湖北五峰绿茶抗宫颈癌Caski细胞作用的研究

目的 研究从湖北五峰绿茶提取的茶多酚抗宫颈癌Caski细胞作用及其可能的机制. 方法茶多酚按不同时间(24h,48h,72h)及不同浓度(1～8mg/ml)分别处理Caski细胞,MTS法分析细胞的增殖速度,用流式细胞仪测定细胞凋亡及细胞周期. 结果 8mg/ml茶多酚处理Caski细胞72h可显著地抑制Caski细胞增殖,2mg/ml茶多酚处理Caski细胞72h即可导致亚凋亡峰的出现,且G0/G1期细胞增多,S期和G2/M期细胞减少. 结论茶多酚可抑制Caski细胞增殖并激发细胞凋亡.     

慢病毒介导的siRNA沉默hTERT基因对宫颈癌Caski细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨利用慢病毒介导小干扰核糖核酸（ siRNA）沉默人体端粒酶反转录酶（ hTERT）的可行性及其对宫颈癌Caski细胞增殖和凋亡的影响。方法用前期构建的慢病毒表达载体anti-hTERT-LV 和 NC-LV转染宫颈癌 Caski细胞。实验共分3组,分别为空白对照组（ NC组）、阴性对照组（ NC-LV组）及干扰组（ anti-hTERT-LV组）。采用实时荧光定量PCR检测hTERT mRNA表达量,采用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡情况。结果 anti-hTERT-LV组hTERT mRNA相对表达量为（0．28±0．02）明显低于NC组（1．0）及NC-LV组（0．87±0．05）（ P均＜0．05）。 anti-hTERT-LV组G1期细胞比例（71．52±0．79）％明显高于NC组（54．69±2．84）％和NC-LV组（55．70±1．31）％（P均＜0．05）;anti-hTERT-LV组S期细胞比例（18．69±1．95）％明显低于NC组（36．06±1．56）％和NC-LV组（34．16±1．09）％（P均＜0．05）。 anti-hTERT-LV组细胞凋亡率（36．45±5．39）％明显高于NC-LV组（8．75±3．75）％和NC组（9．55±2．57）％（P均＜0．05）。结论慢病毒介导siRNA可以沉默hTERT基因,高效特异地抑制宫颈癌Caski细胞hTERT基因的表达,促进细胞凋亡,抑制肿瘤细胞的生长和增殖。     

siRNA表达载体对宫颈癌Caski细胞凋亡和增殖的影响

目的: 观察HPV16 E6 siRNA表达载体对宫颈癌Caski细胞凋亡和增殖的影响.方法: 利用脂质体将HPV16 E6特异性siRNA表达载体转染Caski细胞,通过荧光定量RT-PCR检测E6 mRNA的变化,流式细胞仪检测E6蛋白和细胞凋亡率的变化,MTT法和细胞克隆法检测细胞增殖的变化.结果: HPV16 E6 siRNA表达载体可明显抑制Caski细胞E6 mRNA和E6蛋白的表达,抑制率分别为89.5%和98.1%;表达载体可明显增加细胞凋亡率,抑制细胞的增殖和克隆的形成.结论: HPV16 E6 siRNA表达载体可以特异高效地抑制宫颈癌Caski细胞E6基因的表达,增加细胞的凋亡,抑制肿瘤细胞增殖和克隆的形成.     

调控细胞分裂周期蛋白6对人类乳头瘤病毒16阳性宫颈癌细胞Caski增殖和凋亡的影响

目的 探讨调控细胞分裂周期蛋白6(CDC6)对人类乳头瘤病毒(HPV)16阳性宫颈癌细胞Caski增殖和凋亡的影响.方法 检测HPV阴性的宫颈癌C33-A细胞株、HPV16阳性的宫颈癌Caski细胞株和SiHa细胞株、HPV18阳性的宫颈癌HeLa细胞株中CDC6蛋白及mRNA的表达水平.将CDC6小干扰RNA(siR...     

细胞凋亡与宫颈癌

近年来 ,细胞凋亡 (apoptosis)及其与肿瘤的相关性是细胞生物学和分子生物学研究的热点。随着对宫颈细胞生物学和分子生物学研究不断深入 ,宫颈细胞凋亡的研究已成为肿瘤细胞生物学的重要组成部分之一 ( 1 )。本文就当前细胞凋亡、细胞凋亡和宫颈癌的相关性 ,放疗和化疗与宫颈癌细胞凋亡的相关性 ,以及基因表达与宫颈凋亡细胞的相关性的状况 ,综述如下。1　细胞凋亡的基因调控与表达1 .1　细胞凋亡的基因调控 :细胞凋亡对于正常的胚胎发育及随后的生长和生存是不可少的。在胚胎时期 ,细胞凋亡是维护器官生成的主要力量 ,也是组织器官的分化…     

中药清毒栓对宫颈癌SiHa细胞凋亡的影响

目的探讨中药清毒栓对宫颈癌SiHa细胞增殖抑制及凋亡的作用。方法设立空白血清组及中药清毒栓组、保妇康栓组、西药安达芬组,以4%含药血清培养液作用于SiHa细胞,分为3个时间点,通过MTT法检测各组对细胞增殖抑制的影响;同时运用流式细胞分析技术进行TUNEL法检测晚期细胞凋亡的变化。结果经含药血清培养液作用后各组SiHa细胞数量减少,其中以作用72h时对细胞抑制作用最强,与空白血清组比较,差异有统计学意义(P<0.01),且抑制作用安达芬组>清毒栓组>保妇康组,清毒栓组与安达芬组间差异有统计学意义(P<0.05)。各含药血清组对细胞凋亡均有显著的影响,且明显优于空白血清组(P<0.05),各含药血清组凋亡率依次为清毒栓组>保妇康组>安达芬组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论清毒栓含药血清通过促进细胞凋亡而达到抑制肿瘤的目的。     

超氧化物歧化酶对抗肿瘤药物促宫颈癌Hela细胞凋亡的影响

目的探讨超氧化物歧化酶（SOD）对抗肿瘤药物诱导Hela细胞凋亡的影响,并从分子生物学水平探讨SOD作用的可能机制。方法宫颈癌Hela细胞经顺铂（DDP）、足叶乙甙（VP-16）和阿霉素（ADM）血浆峰浓度不同时间作用后,测定肿瘤细胞内活性氧（ROS）水平、细胞凋亡率及突变型p53和c-fos基因表达的变化,并测定不同时间加入SOD对DDP、ADM、VP-16诱导Hela细胞凋亡及p53、c-fos基因表达的影响。结果DDP、ADM不同作用时间对Hela细胞ROS产生状态和细胞凋亡的影响不同,VP-16不刺激Hela细胞产生高浓度ROS。DDP和ADM作用同时加入SOD共同孵育可降低Hela细胞凋亡率（P〈0.01）,而DDP和ADM作用24 h后加入SOD对细胞凋亡影响不明显（P〉0.05）,而且与p53和c-fos基因表达变化具有一致性。结论DDP、ADM作用同时给予SOD可抑制药物诱导Hela细胞凋亡,延迟给予SOD不影响Hela细胞凋亡。     

米非司酮对早孕后期蜕膜及绒毛孕激素受体及细胞凋亡的影响

目的　探讨米非司酮对早孕后期蜕膜及绒毛孕激素受体 (PR)及细胞凋亡的影响。方法　取孕 7～12周人工流产 (对照组 )、顿服米非司酮 2 0 0mg后 2 4h流产及服药 4 8h后流产各 2 0例患者的蜕膜及绒毛 ,应用免疫组织化学方法 (ABC法 )测定PR含量 ;应用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法测定比较细胞凋亡比率。结果　蜕膜组织PRH 积分对照组为 170 .33± 4 5 .71,服药 2 4h组为 16 3.5 5± 2 7.36 ,服药 4 8h组为 2 0 5 .2 9±34.0 4 ,后二组与对照组比较有显著性差异。对照组绒毛组织PR全部为阴性 ,服药 2 4h组 1例弱阳性 ,服药 4 8h组3例阳性 ;蜕膜细胞凋亡率对照组为 (0 .2 0 6± 0 .175 ) ,服药 2 4h组为 (0 .2 35± 0 .189) ,服药 4 8h组为 (0 .391± 0 .2 0 3) ,后者与对照组比较有显著性差异。绒毛细胞凋亡率对照组为 (0 .0 5 2± 0 .0 34) ,服药 2 4h组为 (0 .0 94± 0 .110 ) ,服药 4 8h组为 (0 .10 2± 0 .12 5 ) ,三组间差异无统计学意义。结论　米非司酮可以使蜕膜及绒毛中PR及细胞凋亡率升高 ,服药 4 8h比 2 4h作用更显著 ,其流产机制也可能作用于绒毛。     

细胞凋亡因子与宫颈癌相关性的研究进展

宫颈癌发生、发展与癌基因激活、抑癌基因突变,抗凋亡基因过表达有关。本文从经典的抑凋亡基因Bcl-2及其同源体促进凋亡的Bax基因,及凋亡通路关键因子细胞色素C,caspase-3进行综述,阐明其与宫颈癌的相互关系。     

米非司酮诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡机制的研究

目的探讨米非司酮（MIF）对人宫颈癌Hela细胞的凋亡诱导作用及作用机制。方法体外培养人宫颈癌Hela细胞,流式细胞技术分析不同浓度米非司酮对Hela细胞凋亡率及细胞周期分布的影响,用Western blot法检测米非司酮对Hela细胞中NF-κB p65蛋白表达水平的影响。结果 5、10、20μmol/L的米非司酮均能使Hela细胞凋亡率明显增加,使S期、G2/M期细胞比例减少,G0/G1期细胞比例显著增加,且作用呈剂量依赖性;随着米非司酮浓度的增加,Hela细胞中NF-κB p65蛋白表达水平逐渐下降。结论米非司酮可能通过NF-κB信号通路下调NF-κB p65蛋白表达,从而调节细胞周期,诱导Hela细胞凋亡。     

苦参碱对人宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用研究

目的探讨苦参碱对人宫颈癌细胞株Hela细胞体外增殖的抑制作用。方法选用人宫颈癌Hela细胞进行体外培养,以0.25～4.0mg/ml的苦参碱分别处理Hela细胞24～72h后,用MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,倒置显微镜和透射电镜进行形态学观察。结果苦参碱对Hela细胞有抑制作用,并呈剂量和时间依赖性;流式细胞仪检测到细胞在苦参碱作用后,细胞凋亡率增加;透射电镜观察发现部分细胞发生凋亡早期改变。结论苦参碱对人宫颈癌Hela细胞具有明显抑制作用,诱导细胞凋亡可能是其机制之一。     

珍香胶囊抗人宫颈癌作用及其机制研究

目的探讨珍香胶囊对人宫颈癌的抗癌作用及其机制。方法建立人宫颈癌裸鼠移植瘤模型,分别应用TUNEL法和免疫组化SABC法观察不同浓度的珍香胶囊对裸鼠移植瘤凋亡指数(AI)增殖细胞核抗原阳性细胞指数(PI)的影响。结果经珍香胶囊治疗后,高浓度组和中浓度组AI分别为(2．83±1．52)％和(2．50±1．43)％均明显高于阴性对照组的(0．78±0．31)％(P＜0．01,P＜0．05),而低浓度组AI为(0．87±0．27)％与对照组比较,差异无显著性(P＞0．05)；高浓度组和中浓度组PI分别为(63．58±9．31)％和(68．83±9．04)％均低于阴性对照组(84．42±9．25)％(P＜0．01),而低浓度组PI为(79．25±8．53)％与对照组比较,差异无显著性(P＞0．05)。结论珍香胶囊通过抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡而达到其抗人宫颈癌作用。     

茶多酚抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖及其机制的研究

目的：探讨茶多酚对人宫颈癌HeLa细胞增殖的影响及其机制。方法：MTr比色法检测茶多酚对HeLa细胞体外增殖的抑制作用;流式细胞仪检测茶多酚对HeLa细胞周期及凋亡率的影响;分光光度法检测Caspase-9的活性。结果：茶多酚对HeLa细胞的生长抑制作用随药物浓度增加而逐渐增加：流式细胞仪分析显示随着茶多酚浓度的增加,S期细胞增多,C1期细胞减少,细胞阻滞在S期,茶多酚诱导HeLa细胞凋亡,且凋亡率呈浓度依赖性：Caspase-9分光光度法检测到不同浓度的茶多酚组与对照组比较,Caspase-9的活性明显升高,且活化程度呈浓度依赖性。结论：茶多酚对HeLa细胞的生长有明显抑制作用并诱导HeLa细胞凋亡,其作用机制可能是通过活化Caspases从而诱导细胞凋亡。     

放疗前后宫颈癌中Survivin表达及凋亡研究

目的研究放疗前后宫颈癌组织Survivin表达水平及凋亡,探讨其与放疗效果的相关性。方法选取38例接受放疗的宫颈癌患者,用免疫组化法分别检测放疗前后Survivin的表达及TUNEL法检测细胞凋亡的情况,并评价放疗效果。结果 Survivin表达阴性和阳性相比,前者的放疗效果优于后者,差异有统计学意义（P〈0.05）;放疗后获得临床稳定的患者与获得临床部分缓解的患者相比,Survivin上调的比例明显高于后者,差异有统计学意义（P〈0.05）;放疗后Survivin阴性表达者的细胞凋亡明显增多,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 Survivin基因有望成为宫颈癌逆转放疗抵抗的新靶点。     

SCC在宫颈鳞癌患者血清中的表达及临床意义

目的　探讨宫颈鳞癌患者血清中鳞状细胞癌抗原 (SCC)的表达及其临床意义。方法　对 2 0 4例宫颈鳞癌患者采用微粒子酶免疫法检测血清SCC值 ,结合临床资料分析该抗原改变的临床意义。结果　宫颈鳞癌、宫颈腺癌和慢性宫颈炎患者SCC阳性率分别为 64 2 1 %、 1 8 1 8%和 1 0 0 0 % ;三个阳性率间的差别有显著性意义 (P <0 0 1 ) ;宫颈癌患者的临床分期、病理分级与SCC间均有相关关系 (P <0 0 1 ) ;有淋巴转移与无淋巴转移者的SCC阳性率间的差别有显著性意义 (P <0 0 1 )。结论　SCC量有随宫颈鳞癌患者病情加重、病理分级的增高而增加的趋势     

宫颈上皮内瘤变及鳞癌中钙粘附素的表达研究

目的 探讨钙粘附素在宫颈上皮内瘤变(CIN)及浸润性鳞癌中的表达。方法 采用免疫组织化学方法对正常宫颈鳞状上皮、不同级别宫颈CIN及宫颈浸润性鳞癌各10例进行上皮型钙粘附素(E—cadherin)染色。结果 E—cadherin在正常宫颈上皮的表达分布均在鳞状上皮基底层细胞和细胞连接处的膜缘，而在CIN的表达分布与CIN的级别有关，宫颈浸润性鳞癌E—cadherin表达明显减少。结论 根据E—cadherin的表达分布可帮助判断CIN的级别。     

维甲酸对宫颈癌耐药细胞株分化及凋亡影响的研究

目的研究全方式维甲酸（ATRA）对宫颈癌耐药细胞株HeLa/MMC诱导分化及凋亡的影响。方法采用MTT法检测HeLa/MMC细胞生长速度;集落形成实验观察ATRA对HeLa/MMC细胞集落形成能力的影响;在透射电镜下观察ATRA对HeLa/MMC超微结构的影响;TUNEL法检测HeLa/MMC细胞实验组与对照组细胞凋亡率;半定量RT-PCR检测凋亡相关基因bax的表达。结果通过实验观察到ATRA联合MMC能明显抑制HeLa/MMC细胞的增殖;ATRA作用后的HeLa/MMC细胞出现成熟细胞的特征、细胞集落形成能力降低;ATRA能促进细胞凋亡,上调HeLa/MMC细胞bax基因的表达。结论表明ATRA能有效的诱导宫颈癌耐药细胞株HeLa/MMC分化,并促进其凋亡。诱导凋亡相关基因bax基因的表达上调是ATRA作用的分子机制之一。     

氧化苦参碱诱导人胃癌细胞凋亡的实验研究

目的：研究氧化苦参碱诱导人胃癌MGC-803细胞裸鼠移植瘤细胞凋亡的作用机制。方法：制备人胃癌MGC-803细胞裸鼠移植瘤模型,将其随机分为阴性对照组、阳性对照组及氧化苦参碱小、中、大剂量组,观察氧化苦参碱对人胃癌裸鼠移植瘤的抑制作用。流式细胞仪检测移植瘤细胞Bd-2、Bax的表达。结果：氧化苦参碱能有效抑制裸鼠移植瘤的生长,与阴性对照组比较,其大剂量组肿瘤抑制作用明显,平均抑制率为43．20％;流式细胞仪检测显示氧化苦参碱组裸鼠移植瘤细胞Bcl-2表达降低,而Bax表达升高,以中剂量氧化苦参碱诱导细胞凋亡最明显,移植瘤细胞Bel-2表达为（339．19±42．34）,与阴性对照组（492．31±36．19）比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;Bax表达为（554．74±26．13）,与阴性对照组（397．48±18．36）比较,差异有高度统计学意义（P〈0．01）。结论：氧化苦参碱对人胃癌MGC-803细胞裸鼠移植瘤生长有一定的抑制作用。且其机制与下调细胞Bel-2的表达、上调Bax的表达,从而诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

5-氨基乙酰丙酸光动力疗法诱导人宫颈癌细胞株Hela和Siha凋亡的研究

目的  探讨5-氨基乙酰丙酸结合光动力疗法对人宫颈腺癌Hela细胞株和鳞癌Siha细胞株凋亡的影响及其相关机制。方法  噻唑蓝（MMT）法检测光动力疗法对人宫颈癌细胞株Hela和Siha增殖的影响,并比较不同的抑制作用。Annexin V-FITC/PI双染法检测光动力疗法对Hela和Siha细胞株凋亡的影响。免疫细胞化学法检测光动力疗法对两种细胞Her-2/neu基因的蛋白表达影响。结果   Hela比Siha细胞株对光动力治疗更敏感。5-氨基乙酰丙酸2mmol/L、10J/cm2激光剂量孵育为光动力疗法体外杀伤Hela和Siha细胞株较理想的实验条件,在该条件下Hela、Siha细胞的IC50分别为0.724、1.206mmol/L。光动力疗法可显著诱导Hela和Siha细胞凋亡,并抑制Hela和Siha细胞Her-2/neu基因的蛋白表达。结论  光动力治疗在体外对人宫颈腺癌Hela细胞株和鳞癌Siha细胞株有明显的增殖抑制作用,还能诱导两种细胞发生凋亡,其机制可能与抑制Her-2/neu基因表达有关。