睫状神经营养因子对视网膜保护作用的研究进展

睫状神经营养因了（CNTF）可诱导视网膜神经细胞分化，减少神经细胞凋亡和促进细胞再生。CNTF能促进轴突切断和视网膜缺血后RGCs的存活和轴突生长，减少视网膜色素变性动物模型的光感受器存活，为治疗视网膜缺血性损伤、神经退行性病变等视网膜疾病提供了可能。本就CNTF及其受体的分子结构、组织分布、基因结构及其表达调控和CNTF对视网膜作用的研究进展作一综述。     

退行性视网膜病变中睫状神经营养因子神经保护作用的研究进展

多项体内外及临床试验结果均证实睫状神经营养因子(CNTF)对光感受器细胞具有良好的神经保护作用,同时也对视网膜多种神经细胞的结构和功能产生不同的影响.CNTF对光感受器细胞保护作用的分子机制涉及Stat、Erk及Akt等信号传导途径,其中Müller细胞发挥着重要作用.细胞包囊技术为CNTF提供了有效的给药途径,在多种退行性视网膜病变的动物模型中均取得良好疗效,其临床应用中的安全性和有效性正在进行评估,这将为CNTF进入临床应用奠定基础.(中华眼科杂志,2011,47:568-572)

Abstract：

Ciliary neurotrophic factor (CNTF) has been showing neuroprotective effects on photoreceptors in a variety of in vivo and in vitro experiments and clinical trials. CNTF causes morphological and functional alterations in various retinal nerve cells. The neuroprotection mechanism of CNTF involves STAT-dependant, ERK-dependant, and Akt-dependant signaling technology (ECT) device is an efficient administration approach to deliver CNTF into the eyes, which is effective in retarding photoreceptor degeneration in several animal models with retinal degenerative diseases. The safety and efficiency of the device in clinical trials are also being evaluated currently for further clinical use in human eyes as a potential treatment.     

内源性睫状神经营养因子对青光眼鼠视网膜的保护作用

目的 探讨睫状神经营养因子(CNTF)蛋白在慢性高眼压性青光眼大鼠视网膜中的定位及表达情况.方法采用水下电凝巩膜静脉建立大鼠慢性高眼压性青光眼模型,在1、3、7、14、28 d分别摘取眼球,运用免疫组织化学和Western blot法检测大鼠视网膜CNTF蛋白的定位及表达变化.结果对照组大鼠视网膜神经节细胞(RGCs)层有少量CNTF蛋白表达,青光眼大鼠视网膜CNTF蛋白的表达显著增加,建立模型后第7～14 d表达量达到高峰,此时除了神经节细胞层外,内外核层亦发现有CNTF蛋白的表达,之后表达减少.结论青光眼大鼠视网膜内源性CNTF表达增加,可能与促进损伤的RGCs的存活和轴突再生密切相关.     

睫状神经营养因子对糖尿病早期大鼠视网膜神经组织的保护作用

目的：研究睫状神经营养因子（ciliary neurontrophic factor,CNTF）对糖尿病早期大鼠视网膜神经组织的保护作用。方法：选择40只健康成年雄性SD大鼠（250g-280g）一次性腹腔注射链脲佐菌素（Streptozotin,STZ）60mg/kg诱发糖尿病模型（DM）,将DM大鼠随机分组为DM＋CNTF组和DM＋BSS组。DM＋CNTF组给予玻璃体腔内注射CNTF（1.0μg/2μL）,DM＋BSS组注射BSS液（2μL）。分别观测0、4、8、12wk两组大鼠体质量和血糖变化,于4wk和12wk进行原位细胞调亡（TUNEL法）的检测及视网膜神经组织超微结构的观察。结果：DM＋CNTF组大鼠的血糖和体质量与DM＋BSS组比较无显著性差异（P〉0.05）。12wk时TUNEL检测DM＋CNTF组大鼠神经节细胞凋亡与DM＋BSS组相比减少（P〈0.05）。透射电镜下观察发现从4wk起两组大鼠视网膜神经组织出现细胞凋亡的改变,经CNTF治疗细胞凋亡改变有所减轻,表现为外节膜盘间隙减小,感光细胞水肿减轻及核染色质浓集减轻等。结论：CNTF对DM＋CNTF组和DM＋BSS组大鼠的体重及血糖无明显影响。CNTF治疗组结果显示对本实验糖尿病大鼠视网膜神经节细胞及感光细胞有一定保护作用。     

睫状神经营养因子对视神经损伤修复作用研究进展

视神经损伤后,视网膜神经节细胞进行性损害,轴突变性坏死,再生困难.睫状神经营养因子是一种非靶源性神经营养因子,在视网膜神经节细胞的生长发育中起重要作用,同时对损伤的视网膜神经节细胞有促进存活及轴突再生的作用.     

睫状神经营养因子对视神经损伤修复作用的研究进展

以往认为，成年哺乳动物视神经损伤后通常不能再生。视神经损伤后，其轴突很快发生变性，胞体死亡，这是个不可逆的过程。但近年来的实验研究发现，视神经轴突可长入移植的周围神经，并且认为在再生过程中，睫状神经营养因子发挥了重要作用，现就睫状神经营养因子及其受体的分子结构、组织分布、基因结构及其在视神经损伤后的作用和作用机制作一综述，为视神经损伤的治疗提供了理论基础。（中华眼底病杂志，2003，19：333-404）     

睫状神经营养因子对大鼠急性高眼压眼视网膜神经节细胞的保护作用

背景 青光眼可以引起视网膜神经节细胞(RGCs)凋亡,据报道睫状神经营养因子(CNTF)对外伤性视神经损伤有修复作用,其是否对青光眼视神经病变有保护作用尚少见报道. 目的 观察CNTF对大鼠急性高眼压眼RGCs的保护作用.方法 24只Wistar大鼠双眼采用眼前房平衡盐液加压灌注法建立大鼠急性高眼压模型,造模前2d左眼玻璃体内注入0.5μg CNTF 5μl,右眼以同样的方法注射磷酸钠溶液5μl,另取3只正常大鼠作为正常对照.造模后1、3、7、14 d过量麻醉法处死动物并摘除眼球,制备视网膜组织学切片后采用苏木精-伊红染色法进行形态学观察,光学显微镜下计数RGCs数目;采用免疫组织化学染色法观察RGCs层谷氨酸的表达情况.结果 正常对照组大鼠视网膜各层排列整齐,细胞边界清晰;模型对照组大鼠RGCs细胞膜、细胞核均发现异常改变,有细胞空泡样变;CNTF治疗组大鼠造模后变性的RGCs数量少.与模型对照组比较,造模后3、7、14 d CNTF治疗组RGCs数目明显增加,差异均有统计学意义(均P=0.000).免疫组织化学染色表明,造模后3～7d,CNTF治疗组RGCs层谷氨酸阳性细胞数分别为(5.50±1.04)个／3个高倍视野和(6.00±1.41) 个/3个高倍视野,明显低于模型对照组的(9.00±2.91)个／3个高倍视野和(10.83±1.94)个／3个高倍视野,差异均有统计学意义(均P=0.000),而造模后1d和14 d两组间谷氨酸阳性细胞数的差异均无统计学意义(P=0.578、0.180).结论 CNTF能够下调急性高眼压眼谷氨酸在RGCs中的表达,从而对RGCs提供保护作用.     

睫状神经营养因子对培养大鼠视网膜神经节细胞的影响

目的 观察不同浓度睫状神经营养因子(ciliary neurotrophic factor，CNTF)对培养大鼠视网膜神经节细胞（retinal ganglion cell，RGC）生长、存活的影响。 方法 取15只生后2～3d Wistar大鼠视网膜组织进行细胞培养，通过Thy-1单克隆抗体免疫细胞化学对培养的RGC进行鉴定。实验分对照组和10、20、40 ng/mlCNTF组（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组），记录RGC存活时间，将培养第3、5、7天的RGC行四甲基偶氮唑盐（methylthio tetrazole,MTT）法测量吸光度(A)值［旧称光密度(OD)］。 结果 Thy-1单克隆抗体免疫组织化学检查显示培养3d的存活细胞90%以上为RGC。细胞存活期间实验组与对照组细胞均无明显突起,细胞体积无明显增大，实验组细胞存活时间比对照组长3~4d。培养第5、7d，Ⅰ组A值分别为0.075 8±0.0139、0.0693±0.0113，Ⅱ组A值分别为0.0902±0.0114、0.0825±0.0125，Ⅲ组A值分别为0.0792±0.0133、0.0653±0.0086，对照组A值分别为0.0620±0.0071、0.0513±0.0068。实验组与同时间对照组A值相比差异有显著性的意义（Ⅱ组与对照组相比P＜0.01，Ⅰ、Ⅲ组与对照组相比P＜0.05）。 结论 一定浓度的CNTF能促进培养大鼠RGC的存活，对RGC形态无影响。 (中华眼底病杂志, 2002, 18: 283-285)     

急性高眼压大鼠视网膜睫状神经营养因子的表达

目的 :探讨大鼠急性高眼压前后睫状神经营养因子 (CNTF)mRNA在视网膜组织中的表达变化及意义。方法 :利用前房高眼压灌注法 ,使大鼠右眼维持在 110mmHg高眼压 30min ,然后恢复视网膜血供 ,并分别于灌注后 1d、3d处死大鼠 ,用半定量RT PCR方法检测大鼠视网膜组织中CNTFmRNA的表达情况。结果 :在正常大鼠视网膜组织中 ,CNTFmRNA有微量表达 ,急性高眼压后 ,其表达明显增高 ,第 1天、第 3天分别比对照组增加 37.0 9%和 2 2 7.4 2 %。结论 :大鼠急性高眼压损伤后 ,可通过内源性CNTF表达增加来应答视网膜神经节细胞 (RGCs)及其他细胞的损伤 ,保护视网膜及视神经 ,为外源性营养因子的应用提供理论依据。     

视神经损伤时视网膜睫状神经营养因子受体的表达

目的研究睫状神经营养因子受体于视神经损伤后不同时间在视网膜中的表达情况,探讨外源性的睫状神经营养因子在神经损伤疾病中的应用价值。方法采用钳夹视神经的方法建立神经损伤的模型,在损伤后1、7、14、28d获取视网膜,提取总RNA及总蛋白,用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定视网膜中睫状神经营养因子受体(CNTFR)αmRNA的表达,用WesternBlot方法了解损伤后不同时间CNTFRα蛋白水平的表达。结果在正常大鼠视网膜内CNTFRαmRNA无表达,在损伤后的1、7、14、28d均有一定水平的CNTFRαmRNA的表达,与正常对照比较差别具有显著性意义(P<0.01);损伤后备时间均有CNTFRα蛋白的表达,但CNTFRα蛋白的表达较弱。结论神经损伤后CNTF的表达先短暂升高以后持续下调,而CNTFRα-mRNA在损伤后4周内均有一定量的表达,提示补充外源性CNTF可能改善神经再生的微环境而发挥保护效应。     

睫状神经营养因子转基因治疗视神经损伤的研究进展

视神经损伤的治疗一直是医学界的难题。而睫状神经营养因子(CNTF)能促进视网膜缺血后视网膜神经节细胞的存活和轴突切断后再生,为治疗视神经损伤提供了可能。但单纯应用外源性CNTF直接治疗,在体内作用时间短,而其与转基因技术相结合克服了该缺点,为治疗视神经损伤性疾病开辟了新途径。本文就CNTF的分子生物学特性、对视神经损伤的保护作用,特别是CNTF转基因治疗在视神经损伤的研究进展作一综述。     

脑源性神经营养因子对视网膜保护作用的研究进展

脑源性神经生长因子(BDNF)是神经细胞存活和分化所必需的营养物质，能通过P13-K和MEK／ERK等途径保护视网膜神经节细胞和光感受器细胞，促进其生存，并与其它细胞因子有叠加作用，本对此作一综述。     

脑源性神经营养因子对视网膜保护作用的研究进展

脑源性神经生长因子(BDNF)是神经细胞存活和分化所必需的营养物质,能通过PI3- K和MEK／ERK等途径保护视网膜神经节细胞和光感受器细胞,促进其生存,并与其它细胞因子有 叠加作用,本文对此作一综述。     

睫状神经营养因子玻璃体内注射对青光眼视神经保护作用的实验研究

目的探讨睫状神经营养因子（CNTF）玻璃体内注射对鼠慢性青光眼视神经的保护作用。方法通过散瞳、前房穿刺放液及角膜缘激光光凝等步骤制造鼠慢性青光眼模型。设正常对照组、前房穿刺对照组、未治疗组（仅造模）、治疗组（造模后双眼玻璃体内注入CNTF）、治疗对照组（造模后双眼玻璃体内注入生理盐水）。观察视网膜组织磷酸化信号转导与转录激活子3（pSTAT3）表达、视神经轴突及闪光视觉诱发电位（F-VEP）变化。结果正常状态pSTA33在视网膜组织中极少表达,眼压升高后1d开始上升,2d达到高峰,14d下降到正常水平。治疗组视网膜中pSTAT3在眼压升高14d和28d表达均高于同时间段的未治疗组及治疗对照组（P〈0．05）。在眼压升高28d治疗组视神经纤维阳性面积比率的值明显高于未治疗组及治疗对照组,且VEPP,波潜伏期明显低于以上两组（P〈0．05）。结论CNTF玻璃体内注射延缓了鼠慢性青光眼视神经的损伤。眼压升高初期,视网膜STAT3信号传导途径暂时被激活,CNTF相对长时间激活了STAT3信号传导途径,STAT3信号传导途径参与介导了CNTF对视神经的保护作用。     

睫状神经营养因子对视网膜色素变性中感光细胞的作用

遗传性视网膜色素变性类疾病是人类的主要致盲眼病之一,目前尚无有效阻止病变进展和恢复视网膜功能的治疗方法.此类疾病的最后结果是感光细胞不可逆的凋亡.阻断感光细胞走向凋亡的进程是近年来研究的热点.在大量的体内外实验中发现,很多神经生长因子对遗传性视网膜色素变性类疾病有一定的治疗作用,其中睫状神经营养因子保护感光细胞、延缓感光细胞凋亡的作用颇受关注.本文就近年来睫状神经营养因子对视网膜色素变性疾病中感光细胞的作用研究作一综述.     

腺病毒介导睫状神经营养因子在大鼠视网膜中的表达定位

目的观察携带睫状神经营养因子(ciliary neurotrophic factor,CNTF)基因的腺病毒(adenovirus,Ad)载体在正常大鼠视网膜中的表达定位。方法正常成年大鼠40只,随机分为处理组(PBS组、Ad-LacZ组、Ad-CNTF组)及正常对照组,向处理组大鼠眼内分别注射相应溶液,各处理组均分为注射后7d、14d、28d共3个时相点。在相应时相点取大鼠眼球,行冰冻切片,进行免疫组织化学染色。结果Ad-CNTF组各时相点视网膜与其他对照组相比,CNTF阳性染色明显增强,分布更广泛,并且可一直持续到注射后28d。结论Ad-CNTF在正常大鼠眼内注射后,CNTF在视网膜的表达明显增加,且表达时限可达28d。     

睫状神经营养因子对纯化培养大鼠视网膜神经节细胞突起再生的影响

目的观察睫状神经营养因子（ciliary neurotrophic factor，CNTF）对纯化培养大鼠视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells，RGCs）突起再生的影响。方法取新生SD大鼠视网膜，消化并利用筛网纯化后接种于96孔板，加入不同浓度（10μg·L-1、20μg·L-1、30μg·L-1、40μg·L-1）CNTF作为实验组，不加CNTF作为对照。根据细胞形态及免疫细胞化学的方法鉴定细胞，观察RGCs生长规律，观测随机选取视野下的RGCs数和有突起细胞数（400倍荧光显微镜和相差显微镜）。结果 纯化的RGCs在含体积分数20％胎牛血清DMEM培养液中可存活30d。加入CNTF后3~5d，40μg·L-1组突起率显著高于对照组（P〈0.05）。7~15d，20μg·L-1、30μg·L-1、40μg·L-1组突起率显著高于时照组（P〈0.05），30μg·L-1、40μg·L-1组突起率显著高于10μg·L-1、20μg·L-1组（P〈0.05）。结论CNTF能显著促进RGCs突起再生，CNTF的浓度和突起率存在量效关系，一定浓度范围内．高浓度CNTF可较早促进突起再生。     

大鼠视神经损伤及修复过程中视网膜睫状神经营养因子mRNA的表达

目的 探讨大鼠视神经损伤及修复过程中睫状神经营养因子（CNTF）mRNA在视网膜上的表达及意义。 方法 35只健康雄性SD大鼠，随机取5只作为正常对照组；另两组为视神经单纯切断组和视神经-坐骨神经吻合组，每组各15只大鼠。建立大鼠视神经单纯切断和神经-坐骨神经吻合模型，分别于建立模型后3、7、14 d取视网膜组织，应用半定量逆转录-聚合酶链反应方法观察正常大鼠及各模型大鼠视网膜上CNTF mRNA的表达情况。 结果 在正常大鼠视网膜上，CNTF mRNA有微量表达，视神经单纯切断后其表达增加（3、7、14 d CNTF mRNA的表达分别增加100%、594%和485%），视神经切断并吻合一段坐骨神经后，表达增加更明显（3、7、14 d CNTF mRNA的表达分别增加258%、752%和515%）。 结论 视神经损伤后，可通过提高内源性CNTF来应答视网膜神经节细胞（RGC）轴索反应，保护RGC，为外源性CNTF的应用提供理论依据。 （中华眼底病杂志，2004，20：355-357）     

脑源性神经营养因子对视网膜神经血管单元的保护作用

神经血管耦合以神经血管单元(NVU)为基础，发挥神经细胞与微血管之间信号传导、代谢调节等功能并共同组成屏障结构维持微环境稳态。神经血管单元在视网膜中广泛分布，与视网膜正常生理功能的维持关系密切，而各种原因引起的视网膜神经血管稳态失衡会导致多种视网膜疾病，如糖尿病视网膜病变(DR)、青光眼、视网膜色素变性(RP)及年龄相关性黄斑变性(ARMD)等。脑源性神经营养因子(BDNF)在视网膜也有广泛分布，通过与其受体TrkB结合发挥促神经生长和损伤修复等功能。近年来，研究发现BDNF在视网膜神经血管单元稳态失衡早期，即神经退行阶段可发挥损伤保护作用，同时减少神经来源的促血管生成物质，延缓疾病进程并为早期干预和治疗提供了新策略新思路。     

神经营养素家族因子对视网膜神经细胞保护作用的研究进展

现有大量研究表明神经营养素家族因子对视网膜神经细胞具有重要的保护作用。在所有家族成员中,神经生长因子能够有效保护视网膜光感受器细胞;阻断视网膜神经节细胞中神经生长因子与受体p75的结合,可以抑制神经节细胞的凋亡。脑源性神经营养因子可以防止光感受器细胞变性,增强光感受器细胞损伤后的修复。在刺激神经节细胞轴突生长和突触形成方面,脑源性神经营养因子、神经营养素-3及神经营养素-4/5均具有显著效应。通过对神经营养素家族因子的研究,了解其作用机制,以期能够应用于视网膜神经细胞变性及损伤性疾病的治疗中。