Ihh-PTHrP负反馈信号通路对髁突软骨内成骨作用的研究现状

临床研究发现,颌面部发育畸形的患者,尤其是Ⅱ类错患者,常同时伴有颞下颌关节盘前移位,而青少年期颞下颌关节盘前移位与颌面部发育畸形存在密切关系。其原因可能与关节盘移位导致髁突表面的应力分布发生改变有关,但具体机制尚不明确。印度豪猪蛋白(Ihh)-甲状旁腺相关蛋白(PTHrP)信号通路是调节骨骺生长板软骨细胞增殖、分化、肥大和矿化的重要负反馈轴,在软骨内成骨中发挥着关键的作用。同时,Ihh是机械应力信号向生物信号转导的重要媒介,介导机械应力信号向刺激软骨生长的生物信号转化。本文对Ihh-PTHrP负反馈信号通路对下颌骨髁突软骨内成骨作用的研究现状作一综述。     

颞下颌关节盘前移位后髁突软骨细胞基质基因表达的变化

目的　探讨颞下颌关节盘前移位后髁突软骨细胞基质基因表达的变化。方法　建立40只大白兔颞下颌关节盘前移位动物模型,用地高辛标记cRNA探针原位杂交技术,检测术后不同病变时期髁突软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白多糖聚合体基因表达的改变。结果　正常髁突的增殖层深层、肥大层和钙化层细胞胞浆内可见大量Ⅱ型胶原和蛋白多糖聚合体mRNA表达。术后1周蛋白多糖聚合体开始下调,至2周达低谷,6周后恢复至正常水平。Ⅱ型胶原4周后开始持续下降,其表达下降程度较蛋白多糖聚合体显著,8周后逐渐恢复正常。结论　关节盘前移位后髁突软骨的基质基因表达发生有序、协调的变化,这种变化意味着适应性改建的启动。     

生长期兔颞下颌关节盘前移位后髁突软骨胶原表达的变化

目的:建立生长期兔颞下颌关节不可复性关节盘前移位动物模型,检测髁突软骨内Ⅱ型胶原和X型胶原的表达,探讨青少年颞下颌关节盘不可复性前移位与髁突软骨内成骨的关系,及其与下颌骨发育不对称畸形之间存在相关性的机制.方法:取生长期新西兰大白兔40只,右侧颞下颌关节手术建立不可复性关节盘前移位模型,左侧行假手术作为对照.实验动物于建模后24 h、1、4、8、12周分组处死取材.通过免疫组织化学方法检测髁突软骨组织内Ⅱ型胶原和X型胶原在蛋白水平的表达,采用PASW statistics 18.0软件包对每组样本实验侧和对照侧进行配对t检验.结果:Ⅱ型胶原在盘移位后24h、1、4、8周时与对照侧均无显著差异,12周时较对照侧表达升高(P＜0.05).X型胶原在盘移位后24 h(P＜0.01)、1周(P＜0.01)、4周(P＜0.05)时较对照侧显著降低,8周、12周时实验侧与对照侧间无显著差异.结论:不可复性关节盘前移位对兔髁突软骨内成骨过程造成干扰,这种影响可能是单侧颞下颌关节盘前移位后患侧下颌支高度不足和下颌骨不对称畸形的重要原因.     

经颧弓后上牵引下颌后髁突软骨中PTHrP的表达及意义

目的:观察经颧弓后上牵引下颌后兔颞下颌关节髁突软骨中PTHrP的分布特征,探讨PTHrP在髁突软骨改建过程中的作用。方法:手术在颧弓和下颌角之间放置弹簧持续地将兔右侧下颌骨向后上方牵引,分别于术后2、4、6周处死动物,观察实验组与对照组PTHrP的分布特征。结果:经颧弓后上牵引下颌,髁突受到过度负荷后髁突软骨发生改建。经颧弓后上牵引2周,增殖层和上肥大层软骨细胞PTHrP表达明显增强,而4和6周PTHrP表达强度不均,软骨细胞丛附近软骨细胞前体细胞内PTHrP表达较强。对照组PTHrP在整个实验过程中均处于弱表达。结论:PTHrP可能与髁突软骨的修复性改建密切相关。     

颞下颌关节盘前移位后VEGF-C基因在髁突软骨中的表达及意义

目的:探讨血管内皮细胞生长因子C在颞下颌关节盘前移位后髁突软骨中的表达及意义.方法:采用日本大耳白兔60只,48只用弹力丝牵拉关节盘前移,建立关节盘前移模型,分别于术后1、2、4、8周处死12只,12只空白对照组同期处死,取出颞下颌关节标本.利用基因芯片技术进行筛选,实时荧光定量PCR进行验证和SP免疫组化技术检测不同组内髁突软骨中VGEF-C的表达与分布.采用SPSS19.0软件包对每组样本实验组和对照组数据进行配对t检验.结果:颞下颌关节盘前移位后,在基因水平上VEGF-C相比于正常对照组均有不同程度变化,早期VEGF-C表达减少,第2周时降至最低水平,差异显著(P＜0.05);第8周时,VEGF-C表达有所增加.镜下观察可见VEGF-C在髁突软骨增殖层、肥大层及钙化软骨层中均有表达,1周组阳性表达主要见于增殖深层和肥大层,钙化软骨层也有弱阳性表达.2周组和4周组阳性表达主要位于肥大层,且在钙化软骨层中表达逐渐增强.8周组肥大层有阳性表达,钙化软骨层未见明显阳性表达,8周组与对照组相比有显著差异(P＜0.05).结论:关节盘前移位后早期髁突软骨VEGF-C基因的转录与表达有所下降,而在后期升高,可能参与关节盘移位后髁突软骨的改建.     

兔颞下颌关节盘前移位后髁突软骨细胞Fas及Caspase-8表达研究

目的:研究颞下颌关节盘前移位后髁突软骨细胞的凋亡途径.方法:17只日本大白兔随机分组,实验组行右侧颞下颌关节手术,人工造成颞下颌关节盘前移位,分别经1、2、4周后处死动物,Western blot法检测髁突关节软骨Fas、caspase-8表达.结果:实验组较对照组Fas、caspase-8蛋白含量增加,且术后4周内其表达随时间的延长而增加.结论:Fas与其配体相互作用在颞下颌关节盘前移位后引起的关节软骨细胞凋亡中可能起到重要作用.     

关节盘移位后髁突软骨c-fos基因转录及表达的研究

目的 观察关节盘移位后髁突软骨中c-fos基因转录与表达水平的变化.方法 32只日本大耳白兔,实验组25只用于建立关节盘前移位的动物模型,5只行模拟手术作为手术对照组,分别于术后1、2、4、8、12周处死;另2只不行手术作为空白对照.原位杂交及免疫组化法分别检测髁突软骨中c-fos基因的转录与表达水平,计算机图像分析系统计算平均灰度值.结果 实验组关节盘移位1周后,髁突软骨c-fos Mrna的灰度值为57.66±4.80,C-FOS蛋白水平的灰度值为144.12±12.43,与对照组相比均有明显增高,其差异有统计学意义(P＜0.05).关节盘移位4周后,髁突软骨c-fos Mrna表达和C-FOS蛋白水平开始回落.关节盘移位8～12周后两者基本达到正常水平,髁突软骨c-fos Mrna的灰度值为16.64±0.08,C-FOS蛋白水平的灰度值为46.72±5.23,与对照组相比差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 关节盘前移位的早期髁突软骨c-fos基因转录与表达水平都明显升高,可能在关节盘移位后髁突软骨的改建过程中发挥着重要信号转导作用.     

兔关节盘前移位后髁突软骨PRG4 mRNA表达改变的研究

目的 分析兔颞颌关节盘前移位后髁突软骨PRG4 mRNA表达的动态改变及其意义。方法 62只日本大耳白兔,48只建立关节盘前移位的动物模型,分期处死。6只为手术对照组,8只为空白对照。合成兔PRG mRNA探针,原位杂交检测关节盘前移位后髁突软骨PRG4 mRNA表达的动态改变。结果 PRG4 mRNA表达于髁突全层软骨。关节盘前移位后,PRG4 mRNA表达一过性升高,8周后回落至正常。4只样本术区骨关节病样表现,软骨崩解区域PRG4 mRNA的表达水平显著下降。结论 关节盘前移位后,髁突软骨细胞PRG4 mRNA一过性升高以保护髁突软骨表层的完整性,促进滑液润滑,有利于实现关节的适应性改建。?     

髁突增殖层细胞在颞下颌关节适应性改建中的作用

目的 探讨颞下颌关节盘前移位后髁突软骨增殖层细胞在关节适应性改建中的作用。方法 32只日本大白兔，在全麻下建立关节盘前移位动物模型，术后1周、2周、4周、6周、8周处死，HE染色、Ⅱ型胶原和蛋白多糖聚合体mRNA原位杂交染色观察。结果 正常髁突的增殖层浅层有蛋白多糖聚合体mRNA的少许表达。但无Ⅱ型胶原表达。增殖层深层Ⅱ型胶原和蛋白多糖聚合体mRNA均有大量表达。术后1周，受力区软骨组织变薄，尤以增殖层明显。蛋白多糖聚合体mRNA表达开始下调。2周后Ⅱ型胶原mRNA表达也开始下降。4周后蛋白多糖聚合体mRNA表达开始回升，增殖层浅层也可见表达，但Ⅱ型胶原mRNA表达继续下降。术后8周两基因表达水平恢复至正常。结论 增殖层细胞具有向软骨细胞分化的潜能，成年兔髁突软骨增殖层具有再生能力，但损伤过度，可导致骨关节病样改变。     

兔颞下颌关节盘前移位后凋亡调控信号Bcl-2及Bax在髁突软骨细胞表达的研究

目的:研究颞下颌关节盘前移位后凋亡调控基因bcl-2及bax在髁突软骨细胞表达的变化.方法:17只日本大白兔随机分组,实验组行右侧颞下颌关节手术,人工造成颞下颌关节盘前移位,分别经1、2、4周后处死动物,Western blot检测侧髁突软骨bcl-2及bax表达.结果:实验组较对照组bax蛋白含量增加,且随着术后时间的延长而增加.bcl-2蛋白则相反,实验组较对照组动物关节软骨内表达减少,且随着术后时间的延长而进一步递减.结论:在颞下颌关节盘前移位后软骨凋亡过程中bcl-2/bax可能起一定调控作用.     

山羊颞下颌关节损伤模型的建立及组织学评价

目的: 建立山羊颞下颌关节损伤模型,比较不同损伤类型的组织病理学改变及对预后的影响。方法：模拟临床损伤类型,16只成年山羊双侧关节随机分为4组。DD组：剪断关节盘后附着,牵引向前,固定于冠突根部,形成不可复性关节盘前移位;CCD组：磨除髁突外侧1/3软骨,造成髁突软骨损伤;DD+CCD组：形成关节盘前移位+髁突软骨损伤。C组：空白对照组。分别于术后2周和1个月观察3种损伤类型的大体及组织学改变。对髁突软骨进行组织学评分,采用SPSS17.0软件包比较4组之间的差异。结果：DD+CCD组,2周和1个月时见囊内纤维性黏连,剩余软骨粗糙;镜下见剩余软骨结构紊乱,蛋白多糖降解。1个月时,软骨剥脱及囊内纤维黏连加重。DD组,2周和1个月时剩余髁突软骨结构紊乱,纤维带完整,少量血管再生;蛋白多糖少量降解。CCD组,2周和1个月时缺损区与关节盘发生黏连;剩余软骨结构和蛋白多糖与空白对照组相比基本正常。各组之间比较,软骨退行性变程度1个月时比2周时更严重,统计评分按严重程度分别为DD+CCD组(11.75±0.75)、DD组(8.75±0.25)、CCD组(1.75±0.85)和C组(0.00±0.00),各组之间比较均存在显著差异(P<0.05)。结论：通过手术成功建立了3种山羊TMJ损伤模型,其中,DD+CCD组对关节软骨的破坏最严重,DD次之,CCD最轻。     

髁突矢状骨折动物模型的实验研究

目的：建立髁突囊内矢状骨折动物模型,观察髁突骨折后不同时间的病理形态改变。方法：对10只绵羊进行实验,右侧关节为手术侧,从耳前区切开皮肤,到达颞下颌关节,切断关节盘前后附着,从髁突外侧嵴到内侧髁颈锯开髁突,建立斜形矢状骨折。髁突碎片和关节盘推向前下内侧,左侧关节为对照侧。分别于术后1周、4周和12周处死2只、4只和4只动物。记录术前和术后每组动物的体质量、最大开口度、侧方活动度,进行X线、CT和组织病理学观察。采用SPSS12.0软件包对数据进行统计分析。结果：各手术组体质量、左侧向活动度未发现显著差异,但是在4周和12周组中,最大开口度和右侧向活动度明显减小。在这2组中,X线检查发现髁突残端外侧有新骨生成,并向外侧生长,同时关节间隙变狭窄和模糊。三维CT检查发现,髁突残端、髁突碎片和关节结节均发生改建。组织病理学观察发现,在4周和12周组动物,关节腔充满纤维组织、软骨和骨组织。结论：该研究表明,此类骨折可以导致髁突骨关节病理改变,颞下颌关节有发展为关节强直的可能。     

兔关节盘前移位后髁突软骨细胞中OPG和OPGL的表达及意义

目的:探讨关节盘前移位后髁突软骨中护骨素(osteoprotegerin,OPG)及其配体(osteoprotegerinligand,OPGL)表达的变化及意义。方法:20只日本大耳白兔,16只用弹力丝牵引关节盘前伸部,建立颞下颌关节盘前移位的动物模型,分别于术后1、2、4、8周处死。2只行模拟手术作为手术对照组,术后2周处死;另2只不行手术,作为空白对照。取颞下颌关节标本,HE染色,观察其镜下结构,SP免疫组化法检测髁突软骨中OPG和OPGL的表达与分布,并对各标本OPG和OPGL的表达进行灰度测定。用单因素方差分析法对所得数据进行统计学分析。结果:各实验组动物术后体重无明显减轻,伤口愈合良好,大体及显微镜下观察,关节盘明显前移位。OPG和OPGL在各组髁突软骨的增殖层及肥大层浅层均有表达,其中关节盘移位组OPG、OPGL染色较强,染色灰度值与对照组均有显著性差异(P<0.05),但OPG/OPGL比率基本稳定。结论:关节盘移位后OPG和OPGL的表达均有升高,可能参与关节盘移位后髁突软骨病变的发展及转归。     

Cartilage changes link retrognathic mandibular growth to TMJ disc displacement in a rabbit model

Recent experimental research demonstrated that non-reducing temporomandibular joint (TMJ) disc displacement in growing rabbits impaired mandibular growth. TMJ disc displacement is also shown to induce histological changes of the condylar cartilage. The authors hypothesized that the severity of these changes would correlate to the magnitude of mandibular growth. Bilateral non-reducing TMJ disc displacement was surgically created in 10 growing New Zealand White rabbits. Ten additional rabbits constituted a sham operated control group. Aided by tantalum implants, growth was cephalometrically determined for each mandibular side during a period equivalent to childhood and adolescence in man. At the end of the growth period, histologically classified cartilage features were correlated with the assessed ipsilateral mandibular growth. Non-reducing displacement of the TMJ disc during the growth period induced histological reactions of the condylar cartilage in the rabbit model. The severity of cartilage changes was inversely correlated to the magnitude and the direction of mandibular growth, which resulted in a retrognathic growth pattern.     

青少年颞下颌关节盘移位关节镜盘复位后的髁突改建

目的：通过磁共振评价青少年颞下颌关节盘移位患者关节镜盘复位后的髁突改建情况。方法：回顾分析2006年1月—2008年12月间因颞下颌关节盘移位而接受关节镜关节盘复位术且随访期超过6个月的26例青少年患者（38侧关节）,在术前和随访磁共振图像上对斜矢状位和冠状位的髁突高度、前后径和内外径分别进行定量测量,应用SPSS13.0软件包中的t检验进行统计学分析。结果：患者手术时的平均年龄为17.7岁,术后平均随访间隔期为15个月。根据Wilkes分类,术前7侧关节为IDⅡ期,26侧为Ⅲ期,2侧为Ⅳ期,3侧为Ⅴ期。随访磁共振显示,所有患者关节盘位于正常位置。与术前相比,在斜矢状位上,髁突前后径和高度分别平均增加了0.45mm（P〈0.05）和0.92mm（P〈0.05）;而在冠状位上,髁突内外径和高度的变化无显著差异（P〉0.05）。结论：青少年颞下颌关节盘前移位患者在关节镜关节盘复位术后,髁突可出现以增生为主的明显改建,这种改建可能对改善面形有所帮助。     

渐进性咬合紊乱大鼠的髁突软骨中Ihh、Smo及Ptch1表达变化

目的 探讨Indian Hedgehog（Ihh）及其受体Smoothened （Smo）和Patched1 （Ptch1）在渐进性咬合紊乱的大鼠髁突软骨-骨改建中的表达变化情况.方法 选用24只8周龄雌性SD大鼠,实验组施以渐进性咬合紊乱,分别于20和24周后取材,苏木精-伊红染色观察组织形态变化,免疫组化及实时定量PCR方法检测Ihh、Smo和Ptch1的表达情况.结果 髁突软骨后部20周实验组明显增厚（F=4.39,P=0.003）,但24周组有所缓解.免疫组化检测24周实验组Ihh的表达水平高于对照组（F=3.78,P=0.02）,而20周实验组Smo的表达水平高于对照组（F=5.16,P=0.04）.实时定量PCR结果显示,20周实验组Ihh （F=7.80,P=0.012）和Smo（F=15.67,P=0.003）的mRNA水平均高于对照组;24周实验组Ihh的mRNA水平表达水平显著高于对照组（F=13.34,P=0.013）,Ptch1的表达差异无统计学意义（F=1.34,P=2.13）.结论 渐进性咬合紊乱促进了大鼠髁突软骨中Ihh及其受体Smo的高表达.     

无髁突骨折颞下颌关节急性创伤后的变化:影像学和手术所见

目的:通过CT、MRI及手术探查观察无髁突骨折颞下颌关节急性创伤后的变化,为该疾患的早期诊治提供依据。方法:上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颌面外科关节组2009—2010年收治的无髁突骨折颞下颌关节急性创伤患者7例11侧关节纳入研究。所有患者伤前均无关节症状,但在伤后出现长时间的关节区疼痛和开口受限,其中6例合并面部骨折,曾在其他医院或由其他医师手术治疗。所有患者均进行了关节区的MRI检查,对受伤后即刻和再次就诊的CT进行比较。所有病例进行了手术探查,术中所见进一步证实影像学的变化。结果:CT显示,87.5%(7/8)的髁突在受伤即刻表面骨质"完好",而伤后1个月至1a出现骨质破坏。伤后1个月至1a的MRI检查显示,所有11侧关节均出现盘前移位,90.9%(10/11)的髁突伴骨质破坏。手术探查显示,2侧关节出现骨性黏连,3侧关节髁突表面骨质破坏与关节窝纤维性黏连,5侧关节髁突表面软骨变性伴黏连,1侧关节髁突表面软骨无明显破坏,关节盘前移位但形态尚可。结论:无髁突骨折的颞下颌关节急性创伤如伴关节盘前移位,可导致骨关节病和(或)关节强直。