度的NaAsO2 可使合成期细胞增多。     

1α,25-二羟维生素D_3对大鼠成骨细胞骨架、间隙连接通讯及[Ca~(2+)]_i的影响

目的研究不同浓度1α,25-二羟维生素D3[1,25-(OH)2·D3]0、10-9、10-8、10-7mol/L对体外培养3～4d龄SD大鼠成骨细胞(OB)骨架F-actin、间隙连接通讯(GJIC)及细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的影响。方法1,25-(OH)2·D3作用20min、24h后测定[Ca2+]i;作用24、48h后观察F-actin及GJIC。结果20min时,不同浓度1,25-(OH)2·D3组[Ca2+]i均显著高于对照组;24h时10-9mol/L组[Ca2+]i则显著低于对照组,其余各组间差异不显著。此时10-8、10-7mol/L组大部分细胞变得扁平,F-actin排列较对照组有序,形成应力纤维;48h时,对照组及10-9mol/L组F-actin表达减少,10-9mol/L组GJIC非常显著地弱于对照组,而10-8、10-7mol/L组大部分细胞F-actin表达完好,GJIC均非常显著地强于其余两组。结论高浓度1,25-(OH)2·D3能够维持OB形态,增强OB间通讯,而低浓度1,25-(OH)2·D3抑制细胞间通讯。     

蔬菜粉提取物和β-胡萝卜素对人肺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 :　探讨蔬菜粉脂溶性提取物 ( FEVP)、β-胡萝卜素对人肺癌细胞 YTMLC- 90增殖和凋亡的影响。方法 :　采用体外培养 ,细胞毒 ( MTT法 )试验、形态学、DNA凝胶电泳、流式细胞术等方法。结果 :　高、中、低浓度 FEVP(分别为相当于 β-胡萝卜素 2 .5× 1 0 -6、2 .5× 1 0 -7、5× 1 0 -8mol/L )和高、中浓度β-胡萝卜素 ( 1× 1 0 -4和 1× 1 0 -5mol/L)能显著抑制 YTMLC- 90细胞增殖。高、中浓度 FEVP和高浓度 β-胡萝卜素可显著抑制 YTMLC- 90细胞核分裂。高、中浓度FEVP、高浓度 β-胡萝卜素组细胞出现细胞核固缩 ,染色质凝聚 ;典型 DNA断裂梯状条带 ;细胞凋亡峰。这些现象符合细胞凋亡的特征。结论 :　蔬菜、β-胡萝卜素可能通过抑制细胞核分裂、诱导凋亡抑制人肺癌细胞增殖 ,有剂量反应关系 ,且蔬菜的作用比 β-胡萝卜素的作用强。     

来曲唑与三苯氧胺对人卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP生长及耐药的影响

目的:研究来曲唑(letrozole,LTZ)与三苯氧胺(tamoxifen,TAM)对人卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP生长及耐药的影响。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法,比较不同浓度的LTZ、TAM、LTZ+TAM对SKOV3/DDP细胞生长及对顺铂(cisplatin,DDP)耐药的逆转作用。结果:①不同浓度(1×10-9mol/L～1×10-4mol/L)LTZ或低浓度(1×10-9mol/L～1×10-7mol/L)TAM对SKOV3/DDP细胞生长无抑制,不能逆转DDP引发的耐药。高浓度(1×10-6mol/L～1×10-4mol/L)TAM能抑制SKOV3/DDP细胞的生长且能逆转DDP引发的耐药,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。②1×10-6mol/L TAM与各浓度(1×10-9mol/L～1×10-4mol/L)LTZ联合用药,对该细胞的生长抑制作用及逆转DDP引发的耐药较单用1×10-6mol/L TAM无明显增强,差异无统计学意义(P>0.05);(1×10-5mol/L～1×10-4mol/L)TAM与各浓度(1×10-9 mol/L～1×10-4 mol/L)LTZ联合用药,在LTZ为(1×10-6 mol/L～1×10-4 mol/L)时,两药联合对该细胞的生长抑制作用与单用TAM(1×10-5mol/L～1×10-4mol/L)及组间相比差异有统计学意义(P<0.01);在LTZ为(1×10-5mol/L～1×10-4mol/L)时,两药联合逆转DDP引发的耐药与单用TAM(1×10-5mol/L～1×10-4mol/L)逆转及组间相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:高浓度TAM可以逆转SKOV3/DDP细胞对DDP的耐药性;高浓度LTZ与TAM联合可使TAM逆转SK-OV3/DDP细胞对DDP耐药的作用增强。     

苯并[a]芘与铅联合神经毒性的细胞学研究

目的苯并[a]芘(BaP)、铅及其联合作用对体外神经元的毒性及细胞凋亡率的影响.方法取8日龄SD大鼠小脑粒细胞培养,按以下分组进行处理空白对照组;溶剂对照组;低浓度铅染毒组;高浓度铅染毒组;低浓度BaP染毒组;高浓度BaP染毒组;低浓度铅+低浓度BaP染毒组;低浓度铅+高浓度BaP染毒组;高浓度铅+低浓度BaP染毒组;高浓度铅+高浓度BaP染毒组;高、低浓度的BaP染毒分别为BaP50μmol/L+S9-mix和BaP5μmol/L+S9-mix,高、低浓度的铅染毒分别为50和5μmol/L的PbAc,溶剂对照组用等量DMSO平行处理,空白对照组不作处理.染毒90min,胰酶消化法收集标本.台盼蓝染色法检测存活率;DNA断点末端核糖核酸转移酶地高辛标记(TUNEL)法检测大鼠小脑粒细胞凋亡率,并对细胞存活率与凋亡率进行相关分析.结果各染毒组细胞存活率均低于对照组,高剂量组降低程度高于低剂量组,联合染毒组降低程度高于单独染毒组(P<0.05～P＜10E-7).各染毒组细胞凋亡率显著升高,高剂量组升高程度高于低剂量组,联合染毒组升高程度高于单独染毒组(P＜0.001～P＜10E-9).细胞凋亡率与存活率间呈负相关(r=-0.76125,P＜0.05).结论 BaP、铅均有一定的体外神经毒性,二者联合作用可使毒性增强.细胞凋亡可能是BaP引起体外神经毒性的机制之一.     

大豆苷原对体外培养人胃癌细胞增殖和细胞周期的影响

目的:了解二羟异黄酮对胃癌细胞有无促增殖与诱导凋亡作用。方法:以不同浓度的二羟异黄酮处理人胃癌细胞系MGC-803细胞。然后分别用MTT法测定细胞增殖情况、流式细胞仪和琼脂糖凝胶电泳测定细胞周期和细胞凋亡等。结果:MTT 结果显示:二羟异黄酮对胃癌细胞具有促进和抑制增殖的双相作用-在低浓度(0.1-1 μmol/L)时促进细胞生长,在较高浓度(10-100 μmol/L)时对细胞生长则有抑制作用。流式细胞术结果显示:癌细胞群阻滞在G1期,没有明显凋亡峰的出现;凝胶电泳也末检测到明显的DNA阶梯状条带。结论:二羟异黄酮对体外培养的胃癌细胞的生长有双相作用,较高浓度可抑制胃癌细胞的生长并使细胞阻滞在G1期,而无诱导细胞凋亡的作用。     

硒对中脑神经细胞生长影响的研究

目的 :研究硒对体外大鼠胚胎中脑神经细胞生长的影响。方法 :用原代培养大鼠胚胎中脑神经细胞 ,MTT法检测不同浓度硒作用下神经细胞的存活率 ;透射电镜观察法定性检测细胞凋亡。结果 :低浓度 (≤ 5μmol/ L)的硒对神经细胞的生长无明显影响 ,高浓度的硒 (≥ 1 0 μmol/L)可降低细胞存活率。结论 :硒可能通过诱发神经细胞凋亡而降低细胞存活率     

长期喂饮钇对子代大鼠生长发育及学习记忆能力的影响

目的考查长期摄入稀土对子代大鼠学习记忆能力及生长发育的影响。方法32只Wistar大鼠,随机分为4组,分别喂饮钇浓度为0、0·534、53·4和5340mg/L的饮用水,计算其孕育率、平均产仔率和平均仔鼠成活率。亲、子代大鼠从出生后第20天开始,每10天对其称重1次,持续2个月,观察其生长发育情况。对6月龄子代大鼠进行跳台实验。结果与对照组相比,低浓度组(0·534mg/L)子代大鼠学习阶段的触电时间显著降低,记忆阶段的潜伏期显著增长(P<0·01),但其亲代、子代体重的增长和生育情况无明显改变;中浓度(53·4mg/L)组子代小鼠各项指标均无明显改变;高浓度(5340mg/L)组子代小鼠在学习、记忆阶段的触电时间都显著增长(P<0·01),而错误次数都明显增加(P<0·05),亲代、子代体重增长量和子代平均成活率显著降低(P<0·05)。结论低浓度(0·534mg/L)的钇对子代Wistar大鼠的学习记忆能力有促进作用(P<0·01),但对其生长发育无明显影响;中浓度(53·4mg/L)时对其学习记忆能力和生长发育均无明显影响;高浓度(5340mg/L)时则对其学习记忆能力和生长发育均有抑制作用(P<0·05)。     

甲醇和汽油汽车尾气对A549细胞株细胞毒性及增殖和凋亡功能的影响

目的:比较甲醇燃料汽车尾气和汽油燃料汽车尾气对A549细胞株的细胞毒性及增殖和凋亡功能的影响。方法:1)MTT比色法检测受试物细胞毒性。2)受试物体外培养实验:汽油组剂量分组为:0·125L/ml,0·0625L/ml,0·03125L/ml,0·0156L/ml,0·0078L/ml和一个空白对照;甲醇组剂量分组与汽油相同。A·细胞培养介质乳酸脱氢酶活性的测定;B·细胞形态学观察;C·流式细胞术a·检测细胞周期并计算细胞增殖指数;b·观察细胞亚二倍体峰的变化,计算凋亡百分比;结果:1)MTT比色法汽油组在0·125L/ml剂量组OD值与对照组相比差异有统计学意义(P<0·05);甲醇组在1·0L/ml剂量组OD值与对照组相比差异有统计学意义(P<0·05);2)受试物体外培养实验:A·细胞培养介质乳酸脱氢酶活性的测定:汽油组在0·0625~0·125L/ml各剂量组LDH值与对照组相比差异有统计学意义(P<0·05),同等剂量下甲醇组与对照组相比,差异无统计学意义(P>0·05);B·细胞形态学观察:汽油组在0·125L/ml,可见大量死亡细胞和凋亡细胞数增加,相同剂量甲醇组未见明显改变;C·流式细胞术:仅汽油组0·0156,0·03125L/ml、0·0625L/ml剂量组细胞增殖指数显著低于对照组(P<0·05),汽油组和甲醇组在0·0156~0·0625L/ml剂量组凋亡百分比均高于对照组,但后者作用更强。结论:在同等剂量下,汽油燃料尾气对A549细胞株的毒性及对细胞增殖的抑制明显高于甲醇,但甲醇诱导A549细胞凋亡的作用略强。     

锰对皮层神经元胞浆游离钙离子浓度的影响

目的探讨皮层神经元胞浆游离钙离子浓度在锰(Mn)神经毒性作用中的变化。方法分离新生Wistar乳大鼠的皮层神经细胞进行体外培养,细胞生长至最佳状态时,予以分组处理。实验分染锰组和未处理组,染锰组分别与含低、中、高浓度氯化锰(MnCl_2·4H_2O)的培养液共培养,氯化锰的浓度分别为0．2、0．6、1．0mmol/L。未处理组则为正常培养的皮层神经细胞。各组处理24h后终止培养,钙离子荧光探针Fluo-3/AM标记后上激光扫描共聚焦显微镜检测荧光强度,以表示游离钙离子浓度,并用图像分析技术进行处理。结果氯化锰处理后引起皮层神经元胞浆游离钙离子不同程度的超载,中、高浓度锰组神经元的胞浆游离钙离子浓度明显高于低浓度锰组及未处理组,细胞钙离子荧光像素荧光强度增高且呈剂量依赖性,中、高浓度锰组分别为(131．1±16．7)、(183．2±22．9)；低浓度锰组为(84．6±10．2),差异有统计学意义(P＜0．05)。结论钙离子超载与锰的神经毒性有关,且钙离子超载与锰浓度呈剂量-反应关系。     

顺铂诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡及其对细胞周期影响的研究

目的:观察顺铂对人宫颈癌Hela细胞凋亡及细胞周期的影响,以揭示顺铂治疗宫颈癌的机理。方法:运用体外细胞培养技术,以不同浓度的顺铂作用于培养的人Hela细胞72 h,用流式细胞仪分析其凋亡率及细胞周期。结果:顺铂能以浓度依赖的方式诱导Hela细胞凋亡,并呈现出G0/G1期阻滞作用。结论:顺铂能诱导Hela细胞凋亡并改变其细胞周期分布,阻滞Hela细胞于G0/G1期,这可能是顺铂抗宫颈癌作用的重要机制之一。     

米非司酮对子宫肌瘤患者血清脂联素的影响

目的观察米非司酮对子宫肌瘤患者血清脂联素的影响,探讨其缩小肌瘤的机制。方法60例子宫肌瘤患者随机分为两组。米非司酮组40例,每日服用米非司酮10mg,共3个月;Enantone组20例,每月皮下注射Enantone3.75mg,共3个月。分别于治疗前后采静脉血化验Hb、血脂、血糖;用免疫化学发光法测定血清皮质醇(C)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、促黄体生成素(LH)、促卵泡素(FSH),用酶联免疫分析法测定血清脂联素水平;测量子宫及肌瘤三维径线。凡肌瘤体积缩小20%以上者,为有效组;肌瘤体积缩小不足20%者,为无效组。结果平均子宫肌瘤体积米非司酮治疗有效组比用药前缩小了45.5%(P<0.05),Enantone组缩小了47.5%(P<0.05),两组缩小程度无差异。无效组体积增大18.74%(P<0.05)。血清脂联素水平治疗后有效组明显上升(P<0.05),无效组明显下降(P<0.05),Enantone组用药前后无明显变化(P>0.05)。3组用药前脂联素水平相比较无显著性差异(P>0.05),用药后脂联素水平相比较差异有显著性(P<0.05)。结论脂联素在子宫肌瘤的增殖中起一定的直接或间接的促进作用。米非司酮可能通过调节脂联素水平抑制子宫肌瘤细胞的生长。     

米非司酮治疗子宫肌瘤的临床观察

目的:探讨米非司酮治疗子宫肌瘤的疗效。方法:对愿意接受米非司酮治疗的子宫肌瘤患者,每天口服米非司酮12.5mg,三个月为一疗程,接受复查。结果:口服米非司酮可引起闭经、改善贫血;停药后月经复潮,可使经量减少、经期缩短;子宫体积、最大肌瘤体积缩小;部分更年期妇女用药后进入绝经期。结论:米非司酮是治疗子宫肌瘤的有效药物。     

紫杉醇诱导卵巢癌细胞凋亡及细胞周期改变的研究

目的研究紫杉醇能否诱导卵巢癌HO-8910细胞凋亡,以及凋亡诱导与细胞周期改变的关系。方法紫杉醇不同浓度、不同作用时间分别处理HO-8910细胞,在光镜和电镜下观察紫杉醇作用后细胞形态变化,流式细胞仪分析细胞凋亡及细胞周期的改变。结果荧光染色及电镜观察到典型的凋亡细胞形态,流式细胞仪DNA含量分析,癌细胞在紫杉醇作用下,首先表现为G2/M期阻滞。但只有出现G2/M期明显阻滞后,经过一定时间才出现凋亡。结论紫杉醇能够诱导HO-8910细胞凋亡,紫杉醇诱导HO-8910细胞凋亡与细胞分裂期阻滞密切相关,这一作用机制将为临床治疗提供理论依据。     

氟铝单独及联合染毒对MC3T3-E1细胞增殖能力及细胞周期的影响

目的 观察不同浓度的氟、铝对体外培养的小鼠颅顶前成骨细胞亚克隆14(MC3T3-E subclone 14)增殖及细胞周期的影响,以进一步阐明地方性氟中毒机制提供实验依据.方法 以10~(-9)～10~(-3)mol/LNaF染毒MC3T3-E1细胞,同时以50μmoI/L NaF及5μmol/L AICl3单独或者联合染毒MC3T3-E1细胞,培养72 h.应用CCK-8(cell counting kit-8)观察MC3T3-E1细胞增殖能力的影响;采用流式细胞术检测MC3T3-E1细胞周期变化情况.结果 氟无显著促进MC3T3-E1细胞增殖的作用,较高浓度的氟(1 mmol/L)抑制MC3T3-E1细胞增殖(P<0.01).氟铝联合染毒显著刺激MC3T3-E1细胞增殖(P<0.01):G_2/M期细胞明显增多,增殖指数(PI)升高(P<0.05),DNA相对含量增高(P<0.05).结论 氟对MC3T3-E1细胞无显著促增殖作用,氟铝联合能显著提高MC3T3-E1的增殖能力,使G_2/M期细胞明显增多,促进成骨细胞的增殖分裂,细胞处于活跃生长状态.

Abstract：

Objective To explore the effects of different concentrations of fluoride, aluminum alone and in combination exposure on mice parietal bone cell subclone 14 (MC3T3-E subclone 14), and to elucidate the pathogenesis of endemic fluorosis. Methods The proliferation of MC3T3-E1 cells exposed to 10~(-9)-10~(-3)mol/L NaF alone, 50 μmol/L NaF and 5 (μmol/L AlCl_3 aloneand in combination ,was measured by CCK-8, and the change of cell cycle was measured by flow cytometry after treatment with various concentrations of fluoride and aluminum. Results Fluoride alone did not promote osteoblast MC3T3-E1 cells proliferation, higher concentration fluoride inhibited MC3T3-E1 cells proliferation. Fluoride and aluminum combined exposure (50 μmol/L NaF +5 μmol/L AlCl_3) stimulated proliferation of MC3T3-E1 cells (P<0.01 ).and significantly induced increase of G_2/M phase, PI (proliferation index) and DNA relative content. Conclusion Fluoride does not promote the MC3T3-cells proliferation, aluminium plus fluoride may increase MC3T3-E1 cells proliferation and affect the cell cycle, which can significantly increase the number of G_2/M phase cells.     

表皮生长因子在子宫肌瘤组织中表达和米非司酮的干预作用

目的探讨米非司酮对子宫肌瘤及子宫肌层组织表皮生长因子(EGF)、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的表达和对性激素的影响。方法11例临床诊断为子宫肌瘤并有手术指征、无肝肾等内科合并症患者自月经周期第2~3d始口服米非司酮12.5mg/d,连续服用90d,监测服药前后血常规、血清性激素水平、血皮质醇、肝功能的变化,应用B超监测子宫大小、最大子宫肌瘤的变化。停药后立即手术,并选同期手术的临床情况相似的子宫肌瘤患者11例为对照组,用ER、PR单克隆抗体、EGF单克隆抗体免疫组化学法检测子宫肌瘤及子宫平滑肌层组织中的ER、PR、EGF水平。结果服药后子宫体积平均缩小51.43%,最大肌瘤体积平均缩小28.62%,血红蛋白上升(P=0.017)。服药后血清性激素水平维持在卵泡期水平。对照组子宫肌瘤组织中ER、PR、EGF高于肌层组织(P=0.003,P=0.000,P=0.001),研究组子宫肌瘤组织中的PR高于肌层组织(P=0.040),研究组子宫肌瘤组织中ER、PR、EGF均明显低于对照组(P=0.031,P=0.040,P=0.021),研究组子宫肌层中PR、EGF低于对照组(P=0.041,P=0.003)。结论子宫肌瘤组织中EGF、ER及PR的表达均高于肌层。使用米非司酮可抑制性激素水平,子宫肌瘤、肌层的EGF表达下降、PR减少,肌瘤中ER减少,孕激素对EGF的上调作用受到抑制从而使肌瘤细胞生长受到抑制至肌瘤缩小。米非司酮用于治疗子宫肌瘤是安全有效的药物。     

丙烯腈对雄性小鼠的生殖毒性作用

目的探讨丙烯腈的雄性生殖毒作用机制。方法以雄性小鼠为研究对象,腹腔注射染毒,流式细胞仪检测分析不同观察终点、不同染毒剂量对小鼠睾丸组织各倍体细胞、各时相生精上皮细胞的影响。结果丙烯腈影响次级精母细胞、精子细胞和精子的形成,主要作用于生精上皮细胞的有丝分裂期;丙烯腈诱导雄性小鼠生精细胞凋亡,随着染毒剂量的增加和时间的延长,凋亡发生率增高,第21天的各染毒组细胞凋亡最明显(P<0.05)。结论丙烯腈具有明显的雄性生殖毒性,干扰精子形成。     

2-甲氧雌二醇诱导人子宫内膜癌细胞株凋亡的实验研究

目的:探讨2-甲氧雌二醇(2-ME)对人子宫内膜癌细胞株KLE细胞凋亡的影响。方法:选用人子宫内膜癌细胞株KLE进行体外培养,实验组加入不同浓度2-ME,对照组不含2-ME。用电子显微镜(电镜)观察细胞形态变化;流式细胞仪(FCM)观察细胞的凋亡率及细胞周期的变化,以及免疫组织化学方法检测P53和Bcl-2的表达强度。结果:2-ME作用后G0/G1期细胞增加,并伴随G0/G1期细胞的增加,出现细胞凋亡峰和凋亡率的升高(P<0.05)。电镜下观察到KLE细胞染色体边集、核固缩、凋亡小体,P53和bc1-2阳性表达率明显下降。结论:2-ME对人子宫内膜癌KLE细胞株有诱导凋亡作用。     

小剂量米非司酮治疗子宫肌瘤的疗效观察

目的：探讨小剂量米非司酮治疗子宫肌瘤的临床疗效。方法：68例子宫肌瘤患者口服米非司酮治疗，12．5mg，1次／d，睡前服用，连服3月。结果：68例子宫肌瘤患者均闭经，贫血症状纠正，血红蛋白指标出现上升，在围绝经期的患者可致绝经，肌瘤体积缩小。结论：小剂量米非司酮在子宫肌瘤的治疗中起到了一定的效果，治疗后的不良反应小，可以作为子宫肌瘤的一种保守治疗方法。     

米非司酮对子宫内膜癌细胞增殖抑制的研究

目的:探讨孕激素拮抗剂米非司酮对患者子宫内膜癌细胞凋亡、周期及孕激素受体(PR)亚型的影响。方法:患者在米非司酮治疗前及治疗后分别留取标本60例,用流式细胞仪检测组织细胞凋亡率和周期时相的变化,用实时定量PCR检测PR-A mRNA和PR-B mRNA的表达情况。结果:患者经过米非司酮治疗后,癌细胞凋亡率和G0/G1比率升高,S期比率下降,RR-B mRNA表达显著下降,PR-B与PR-A的比例明显降低。结论:米非司酮下调PR-B的表达,使癌细胞阻滞于G1期,促进癌细胞凋亡,抑制子宫内膜癌肿瘤细胞的生长。