分化型甲状腺癌组织中HSP70、E-cadherin、CyclinD1的表达变化与临床病理特征的关系

目的　研究分化型甲状腺癌组织中热休克蛋白70（HSP70）、上皮钙粘蛋白（E-cadherin）、细胞增殖周期调控蛋白D1（CyclinD1）的表达,探讨其与分化型甲状腺癌病理特征的关系。方法　收集我院2013 年1 月～2016 年5 月存档的分化型甲状腺癌手术标本50 例（乳头状瘤29 例、滤泡状癌21 例）,甲状腺腺瘤18 例,瘤旁正常甲状腺组织15 例。采用免疫组化法检测组织标本中HSP70、E-cadherin、CyclinD1 的表达,并结合临床病理资料进行分析。结果　分化型甲状腺癌组织中HSP70、CyclinD1 的阳性表达率显著高于甲状腺良性肿瘤组织及正常甲状腺组织（P<0.05）,而E-cadherin 的阳性表达率显著低于其它两组（P<0.05）。HSP70、CyclinD1 与分化型甲状腺癌的临床分期、淋巴结转移及包膜浸润有关（P<0.05）,E-cadherin 与分化型甲状腺癌的淋巴结转移及包膜浸润有关（P<0.05）。结论　HSP70、CyclinD1 在分化型甲状腺癌组织中呈高表达,E-cadherin在分化型甲状腺癌组织中呈低表达,且均与分化型甲状腺癌的发生、发展及转移密切相关。     

细胞周期蛋白B1在肝细胞肝癌中的表达及其临床意义

目的 研究细胞周期蛋白 B1 (CCNB1)在肝细胞肝癌(HCC)中的表达情况及与临床病理参数之间的相关性。 方法 免疫组织化学法检测 100 例肝癌和 20 例癌旁组织中 CCNB1 的表达水平,并分析其表达与HCC 临床病理间的相关性。 结果 与癌旁组织比较,CCNB1 在肝癌中阳性表达率高达 61%,差异有统计学意义( χ²=8.727,P=0.003)。 CCNB1 阳性表达与肝癌肿瘤大小和患者是否伴有肝硬化相关(P<0.05),而与年龄、性别、肝炎、甲胎蛋白(AFP)以及肿瘤分化程度无关(P>0.05)。 生存分析表明,CCNB1 高表达患者总体生存率明显低于CCNB1 低表达者(P<0.05)。 结论 CCNB1 可能参与肝癌的发生发展过程,是判断肝癌预后的潜在靶基因。     

细胞周期蛋白D1在大肠癌组织中的表达及其意义

目的检测细胞周期蛋白D1蛋白在大肠癌组织中的表达情况,并探讨其与大肠癌临床病理参数的关系。方法应用Western blot和免疫组织化学EnVision法检测50例大肠癌患者与10例外伤患者肠黏膜组织中细胞周期蛋白D1的表达水平,采用t检验和χ2检验进行统计学分析。结果细胞周期蛋白D1在大肠癌组织中表达主要在细胞核,也有少量表达在细胞质,阳性表达率为80.0%,明显高与在正常口腔黏膜组织中的表达率10.0%,差异有统计学意义(P=0.000);且随着大肠癌组织分化程度的降低,细胞周期蛋白D1的表达显著增加(r=0.972,F=119.304,Pr=0.000);淋巴结转移的大肠癌组织细胞周期蛋白D1表达高于无转移组织,差异有统计学意义(χ2=7.762,P=0.005);细胞周期蛋白D1在不同分期的大肠癌组织中表达不同(χ2=16.328,P=0.003),且细胞周期蛋白D1的表达与大肠癌的分期有关(r=-0.400,F=11.077,Pr=0.002)。结论细胞周期蛋白D1的异常表达与大肠癌的发生、发展有密切的关系,可作为大肠癌治疗和预后的辅助性指标。     

口腔鳞状细胞癌细胞周期蛋白D1的表达与意义

目的：分析口腔鳞状细胞癌（OSCC）细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达与临床美丽资料及预后的关系。方法：回顾性研究50例OSCC及10例正常口腔黏膜cyclin D1的表达情况，采用SABC法根据染色指标计数，并利用Cox比例风险模型进行生存多因素分析。结果：cyclinD1在正常口腔黏膜上皮呈现低水平表达，在OSCC组织中过表达。单因素生存分析表明cyclinD1的表达与生存期显相关，多因素Cox回归分析表明cyclinD1的表达可作为OSCC辅助性的预后指标。结论：cyclinD1的表达与OSCC的发生发展有密切关系，并与肿瘤的预后密切相关，可作为辅助性的预后观察指标。     

原发性肝细胞肝癌中MRP-1表达的意义

目的:研究原发性肝细胞肝癌(HCC)中移动相关蛋白-1(MRP-1,CD9)的表达特征,探讨其对HCC发生发展的影响及其意义。方法:采用免疫组化(S-P)法检测90例HCC患者CD9的表达。采用卡方检验、Spearman相关分析、有序结果的逐步累积比Logistic回归方法建立与HCC临床分期(X1)、病理分级(X2)、血清AFP水平(X3)、转移(X4)和大小(X5)有关的方程。结果:(1)HCC中CD9阳性以胞浆为主。(2)HCC中CD9的表达在癌旁强阳性,癌细胞中显著减弱(P=0.0000),并与病理分级(r率=-0.3355和r强=-0.2117)呈负相关,且随转移(r=-0.2279)和血清AFP水平(r=-0.2326)增高表达减少,尤以转移因素为著;Logistic回归后退法方程LogitPj=αj-0.3902X2-0.6732X3-1.0165X4,j=1、2、3,α1=-2.1410,α2=-1.5806,α3=-1.3861。(3)HCC中CD9阳性在单因素时与肿瘤大小负相关,但在多因素时被掩盖。结论:(1)CD9的表达与HCC的分级分化有关,低表达可能是HCC诊断和病理分级的有用指标。(2)CD9的低表达有利于HCC的转移,是HCC预后判断较重要的指标。(3)单因素分析和多因素分析的联合使用对肝癌的检测和机制探讨具有重要价值。     

采用组织芯片技术研究鼻咽癌组织中HSP70的表达及意义

目的:探讨使用组织芯片技术,观察热休克蛋白在鼻咽癌组织中的表达及临床意义。方法:以50例鼻咽癌患者鼻咽部存档石蜡标本为观察研究对象,采用组织芯片技术和免疫组织化学方法检测鼻咽癌组织中HSP 70的表达。结果:50例鼻咽癌组织中HSP70阳性表达为72%(36/50),与采用常规制片方法进行免疫组织化学染色片对比,阳性率、阳性表达强度结果基本一致,鼻咽癌中颈淋巴结转移阳性组的HSP70表达高于阴性组,差异具有显著性,P<0.01。结论:HSP70表达与鼻咽癌相关,HSP70可作为评价鼻咽癌患者预后的指标。使用自制组织芯片进行HSP70免疫组织化学染色分析,效果良好,显示了组织芯片技术应用于临床病理免疫组织化学染色和实验分析的良好前景。     

细胞周期蛋白D1在卵巢子宫内膜异位症中的表达及意义

子宫内膜异位症多发生于生育期女性,目前发病机制仍然不十分清楚.细胞周期蛋白D1(cyclinD1)是重要的细胞周期调控因子,与肿瘤的形成密切相关.本研究采用免疫组织化学的方法检测子宫内膜异位症中cyclinD1蛋白表达,分析其在卵巢子宫内膜异位症发病过程中的作用及与临床分期的关系.     

热应激和短暂心肌缺血对大鼠心肝组织热休克蛋白70表达的影响

目的探讨热应激及短暂心肌缺血对大鼠心、肝组织损伤及热休克蛋白（HSP70）表达的影响。方法24只雄性SD大鼠随机分为：对照组、假手术组、热休克组和短暂心肌缺血组,每组6只,应激后20h取心、肝组织,采用Western blotting、免疫组化及HE染色方法,观察大鼠心、肝组织的病理变化和HSP70的表达。结果（1）热应激及短暂心肌缺血后大鼠心、肝组织均有病理改变且HSP70表达与对照相比均显著增加（P〈0．05）;（2）短暂心肌缺血后心肌中HSP70表达量显著高于热应激后的表达量（P〈0．05）,而肝脏在两种刺激后HSP70表达量差异无统计学意义（P〉0．05）。结论短暂心肌缺血对心脏组织中HSP70表达的影响强于热应激,而对肝脏的影响两者无显著差异,这可能与不同刺激引起心、肝组织中HSP70表达机制不同有关。     

Livin蛋白在肝细胞癌组织中的表达及其意义

目的找出Livin蛋白在肝细胞癌组织中的表达及其意义,为治疗HCC提供理论依据。方法应用免疫组织化学(SP法)分别检测Livin在肝细胞癌和癌旁"正常"组织中的表达情况及分析这两种蛋白表达与淋巴结转移的关系及其之间的相关性。结果Livin在肝细胞癌中高表达,表达部位位于胞浆;Livin蛋白阳性表达在肝细胞癌组织和癌旁"正常"肝组织有显著性差异,表明Livin蛋白阳性表达与肝细胞癌的发生有关,同时也与组织学分级有关。结论Livin的蛋白表达在HCC发生中的作用,对临床医生有指导性意义。     

细胞周期蛋白D1表达与bcl-1基因重排检测在套细胞淋巴瘤诊断中的意义

淋巴造血系统肿瘤的WHO新分类将套细胞淋巴瘤（mantle cell lymphoma，MCL）作为一种独立的疾病。目前病理诊断除依据典型的形态学特征之外，细胞周期蛋白D1（cyclinD1）的过表达常作为诊断的“金标准”。但是，由于cyclinDl抗原对组织制片过程（尤其是组织固定）要求较高^[1]，不同实验室检测的阳性率也不相同^[2,3]，以致影响到MCL的诊断与鉴别诊断。     

丙泊酚诱导缺氧鼠脑神经元HSP70的表达

目的：探讨丙泊酚的脑保护机制。方法：培养12d的胎鼠大脑神经元，随机分为正常对照组、缺氧组和丙泊酚组。丙泊酚组于缺氧前1h换入含有14μmol／L和56μmol／L丙泊酚的培养液，随后缺氧30min。于缺氧后1，3，6，8，24，48h分别用原位杂交法和免疫组化法观察3组Hsp70mRNA、Hsc70mRNA及Hsp 70的表达。结果：(1)缺氧30min可诱导神经元Hsp70mRNA、Hsc70mRNA和Hsp70表达，且表达高峰分别为24，24和48h；(2)14μmol/L和56μmol／L丙泊酚可诱导缺氧鼠脑神经元Hsp70mRNA和Hsc70mRNA表达高峰提前至8h和6h，56μmol／L丙泊酚可使缺氧鼠脑神经元Hsp70表达高峰提前至24h。结论：丙泊酚可从转录和翻译两个水平促进缺氧鼠脑神经元HSP70的表达，产生延迟神经保护作用。     

苦参素对实验性肝癌PCNA、cyclinD1、CDK4表达的影响

目的 :研究苦参素对 2 乙酰氨基芴 (2 AAF)诱发大鼠实验性肝癌的防治作用 ,并探讨其抑制肝癌细胞增殖的机制。方法 :以 2 AAF喂饲SD大鼠制备肝癌模型。给予不同剂量的苦参素腹腔注射 ,观察肿瘤生成状况 ;免疫组化方法检测增殖细胞核抗原 (PCNA)蛋白的表达 ;RT PCR检测细胞周期素D1(cyclinD1)、细胞周期蛋白依赖激酶 4 (CDK4 )mR NA的表达。结果 :苦参素各防治组大鼠肝表面癌结节数明显低于模型组 ,预防组肝表面结节数最少。苦参素各预防治疗组PCNA和cyclinD1、CDK4的表达显著低于模型组 (P <0 .0 1)。结论 :苦参素有预防或延缓 2 AAF诱发大鼠肝癌发生的作用 ,其机制可能通过抑制cyclinD1、CDK4mRNA和PCNA蛋白的表达 ,从而诱导细胞周期阻滞 ,抑制肝癌细胞过度增殖。     

黄芩苷对大鼠脑缺血再灌注损伤后海马神经元HSP70表达的影响

目的研究黄芩苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后海马神经元热休克蛋白质(HSP)70表达的影响。方法Wistar大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注模型组、黄芩苷组(50，100和200 mg·kg^-1)以及尼莫地平0.4 mg·kg^-1组。利用大鼠大脑中动脉内栓线阻断法制备局灶性脑缺血再灌注损伤模型，通过HE染色、流式细胞术、免疫组织化学以及RT-PCR等方法，观察黄芩苷对缺血再灌注损伤大鼠脑组织病理形态学改变、神经细胞凋亡率以及HSP70表达的影响。结果黄芩苷可明显改善缺血再灌注损伤所致的大鼠脑组织病理形态学改变,降低神经细胞凋亡率，促进HSP70基因的转录与翻译。结论黄芩苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用，其作用机制可能与黄芩苷促进HSP70表达、抑制神经细胞凋亡有关。     

热耐受减低鼠脑海马CA1区缺血后hsp 70 mRNA的诱导

目的：观察海马缺血再灌注后hsp 70mRNA的诱导，及其在迟发神经元死亡（DND）的作用意义。方法：制备热耐受及大鼠前脑缺血模型。观察海马CA1区锥体细胞存活情况，并用原位杂交技术检测hsp 70mRNA的诱导情况。结果：短暂缺血后海马CA1区出现DND。热耐受后缺血组的神经元损害明显减轻，hsp 70mRNA表达与缺血组相比明显减低。结论:hsp 70表达增强是减少DND的机制之一，而hsp 70mRNA可能是应激状态较好的指标。将2者综合分析，可以更有效地评价细胞损伤程度与疗效。     

D类细胞周期蛋白与膀胱肿瘤关系的研究现状

D类细胞周期蛋白是细胞周期G1期的主要调控因子,其表达异常与膀胱肿瘤的发生发展有重要关系,对判断肿瘤的生物学特性、预后及指导临床治疗有重要意义,对D类细胞周期蛋白的靶向调节有望为膀胱肿瘤的防治开辟新途径.     

E-cadherin和HSP70在肝细胞癌中的表达

目的:探讨E-cadherin和HSP70在不同分化程度HCC中的表达情况以及两者的相关性。方法:采用免疫组织化学方法,检测41例肝癌组织及5例癌旁正常肝脏组织中E-cadherin和HSP70的表达情况。结果:E-cadherin在正常肝脏组织中呈高表达,而在HCC中表达降低且与分化程度有关,部分低分化的HCC组织中表达缺失(P<0.05);HSP70在HCC中表达升高,与正常组比较差异有显著性,且与分化程度有关。相关性分析发现E-cadherin和HSP70在HCC中的表达成负相关(r=-0.322,P<0.05)。结论:HCC中,E-cadherin表达降低,HSP70表达升高,提示两者在HCC侵袭和转移中存在一定的相关性。     

Prokaryotic expression and purification of fusion protein HSP70-EGFP and its application in the study of dendritic cells internalization antigen

To study the endocytic activity of dendritic cells (DCs) by obtaining fusion protein HSP70-EGFP as exogenous antigen and loading it with DCs derived from human peripheral blood. Fusion protein HSP70-EGFP was prokaryotically expressed, isolated and purified. DCs were isolated and cultured from human peripheral blood. The DCs were divided into 3 groups in the endocytic experiment. There were 10⁶ DCs in each group. Group 1 and 2 were respectively incubated for 30 min. with HSP70-EGFP and EGFP. Group 3 was incubated with HSP70 for 30 min, and then incubated for 30 min. with HSP70-EGFP. Subsequently, 3 groups were placed in an incubator at 37°C for 0.5, 1, 2 and 24 h. Flow cytometry (FCM) was adopted to detect the amount of DCs with EGFP inside. IL-12 Eli-spot was adopted to detect the amount of DCs which secreted IL-12. There were 5 types in the experiment: LPS, inactive LPS, HSP70-EGFP, EGFP and no antigen. Fusion protein HSP70-EGFP was successfully obtained and its molecular weight was 97 000. It accounted for 35.32% of the total protein. Under irradiation of an ultraviolet lamp, the protein solution sent out viridescent fluorescence. The result detected by FCM indicated that after incubation for 0.5 h at 37°C, the positive rate in group 1 was 63%, while the other 2 groups were negative. After incubation for 1, 2 and 24 h at 37°C, the positive rates in the 3 groups were above 80%. The IL-12 Eli-spot examination shows that with HSP70-EGFP being loaded, the amount of DCs secreting IL-12 was 134.09 ± 31.78/10⁵ cells, a little lower than that of DCs with LPS loaded (with the average point of 156.36 ± 15.73). There was no significant difference between the 2 groups (P < 0.01). By contrast, both of them were significantly higher than inactive LPS-(33.78 ± 1.40)/10⁵ cells and EGFP-loaded (23.13 ± 4.57)/10⁵ cells DC groups in the amount of DCs secreting IL-12 (P < 0.01). The results suggest that receptor-mediated phagocytosis plays a main role in the preliminary stage of DCs internalizing HSP70-EGFP. With increasing incubation time, pinocytosis begins to dominate. HSP70-EGFP may promote DCs to secret cell factor IL-12. __________ Translated from Journal of the Fourth Military Medical University, 2007, 28(12): 1057–1060 [译自: 第四军医大学学报]     

纳洛酮对IL-1β致热大鼠体温及下丘脑中cAMP和HSP70含量的影响

目的研究阿片受体在IL-1β致热大鼠发热过程中的作用及机制。方法经大鼠侧脑室微量注射纳洛酮和(或)IL-1β,观察大鼠体温变化情况,并测定下丘脑中cAMP含量和HSP70表达。结果纳洛酮能够减弱IL-1β致热效应,同时下丘脑中cAMP含量和HSP70表达水平也相应减少(P<0.01)。结论阿片受体拮抗剂纳洛酮能够抑制大鼠IL-1β性发热,其机制可能与降低下丘脑中cAMP的合成有关;同时可见HSP70表达水平降低。