毛竹林下多花黄精仿野生栽培技术

目的：毛竹林下仿野生栽培多花黄精,以扩大黄精种植途径,并为其仿野生栽培提供试验依据。方法：根据竹林内毛竹的疏密及山势、坡度整地挖穴,选择健壮,具顶芽的根茎做种栽,其锄草、松土、施肥等结合竹林管理统一进行。结果：毛竹林下仿野生栽培多花黄精3年后,产量可达1 500～1 800 kg·hm-2;经检验,其品质符合2010年版《中国药典》黄精质量标准规定。结论：有计划地进行毛竹林下黄精仿野生栽培,既不占用农田,减少了投入,有利于发展林下多种经济,又保护和改善了生态环境,增加了竹农收入,扩大了黄精种植途径。     

多花黄精炮制方法考证与研究进展

为了更好地运用现代技术提升黄精根茎炮制工艺,该文对黄精炮制方法进行了古法考证及文献研究.经考证,黄精始载于《名医别录》,炮制方法始载于《抱朴子内篇》,古代用药黄精基原植物以轮叶系的滇黄精、黄精、粗毛黄精、轮叶黄精和对叶系的棒丝黄精为主,互叶系的多花黄精和长梗黄精为辅;多花黄精作为药用黄精使用史见于宋朝,民国开始作为药用...     

浙江多花黄精及长梗黄精的鉴定研究

黄精,始载于晋代《名医别录》,列为上品。中医学认为,黄精性平,味甘,入脾、肾、肺经,具有补肾益精、滋阴润燥之功效,长期用于治疗肾虚亏损,脾胃虚弱,肺虚燥咳,体倦乏力等症,并有“血气双补之王”的美称。     

多花黄精组培快繁技术初探△

目的：初步研究福建多花黄精快速繁殖技术,方法：以多花黄精的根茎为外植体,比较不同的消毒剂和消毒时间,不同的细胞分裂素对多花黄精快繁的影响,优选出最适条件。结果：0．2％HgCl2消毒15min最佳,污染率低存活率高;BA比其他细胞分裂素有利于多花黄精的分化,在其浓度40mg·L^-1时,增殖系数最高为2．80。     

多花黄精化学成分分离鉴定

目的:对多花黄精根茎的正丁醇和二氯甲烷部位的化学成分进行分离,并对所得化合物进行结构鉴定。方法:多花黄精的干燥根茎经江西建昌帮传统炮制方法—炆法炮制,60℃烘干,粉碎,70%乙醇浸泡1 h,加热回流提取2次,滤过,提取液合并浓缩,依次用两倍体积的二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇溶液分别萃取3次,萃取液分别减压浓缩至干,得二氯甲烷萃取部分、乙酸乙酯萃取部分和正丁醇萃取部分。用大孔吸附树脂,反复硅胶柱,LH-20型羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20),YMC-HPLC制备柱等技术对多花黄精根茎的正丁醇和二氯甲烷部位进行分离纯化,根据化合物的理化常数测定及波谱数据分析鉴定化合物结构。结果:从多花黄精根茎的正丁醇和二氯甲烷萃取部位中分离得到14个化合物,分别鉴定为(25S)spirostan-5-en-12-one-3-O-D-glucopyranosyl-(1→2)-O-[β-D-xylopyranosyl(1→3)]-O-β-D-glucopyranosyl(1→4)-β-Dgalactopyranoside(1),(25S)spirostan-5-en-12-one-3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→2)-O-[β-D-glucopyranosyl-(1→3)]-O-β-Dglucopyranosyl-(1→4)-β-D-galactopyranoside(2),邻苯二甲酸二丁酯(3),胡萝卜苷(4),β-谷甾醇(5),hypofuran B(6),(25R)-3-β-hydroxyspirost-5-en-12-one(7),(+)-medioresinol(8),黄精碱A(9),5-羟甲基糠醛(10),5-羟基麦芽酚(11),2-(4-羟苯基)乙醇(12),1H-吲哚-3-甲醛(13),黄精碱B(14)。结论:化合物4,5,9,14为首次从多花黄精中分离得到,化合物6,8,12,13为首次从黄精属植物中分离得到。该研究为多花黄精综合开发及天然植物药理活性研究提供化学依据和物质参考。     

不同产地多花黄精生态因子与品质形成的相关性分析

目的 研究不同产地多花黄精品质形成与生态因子的相关性,为黄精药材的规范化种植布局、引种栽培及资源可持续利用提供参考。方法 分析浙江、福建、安徽、江西、湖南、湖北6个产区31个产地的多花黄精的形态特征和有效成分含量,应用单因素方差分析,评价不同产地多花黄精质量与生态因子的相关性。结果 不同产地多花黄精形态和有效成分含量差异较大,纬度、海拔、年均温、7月均温、日照时数及无霜期对多花黄精质量有较大的影响。纬度和年均温对多花黄精有效成分含量影响较大,纬度和叶宽呈显著正相关,海拔和株高、叶长、叶宽及根茎鲜质量呈显著负相关,年均温与叶宽呈负相关,7月均温和多糖含量呈显著正相关,叶片数量和日照时数、积温及无霜期呈显著性负相关,土壤中有效磷、速效钾有利于黄精株高、根茎和叶片的生长,水解性氮含量与叶长呈显著负相关,地上部分与地下根茎产量呈显著正相关。结论 在进行多花黄精规范化种植过程中,应注意海拔、温度、无霜期、土壤酸性、生长期温度、磷肥及钾肥施用等对药材质量的影响。     

基于叶绿体基因序列黄精和多花黄精遗传多样性分析

目的 基于叶绿体基因联合序列分析不同地理居群黄精和多花黄精遗传多样性.方法 目的序列经PCR扩增、测序、拼接和比对后,DnaSP分析单倍型多态性,Permut计算遗传分化,Arlequin分析居群标准分子变异,最后构建基于遗传距离的系统发育树.结果 94条黄精序列存在2个多态性位点,得到3个单倍型,居群间总遗传多样性为...     

不同种源多花黄精生物生态特性研究

连续3年进行物候观测、产量对比,研究不同种源多花黄精生物生态特性,并分析探讨其多糖含量与原生地多年生态环境相关性。研究结果表明:多花黄精整个生长期为201~240 d,不同种源各有差异,最短的与最长的相差39 d,平均值为218.8 d;可分出苗期、伸长期、开花期、果实期和枯萎期,其中出苗期为24~38 d,伸长期为38~45 d(从出土到展叶10~15 d),开花期36~47 d,果实期为116~134 d(结果期20~40 d),枯萎期为75~108 d;种植2年增产最明显的为浙江庆元种源173.1%,其次为安徽青阳种源164.5%、浙江莲都种源161.7%、浙江安吉种源159.8%;优质多花黄精对各项生态因子的要求为:空气湿度78.9%,活动积温4791.4℃,日照时数1 691,年降水量平均1463 mm,七月最高温30.6℃,一月最低温1.1℃。     

不同生境下多花黄精化学成分比较

目的比较不同生境下多花黄精的化学成分。方法采集浙江地区不同生境下的多花黄精,分别测定多花黄精的折干率、浸出物、黄精多糖、总黄酮、总皂苷和总酚含有量,采用主成分分析法对各样品的质量进行综合评价。结果折干率以毛竹林生境下最高为23.65%;浸出物以锥栗林生境下最高为72.93%;黄精多糖及总皂苷亦以锥栗林生境下最高分别为7.18%和84.98 mg/g;总黄酮以大田生境下最高为12.53 mg/g;总酚则以毛竹林生境下最高为1.67 mg/g。不同生境下多花黄精折干率、浸出物、多糖及总皂苷含有量差异显著;折干率与化学成分含有量均呈正相关。不同生境下多花黄精综合得分排名依次为锥栗林、毛竹林、常绿阔叶林、大田、针阔混交林。结论锥栗林生境下种植的多花黄精根茎所含有效成分累积最多,锥栗与多花黄精的林下复合种植模式值得推广。     

泰山多花黄精试管苗生根技术研究

目的:提高泰山黄精试管苗的生根率,为其快速繁殖提供依据。方法:以泰山多花黄精试管苗为试验材料,以改良MS为基本培养基,研究了不同水平NAA、蔗糖、暗培养时间对生根产生的影响。结果:暗培养和NAA对生根率有显著影响,蔗糖的影响作用较小;NAA在0.5～1.0mg·L-1、蔗糖在20～30g·L-1时,单株生根条数较多,而暗培养时间长短对其单株生根条数影响不大;NAA浓度的大小对其生根长度影响最大,蔗糖和暗培养时间对生根长度影响不大。结论:试管苗生根的最佳培养组合为:改良1/2MS+NAA0.5mg·L-1+蔗糖20g·L-1+暗培养7d,生根率高达96%,有效解决了黄精组培快繁中生根率低的问题。     

九华黄精本草考证

查阅古今文献,对九华黄精的基原植物及药材使用进行本草考证。九华黄精基原植物为多花黄精,叶序类型为互叶型;九华黄精作为药用,其炮制方法主要为九蒸九晒法,近现代九华黄精从药用转为食用,可以进行九华黄精的食品开发,为九华黄精的现代化生产打下基础;但是目前仅能确定湖南、贵州、广西、安徽九华山所产多花黄精为佳,因此需进一步研究从而确定现代九华黄精是否可以成为道地药材。     

栽培基质对多花黄精组培苗生长的影响

目的 研究解决多花黄精Polygonatum cyrtonema组培苗移栽后成苗率低、长势差和叶部病害危害等问题。方法 以多花黄精组培苗为实验材料,采用福建地区生产上常用的2种商品基质和以泥炭土、珍珠岩、蛭石、沙、菌渣、草木灰为原料自行配制的6种基质,其中T5和T7基质中添加专用的育苗营养液。测定不同基质的理化特性,研究不同基质对多花黄精组培苗成苗率、生物学性状、生长量、壮苗指数、叶部病害发病率的影响,探索不同栽培基质理化特性与多花黄精组培苗生物学性状、生长量、壮苗指数的相关性。结果 不同的栽培基质对多花黄精组培苗的成苗率、形态指标、生长量、评价指标和叶部病害发病率影响较大,不同基质容重与多花黄精组培苗株高存在显著负相关,不同基质有机质含量同多花黄精组培苗全株鲜质量、干质量存在显著正相关。自行配制的T5基质处理的多花黄精组培苗成苗率、形态指标、壮苗指数优于其他基质,植株生长健壮,未发现叶部病害。结论 自行配制的T5基质可作为多花黄精组培苗栽培基质推广应用。     

多花黄精粗多糖抗肿瘤活性研究

目的:研究多花黄精粗多糖(PSP)体内外抗肿瘤作用。方法:采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)考察PSP对S180肿瘤细胞和人乳腺癌细胞株(MCF-7)的增殖抑制作用;以小鼠S180肉瘤为模型,考察PSP对体内肿瘤生长的抑制作用。结果:PSP对S180肿瘤细胞及MCF-7有较明显的增殖抑制作用,且呈现良好的浓度-效应依赖关系,但其IC50>30μg·mL-1;PSP对小鼠S180肉瘤也有显著的抑制作用,并能显著提高S180荷瘤小鼠的脾脏指数及胸腺指数,且呈现良好的剂量-效应关系。结论:PSP可有效抑制S180肉瘤的生长,促进荷瘤鼠胸腺和脾脏的生长发育,可通过提高动物的免疫功能来达到控制和杀灭肿瘤细胞的目的。     

多花黄精地上部分化学成分的研究

目的研究多花黄精Polygonatum cyrtonema地上部分的化学成分。方法采用色谱分离技术进行分离和纯化,并根据波谱学数据鉴定化合物的结构。结果从多花黄精地上部分的甲醇提取物中分离得到15个化合物,分别鉴定为(3R)-5,7-dihydroxy-3-(2'-hydroxy-4'-methoxybenzyl)-chroman-4-one(1)、5,7-dihydroxy-6-methyl-3-(2',4'-dihydroxybenzyl)-chroman-4-one(2)、5,7-dihydroxy-6-methyl-3-(4'-hydroxybenzyl)-chroman-4-one(3)、(3S)-3,7-dihydroxy-8-methoxy-3-(3',4'-methylenedioxybenzyl)-chroman-4-one(4)、芹菜素(5)、山柰酚(6)、香草酸(7)、反式对羟基桂皮酸(8)、反式对羟基桂皮酸甲酯(9)、水杨酸(10)、(+)-丁香脂酸(11)、balanophonin B(12)、咖啡酸(13)、苯丙氨酸(14)和松柏醛(15)。结论化合物1、2、7、11、14和15为首次从多花黄精中分离得到,化合物3、4和12为首次从黄精属植物中分离得到。     

多花黄精遗传多样性和遗传变异规律研究

目的揭示多花黄精遗传多样性及地理分布特征。方法采用ISSR分子标记技术,对来自浙江、安徽、江西、福建、湖南、湖北6省20个种源118株多花黄精进行综合分析。结果 16条引物共扩增出130条清晰条带,其中多态性条带123条,平均多态百分率(PPL)为94.62%,种源内遗传多样性在33.85%～60.00%,平均Nei’s基因多样度(H_e)为0.1838,Shannon信息指数(I)为0.267 4,遗传分化系数(G_st)为0.529 3。UPGMA聚类分析显示,同一种源的种质基本上聚在一起,说明种源间的遗传分化大于种源内不同个体间的基因遗传分化;在遗传相似系数值等于0.61时可将118份种质聚为武夷山脉、武陵山脉和罗霄山脉、大别山脉、洞宫山脉和天目山脉4类。结论多花黄精具有丰富的遗传多样性,遗传变异与山脉密切相关,山脉之间的平原、水域隔离可能是导致群体间遗传分化的主要原因之一。研究结果对黄精种质资源保护、品种选育具有重要的理论价值与现实意义。     

多花黄精挥发油GC-MS分析及其生物活性研究

目的分析多花黄精根状茎挥发油成分及检测其抑菌和抗肿瘤生物活性.方法采用水蒸汽蒸馏法(sD)提取挥发油,用气相色谱.质谱(GC-MS)联用技术分析多花黄精根状茎精油的成分,生物活性检测采用杯碟法和Alamar blue法.结果共鉴定出16个化合物,占总挥发油的95.97%,该挥发油对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、红酵母均有较强的抑制能力;对人肺癌细胞(NCI-H460)有显著的抑制作用,当浓度达到100μg·mL-1,抑制率达到98.08%.结论实验结果表明多花黄精挥发油成分具有较强的生物活性,为进一步研究其药理作用提供了科学依据.     

多花黄精转录组SSR位点分析及分子标记开发

目的基于转录组测序数据鉴别和分析多花黄精EST-SSR位点,开发可用于多花黄精种质资源评价与利用的SSR标记。方法利用MISA工具从多花黄精转录组126 544条Unigenes中鉴定SSR位点并进行分析;利用Primer 3.0设计SSR引物,随机选择50对SSR引物进行有效性验证。结果从9 982条Unigenes中鉴定出12 317个包含2～6个核苷酸重复类型的SSR位点,SSR的分布频率为9.73%,发生频率为1/5.91 kb;SSR位点中的主导类型是二核苷酸重复,占总SSR的53.14%,其次是三核苷酸重复,占33.31%。SSR引物的有效性筛选显示,50个SSR引物对中有29个(58%)可从多花黄精中扩增出预期大小的SSR条带。SSR荧光标记的毛细管电泳检测显示在多花黄精的7个SSR位点共鉴定出了9种基因型,进一步验证了SSR引物的有效性。结论多花黄精转录组SSR位点出现频率高,重复类型丰富,多态性较高,这将为多花黄精遗传多样性分析和遗传图谱构建提供大量有价值的候选标记,也可为黄精属内种间物种的分子鉴别、多花黄精优良品种的分子辅助育种提供技术手段。     

基于DNA条形码的多花黄精系统发育和变异位点分析研究

目的对来自不同地域的多花黄精野生资源的核糖体内转录间隔区2(internal transcribed spacer 2,ITS2)和psbA-trnH基因间隔区序列进行系统发育分析,探索不同地理来源的多花黄精资源的遗传多样性和亲缘关系。方法用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)的方法扩增获得多花黄精ITS和psbA-trnH的核酸序列,与美国国家技术信息中心(NCBI)相对应的核酸序列比对获得多花黄精ITS2和psbA-trnH核酸序列。用邻接法(Neighbor joining)构建系统发育树,用Kimura two-parameter(K2-P)模型分析遗传距离,用Mega和DNAman软件进行多重比对分析。结果安徽青阳样品的ITS2序列为224bp,其余24份样品的ITS2序列均为225bp,福建泰宁的1份样品为620bp,其余24份多花黄精样品的psbA-trnH序列均为621 bp,2个序列分别存在7个和4个变异位点。采用ITS2序列构建的系统发育树将25份资源分为2个大的类群,湖南和贵州的5份资源种群聚为一类,其他20份资源聚为一类,遗传距离显示来自贵州花溪、剑河的样品和来自福建建阳的遗传距离最大;采用psbA-trnH序列构建的系统发育树则无法将不同地域多花黄精资源区分开。结论系统发育和变异位点分析为多花黄精资源的进化研究、道地性评价奠定了理论基础,变异位点的分析可用于相关资源的鉴定。