HCV患者外周血单个核细胞B细胞刺激因子的异常表达及其临床意义

目的研究慢性丙型肝炎（HCV）患者外周血单个核细胞中B淋巴细胞刺激因子（BLys）的表达情况，分析BLys的转录水平与HCV相关性自身免疫的关系。方法应用半定量反转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测48例HCV患者外周血单个核细胞（PBMCs）的BLyS-mRNA的表达水平，并与健康志愿者（25例）及慢性乙型肝炎患者（20例）比较。检测HCV患者血清的混合性冷球蛋白（MC），类风湿因子（RF），分析BLyS-mRNA的表达水平与混合性冷球蛋白、类风湿因因子关系。结果HCV患者PBMCs中的BLyS-mRNA的表达明显高于健康对照组（0．54±0．22vs0．40±0．14，P〈0．01）和慢性乙型肝炎组（0．54±0．22vs0．42±0．17，P〈0．05）。有自身免疫现象者（冷球蛋白或类风湿因子阳性）BlyS-mRNA表达水平更高（0．64±0．25vs0．49±0．20，P〈0．05）。结论HCV患者PBMC的BLyS-mRNA表达增强，BLys可能与HCV的自身免疫现象有关。     

趋化因子受体CCR7在结肠癌患者外周血CD3~+CD8~+T细胞上的表达及其临床意义

目的检测结肠癌患者外周血中CD3+CD8+T细胞上趋化因子受体CCR7的表达,分析CCR7的表达与结肠癌的病理分化程度、肿瘤大小和临床分期的相关性。方法利用流式细胞仪检测44例患者外周血,以CELLQuest软件分析获取CD3+CD8+T细胞,检测CCR7的阳性表达率。比较结肠癌患者与正常人外周血CD3+CD8+T细胞上CCR7的表达情况;比较患者术前、术后外周血CD3+CD8+T细胞上CCR7表达阳性率变化;比较CD3+CD8+T细胞亚群上CCR7表达在术前、术后的变化。结果结肠癌患者外周血CD3+CD8+T细胞上CCR7阳性表达率比正常人低,差异有统计学意义(P<0.05);术后组外周血CD3+CD8+T细胞上CCR7阳性表达率比术前组高,差异有统计学意义(P<0.05)。外周血CCR7的表达与结肠癌肿瘤的大小、肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移等具有显著相关(P<0.05)。结论CCR7在结肠癌患者外周血CD3+CD8+T细胞上高度表达,并与结肠癌的病理分化程度、肿瘤大小和临床分期的密切相关。CCR7的表达可能与促细胞凋亡和抗细胞凋亡蛋白质有关。     

稽留流产患者外周血CD~4+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞的表达及意义

目的:探讨CD4+ CD25+ Foxp3+调节性T细胞在稽留流产患者外周血中的比例变化。方法:选取16例稽留流产患者,采用细胞内染色的流式细胞术及定量PCR方法分别在蛋白质和mRNA水平检测其外周血中CD4+ CD25+ Foxp3+的表达,并与正常妊娠和正常育龄妇女进行比较。结果:稽留流产患者外周血单个核细胞(PBMCS)CD4+ T细胞中CD25high细胞明显低于正常妊娠和正常育龄妇女,CD4+ CD25+ Foxp3+的表达显著降低。结论:稽留流产患者CD4+ CD25+ Foxp3+的表达明显减少,提示稽留流产的发生可能与患者外周血中CD4+ CD25+ Foxp3+下降有关;而在妊娠早期CD4+ CD25+ Foxp3+的表达明显升高,表明其可能是调控母-胎间免疫耐受形成的重要因素,参与了正常妊娠的维持。     

CD4~+ CD25~(high) CD127~(low)调节性T细胞在宫颈癌患者外周血中的表达及意义

目的:探讨CD4+ CD25high CD127low调节性T细胞(Regulatory Tcell,Treg)在宫颈癌患者外周血中的表达特点及临床意义。方法:采用流式细胞术检测21例宫颈癌患者和11例健康者外周血中CD4+ CD25high CD127low Treg、CD4+ T细胞、CD8+T细胞和NK细胞的表达水平。结果:21例宫颈癌患者外周血中CD4+ CD25high CD127low Treg占总CD4+ T细胞的(11.17±2.14)%,高于健康对照组(6.96±0.94)%(t=5.974,P<0.05),与NK细胞呈负相关(r=-0.468,P<0.05);CD4+T、CD8+T细胞占总T细胞的比例与健康对照组比较差异均无统计学意义;随疾病进展,宫颈癌患者外周血中CD4+ CD25high CD127low Treg水平升高,Ⅱ期+Ⅲ期患者外周血中CD4+ CD25high CD127low Treg占总CD4+ T细胞的(10.80±1.48)%,明显高于Ⅰ期患者(9.34±1.42)%(P<0.05)和健康对照组(6.96±0.94)%(P<0.05)。结论:宫颈癌患者外周血CD4+ CD25high CD127low Treg表达水平可能是一个较好的反映宫颈癌患者免疫功能状态的参考指标,其在外周血的升高程度与肿瘤临床分期有关,可能参与了宫颈癌的发生发展。     

非酒精性脂肪性肝病患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的变化及意义

目的观察非酒精性脂肪性肝病患者外周血单个核细胞(PBMC)CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的变化及与胰岛素抵抗的关系,初步探讨其意义。方法 46例非酒精性脂肪性肝病患者根据体质指数分为肥胖组(21例)及非肥胖组(25例),42名健康医务工作者作为健康对照。检测空腹胰岛素及空腹血糖水平,计算胰岛素抵抗指数;采用流式细胞术检测患者外周血PBMC CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数目,并计算CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比;分析CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞与胰岛素抵抗间的关系。结果与健康对照组相比,非酒精性脂肪性肝病患者外周血PBMC CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数及其占CD4+T淋巴细胞的百分比均显著下降(P<0.01,P<0.05),但在肥胖组与非肥胖组间差异均无统计学意义(P>0.05);肥胖者胰岛素抵抗指数较非肥胖者显著升高(P<0.01);肥胖组内PBMC CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数值及其占CD4+T淋巴细胞的百分比均与胰岛素抵抗指数呈明显负相关(r=-0.989,P<0.01)。结论非酒精性脂肪性肝病患者PBMC CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数目和比例减少,可能存在自身免疫调节功能的紊乱;PBMC CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞可能通过调节胰岛素抵抗参与非酒精性脂肪性肝病的形成和发展。     

重症肌无力患者的外周血CD8~+CD28~-T细胞的变化及意义

目的探讨CD8+CD28-T细胞在重症肌无力(MG)发病中的作用。方法采用流式细胞术对51例MG患者和35例健康对照者外周血中CD8+CD28-T细胞的构成比进行测定。结果 MG患者外周血中CD8+CD28-T细胞明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P0.01);病情未能控制的MG患者外周血中CD8+CD28-T淋巴细胞构成比显著低于正常对照组(P0.01);胸腺切除的MG患者CD4/CD8比值均低于胸腺未切除组(P0.05)。胸腺瘤B2型MG患者外周血CD8+CD28-T细胞构成比明显高于胸腺增生的MG患者以及胸腺正常MG患者,其差异有统计学意义(P0.01)。胸腺瘤B2型的MG患者外周血CD4/CD8比值低于胸腺正常的MG患者的(P0.05)。结论提示MG患者外周血中存在异常比例的CD8+CD28-T细胞,可能参与疾病的发生与发展。     

特发性血小板减少性紫癜患儿B淋巴细胞刺激因子表达对感染的影响

目的分析急性特发性血小板减少性紫癜患儿B淋巴细胞刺激因子表达及其对医院感染的影响,为指导临床治疗方案、改善患儿预后提供理论依据。方法选取2009年4月-2012年3月收治的51例aITP患儿及同期门诊50名健康体检儿童,分别纳入患儿组及对照组,对其BLyS水平进行检测,并统计患儿组医院感染发生情况及BLyS表达与其临床参数的相关性。结果 51例aITP患儿共出现4例医院感染,感染率7.8%,其中3例消化道感染,1例呼吸道感染;患儿组BLyS、血小板相关抗体及免疫球蛋白显著高于正常对照组,两组数据对比差异有统计学意义(P<0.05),其PAIgA、PAIgM、IgA及IgM总体高于正常对照组;高BLyS水平是增加患儿医院感染风险的独立危险因素(P<0.05)。结论 aITP患儿BLyS、PAIgG及IgG显著高于标准值,显示其机体炎性反应剧烈,免疫功能受影响,而高BLyS是导致患儿医院感染的独立危险因素,因此,对于aITP患儿早期BLyS的监测是指导临床用药、改善其预后及生存质量的关键。     

肺结核患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的检测及意义

[目的]通过对肺结核患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的分析,探讨其在肺结核患者中的临床意义。[方法]采用流式细胞技术多色荧光分析法,测定84例肺结核患者及29例健康体检者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞水平,观察肺结核患者与健康对照者之间、各型肺结核之间及结核杆菌阳性与阴性者之间的差别。[结果]肺结核患者CD4+CD25+所占比例为(10.81±2.65)%,与健康对照组差异有统计学意义(P0.05);各型结核之间、抗酸杆菌阳性与阴性之间的差异有统计学意义(P0.05);初治肺结核与复治肺结核也有一定的差异,但无统计学意义(P0.05)。[结论]CD4+CD25+调节性T细胞可作为判断肺结核患者免疫功能的指标,它对肺结核患者的免疫状态、指导用药、疗效观察有一定的临床意义。     

CD69在急性髓系白血病患者外周血T淋巴细胞的表达及意义

目的检测急性髓系白血病患者外周血T淋巴细胞CD69的表达,评估T细胞活化状态,了解急性髓系白血病的免疫功能、状态。方法采用流式细胞术检测15例急性髓系白血病患者化疗前后外周血T淋巴细胞CD69的表达,同时以正常外周血标本作对照。结果急性髓系白血病组化疗前、化疗后CD69的表达均显著低于正常对照组(P<0.05),但化疗后CD69的表达较化疗前明显升高(P<0.05)。结论急性髓系白血病存在T细胞活化受抑、免疫功能受损。T细胞活化受抑可能是急性髓系白血病免疫逃逸的重要机制。CD69可能成为疗效评价的辅助指标及免疫治疗的潜在靶点。     

淋巴细胞CD35在慢性乙型肝炎患者外周血中的表达意义

目的探讨CD35、CD64在慢性乙肝患者外周血中的表达及临床意义。方法应用流式细胞术检测比较慢性乙肝患者与健康对照组外周血中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞CD64和CD35的平均荧光强度。并分析其与乙肝相关实验室指标的相关性。结果慢性乙肝患者淋巴细胞CD35(LCD35)的平均荧光强度低于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);与乙肝DNA的载量呈负相关(r=-0.49,P<0.05)。结论LCD35在慢性乙肝患者中表达下降,并且与病毒活动有密切的关系。     

化疗对乳腺癌患者外周血CD4~+CD25~+CD127~-调节性T细胞的影响

目的观察化疗对乳腺癌患者外周血免疫指标的变化并探讨其影响。方法采用流式细胞术分析129例乳腺癌患者化疗前后CD4+CD25+CD127-调节性T细胞占CD4+T细胞的比率及T淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8;B淋巴细胞CD19;NK细胞(CD16+CD56)和CD4/CD8比值的动态变化。结果化疗后的乳腺癌患者CD4+CD25+CD127-调节性T细胞占CD4+细胞比率较化疗前降低,T淋巴细胞亚群中CD3、CD4、CD4/CD8增高,CD8、NK和CD19降低;乳腺癌患者外周血调节性T细胞的数量与临床分期和组织分化程度相关。结论乳腺癌患者化疗后调节性T细胞的数量降低,免疫调节抑制功能下降,免疫功能得到提高,但体液免疫及NK功能未见提高。     

内蒙古新发现HIV感染者首次CD4~+T淋巴细胞检测分析

目的:通过对内蒙古地区新发现的HIV感染者首次CD4+T淋巴细胞进行检测分析,了解其免疫状况及疾病进展情况。方法:采用流式细胞术对采集的全血样本进行CD4+T淋巴细胞绝对值检测,统计分析其测定值。结果:能随访到的182例HIV感染者CD4+T淋巴细胞绝对值的均值为(459.85±240.21)个/μl。不同年龄组HIV感染者间CD4+T淋巴细胞绝对值差异具有统计学意义(F=9.509,P=0.0001**<0.05),且随年龄增长CD4+T淋巴细胞绝对值具有下降趋势。结论:内蒙古新发现HIV感染者中1/3已进入艾滋病期,需要监测疾病进程并及时对其进行抗病毒治疗。加强宣传,早发现、早干预、早管理,以提高HIV感染者的生存质量。     

恶性肿瘤患者外周血T细胞亚群的检测及其临床意义

目的检测分析恶性肿瘤患者外周血CD3 ,CD3 CD4 ,CD3 CD8 比例及CD3 CD4 /CD3 CD8 比值的变化,并探讨其临床意义。方法采用多参数流式细胞术(FCM)检测254例恶性肿瘤患者外周血T细胞亚群水平与31例健康者比较研究。结果与正常人比较,恶性肿瘤患者外周血CD3 ,CD3 CD4 细胞比例明显减少(P<0.01),而CD3 CD8 细胞比例明显增多(P<0.01),CD3 CD4 /CD3 CD8 比值明显下降(P<0.01)。性别、各年龄阶段不影响T细胞亚群水平的表达,差异无统计学意义(P>0.05)。鼻咽癌患者CD3 CD4 细胞比例及CD3 CD4 /CD3 CD8 比值明显低于其他种类肿瘤患者(P<0.01)。结论恶性肿瘤患者细胞免疫功能紊乱,监测肿瘤患者T细胞亚群水平,对评估患者的细胞免疫功能及疾病的诊断和预后判断具有积极的临床意义。     

子痫前期患者CD4~+CD25~+Foxp~(3+)调节性T细胞检测及意义

目的:研究CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在子痫前期患者(PE)外周血中的比例变化,探讨其在子痫前期发病中意义。方法:采用细胞内染色的流式细胞术检测22例子痫前期患者外周血中CD4+CD25high和CD4+CD25+Foxp3+的表达,并与正常妊娠和正常育龄妇女进行比较。结果:子痫前期患者外周血单个核细胞(PBMCS)CD4+T细胞中CD25high细胞明显低于正常妊娠和正常育龄妇女,CD4+CD25+Foxp3+的表达显著降低,而且其CD4+CD25+Foxp3+的表达与平均动脉压呈负相关。结论:子痫前期患者CD4+CD25+Foxp3+的表达明显减少,表明调节性T细胞的降低可能打破了母胎之间的耐受,参与了子痫前期的病理进程。     

芳香烃受体在类风湿关节炎患者外周血CD4+CD25+T细胞的表达及意义

目的 以类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者为研究对象,观察芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AHR)在患者外周血CD4+CD25+T细胞中的表达水平,探讨AHR在RA发病机制中的意义.方法 采用流式细胞术检测RA患者(35例)及健康对照组(14例)中AHR阳性细胞在外周血CD4+CD25+T及CCR6+CD4+T细胞中所占比例,并将所得结果与患者临床指标的相关性做分析.结果 RA组外周血CD4+ CD25+T细胞中AHR阳性细胞所占比例为(17.90(6.10,80.10))％,低于健康对照组(52.43(19.18,96.43))％,差异有统计学意义(Z=-4.362,P＜0.001);正常对照组外周血CD4+ CD25+T细胞中AHR阳性细胞比例为(52.49±19.18)％,高于CCR6+ CD4+T细胞中(23.18±5.62)％,且都高于外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中(18.06±7.80)％,三组间差异有统计学意义(x2=24.03,P＜0.001);RA组CD4+ CD25+T细胞中的AHR比例为(17.90(6.10,80.10))％,低于PBMCs中的(34.43(8.72,56.37))％,且都低于CCR6+CD4+T细胞中的(46.15(20.18,87.31))％,三组间差异有统计学意义(x2=38.29,P＜0.001).结论 RA外周血CD4+CD25+T细胞中,AHR阳性细胞比例降低,而在CCR6+ CD4+T细胞中升高,AHR可能通过调节辅助性T细胞17与调节性T细胞细胞的分化,影响Th17与Treg之间的平衡,从而参与RA的发病机制.     

艾滋病患者外周血中CD4、CD8T细胞数及血清中Zn、Se含量的变化

目的　测定艾滋病患者 (感染者 )外周血中 CD4、CD8和微量元素锌 (Zn)、硒 (Se)含量。　方法　应用流式细胞术检测 CD4、CD8,用光谱法测定 Zn、Se。　结果　 AIDS患者 CD4、CD4/ CD8、Zn、Se水平显著低于正常对照组 (P<0 .0 1) ;而 CD8则高于正常对照组 (P<0 .0 1)。　结论　 CD4、CD8、Zn、Se含量水平在 AIDS患者病情观察、诊断治疗中可能起着一定的作用     

肺结核合并糖尿病患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的检测分析

目的:检测肺结核合并糖尿病患者外周血CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞,探讨Treg细胞在疾病发生发展中的作用。方法:采用流式细胞技术多色荧光分析法,对81例肺结核合并糖尿病患者、63例肺结核患者及38例健康对照者外周血中Treg细胞测定,观察肺结核合并糖尿病患者与肺结核患者、健康对照者之间的差别。结果:肺结核合并糖尿病组与肺结核组外周血Treg细胞增多,两组间比较:t=2.24,P<0.05;肺结核合并糖尿病组与健康对照组外周血Treg细胞比较:t=3.79,P<0.01;肺结核组与健康对照组外周血Treg细胞比较:t=2.77,P<0.01。肺结核合并糖尿病初治组和复治组外周血Treg细胞比较:t=2.19,P<0.05;相关性分析显示肺结核合并糖尿病组中血糖浓度与Treg细胞数量之间呈正相关(r=0.269,P<0.01)。结论:肺结核合并糖尿病患者外周血Treg细胞数量增多,诱导免疫耐受,在疾病的发生发展中起到一定作用。     

低浓度二氧化硫对哮喘大鼠CD4~+CD25~+调节性T细胞及转录因子Foxp3表达的影响

目的探讨低浓度二氧化硫(sulfurdioxide,SO2)暴露对哮喘大鼠CD4+CD 25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)数量及转录因子Foxp3表达的影响。方法将60只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为正常对照组、低浓度SO2暴露组、哮喘组和低浓度SO2暴露哮喘组,每组15只;哮喘组采用卵清白蛋白(OVA)致敏并吸入激发制备哮喘模型,正常对照组吸入雾化生理盐水,低浓度SO2暴露组采用吸入低浓度SO2,低浓度SO2暴露哮喘组于每日雾化激发OVA前给予低浓度SO2吸入。采用流式细胞术检测外周血CD4+CD 25+Treg细胞占CD4+T细胞的比例,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测外周血和肺组织γ-干扰素(interferon-γ,γ-INF)以及白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)含量;Western blot检测肺组织Foxp3蛋白表达水平。结果哮喘组大鼠CD4+CD 25+Treg为(5.78±1.26)%,低于正常对照组的(9.63±1.37)%;低浓度SO2暴露哮喘组为(3.15±0.82)%,低于正常对照组和哮喘组,差异有统计学意义(P均<0.01)。哮喘组大鼠血浆和肺组织中IL-4含量[(23.51±4.86)ng/L和(0.93±0.16)ng/L]高于正常对照组[(11.24±2.53)ng/L和(0.29±0.06)ng/L],差异有统计学意义(P均<0.01);低浓度SO2暴露哮喘组血浆和肺组织中IL-4含量[(36.73±7.46)ng/L和(1.67±0.41)ng/L]高于正常对照组和哮喘组,差异有统计学意义(P均<0.01);哮喘组血浆和肺组织中γ-INF含量[(63.82±21.78)ng/L和(0.49±0.15)ng/L]低于正常对照组[(156.98±60.23)ng/L和(1.58±0.18)ng/L],差异有统计学意义(P<0.01),低浓度SO2暴露哮喘组γ-INF含量[(10.02±1.68)ng/L和(0.43±0.12)ng/L]低于正常对照组和哮喘组,差异有统计学意义(P<0.01)。哮喘组Foxp3蛋白表达为(8.23±0.56),低于正常对照组的(11.87±0.65)(P<0.05);低浓度SO2暴露哮喘组为(6.05±0.36),低于正常对照组和哮喘组(P<0.05)。结论低浓度SO2暴露可能通过下调CD4+CD 25+Treg数量并抑制Foxp3蛋白表达,进一步加重哮喘的Th1/Th2比例失衡,可能是诱发哮喘发病的因素。     

外周血CD4+CD25+调节性T细胞与乙型肝炎疫苗接种后应答关系的研究

目的 通过检测乙型肝炎(简称乙肝)疫苗接种后弱应答和无应答人外周血CD4+CD25+ 调节性T细胞(CD4+ CD25+ regulatory T cell,简称Treg细胞)的频率,探讨CD4+ CD25+ 调节性T细胞与乙肝疫苗接种后弱和(或)无应答之间的关系.方法 利用流式细胞分析方法 对25例乙肝疫苗无应答、30例乙肝疫苗弱应答者外周血Treg细胞的频率进行分析,另外选取20例乙肝疫苗强应答者作为对照.结果 强应答组Treg细胞的频率为(4.32±1.21)%,弱应答组Treg细胞的频率为(7.01±1.06)%,无应答组Treg细胞的频率为(12.75±2.01)%,无应答组和弱应答组与强应答组相比Treg细胞频率显著升高(t=8.426,t=3.289,P值均＜0.01).结论 乙肝疫苗接种后无应答和弱应答现象与外周血CD4+ CD25+ 调节性T细胞频率升高存在一定关系.     

乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群的变化及临床意义

目的探讨T淋巴细胞亚群在乙型肝炎患者外周血中的变化及其临床意义。方法采用多参数流式细胞仪检测乙型肝炎病毒携带者40例(病毒携带组)、慢性乙型肝炎30例(慢性组)、乙型肝炎肝硬化15例(肝硬化)及30例健康人(对照组)的外周血T淋巴细胞CD3及其亚群(CD4、CD8),并将结果进行比较。结果与对照组比较,三组乙型肝炎患者的CD3、CD4及CD4/CD8比值均降低,差异有统计学意义(P<0.05),CD8明显增高(P<0.05)。结论乙型肝炎患者细胞免疫功能紊乱,T细胞亚群的变化程度与病情进展有相关性。