辣椒素对P-糖蛋白和细胞旁途经转运透过的作用

目的：通过研究P-糖蛋白（P-gp）底物罗丹明123（R123）在空肠、回肠和结肠转运时辣椒素的作用,探究辣椒素对肠粘膜上P-gp功能的影响。方法使用体外扩散池法技术,分别取SD雄性大鼠的空肠、回肠和结肠肠段标本,计算各肠段中吸收方向（mucosa to serosa, M-S）和分泌方向（serosa to mucosa, S-M）R123的表观渗透速率（Papp）。用荧光分光光度计测定R123和荧光素钠（CF）在接收室中的浓度。结果在辣椒素作用下,R123经空肠粘膜透过时,吸收方向与空白组相比显著增高,分泌方向显著降低,但其在回肠及结肠M-S组及S-M组表观渗透系数Papp与空白组相比均没有显著性差异。CF经空肠粘膜透过时,M-S组及S-M组Papp与空白组相比均显著增高;经回肠和结肠粘膜透过与空白组相比没有显著性差异。结论辣椒素影响P-gp底物R123和细胞旁转运药物CF经肠粘膜透过的作用具有肠段差异性,对R123和CF的影响仅存在于空肠,表明辣椒素是一种较弱的P-gp抑制剂和粘膜通道改善剂。可能与P-gp和紧密连接在肠粘膜上的逐渐变化的分布有关。     

加味四逆散对慢性身心应激模型大鼠胃粘膜超微结构及脑肠轴的影响

目的建立大鼠慢性身心应激模型,探讨加味四逆散对模型大鼠胃粘膜超微结构、血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）和
皮质醇(CORT)含量、胃组织胃泌素受体（GASR）、空肠组织血管活性肠肽Ⅱ型受体（VIPR2）mRNA表达的影响,阐明加味四
逆散干预应激性胃肠功能障碍的机制。方法大鼠随机分为正常组,模型组,加味四逆散大、中、小剂量组,奥美拉唑组,采
用慢性身心应激方法建立大鼠应激模型,经加味四逆散等干预后透射电镜法观察腺胃区胃粘膜组织细胞及细胞间连接的超
微结构改变,放免法测定血浆ACTH和血清CORT的变化,并用RT-PCR 法检测胃组织GASR、空肠组织VIPR2 mRNA表达
变化。结果电镜观察显示正常组大鼠胃粘膜上皮细胞形态及大小正常;模型组大鼠胃粘膜上皮细胞细胞器及胞核受损严
重;其余治疗组均较模型组不同程度好转。与模型组比较,加味四逆散方各给药组、奥美拉唑组大鼠血中ACTH和CORT含
量不同程度降低;而胃组织GASR mRNA表达均升高,空肠组织VIPR2 mRNA表达则降低,差异有统计学意义（P<0.05 或
P<0.01）。结论加味四逆散可显著改善慢性身心应激模型大鼠胃粘膜组织细胞的微观病理形态,调节脑肠轴状态并可改善
胃组织GASR、空肠组织VIPR2 mRNA表达。
     

参附方提取物经不同肠黏膜透过特性的研究

目的 研究参附方提取液经不同肠黏膜的透过特性,探索其口服吸收机制.方法 采用Franz扩散池法和家兔肠黏膜进行参附提取液体外渗透实验,以方中有效成分人参皂苷和人参附子总多糖含量为指标,评价参附提取液经不同肠黏膜的透过率.结果 制备的参附提取液中,有效成分人参皂苷经空肠和回肠的稳态渗透速率分别为6.054 5、5.299 5 mg/(cm2/h);而另一种有效成分总多糖经空肠和回肠的稳态渗透速率分别为3.653 7、3.230 3 mg/(cm2/h).结论 参附方提取液经肠黏膜的透过性存在区段差异,经空肠的透过性高于回肠,并且人参皂苷在空肠和回肠稳态渗透速率明显高于人参附子总多糖.     

中药枳壳提取物对大鼠不同肠段平滑肌运动功能的影响

【目的】观察枳壳提取物对大鼠十二指肠、空肠、回肠及结肠不同肠段平滑肌收缩功能的影响。【方法】采用离体肠平滑肌实验方法,利用BL-410生物机能分析仪记录给药前后大鼠各肠段平滑肌的收缩幅度和频率,探讨不同浓度枳壳提取物对各肠段收缩的影响。【结果】随着枳壳提取物浓度的不断增加,对正常大鼠十二指肠、空肠、回肠及结肠平滑肌的自发性收缩表现出显著的抑制作用,并能够拮抗乙酰胆碱所致的平滑肌收缩功能的亢进,使阿托品所致平滑肌的舒张作用进一步增强。而枳壳提取物对十二指肠、空肠、回肠及结肠4个肠段平滑肌的舒张作用的强度不同,其中对回肠的作用最强。【结论】枳壳提取物对大鼠离体肠平滑肌的舒张作用强弱表现为回肠>空肠>结肠>十二指肠。     

复方抗肝纤维化处方的优化

摘要：目的优化处方,以期得到疗效确切,低毒的抗肝纤维化复方。方法运用硫代乙酰胺诱导大鼠肝纤维化模型,采用均匀设
计法（二因素五水平）分组实验,并设有正常组,模型组,以大鼠肝组织羟脯氨酸含量作为检测指标,经均匀设计软件3.0处理分析
得最佳处方;运用相同方法诱导大鼠肝纤维化模型,设正常组,模型组,秋水仙碱组,最佳处方组,通过观察肝组织羟脯氨酸含
量,大鼠血清HA,ALT,AST,ALB含量以及肝组织纤维化变化,对于最佳处方的疗效进行比较和验证实验。结果经实验筛选
的最佳处方为甘草甜素70 mg/kg,苦参碱70 mg/kg;验证实验中,最佳处方组抗肝纤维化作用显著（P<0.05）,与秋水仙碱组无显
著性差异（P>0.05）。结论均匀设计在处方优化中作用显著,明显减少实验次数,结果可靠;苦参碱与甘草甜素合用抗肝纤维化
作用明显。
     

低浓度聚氧乙烯蓖麻油对p-gp底物罗丹明123经肠黏膜透过性的影响

目的观察低浓度聚氧乙烯蓖麻油对肠黏膜p-gp的调控作用。方法使用体外扩散池法评价罗丹明123（R123）经空肠、回肠和结肠黏膜的经时经吸收方向和分泌方向的透过量和透过系数（Papp）,并测定不同浓度表面活性剂对R123和荧光素钠（CF）经肠黏膜透过性的影响。R123和CF在接受室中的浓度用荧光分光光度法测定。结果R123经肠道黏膜的透过性存在部位差,空肠、回肠和结肠的次序透过性依次减少;R123经肠道分泌方向的透过性显著高于其吸收方向的透过性。低浓度的聚氧乙烯蓖麻油具有增加R123经吸收方向的透过性,减少经分泌方向的透过性。但试验浓度的表面活性剂对CF的肠道转运没有影响。结论低浓度的聚氧乙烯蓖麻油可通过对p-gp功能的抑制而用于改善受p-gp介导药物的吸收,有望提高此类药物的口服生物利用度。     

紫杉醇-两亲性壳聚糖胶束大鼠药代动力学和在体肠吸收

以紫杉醇(paclitaxel,PTX)注射剂Taxol为对照,通过大鼠药代动力学及在体肠吸收实验考察N-辛基-O,N-羧甲基壳聚糖(OCC)胶束作为PTX口服给药系统的可行性。结果表明,与Taxol相比,PTX-OCC胶束经口给药在大鼠体内的cmax、AUC均显著提高(P<0.05),相对生物利用度为331.4%;PTX-OCC胶束在各个肠段吸收均显著高于Taxol(P<0.05),且十二指肠吸收略优于其他肠段,结肠、空肠和回肠吸收相近,说明OCC胶束具有显著的促吸收效果,作为难溶性药物口服递送载体具有优良的应用前景。     

高频超声在大鼠胶原诱导性关节炎模型中的应用

目的建立稳定的大鼠胶原诱导关节炎（CIA）模型,尝试应用高频超声在体观察CIA大鼠关节病变,评价超声在RA小动
物实验研究中的应用价值。方法60只Wistar大鼠分为模型组（50只）和空白组（10只）,模型组采用牛Ⅱ型胶原与完全弗氏佐
剂在尾部皮内注射,14 d后同样方法加强免疫。空白组同期给予生理盐水注射。定期观察两组小鼠的关节和关节外表现。第
45天对所有实验大鼠进行踝关节评分（AI）及高频超声检查;处死大鼠,对60只大鼠共120个踝关节进行病理检查,与AI及超声
结果进行对比。结果对照组均未发病。模型组50只大鼠共100个踝关节经病理证实62个发生滑膜炎,病理切片显示典型的炎
性细胞浸润,滑膜增生,软骨及软骨下骨破坏,部分伴血管翳形成。使用AI诊断其中42个,检出率为67.8%;高频超声诊断54
个,检出率77.4%,二者具有显著性差异（P<0.05）。结论高频超声成功显示CIA大鼠踝关节类风湿病变。高频超声无创性反映关
节病变可以作为类风湿性关节炎小动物模型研究的理想影像学     

辣椒素经大鼠肠黏膜的区段透过特性

目的研究辣椒素经大鼠空肠、回肠和结肠黏膜的区段透过特性。方法应用体外Ussing Chamber法,评价100μg.mL^-1辣椒素经空肠、回肠和结肠黏膜的经时吸收方向的累计透过量,并计算表观渗透系数,辣椒素在接收池中的浓度用HPLC法测定。结果辣椒素经结肠和回肠的透过性显著高于空肠,在结肠的透过性也显著高于回肠。结论辣椒素在大鼠肠黏膜中的透过性存在区段性差异,在空肠部位吸收最差,结肠部位吸收最好,可考虑将其制成结肠定位肠溶片。     

吐温-80对p-糖蛋白底物罗丹明123经肠粘膜透过性的影响

目的 观察低浓度吐温-80对肠粘膜P-gp的调控作用.方法 使用体外扩散池评价罗丹明123(R123)经空肠,回肠和结肠粘膜的经时吸收方向和分泌方向的透过量和透过系数,并测定不同浓度吐温-80对R123和荧光素钠经肠粘膜透过性的影响.R123和荧光素钠在接受室中的浓度用荧光分光光度法测定.结果 R123经肠道粘膜的透过性存在部位差.即以空肠、回肠和结肠的次序透过性依次减少.另一方面,R123经肠道分泌方向的透过性显著地高于其吸收方向的透过性.低浓度的吐温-80具有增加R123经吸收方向的透过性.但实验浓度的吐温-80对荧光素钠的肠道转运没有影响.结论 低浓度的吐温-80可通过对P-gp功能的抑制而用于改善受P-gp介导药物的吸收,有望提高此类药物的口服生物利用度.     

体外垂直型扩散池技术评价原花青素对大鼠不同区段肠黏膜药物透过特性的影响

目的 评价原花青素对P-糖蛋白(P-gp)底物罗丹明123(R123)和荧光素钠(FS)在大鼠不同区段肠黏膜透过特性的影响.方法 采用体外垂直型扩散池(Ussing Chamber)技术,分别计算原花青素20 mg/L时R123和FS经空肠、回肠和结肠黏膜吸收与分泌方向的累计透过率和表观渗透系数(Papp),R123和FS在接收池的样品浓度用荧光分光光度计法测定.结果 原花青素具有增加R123经空肠、回肠与结肠吸收方向透过性的趋势,同时具有降低R123经空肠、回肠与结肠分泌方向透过性的趋势,与正常对照组相比,原花青素使结肠R123分泌方向透过性明显降低(P<0.01).结论 原花青素具有抑制R123经肠黏膜外排的作用,该作用可能与原花青素抑制肠黏膜上皮P-gp功能有关.     

龙胆外洗液质量控制的方法研究

目的：建立龙胆外洗液的质量控制方法。方法：采用薄层色谱法对龙胆洗液中百部、苦参、当归进行定性鉴别;并应用高效液相色谱法对龙胆外洗液中主药黄芩中含的黄芩苷进行含量测定。结果：薄层色谱法能准确鉴定出制剂中百部、苦参、当归;黄芩苷在4.0ug/mL～40.0μg/mL范围内线性关系良好（r=0.9997）,平均回收率为100.30%,RSD=1.44%（n=5）。结论：所建立的方法可准确地进行定性、定量检测,可作为龙胆洗液的质量控制标准。     

复方丹参对门脉高压症大鼠血流动力学的影响

目的：探讨复方丹参对门脉血流动力学的影响。方法：用四氯化碳（CCl₄）复合致病因子复制60只Wistar大鼠肝硬化模型,将其中56只成功制模大鼠随机均分为4组：复方丹参3、10及15 d组以及对照组,分别给予复方丹参（5 mL·kg^-1·d^-1）3、10及15 d和同剂量生理盐水15 d。分别于给药结束后检测门静脉血流量、肠系膜上动脉血流量、门静脉压力、腹主动脉压。结果：与生理盐水对照组比较,复方丹参3、10及15 d组的门静脉压力、门静脉血流量、肠系膜上动脉血流量、腹主动脉压力均呈梯度性降低（P<0.05）,复方丹参15d组较3 d组和10 d组上述指标下降明显（P<0.05）,复方丹参3 d和10 d组,血流动力学指标变化差异无显著性（P>0.05）。结论：复方丹参能降低血流量和门静脉压力,并且延长丹参用药时间则更有效地降低血流量和门静脉压力。     

茯苓酸在人源肠Caco-2细胞单层模型的吸收和转运

目的：研究中药茯苓中茯苓酸（pachymic acid，PA）在人肠的吸收和转运。 方法：人源肠Caco－2细胞单层作为药物的肠吸收转运模型，测定PA从绒毛面（AP）到基底面（BL）的渗透性；反相高效液相色谱法测定PA在AP和BL的浓度，紫外检测波长为210nm；计算转运参数和表观渗透系数（Papp），并与在Caco-2细胞单层模型呈良好吸收转运的阳性对照药普萘洛尔和不良吸收转运的阳性对照药阿替洛尔进行比较。 结果：PA由AP到BL方向的Papp值为（9．50±2．20）×10^-7cm／s，由BL到AP方向的Papp值为（11．30±5．90）×10^-7cm／s。在本项研究条件下，普萘洛尔和阿替洛尔的Papp值分别为1．45×10^-5cm／s和4．22×10^-7cm／s。 结论：PA在Caco-2细胞单层馍型的吸收转运呈浓度依赖性，与转运时间呈线性关系；由AP到BL和BL到AP两个方向的转运不良，其Papp值与阿替洛尔的接近；除被动扩散机制外，ATP部分地参与了PA的转运。     

Studies on Absorption and Tansport of Limoninoids from Fructus Evodiae in Caco-2 Cell Monolayer Model

Objective To study the intestinal absorption and transepithelial transport of three limoninoids: evodol (EVO), limonin (LIM), and shihulimonin A (SHIA), isolated from Fructus Evodiae [the unripe fruit of Evodia rutaecarpa and Evodia rutaecarpa var. bodinieri] in the human intestine. Methods The in vitro cultured human colon carcinoma cell line, Caco-2 cell monolayer model, was applied to studying the absorption and transepithelial transport of the three limoninoids from apical (AP) to basolateral (BL) side and from BL to AP side. The three limoninoids were measured by reversed-phase high performance liquid chromatography coupled with ultraviolet absorption detector. Transport parameters and apparent permeability coefficients (Papp) were then calculated and compared with those of Propranolol as a control substance of high permeability and Atenolol as a control substance of poor permeability. Results The Papp value of EVO and LIM from AP to BL side for absorption and transport were 1.78 × 10-5 cm/s and 1.16 × 10-5 cm/s, respectively, which was comparable to that of Propranolol with Papp 2.18 × 10-5 cm/s. Conclusion The absorption and transport of both EVO and LIM are main passive diffusion as the dominating process in Caco-2 cell monolayer model, and they were estimated to be high absorbed compounds. SHIA in Caco-2 cell monolayer model may be involved in metabolism in the transport processes.     

茵陈中6,7-二甲氧基香豆素在MDCK模型中的吸收机制研究

目的：基于马丁达比犬的肾近曲小管上皮( MDCK)细胞模型研究茵陈中6,7-二甲氧基香豆素的吸收机制。方法考察时间、药物浓度(12.5、25、50、100、200μmol/L)、温度(4、37℃)和抑制剂(碘乙酰胺、维拉帕米、MK571)对6,7-二甲氧基香豆素吸收和转运的影响。采用高效液相色谱法(HPLC)检测6,7-二甲氧基香豆素的浓度,计算出表观渗透系数(Papp),并分析其吸收机制。结果根据Papp得出6,7-二甲氧基香豆素在MDCK细胞模型上的转运量呈时间和浓度依赖性且不同浓度下的Papp(B-A)/Papp (A-B)≈1,4、37℃和加入抑制剂碘乙酰胺后,6,7-二甲氧基香豆素的吸收Papp (A-B)之间差异无统计学意义,37℃和加入外排蛋白抑制剂维拉帕米、MK571后,6,7-二甲氧基香豆素的外排Papp(B-A)之间差异无统计学意义。结论6,7-二甲氧基香豆素在MDCK细胞模型上表现为浓度依赖的单纯扩散。     

丹参-人参组分配伍对肺癌A549细胞侵袭迁移及ERK1/2磷酸化水平的影响

目的?研究丹参-人参组分配伍对肺癌A549细胞侵袭迁移以及ERK1/2磷酸化水平的影响。方法?采用细胞划痕实验和高内涵细胞成像系统分析丹参-人参组分配伍对肺癌A549细胞迁移的影响;应用实时细胞传感电阻仪Transwell实验动态检测丹参-人参组分配伍对肺癌A549细胞侵袭的影响;通过纳米级超微量蛋白质分析系统检测丹参-人参组分配伍对肺癌A549细胞ERK1/2磷酸化水平的影响。结果?丹参-人参组分配伍可显著增加划痕空白区域的距离（P<0.01）,且呈一定的时间依赖性;显著降低细胞迁移的面积（P<0.01）,且呈一定的剂量依赖性;对A549细胞侵袭有抑制作用（P<0.01）,且呈一定的时间依赖性;能够显著降低肺癌A549细胞ERK1/2磷酸化水平（P<0.01）。结论?丹参-人参组分配伍能显著降低肺癌A549细胞迁移侵袭的能力,其作用机制可能与降低肺癌A549细胞ERK1/2磷酸化水平有关。      

人参三七组方对急性心肌梗死大鼠缺血心肌血管内皮生长因子受体2和缺氧诱导因子1α表达的影响

目的：探讨人参三七组方对急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）大鼠缺血心肌血管内皮生长因子受体2（vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2）和缺氧诱导因子1α（hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α）表达的影响。 方法：100只Wistar大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组、美托洛尔（商品名倍他乐克）组和高、低剂量人参三七组方组。除正常对照组大鼠外,结扎各组大鼠冠状动脉左前降支建立心肌缺血模型,并于造模后予相应药物治疗12 d。治疗结束后,检测缺血心肌微血管密度（microvessel density,MVD）,蛋白免疫印迹法检测缺血心肌的血管内皮生长因子受体VEGFR-2和HIF-1α的蛋白表达,实时聚合酶链式反应法检测缺血心肌VEGFR-2和HIF-1α mRNA表达。 结果：模型组缺血心肌MVD较正常对照组及假手术组显著增加（P〈0.05）;高、低剂量人参三七组方组及倍他乐克组MVD较模型组显著增加,差异均有统计学意义（P〈0.01）;高、低剂量人参三七组方组之间比较,差异有统计学意义（P〈0.01）。模型组VEGFR-2、HIF-1α的蛋白和mRNA表达上调,与正常对照组及假手术组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;高、低剂量人参三七组方组及倍他乐克组VEGFR-2、HIF-1α蛋白和mRNA表达均显著高于模型组（P〈0.05）;高、低剂量人参三七组方组之间比较,差异亦有统计学意义（P〈0.05）。 结论：人参三七组方能够促进缺血心肌VEGFR-2和HIF-1α表达,提高缺血心肌毛细血管密度,从而改善心肌缺血,促进侧支循环的形成。     

巴戟天醇提物对D-半乳糖致衰老大鼠免疫功能的影响

目的探讨巴戟天醇提物对D-半乳糖致衰老大鼠免疫功能的影响。方法50只健康雄性Wistar大鼠随机均分为空白对照组、模型对照组、维生素E组、巴戟天高剂量组和巴戟天低剂量组,每组各10只。利用D-半乳糖制作衰老大鼠模型．并用维生素E及两种不同剂量的巴戟天醇提物进行灌胃。给药结束后,检测大鼠的胸腺指数、脾脏指数、T淋巴细胞转化指数、B淋巴细胞转化指数、白介素-2（IL-2）水平以及CD28阳性淋巴细胞数。结果与模型对照组比较,维生素E组、巴戟天高剂量组和巴戟天低剂量组胸腺指数、脾脏指数、T淋巴细胞转化指数、B淋巴细胞转化指数、IL-2水平以及CD28阳性淋巴细胞数明显升高,差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论巴戟天醇提物能够增强D-半乳糖致衰老大鼠的免疫功能,可能具有延缓衰老的作用。