狂犬病病毒中和抗体检测试剂盒的效果评价

目的应用快速荧光灶抑制试验(RFFIT)对狂犬病病毒中和抗体检测试剂盒的检测效果进行评价。方法用RFFIT和狂犬病病毒中和抗体检测试剂盒分别对135份人血清和164份动物血清进行狂犬病病毒中和抗体(RVNA)效价检测,应用SPSS22.0分析两种检测方法所得结果的相关性和一致性。结果两种方法所得结果的阳性检出符合率为99.33%(297/299);两种方法对动物血清和人血清的检测结果之间有较好的直线相关关系,相关系数分别为0.897和0.941;同一份标本的重复性检验显示,试剂盒检测方法具有较好的稳定性。结论狂犬病病毒中和抗体检测试剂盒可以用于人和动物血清狂犬病病毒中和抗体的检测。     

采用快速荧光灶抑制试验对一种狂犬病病毒抗体竞争性ELISA检测法的评价

目的以快速荧光灶抑制试验(RFFIT)检测结果为标准,确定竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)检测人血清样品中狂犬病病毒抗体的能效。方法对100份人血清样品采用RFFIT检测狂犬病病毒中和抗体,采用竞争性ELISA检测狂犬病病毒抗体,分析两种方法检测结果的相关性和一致性。结果经回归分析,两方法检测结果之间有线性关系,回归方程Y=2.320+0.333X,相关系数r=0.504;经χ2检验,两种方法阳性检出率差异无统计学意义(χ2=3.70,P>0.05),两种方法有相关性(χ2=16.50,P<0.05);经Scheff啨可信区间法分析,RFFIT不同检测值范围内ELISA阳性检出率之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论本组评价的竞争性ELISA与RFFIT检测结果之间有相关性,但一致性较差,还需要进一步改进。     

新型抗狂犬病病毒核蛋白抗体进行RFFIT检测效果评估

目的评价自主研发的荧光标记抗狂犬病病毒核蛋白单克隆抗体用于快速荧光灶抑制试验(RFFIT)的效果。方法将狂犬病病毒核蛋白的一段线性表位肽与KLH耦联后免疫Balb/c小鼠制备的高效价单克隆抗体抗-RVNP-Mcl,经浓缩、纯化、异硫氰酸荧光素(FITC)标记用于RFFIT检测,以Millipore公司DFA5100为对照试剂,对200例人血清进行平行RFFIT检测,将结果进行统计学分析。结果两种抗体检测结果的线性相关分析显示相关系数(r)=0.980;两种抗体检测定性结果一致率为96.83%,卡方检验显示两种抗体检测定性结果差异无统计学意义(χ2=0.098,P>0.05),发生定性结果不一致的6例(3.00%)血清两种抗体检测结果均小于1 IU/mL;68例两种抗体检测结果均小于或等于1 IU/mL的血清样品中有6例(8.82%)发生结果定性不一致,其余样品均未发生不一致的情况。结论使用荧光标记抗-RVNP-Mcl与DFA5100进行RFFIT检测时结果高度一致,荧光标记抗-RVNP-Mc1可供RFFIT检测使用。     

狂犬病毒核蛋白单抗和荧光抗体中和试验的建立与应用

目的建立狂犬病毒血清中和抗体效价的快速检测方法，以实现狂犬疫苗免疫效果的定量评价，指导高危人群及动物种群的免疫预防。方法采用常规方法建立杂交瘤细胞株并制备抗狂犬病毒核蛋白单抗，以亲和层析法进行纯化，异硫氰酸荧光黄标记制备荧光抗体；以BHK-21细胞系培养狂犬病毒细胞适应株CVS-11，以染毒细胞测定荧光抗体的工作浓度后，通过荧光抗体染色法测定CVS-11细胞半数感染量（TCID50）；利用狂犬病毒灭活疫苗免疫犬制备抗狂犬病毒血清，并以国际兽疫局标准品进行标定；参考世界卫生组织及国际兽疫局推荐方法，确定中和试验程序，对51份样品血清进行测定，并与国际狂犬病参考实验室的检测结果进行比较，评价其精确及可靠程度。以Kaber法公式和Microsoft Excel软件为基础，设计被测样品中和效价计算方法。结果制备的抗狂犬病毒核蛋白单抗的亚型为IgG2a；纯化、标记后的荧光抗体工作浓度为1：400；CVS-11株的使用量为每孔100 TCID50；本研究建立的检测程序对51份人及犬血清测得的中和效价结果与国际参考实验室的测定结果一致；自行设计的计算方法操作简便，计算快捷。结论成功建立了与国际标准相当的狂犬病毒中和抗体效价测定和计算方法。     

人狂犬病毒IgG抗体定量测定试剂盒(酶联免疫法)的评价

目前,被国际兽疫局（OIE）和世界卫生组织（WHO）狂犬病专家委员会认可的检测狂犬病病毒血清／血浆抗体的方法有小鼠中和试验（MNT）、快速荧光灶抑制试验（RFFIT）、荧光抗体病毒中和（FAVN）试验口,但均存在耗时长、操作繁琐、需要昂贵荧光显微镜以及专业人员培训等缺点,只能在有条件的实验室进行。而抗狂犬病毒抗体的ELISA测定方法因其特异、     

改良抗体结合试验的建立和在灭活狂犬病疫苗效价检测中的应用

目的对抗体结合试验(ABT)进行改进并将其用于灭活狂犬病疫苗效力的测定。方法将快速荧光灶抑制试验(RFFIT)与ABT方案融合,在疫苗样品稀释、剩余中和抗体检测、结果计算方面进行改进,形成改良抗体结合试验(M-ABT);应用M-ABT对10种灭活狂犬病疫苗随库存时间增加疫苗效力改变的情况进行检测。结果 M-ABT可以在28 h内完成,比ABT节省2 d,检测结果与人用狂犬病疫苗效价测定法(NIH)基本等效;10种疫苗随着库存时间增加疫苗效力下降。结论 M-ABT法能够成功建立,并用于灭活狂犬病疫苗效力检测效果较满意。     

双重平行检测批量样品对两个实验室RFFIT检测效能的评价

快速荧光灶抑制试验(RFFIT)是世界卫生组织(World Health Organisation,WHO)推荐的狂犬病病毒中和抗体检测标准方法之一,国内进行RFFIT检测的不同实验室之间互评可促进该方法推广时的标准化。病毒病预防控制所和中国药品生物制品检定所对200例人血清进行了双重平行RFFIT检测。结果显示双方检测中和抗体效价几何均值(genomic means titration,GMT)为1.89、1.84I U/mL,差别无统计学意义(t=-0.94,P>0.05);血清中和抗体阳性率为95.00%、93.00%,差别无统计学意义(χ2=0.71,P>0.05);双方结果定性一致率为89.00%,发生结果定性不一致的22例(11.00%)血清双方检测结果均<1I U/mL;67例双方检测结果均<1I U/mL的血清样品中有22例(32.84%)发生结果定性不一致。     

BHK-21和BSR细胞用于RFFIT检测的一致性研究

目的 比较BSR和BHK-21两种细胞分别引入快速荧光灶抑制试验(RFFIT)检测体系后其检测结果的差异.方法 将BSR、BHK-21两种细胞分别引入RFFIT体系后,检测106份人血清样品中狂犬病毒中和抗体,并分析结果的相关性和一致性.结果 两种方法结果之间有较好的直线相关关系(r=0.859),并有正向回归关系,直...     

狂犬病疫苗接种者抗狂犬病病毒中和抗体影响因素分析

目的探讨狂犬病疫苗接种后体内抗狂犬病病毒中和抗体产生的影响因素。方法采集2018年1-8月山东、江苏、河南、河北、湖南和安徽6省疑似狂犬病Ⅱ/Ⅲ级暴露后接种狂犬病疫苗的暴露者血清标本,快速荧光灶抑制实验(RFFIT)检测抗狂犬病病毒中和抗体(RVNA)水平,采用SPSS 19.0软件进行数据统计分析。结果全程接种狂犬病疫苗的血清样本为498份,RFFIT检测结果显示,RVNA几何平均滴度(GMT)为4.94 IU/ml,血清阳性率为96.18%(479/498)。不同组别抗体阳性率分析结果显示,免疫时间各组阳性率之间差异有统计学意义(χ^2=7.888,P=0.039),30~90 d组抗体阳性率高于91~180 d组,其他各组比较差异均无统计学意义。多因素分析结果显示年龄、免疫时间是RVNA水平的重要影响因素,其中年龄与RVNA水平呈正相关,免疫时间与RVNA水平呈负相关。免疫时间对RVNA水平的影响最大,影响重要性为0.62。结论接种狂犬病疫苗后能产生可靠的免疫效果,年龄、免疫时间等因素对抗体阳性率及RVNA水平有一定影响。暴露后在及时进行规范完整的暴露后处置外,应对经常暴露于狂犬病的高危人群、免疫力低下者或患有免疫抑制性疾病的人群定期检测血清抗体,对于RVNA滴度小于0.5 IU/ml的接种者应及时进行加强免疫,补接种疫苗,从而有效预防狂犬病。     

高胆血症新生儿溶血症血清学检测结果及相关因素的分析

目的：分析高胆红素血症患儿新生儿溶血病（hemolytic disease of newborn,HDN）血清学检测结果并探讨与其相关因素之间的关系。方法对796例高胆红素血症患儿的血样进行新生儿溶血三项试验,并分析 HDN 阳性率与血型、送检日龄、血红蛋白水平及血清总胆红素值等因素的关系。结果796例高胆红素血症患儿中 HDN 患儿184例（23.12％）,其中 ABO-HDN 176例,Rh-HDN 8例。796例患儿血样检测结果中游离试验阳性180例（22.61％）,释放试验阳性184例（23.12％）,直抗试验阳性140例（17.59％）。B 型血患儿 HDN 阳性率高于 A 型血患儿,差异有统计学意义（χ2＝10.30,P ＜0.05）。HDN 阳性率与送检日龄密切相关,且日龄越大阳性检出率越低,差异有统计学意义（P ＜0.05）。184例 HDN 阳性患儿血红蛋白水平及血清总胆红素值与 HDN 患儿差异有统计学意义（P ＜0.05）。结论高胆红素血症患儿 HDN 阳性率较高,应尽早进行溶血三项试验,并可结合血红蛋白水平及血清总胆红素值来提高 HDN 检出率。     

凝聚胺法与微柱凝聚法检测不规则抗体的对比分析

目的探讨凝聚胺法与微柱凝聚法在不规则抗体筛选中的价值对比。方法对2010～2011年江门市新会区人民医院6 720例预约输血患者,用凝聚胺法与微柱凝聚法分别进行不规则抗体筛查,阳性结果再用谱细胞通过抗人球蛋白方法进行特异性检测。结果用微柱凝聚法筛查出不规则抗体阳性28例,阳性率为0.42%,而凝聚胺检测阳性26例,阳性率仅为0.39%,两种方法比较差异无统计学意义（P〉0.05）。其中Rh系统占总不规则抗体比例为57.1%,分别为抗-D 5例,抗-E 7例,抗-C 2例,抗-Ec 2例。结论凝聚胺法与微柱凝聚法都适用于临床筛查不规则抗体,微柱凝聚法比凝聚胺法更有利于大规模自动化筛查,对于有条件的大医院更适合临床输血前的应用和相关疾病的诊断,而凝聚胺法在基层或者临床急诊上也可合理开展。     

某院新生儿溶血病血清学检测结果分析

目的 通过对该院新生儿溶血病(HDN)血型血清学检测结果的分析,掌握溶血三项试验(直接抗球蛋白试验、抗体释放试验、游离抗体试验)的检测时间和意义.方法 对临床表现符合HDN的338例新生儿进行血型血清学检测,分析新生儿出生日龄对三项试验检出阳性率的影响以及实验诊断与临床表现的符合率.结果 溶血三项试验阳性率随新生儿出生日龄的增加而降低,338例新生儿中,出生日龄小于或等于2 d者比大于2 d者三项试验的阳性率显著升高,差异有统计学意义(P<0.01),血清学检测HDN与临床表现的符合率为55.3%.结论母婴血型不合的新生儿应在出生2 d内进行血清学检测,出生日龄大于2 d后,免疫性血型抗体可被破坏使检测结果阴性,从而易造成临床误诊.     

Underutilization of diagnostic assays for celiac disease in Korea

BackgroundTest utilization for the diagnosis of celiac disease may affect the prevalence and incidence of the disease in Korea. We aimed to investigate the test utilization of serological biomarkers for celiac disease in Korea.MethodsWe retrospectively investigated the test utilization of tissue transglutaminase IgA, gliadin IgA and IgG, and endomysial IgA antibody (Ab) assays between January 2011 and June 2020.ResultsDuring a nine‐year‐and‐six‐month study period, overall 307,322,606 clinical tests were requested from different clinical settings, such as local clinics, hospitals, university hospitals, and tertiary medical centers. Among them, only 58 tissue transglutaminase IgA, 22 gliadin IgA, 12 gliadin IgG, and 16 endomysial IgA Ab tests were performed on 79 Korean patients. Among them, one patient had positive transglutaminase IgA Ab result (1.3%).ConclusionLow prevalence and incidence of celiac disease in Korea may be due to an underutilization of diagnostic assays.     

微柱凝胶技术在新生儿溶血病检测中的应用

目的探讨微柱凝胶免疫技术在新生儿溶血病(HDN)筛查中的应用价值。方法采用微柱凝胶技术对本院临床疑似HDN 212例患儿血液标本做直接抗人球蛋白试验、游离试验、放散试验。结果疑似HDN患儿血液样本212例,确诊为HDN 50例(23.6%),其中ABO-HDN 45例(21.2%)、Rh-HDN 5例(2.4%)。45例ABO-HDN的患儿中,A型23例,阳性率为36.5%(23/63);B型22例,阳性率为28.2%(22/78)。3项试验的检出敏感性:50例HDN确诊患儿中放散试验阳性率为100%,DTA阳性率为28%,游离试验阳性率为92%。结论微柱凝胶法能快速准确检测出HDN,具有操作简便、标本用量少、方法学敏感性高、特异性强,可为HDN提供可靠诊断依据,适用于临床推广应用。     

艾滋病筛查检测结果分析

目的 探讨艾滋病初筛实验与确认实验之间的关系,为提高艾滋病检测技术提供依据。方法 本实验室2000～2004年人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体初筛阳性标本的初筛实验和确认实验结果进行分析。结果 初筛实验一阴一阳标本确认实验阳性率0％,双阳标本确认阳性率44．7％,两种试荆初筛实验标本光密度／临界值（S/GO）≥6的标本确认阳性率为90.9％。结论两种试剂初筛S／CO≥6标本,虽可上报疫情,但应尽快送确认实验室做确认实验。     

2004-2005年十堰市冬春季流感监测实验室结果分析

目的分析2004～2005年十堰市冬春季流感监测实验室结果,探索十堰市流感活动规律,制定有效的防制方案。方法收集2004年8￣9月份十堰市健康人群血清,检测流感抗体水平;每周至监测点医院采集流感样患者鼻咽拭子标本5￣10份,以MDCK细胞进行流感病毒分离。结果健康人群流感病毒抗体水平,A3(H3N2)型阳性率最高,达92.00%(GMT为76.74),A1(H1N1)型较低,为35.00%(GMT为11.10),B型最低,仅18.00%(GMT为6.64);病原学监测:冬春季以B型为优势流行株,也分离到3株A3(H3N2)亚型毒株。结论十堰市人群中A3型流感抗体水平较高,但B型和A1型流感抗体水平很低,特别是人群中B型流感病毒分离率较高,应加强防范。     

自身抗体阳性伴直接抗人球蛋白试验阳性患者血型血清学特征及输血疗效

目的探讨自身抗体和直接抗人蛋白试验(DAT)阳性患者的血型血清学特征及配血的处理方法,寻求安全、有效的输血对策。方法结合吸收放散方法采用不同厂家、批号的抗筛细胞和谱细胞对待检血清和红细胞放散液进行自身抗体和同种抗体特异性的鉴别;选取合适的献血者进行主次侧交叉配血试验;分析自身抗体、同种抗体的特异性及其与ABO血型、疾病、贫血的关联和对输血及输血疗效的影响。结果 139例研究对象均为自身抗体阳性伴DAT阳性且交叉配血试验主次侧均不合,其中20例只含有自身抗体,59例伴Rh系统或MNs系统或Kidd系统抗体,47例为自身抗体不能排除同种抗体,13例伴有药物抗体或其他系统抗体;共进行221次输血治疗,未发生溶血性输血反应。自身抗体和DAT的凝集强度与贫血呈正相关(P0.05),与输血疗效呈负相关(P0.05);自身抗体的强度与自身红细胞被致敏的程度呈正相关(P0.05),且多为免疫性疾病,与ABO血型无明显相关性(P0.05)。结论对于自身抗体伴DAT阳性的病例,其贫血的严重程度、输血次数、输血后疗效与自身抗体和DAT的凝集强度有关,交叉配血前必须采用合理的流程和方法判定是否伴有同种抗体,选取相应抗原阴性的献血者或该地区出现较高频率的同种抗体对应的抗原系统同型的献血者配血,可提高安全输血效率,最大限度地减少输血不良反应发生。     

O型人血清中交叉反应性抗体的初步研究

对Ｏ型人血清中ＩｇＭ和ＩｇＧ交叉反应性抗体的性质作了初步研究。实验证明：Ｏ型人血清经Ａ型细胞和Ｂ型细胞吸收后，血清中除抗Ａ和抗Ｂ被完全吸收外，抗Ｂ和抗Ａ效价也下降１～２个稀释度。Ｏ型人血清中除有抗Ａ和抗Ｂ外，还有一种不可分离的抗Ａ，Ｂ。交叉反应性ＩｇＭ抗Ａ，Ｂ的凝集强度一般效价在２～８。Ｏ型血清经２－ｍｅ处理后，ＩｇＧ抗Ａ，抗Ｂ效价在６４～２５６之间，经Ａ型细胞和Ｂ型细胞吸收后，吸收液中抗Ｂ和抗Ａ效价也分别下降。证明交叉反应性抗Ａ，ＢＩｇＭ及ＩｇＧ二种免疫球蛋白都有，但ＩｇＧ抗Ａ，Ｂ的放散能力比ＩｇＭ抗Ａ，Ｂ明显减低，其机制尚待进一步研究。还证明交叉反应性抗Ａ，Ｂ都能被血型物质中和。     

间接荧光抗体试验诊断肠螨病初探

目的探讨间接荧光抗体试验在肠螨病诊断中的应用价值。方法采集48例肠螨病患者血清，以粉尘螨(成螨)体组织切片为抗原，建立间接荧光抗体试验检测血清螨特异性抗体IgG。结果肠螨病患者血清抗体反应滴度为1：4～1：512，若以抗体滴度≥1：16为阳性，阳性检出率达91．67％(44／48)。结论问接荧光抗体试验诊断肠螨病具有一定的灵敏性，以血清抗体滴度≥1：16为阳性标准较合适。