低剂量甲基叔丁基醚诱导CHL细胞DNA损伤的适应性反应

甲基叔丁基醚(methyl tertiary butyl ether,MTBE)是一种新型汽油防爆添加剂.我国自2000年开始全面推广使用无铅汽油,MTBE得到广泛使用.     

锗与镉对小鼠着床前胚胎细胞微核的影响

锗与镉对小鼠着床前胚胎细胞微核的影响李莲姬，崔山田，．韩春姬，李永烈，吴国用钢是常见的金属环境污染物之一。钢具有高度生物活性，半衰期长和毒性强的金属元素，有致癌、致畸和致突变作用。动物实验证明，将钢经不同途径投予妊娠的哺乳动物，可引起胚胎吸收，死亡和...     

镉镍单独及联合作用对小鼠胚胎肢芽细胞蛋白聚糖合成的影响

为探讨镉和镍的发育毒性机制及二者的联合作用特点，应用小鼠胚胎肢芽细胞微团培养和３５ＳＯ４掺入合成方法观察了氯化镉、氯化镍单独及联合作用对胚胎肢芽细胞蛋白聚糖合成情况的影响。结果表明，低剂量氯化镉（０．２μｇ／ｍｌ）可促进蛋白聚糖的合成，高剂量氯化镉（≥０．４μｇ／ｍｌ）可明显抑制蛋白聚糖的合成；氯化镍（１１．０～３３．０μｇ／ｍｌ）对蛋白聚糖的合成有明显的抑制作用，氯化镉和氯化镍联合染毒对胚胎肢芽细胞蛋白聚糖的合成抑制有加强作用。提示，蛋白聚糖合成紊乱可能是镉和镍引起肢体发育异常的机制之一。     

镉诱导OK细胞凋亡

镉在人体的半衰期长达 2 0～ 3 0年 ,长期职业或环境接触可导致镉在人体组织的大量蓄积。镉在肾脏的蓄积 ,会影响肾近曲小管的功能 ,表现为低分子量蛋白质、氨基酸、钙、葡萄糖、尿酸、磷酸盐和酶等从尿中大量排出 ,以及肾近曲小管的酸化[1 ,2 ] 。这些损害已被大量研究所证实 ,同时开始从分子生物水平得到一定认识 ,镉致细胞凋亡就是其中一个方面。有研究表明镉在体外实验中可致人Ｔ细胞 (Ｔｃｅｌｌｌｉｎｅ) [3] 、猪肾细胞 (ＬＬＣ ＰＫ1ｃｅｌｌｓ) [4 ] 、转化人肾细胞 ( 2 93ｃｅｌｌｓ) [5] 发生凋亡 ,少量整体实验如大鼠肾近曲小管…     

镉诱导HL-7702细胞损伤及其机制

目的 研究不同剂量镉对正常人肝细胞系HL-7702细胞生长增殖的抑制作用，探讨镉肝毒性机制。     

DEHP、MEHP对小鼠胚胎干细胞细胞毒性的研究

目的分析不同浓度的邻苯二甲酸二乙基己酯[di(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP]及其活性代谢产物邻苯二甲酸单乙基己基酯[mono(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP)对小鼠胚胎干细胞细胞毒性、增殖的影响。方法用含有不同浓度DEHP(1 000、100、10、1、0.1、0.01μmol/L)、MEHP(1 000、100、10、1、0.1、0.01μmol/L)的培养液,对胚胎干细胞进行培养,用CCK-8法检测细胞活性。结果染毒96 h后,高剂量(1 000μmol/L)DEHP、MEHP均对胚胎干细胞的增殖有抑制作用(P<0.05),且染毒剂量与细胞抑制率之间存在明显的正相关性,相关系数分别为0.51、0.62(P<0.05)。结论在一定浓度范围内,DEHP及MEHP均对小鼠ESC具有细胞毒性,且有浓度依赖性。     

诊断用彩色多普勒超声辐照对小鼠早孕胚胎细胞超微结构的影响

目的:应用彩色多普勒超声辐照早孕小鼠胚胎,观察小鼠早孕胚胎细胞超微结构的变化。方法:8只孕6~7 d成年昆明种小鼠,按彩超辐照时间不同随机等分为4组,组(对照组)、组(辐照10 min组)、组(辐照20 min组)、组(辐照30 min组),仪器采用百胜公司DU-8型彩色超声诊断仪。照射条件:腹部凸阵探头,探头频率为3.0MHz,MI=0.9 TiS=0.9。照射后24 h取小鼠胚胎标本,HE染色光镜观察组织结构,透射电镜观察超微结构变化。结果:各组光镜下观察胚胎组织结构均未见异常。照射30 min组小鼠胚胎细胞电镜检查发现染色质浓缩边集、线粒体肿胀等超微结构变化。结论:彩色多普勒超声辐照早孕小鼠可引起胚胎细胞超微结构发生改变。     

低剂量γ射线诱导丝裂霉素C损伤小鼠胸腺细胞的适应性反应

目的 :探讨低剂量辐射诱导小鼠拮抗丝裂霉素C(MitomycinC,MMC)损伤作用的机制。方法 :小鼠接受低剂量γ射线作用后6h ,再给予损伤剂量的MMC ,然后通过流式细胞术和 3H_TdR掺入法观察小鼠胸腺细胞周期和DNA含量的变化。结果 :50mGy和100mGy照射加MMC组小鼠胸腺细胞 3H_TdR自发掺入率、S期细胞百分率明显高于单纯MMC对照组 (P<0.01,P<0.05)。胸腺细胞G0/G1 期细胞百分率明显低于单纯MMC对照组 ,100mGy照射加MMC组小鼠胸腺细胞G2/M期细胞百分率明显低于单纯MMC对照组。结论 :低剂量γ射线对MMC损伤小鼠胸腺细胞自发掺入能力和细胞周期进程具有刺激作用。     

诊断用彩色多普勒超声辐照对小鼠早孕胚胎细胞超微结构的影响

目的:应用彩色多普勒超声辐照早孕小鼠胚胎,观察小鼠早孕胚胎细胞超微结构的变化。方法:8只孕6～7d成年昆明种小鼠,按彩超辐照时间不同随机等分为4组,组(对照组)、组(辐照10min组)、组(辐照20min组)、组(辐照30min组),仪器设备采用百胜公司DU-8型彩色超声诊断仪。照射条件:腹部凸阵探头,探头频率为3.0MHz,MI=0.9Tis=0.9。照射后24h取小鼠胚胎标本,HE染色光镜观察组织结构,透射电镜观察超微结构变化。结果:各组光镜下观察胚胎组织结构均未见异常。照射30min组小鼠胚胎细胞电镜检查发现染色质浓缩边集、线粒体肿胀等超微结构变化。结论:彩色多普勒超声辐照早孕小鼠可引起胚胎细胞超微结构发生改变。     

低剂量氢醌、甲醛及过氧化氢刺激人胚肺成纤维细胞适应性反应的共同差异蛋白的表达

目的研究低剂量氢醌(HQ)、甲醛(FA)及过氧化氢(H2O2)刺激引起的细胞耐受与适应反应是否存在共同机制。方法利用已建立的HQ,FA及H2O2诱导人胚肺成纤维细胞MRC-5适应性反应模型,分别选择能诱导产生适应性反应的低剂量和致死剂量的HQ,FA及H2O2交叉染毒,AlamarBlue还原率检测细胞增殖。适应剂量HQ,FA及H2O2处理细胞后,二维凝胶电泳(2-DE)分离细胞总蛋白,图像分析后选取共同变化的差异蛋白点进行质谱鉴定。结果MRC-5细胞交叉染毒结果发现,低剂量HQ预刺激后再给予致死剂量FA或H2O2刺激,以及低剂量FA或H2O2预刺激后再给予致死剂量HQ刺激,其AlamarBlue还原率均较单独用致死剂量HQ,FA或H2O2刺激增高。低剂量HQ,FA和H2O2刺激MRC-5细胞后2-DE图谱图像分析发现,对照组MRC-5细胞检测到1519±154个蛋白点,低剂量HQ组为1551±172个,低剂量FA组为1572±179个,低剂量H2O2组为1429±159个,凝胶匹配后发现,染毒后出现4个共同消失的蛋白点,7个新增蛋白点,经肽质量指纹图谱和串联质谱鉴定了其中6个蛋白点。已鉴定的蛋白包括二磷酸核苷激酶B,蛋白磷酸酶PP1-β催化亚基,Ufm1结合酶1,肌苷-5′-单磷酸脱氢酶,α晶状体球蛋白B链,巯氧还蛋白过氧化物酶1,这些蛋白功能涉及氧化应激、细胞骨架、蛋白折叠等各个方面。结论HQ,FA和H2O2交叉染毒可相互诱导适应性反应;低剂量HQ,FA和H2O2可诱导多种共同蛋白的表达。     

α粒子对叙利亚地鼠胚胎细胞H－ras和p53基因的影响

观察了２Ｇｙα粒子（５．３４ＭｅＶ）照射诱发叙利亚地鼠胚胎细胞转化后Ｈ－ｒａｓ和ｐ５３基因的变化．结果表明，转化细胞Ｈ－ｒａｓ基因处于激活和ｐ５３基因失活状态，以逆转录聚合酶链反应和单链构象多态性分析方法进一步分析，证明Ｈ－ｒａｓ基因发生突变和ｐ５３基因部分缺失．本实验结果提示，Ｈ－ｒａｓ基因突变与ｐ５３基因突变的偶联可能是α粒子诱发叙利亚胚胎细胞转化的重要分子机理．     

电离辐射诱导细胞凋亡的研究进展

电离辐射诱导细胞凋亡的研究进展陈铁河１印木泉２１．海军医学研究所（上海２００４３３）２．第二军医大学特殊毒理教研室细胞凋亡是一种有步序的按照某种特定的生理生化途径进行的细胞死亡形式。虽然细胞凋亡早在２０多年前就被Ｋｅｒ等人（１９７２年）所描述，但是直...     

钙拮抗剂对HSB—2细胞摄取镉的影响

本研究观察了钙拮抗剂对ＨＳＢ－２细胞Ｃｄ摄取作用的影响，发现ＣｄＣｌ２和ＣｄＭＴ均可为细胞摄取，在１０μｍｏｌ·Ｌ－１Ｃａ２＋存在的条件下使得Ｋｍ值发生改变，而Ｖｍａｘ无影响，提示Ｃａ２＋是通过竞争性抑制Ｃｄ２＋进入细胞的。Ｌ型电压依赖性Ｃａ２＋通道抑制剂Ｖｅｒａｐａｍｉｌ却使Ｖｍａｘ减小，Ｋｍ值不变，说明其非竞争性拮抗Ｃｄ２＋入胞的本质，这为Ｃｄ可以通过钙通道摄取提供了证据。钙调素拮抗剂ＣＰＺ对细胞Ｃｄ摄取动力学无影响，以ＣｄＭＴ染毒细胞时，Ｃａ２＋，Ｖｅｒａ，ＣＰＺ对ＣｄＭＴ的摄取均未产生显著影响。     

α粒子体外诱发叙利亚地鼠胚胎细胞恶性转化

叙利亚地鼠胚胎细胞经２００ｃＧｙα粒子（５．３４ＭｅＶ）照射后连续传代．传至２０代时，用低密度培养法分离出１１个克隆，采用多项指标观察其生物学特性的变化，最后经ＮＩＨ３Ｔ３细胞转染和裸鼠接种试验证实，第２０代细胞和Ｔ４克隆细胞具有恶性转化细胞的特征．     

低浓度镉对小鼠脾淋巴细胞体外增殖反应的影响

镉在体内的生物半减期长达10～35年。镉对机体的慢性毒害后果已日益引起人们的关注。近年来,国外有关镉对机体免疫系统影响的体内外研究报告较多,国内的研究资料则少见。本文报告不同浓度的镉体外作用不同时间对小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响。 LACA雌性小鼠,体重22～24g。脾淋巴细胞增殖反应的测定参照改良的MTT颜色反应法。无菌取脾,制成单细胞悬液,用完全培养液调整细     

镉诱导HEK293细胞胞内钙稳态的失调引发细胞凋亡

目的　研究镉诱导HEK2 93细胞钙稳态失调及其引发细胞凋亡的机制。方法　通过吖啶橙 /溴乙锭双荧光染色法检测细胞凋亡 ,并通过MTT法检测细胞生长抑制 ;以Fluo 3/AM和Fura 2 /AM为探针检测胞浆内游离钙离子浓度 ([Ca2 +]i)的变化 ;使用钙调磷酸酶试剂盒测定镉对钙调磷酸酶活性的影响。结果　镉诱导HEK2 93细胞的凋亡和生长抑制呈浓度依赖性 ;镉通过引发胞内钙库的释放后引起胞外钙离子内流 ;钙信号阻断剂能显著地抑制镉引起的细胞凋亡 ;镉使胞内钙调磷酸酶的活性显著增加。结论　 [Ca2 +]i 升高使钙调磷酸酶活化可能在镉引发细胞凋亡过程中起重要作用。     

镉诱导小鼠十二指肠上皮细胞损伤及机制

目的探讨在体和离体镉(Cd)暴露对小鼠十二指肠上皮细胞的损伤作用及其机制。方法①在体实验:C57BL/6小鼠连续30 d每天1次ig给予二氯化镉(CdCl2)10 mg·kg-1构建慢性Cd中毒模型;单次ig给予CdCl280 mg·kg-1构建急性Cd中毒模型,观察小鼠生存状况和生存率。分离培养急性和慢性Cd中毒小鼠的十二指肠上皮细胞,经E-钙黏蛋白免疫荧光鉴定为上皮细胞后,利用激光共聚焦显微镜检测细胞内Cd离子含量。②离体实验:分离培养正常C57BL/6小鼠的十二指肠上皮细胞,与CdCl22.5～100μmol·L-1共孵育24 h,CellTiter-Blue法检测细胞活力;与CdCl215μmol·L-1共孵育24 h,流式细胞术检测细胞周期;与CdCl230μmol·L-1共孵育3～12 h,Western印迹法检测细胞内活化的胱天蛋白酶3表达水平。结果①在体实验:与正常对照组相比,慢性Cd中毒小鼠活动状况正常,急性Cd中毒小鼠出现萎靡不振,进食减少和死亡现象,在急性Cd暴露第5天时,小鼠生存率降低至40%;急、慢性Cd中毒小鼠十二指肠上皮细胞Cd离子含量均显著增加(P<0.01)。②离体实验:CdCl2对体外培养的十二指肠上皮细胞活力具有抑制作用,其半数抑制浓度(IC50)为(24.55±0.84)μmol·L-1。与细胞对照组相比,CdCl215μmol·L-1使十二指肠上皮细胞细胞周期阻滞于G0/G1期(P<0.05),且CdCl230μmol·L-1处理6,9和12 h后,十二指肠上皮细胞中活化的胱天蛋白酶3表达水平显著上升(P<0.05,P<0.01)。结论经消化道进入体内的Cd会被十二指肠上皮细胞吸收并对其造成损伤,其机制可能与细胞周期阻滞和胱天蛋白酶3介导的细胞凋亡有关。     

诊断用彩色多普勒超声辐照对小鼠早孕胚胎细胞凋亡的影响

目的:探讨诊断用彩色多普勒超声对小鼠早孕胚胎组织细胞凋亡的影响。方法:20只孕6~7 d成年昆明种小鼠,按彩超辐照时间不同随机等分为4组,Ⅰ组(对照组)、Ⅱ组(辐照10 min组)、Ⅲ组(辐照20 min组)、Ⅳ组(辐照30min组),仪器采用百胜公司DU-8型彩色超声诊断仪。照射条件:腹部凸阵探头,探头频率为3.0MH z,M I=0.9,T is=0.9,照射后24 h取小鼠胚胎标本。利用流式细胞仪检测凋亡细胞百分率。结果:各组胚胎组织均存在凋亡细胞,照射30 min组凋亡细胞百分率高于0 min组,差异有显著性(P<0.05)。结论:诊断用彩色多普勒超声过度辐照早孕小鼠,可诱发胚胎组织细胞凋亡。     

人胚胎干细胞诱导分化的肝样细胞质量评价研究

肝细胞、肝组织或器官移植是目前不可逆失代偿性肝病的主要治疗手段,而由人胚胎干细胞诱导分化来源的肝样细胞(human embryonic stem cells-derived hepatocyte-like cells,hESC-HLCs)能为移植提供数量充足、质量可控、来源稳定的细胞.为满足临床应用研究的需要,hESC...     

PARP-1及其相关因子在适应性反应中的表达改变

目的探讨PARP-1在适应性反应中的作用。方法低剂量甲醛预处理人胚肺成纤维细胞(MRC-5)后,观察细胞对高剂量甲醛攻击的适应性反应。在MTT法检测细胞存活率的基础上,荧光定量PCR技术测定不同组细胞中PARP-1及其相关因子表达的变化。结果用低剂量甲醛预刺激可提高细胞对继后大剂量甲醛攻击的抵抗力;低剂量甲醛能引起PARP-1及其相关因子表达增加,产生适应性反应时这种增加尤为突出,其中PARP-1的表达量是对照组的147倍。结论低剂量的甲醛可使PARP-1活化,进而调节其相关因子DNA-PK、P53、NF-κB的表达,促使细胞免疫功能增强,启动适应性反应的产生。