兔骨骼肌运动点与运动终板的形态学研究及临床意义

目的:探索运动点的本质是终末神经纤维密集区,还是运动终板密集区,给化学神经阻断技术的定位方法提供理论依据。方法:成年新西兰兔9只,靶肌肉为双侧肱二头肌及双侧腘绳肌。每块肌肉选择2个研究点,共计72个点分为3组:小神经密集区(N组):通过最小电刺激引起最大收缩的部位;运动终板密集区(P组):肌电图显示终板电活动最活跃的部位;非密集区对照组(C组):以最强电流诱发最弱靶肌肉收缩,且连接肌电图后未出现终板电活动的部位;在以上部位注入染料定位。分别记录三组的电刺激强度。通过苏木精-伊红染色和乙酰胆碱酯酶染色,应用图文报告分析软件观察运动终板及神经纤维数量,将3组数据进行统计学分析。结果:电刺激强度比较:C组最大(0.73±0.05)mA,P组次之(0.39±0.04)mA,N组最小(0.10±0.01)mA,3组间两两比较均有显著差异(P<0.01)。神经纤维数量比较:N组最多,P组次之,C组最少。N组与P组之间的差异不显著(P>0.05),但N组与C组,P组与C组之间差异显著(P<0.01)。运动终板数量比较:P组最多,N组次之,C组最少,3组间两两比较差异均有显著性(P<0.05)。结论:终末神经纤维密集区和运动终板密集区十分接近,但是"运动点"概念不同。临床上可以使用电刺激技术作为肉毒毒素肌肉注射的定位技术。     

消瘿强肌汤对甲亢肌病骨骼肌运动终板的影响

目的观察消瘿强肌汤对甲亢肌病大鼠骨骼肌运动终板超微结构的影响和乙酰胆碱酯酶活性的变化。方法36只健康雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组(n=6)和模型组、中药治疗组、生理盐水对照组(均n=10),后3组腹腔注射甲状腺激素钠盐制作甲亢肌病模型,中药治疗组注射甲状腺激素后再灌服中药方剂消瘿强肌汤。光、电镜观察运动终板乙酰胆碱酯酶活性变化及运动终板超微结构的变化。结果模型组各型骨骼肌纤维运动终板乙酰胆碱脂酶活性均较正常对照组明显减弱,酶反应产物减少,分布不均,超微结构显示突触间隙电子密度高低不等,接头褶减少、变短,轴突终末内线粒体空泡化。中药治疗组运动终板乙酰胆碱酯酶活性明显恢复,接头褶结构、轴突终末内部分线粒体结构恢复正常。结论消瘿强肌汤可恢复甲亢肌病骨骼肌运动终板乙酰胆碱酯酶活性,改善骨骼肌运动终板超微结构。     

针刺疗法对大鼠坐骨神经损伤后运动终板的影响

目的：周围神经损伤后,通过对针刺后运动终板（MEP）组织形态变化的观察,探讨针刺治疗周围神经损伤的机理。方法：将150只Wistar大鼠按照每批30只,共分五个时间点进行造模后随机分为电针组、手针组、模型组,于最后一批造模并针刺治疗3d后将全部大鼠处死取材。将术后及针刺治疗3d、7d、14d、21d、28d各组腓肠肌运动终板进行电镜观察,并进行横向、纵向比较。结果：术后3d各组运动终板形态上无明显区别;术后7d,模型组运动终板电镜下观察微观形态的变化较电针组及手针组明显,电针组及手针组仍维持一定程度的正常结构;术后14—28d,各组运动终板开始恢复,电针组恢复较快,至28d时已基本恢复如常,手针组的微观结构与电针组无明显差别,但嵴排列上相对紊乱。模型对照组也明显恢复,但微观结构及突触后膜形态的恢复较电针组和手针组差。结论：针刺治疗可以在周围神经损伤后改善MEP内的营养物质含量和结构。     

神经生长因子对失神经肌肉及其运动终板的作用

目的探讨失神经后,神经生长因子(nervergrowthfactor,NGF)对运动终板(motorendplate,MEP)和肌肉的营养作用。方法用硅胶管桥接大鼠坐骨神经10mm长的缺损,管内注入生理盐水稀释NGF(5ng/μl,20μl/只),对照组注入等量的生理盐水(NS),于术后不同时相点取腓肠肌组织作乙酰胆碱酯酶(AchE)染色和常规HE切片,并检测肌纤维横截面积的变化。结果术后各时相点,NGF组AchE反应明显强于NS对照组,肌纤维截面积也明显较NS对照组粗。结论周围神经损伤后,局部应用NGF可明显减轻运动终板和肌肉的变性程度,促进终板和肌肉的再生。     

酸性成纤维细胞生长因子预防失神经支配肌运动终板退变的酶组织化学变化

目的：观察大鼠右侧腓总神经损伤局部植入酸性成纤维细胞生长因子纤维蛋白凝胶载体后的形态学及酶组织化学的变化。 方法：实验于2005-07／10在南方医科大学珠江医院完成。①选取清洁级SD大鼠30只，随机分为3组：酸性成纤维细胞生长因子＋纤维蛋白凝胶载体组、单纯纤维蛋白凝胶载体组、空白对照组，10只／组。②各组大鼠全麻状态下均切断右侧腓总神经，距神经入肌点约1cm处。酸性成纤维细胞生长因子＋纤维蛋白凝胶载体组缝合神经外膜，失神经支配的胫前肌神经区周围的肌间隙植入圆柱形复合物（含酸性成纤维细胞生长因子25μg，纤维蛋白凝胶载体7．5mg）；单纯纤维蛋白凝胶载体组缝合神经外膜，失神经支配的胫前肌神经区周围的肌间隙单纯植入纤维蛋白凝胶载体7．5mg；空白对照组缝合神经外膜但不给药。③各组大鼠全麻下对称显露双侧胫前肌，行右侧（处理侧）与左侧（正常侧）对比．观察右侧胫前肌外观变化情况，并记录各组右侧胫前肌湿质量。6周后取材进行酶组织化学指标检测。 结果：实验选取SD大鼠30只，全部进入结果分析。①各组胫前肌大体形态学观察结果：酸性成纤维细胞生长因子＋纤维蛋白凝胶载体组两侧胫前肌对称且无明显肌萎缩，肌张力正常；单纯纤维蛋白凝胶载体组及空白对照组右侧胫前肌均明显萎缩，肌肉硬度增加，肌张力下降。②各组肌肉湿质量检测结果的比较：与单纯纤维蛋白凝胶载体组、空白对照组比较，酸性成纤维细胞生长因子＋纤维蛋白凝胶载体组肌肉湿质量明显增大（0．82，0．81，1．26，P〈0．001）。③各组乙酰胆碱酯酶活性检测结果：酸性成纤维细胞生长因子＋纤维蛋白凝胶载体组乙酰胆碱酯酶活性强，接近于正常侧，染色均匀，运动终板结构规则；单纯纤维蛋白凝胶载体组及空白对照组乙酰胆碱酯酶活性弱，染色不均，运动终板结构松散、周边不规则。 结论：酸性成纤维细胞生长因子纤维蛋白凝胶载体可有效保护失神经支配肌运动终板，防止肌肉萎缩。     

酸性成纤维细胞生长因子预防失神经支配肌运动终板退变的酶组织化学变化

目的:观察大鼠右侧腓总神经损伤局部植入酸性成纤维细胞生长因子纤维蛋白凝胶载体后的形态学及酶组织化学的变化。方法:实验于2005-07/10在南方医科大学珠江医院完成。①选取清洁级SD大鼠30只,随机分为3组:酸性成纤维细胞生长因子 纤维蛋白凝胶载体组、单纯纤维蛋白凝胶载体组、空白对照组,10只/组。②各组大鼠全麻状态下均切断右侧腓总神经,距神经入肌点约1cm处。酸性成纤维细胞生长因子 纤维蛋白凝胶载体组缝合神经外膜,失神经支配的胫前肌神经区周围的肌间隙植入圆柱形复合物(含酸性成纤维细胞生长因子25μg,纤维蛋白凝胶载体7.5mg);单纯纤维蛋白凝胶载体组缝合神经外膜,失神经支配的胫前肌神经区周围的肌间隙单纯植入纤维蛋白凝胶载体7.5mg;空白对照组缝合神经外膜但不给药。③各组大鼠全麻下对称显露双侧胫前肌,行右侧(处理侧)与左侧(正常侧)对比,观察右侧胫前肌外观变化情况,并记录各组右侧胫前肌湿质量。6周后取材进行酶组织化学指标检测。结果:实验选取SD大鼠30只,全部进入结果分析。①各组胫前肌大体形态学观察结果:酸性成纤维细胞生长因子 纤维蛋白凝胶载体组两侧胫前肌对称且无明显肌萎缩,肌张力正常;单纯纤维蛋白凝胶载体组及空白对照组右侧胫前肌均明显萎缩,肌肉硬度增加,肌张力下降。②各组肌肉湿质量检测结果的比较:与单纯纤维蛋白凝胶载体组、空白对照组比较,酸性成纤维细胞生长因子 纤维蛋白凝胶载体组肌肉湿质量明显增大(0.82,0.81,1.26,P<0.001)。③各组乙酰胆碱酯酶活性检测结果:酸性成纤维细胞生长因子 纤维蛋白凝胶载体组乙酰胆碱酯酶活性强,接近于正常侧,染色均匀,运动终板结构规则;单纯纤维蛋白凝胶载体组及空白对照组乙酰胆碱酯酶活性弱,染色不均,运动终板结构松散、周边不规则。结论:酸性成纤维细胞生长因子纤维蛋白凝胶载体可有效保护失神经支配肌运动终板,防止肌肉萎缩。     

失神经支配骨骼肌的变化

目的：剧烈运动导致的神经损伤往往会影响骨骼肌的功能，为更好治疗和恢复各种原因引起的失神经支配骨骼肌的萎缩和变化，对骨骼肌失神经支配后肌肉变化规律进行综述。 资料来源：应用计算机检索Medline1980—01／2005-10与失神经肌肉变化相关的文章，检索词“losing innervation，muscle”，并限定文章语言种类为“English”。检索中国期刊全文数据库1980—01／2005-10的相关文献，检索词“失神经，肌肉”，限定文章语言种类为中文。 资料选择：对资料进行初审，选取失神经肌肉变化相关文献。并查找全文，排除重复性研究及经验和个案报告文献。 资料提炼：在检索85篇文献中有40篇文献是关于失神经后肌肉的变化等研究的文献。删除16篇重复性研究，进行资料整理．选用其中24篇作为参考文献。 资料综合：失神经支配后的骨骼肌中Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-ATP酶的活性和肌糖原含量随失神经时间的延长而降低，而脯氨酸-4-羟化酶的含量和活性都有提高，亚细胞结构变的杂乱无序，成肌调节因子家族在失神经后大量表达对神经在支配其很重要作用。 结论：对各种失神经骨骼肌萎缩的治疗要尽量减少以上的退行性变化，为神经再支配和肌肉功能的恢复打下基础。     

大鼠完全性脊髓损伤后降钙素基因相关肽与运动终板的关系

目的 观察大鼠完全性脊髓损伤后降钙素基因相关肽(CGRP)和乙酰胆碱酯酶(AChE)在骨骼肌运动终板中的变化特点及运动终板的变化。方法 采用Wistar大鼠制作T10脊髓横断模型，分别于损伤后1、2、4、8周取胫前肌肌腹标本，以免疫组化法检测AChE和CGRP在运动终板中的变化。结果 脊髓横断1周后CGRP在运动终板中的数量、分布即明显减少，着色变浅，而AChE在运动终板中的变化发生在损伤后4周时；运动终板中CGRP和AChE始终未完全消失。结论 上运动神经元损伤后骨骼肌运动终板存在退变现象；AChE和CGRP与运动终板的退变相关；检测CGRP能更早地显示运动终板的改变。     

失神经支配的骨骼肌萎缩与防治

背景:随着当今医学的发展,失神经支配骨骼肌萎缩的防治已取得了显著的进步,但临床疗效仍不十分满意.目的:对火神经支配骨骼肌萎缩防治方法的研究现状作一总结,试图寻找更为有效的失神经支配骨骼肌萎缩防治方法.方法:以denervation,muscle atrophy,treatment为检索词,检索Medline数据库(1998-01/2008-01).以失神经,肌萎缩,治疗为检索词,检索中国期刊全文数据库(1998-01/2008-01)、万方数据库(1998-01/2008-01)和<中国临床康复>杂志(1998-01/2008-01).文献柃索语种限制为英文和中文.以肌肉的耐力及收缩力、失神经的肌湿重和骨骼肌的修复情况为评价指标.纳入研究失神经支配骨骼肌萎缩的显微外科手术方法、物理疗法、生物和化学疗法、基因疗法.排除上述方法之外失神经支配骨骼肌萎缩的其他疗法.结果与结论:周围神经损伤后,骨骼肌失神经支配将不可避免的发生萎缩.因此,探索失神经支配骨骼肌萎缩的防治方法,吸引了国内外许多学者的兴趣,必将成为21世纪周围神经领域内的重要任务和研究热点.显微外科手术、物理疗法、生物和化学疗法、基因疗法等都是失神经支配骨骼肌萎缩有效的防治手段.目前,该领域的研究已经呈现多角度、多方面的趋势.失神经肌萎缩的防治方面已经有了针对性的措施,但在改善微循环、防止细胞凋亡、抑制胶原过度生长以及如何应用基因治疗的方法在基因水平改变生肌调节因子的表达等方面,还有大量工作需要进行.随着组织工程学、细胞培养学、分子生物学、基因工程等方面的不断发展,防治失神经肌萎缩必定会有新的突破.     

颈椎退变对终板倾斜角的影响

目的：探讨颈椎退变对终板倾斜角的影响及其临床意义。方法：随机选取21-30岁正常人和51～60岁颈椎退变性疾病患者各40例，将其颈椎侧位X线片扫描至计算机，使用Sigma Scan Pro 5软件测量C3～C7终板倾斜角，比较其差异。结果：51-60岁颈椎退变性疾病患者的C3～C7上、下终板倾斜角均明显〉21～30岁正常人组，且差别显著（P〈0.01）。结论：C3～C7上、下终板倾斜角随颈椎退行性改变均明显增大。     

细胞外ATP防治失神经肌肉萎缩的实验研究

目的研究细胞外ATP对于失神经肌肉萎缩的作用。方法采用大鼠坐骨神经切断后腓肠肌肌注ATP模型,检测肌湿重,肌肉横断面面积和运动终板染色及图象分析。结果肌注ATP侧肌湿重、肌肉横断面面积和运动终板染色平均灰度值与生理盐水肌注组对照具有显著差异(P<0.05)。结论细胞外ATP对于防止或延缓失神经肌肉萎缩的发生具有一定的作用。     

分米波对神经损伤后运动终板再生的影响

目的:探讨分米波对神经损伤吻合术后肌肉运动终板(MEP)再生的影响。方法:大鼠坐骨神经离断后行9-0无损伤线吻合,术后实验组行分米波局部辐射,每周5次,分别于术后第4周、8周、12周观察运动终板显微结构的变化及乙酰胆碱酶(AchE)含量的变化。结果:各时间点实验组大鼠腓肠肌运动终板再生和AchE含量明显高于对照组。结论:周围神经损伤后,局部应用分米波辐射可明显促进终板再生和提高AchE含量,从而促进运动功能的恢复。     

Stem cells treatment for sciatic nerve injury

Introduction: Sciatic nerve injury is common and usually results in degeneration of the distal axons and muscle denervation. Chronic muscle atrophy and fibrosis limit the recovery of muscle function and severely compromises efforts to restore muscle function. Despite early diagnosis and modern surgical techniques there is still poor functional recovery.

Areas covered: Stem cell transplantation has been investigated as a promising treatment strategy for peripheral nerve injury, and has demonstrated utility in limiting neuronal damage. The focus has been on the isolation of stem cells from bone-marrow and adipose tissue in addition to embryonic and neuronal stem cells. Transplantation of these cells into transected sciatic nerve in animal models demonstrates clinical improvement, inducing vigorous nerve regeneration accompanied by myelin synthesis. Cell replacement, trophic factor production, extracellular matrix molecule synthesis, guidance, remyelination, microenvironmental stabilization and immune modulation have been postulated as possible mechanisms for stem cell implantation.

Expert opinion: Although further research is still needed, this therapeutic approach will probably become a routine treatment technique in the coming years, especially with bone marrow mesenchymal stem cells. We believe that the most promising results were noted for the use of stem cells of this origin in the treatment of sciatic nerve injury.     

Transplantation of embryonic motor neurons into peripheral nerve combined with functional electrical stimulation restores functional muscle activity in the rat sciatic nerve transection model

Reinnervation of denervated muscle by motor neurons transplanted into the peripheral nerve may provide the potential to excite muscles artificially with functional electrical stimulation (FES). Here we investigated whether transplantation of embryonic motor neurons into peripheral nerve combined with FES restored functional muscle activity in adult Fischer 344 rats after transection of the sciatic nerve. One week after sciatic nerve transection, cell culture medium containing (cell transplantation group, n = 6) or lacking (surgical control group, n = 6) dissociated embryonic spinal neurons was injected into the distal stump of the tibial and peroneal nerves. Electrophysiological and tissue analyses were performed in the cell transplantation and surgical control groups 12 weeks after transplantation, as well as a in naïve control group (n = 6) that received no surgery. In the cell transplantation group, ankle angle was measured during gait, with and without FES of the peroneal nerve. Ankle angle at mid‐swing was more flexed during gait with FES (26.6 ± 8.7°) than gait without FES (51.4 ± 12.8°, p = 0.011), indicating that transplantated motor neurons in conjunction with FES restored ankle flexion in gait, even though no neural connection between central nervous system and muscle was present. These results indicate that transplantation of embryonic motor neurons into peripheral nerve combined with FES can provide a novel treatment strategy for paralysed muscles. Copyright © 2013 John Wiley & Sons, Ltd.     

坐骨神经震荡伤后腰髓背根神经节病理改变及意义

目的　应用图像分析和免疫组织化学技术观察和分析兔坐骨神经高速弹丸震荡伤后腰髓背根神经节病理改变及意义。方法　大耳白兔 2 5只 (包括正常对照 5只 ) ,致伤靶点为右后肢外侧坐骨神经体表投影线中点 (0 38g钢珠 ,0 6 5g装药量 ) ,观察伤后 1、3、7、14d(n =5 )腰髓背根神经节病理改变及一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthase ,NOS)表达变化 (免疫组化法 ) ,并进行神经元计数及神经元截面积图像分析。结果　腰髓背根神经节伤后发生出血、水肿、神经元皱缩、坏死等变化 ,伤后 3dNOS表达显著增强 ,伤后 7d神经元数显著减少 ,神经元平均截面积显著减少。结论　坐骨神经高速弹丸震荡伤后腰髓背根神经节发生了较重的损伤。     

坐骨神经损伤后相应脊髓前角运动神经元的形态学变化

目的探讨坐骨神经损伤与修复过程中相应脊髓前角外侧核运动神经元的形态学变化,并对神经元尼氏染色法的应用价值进行评估。方法采用硅胶管套接切断的大鼠坐骨神经模型,应用焦油紫染色、甲苯胺蓝染色和硫堇染色等3种尼氏法对伤后7、14、30d脊髓前角运动神经元进行形态学观察。结果应用3种染色方法均观察到坐骨神经伤侧脊髓前角外侧核大、中型运动神经元的形态结构和存活率与对照侧有明显差别。与对照侧比较,伤后7d伤侧脊髓神经元数目减少,存活率降低;伤后14d和伤后30d,尤其是伤后30d,伤侧脊髓神经元数目减少更显著,存活率下降更明显,有些神经元轮廓不清且尼氏体模糊。结论随着大鼠坐骨神经损伤时间的延长,其相应脊髓前角运动神经元的损伤程度逐渐增加,尤其是伤后30d退变非常明显。焦油紫染色方法是显示神经元尼氏体及反映神经元生活状态的简捷有效的方法。     

鼠神经生长因子不同给药方式修复周围神经损伤

背景：鼠神经生长因子对神经损伤后的修复和再生有促进作用,但目前实验研究表明不同用药方式的作用尚有争议。目的：评价鼠神经生长因子不同给药方式治疗周围神经损伤的临床疗效。方法：52例周围神经损伤的患者随机分为2组,试验组27例局部注射鼠神经生长因子;对照组25例全身注射鼠神经生长因子,1次/d,一个疗程4周,比较两组患者神经功能的修复情况及疗效。结果与结论：与对照组相比,试验组优良率85%（23例）,有效率93%（25例）;对照组的优良率72%（18例）,有效率84%（21例）,两组优良率与有效率相比试验组显著优于对照组（P〈0.05）。试验组中13例出现注射部位一过性痛,其中1例患者口服镇痛药物缓解;对照组中12例患者出现注射部位一过性疼痛,未做处理。结果提示,鼠神经生长因子治疗周围神经损伤安全有效,局部注射疗效优于全身用药。     

汶川地震后什邡市周围神经损伤患者调查分析

目的:筛查2008年汶川地震后9个月什邡市6个重灾镇的周围神经损伤患者,并调查这些患者接受康复指导与治疗的情况。方法:调查的什邡市六个重灾镇包括蓥华、红白、师古、八角、湔底和洛水。采用三级筛查方法:第一级,村医将所有在地震中受伤患者的名字列表;第二级,镇医对所有受伤的患者进行体格检查,挑选出可疑周围神经损伤的患者;第三级,来自北京大学第一医院的专家对经过两次筛查的患者进行再次体格检查,初步确定周围神经损伤的人群并定位损伤的神经。在进行第三级筛查的同时,对筛查的对象进行康复医疗状况的问卷调查。最后,对三级筛查出的可疑周围神经损伤的患者进行肌电图检查,确定肌电图表现出周围神经损伤的患者。结果:共有372例进入了第三级筛查。经过三级筛查后,140例存在疑似周围神经损伤,其中,31例(22%)存在疑似运动神经损伤,26例(19%)存在疑似感觉神经损伤,83例(59%)存在疑似混合神经损伤。对于所有疑似周围神经损伤的患者,仅42例(30%)接受过康复指导或治疗。105例进行了肌电图检查,48例存在周围神经损伤的异常肌电图表现。另外,进入第三级筛查的患者中123例存在疼痛,16例日常生活活动能力Barthel指数评测低于正常。结论:地震后9个月仍有许多存在周围神经损伤或疼痛或日常生活活动能力受限的患者,但是大多数人没有接受过康复指导或治疗。在重大灾难的救援中,需要关注潜在的周围神经损伤问题,并且及时给予康复治疗。     

四肢常见周围神经损伤的康复问题

此文对周围神经损伤分类、临床检查和测评进行了阐述,介绍各种康复治疗方法包括支架、肌力训练、物理治疗、感觉再教育、作业疗法的应用原则,说明周围神经损伤的康复治疗对神经再生、功能重建及保护肢体功能方面起着十分重要的作用,可使神经的恢复达到最大程度.     

Functional recovery of denervated muscle by neurotization using nerve guidance channels

Tissue‐engineered muscle has been proposed as a means of repairing volumetric muscle defects to restore anatomical and functional recovery. We have previously demonstrated that denervated muscle, which is analogous to engineered muscle construct, can be reinnervated by direct transplantation of host nerve (neurotization) in a rat model. However, the use of this approach is not possible if the length of host nerve is inadequate and cannot be mobilized to the insertion site of the engineered muscle. In this study we investigated whether neurotization coupled with nerve guidance channels would increase the regeneration of neuromuscular junctions (NMJs) in completely denervated muscle and encourage neurofunctional recovery. Seventy‐two Lewis rats were evaluated in three groups, a normal control group (n = 8), a denervated group (n = 32) and a neurotization coupled with nerve guidance group (n = 32). Neurofunctional behaviour and histological evaluations were performed at 4, 8, 12 and 20 weeks postoperatively. Extensor postural thrust (EPT) and compound muscle action potential (CMAP) amplitude were significantly improved in the nerve guidance group when compared with the denervated group, even though these values were different from those of the normal control group at 20 weeks postoperation. Regeneration of axons and NMJs was demonstrated histologically in the nerve guidance group. Neurotization coupled with nerve guidance channels leads to regeneration of axons and NMJs in completely denervated muscle. To our knowledge, this is the first report to show that nerve guidance can allow re‐innervation in denervated muscle containing long‐gap nerve injuries. Copyright © 2013 John Wiley & Sons, Ltd.