抗-HCV阳性无病毒血症患者HCV特异性免疫反应研究

目的　研究抗HCV阳性无病毒血症患者特异的体液及细胞免疫状态。方法　对 15例抗HCV阳性无病毒血症患者 ,15例慢性HCV持续感染者及 15例正常对照者进行研究 ,通过MTT、LDH释放法、酶联免疫等方法观察患者外周T细胞反应、自然杀伤 (NK)细胞活性、细胞因子分泌及特异性体液免疫反应。结果　无病毒血症者T细胞增殖反应明显大于持续感染者及对照组 ,并且T细胞对核心区抗原增殖最大 ,NS3次之 ,对NS5则无明显增值。而NK细胞活性较持续感染者及对照组稍高 ,但无统计学差异。此外我们观察了患者抗HCV抗体产生 ,发现无病毒血症患者与持续感染者抗 -HCV抗体产生无明显统计学差异。还观察到在无病毒血症组抗原刺激后产生IFN明显高于持续感染组 ,两组在无抗原刺激下IFN产生水平均极低下。结论　抗HCV阳性无病毒血症患者 ,其T细胞免疫及抗体的产生均高于持续感染者 ,这可能在病毒的清除中起一定作用 ,而免疫反应在慢性HCV感染中的作用及机制 ,尚需进一步研究     

HCV感染的细胞免疫

目前，对ＨＣＶ感染的致病机制尚不清楚，免疫机制被认为起重要作用。本文就ＨＣＶ感染引起的细胞免疫方面作一综述。     

丙型肝炎病毒特异性细胞免疫研究进展

本文综述了近几年丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）特异性细胞免疫研究进展，重点介绍了ＣＤ８＋细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）介导的细胞免疫在抗ＨＣＶ感染中的作用及来自病毒方面的并分析了小鼠在这一研究领域的价值。     

HCV准种多样性及其与临床关系的研究

目的     

输血后丙型肝炎与抗丙型肝炎病毒（HCV）阳性献血？…

采用丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）５’－非编码区（５’－ＮＣＲ）和Ｃ区具有型特异性的引物建立的逆转录－聚合酶链反应方法检测了２５例丙型肝炎（ＨＣ）和２６例抗－ＨＣＶ阳性献血员的ＨＣＶ ＲＮＡ及基因型。结果２５例ＨＣ患者ＨＣＶ ＲＮＡ阳性率为１００．０％，２６例抗－ＨＣＶ阳性献血员ＨＣＶ ＲＮＡ阳性率为８４．５％，（２２／２６）。２５例ＨＣ中Ｉ、Ⅱ和混合型（Ｉ＋Ⅱ、Ⅱ＋Ⅲ、Ｉ＋Ⅲ、Ｉ＋Ⅱ＋Ⅲ）分别占８．０％     

丙型肝炎病毒准种多样性与病毒血症水平、疾病活动度及干扰素疗效的关系

目的　了解丙型肝炎病毒 (HCV)准种变异与病毒血症水平、疾病活动度及干扰素疗效的关系。方法　采用针对HCVE2高变区 1 (HVR1 )的单链构象多态性分析法 (SSCP)对 68例慢性丙型肝炎患者进行HCV准种检测 ,分析准种数目与HCVRNA、ALT、AST水平及肝组织活动指数 (HAI)的相关性。对其中 48例给予干扰素治疗 ,分析准种数目对干扰素应答效果的影响。结果　 61例HVR1SSCP阳性 ,HCV准种数目为 (6 2± 2 4)条。准种数量与HCVRNA水平显著相关 (P <0 0 1 ) ,与ALT、AST及HAI无明显相关 (P >0 0 5)。干扰素治疗患者中 ,43例HVR1阳性 ,持续应答者治疗前HCV准种数量 (3 3± 1 2 ,n =1 1 )显著少于获得治疗终点应答 (ETR)伴复发者 (6 3± 2 2 ,n =1 2 ,P <0 0 5)或无应答者 (8 0± 3 3 ,n=2 0 ,P <0 0 1 )。治疗结束时 ,干扰素组仍有 1 6例检测出HCV准种 ,但准种条数降为 (3 4± 1 2 )条 ,与未接受干扰素治疗病例的准种数目 (6 8± 2 5)相比差异有显著性 ,P <0 0 1 ) ,且其中 1 0例准种模式发生了改变。结论　HCV准种多样性可引起较高的病毒血症水平 ,但与疾病活动度无关 ;准种数目可作为预测慢性丙型肝炎干扰素疗效的指标。     

HLA-B宽特异性抗原表位Bw4对HCV特异性T细胞反应影响分析

目的 探讨HLA-B分子宽特异性抗原表位Bw4对丙型肝炎病毒(HCV)特异性T细胞反应的影响.方法 以有偿献血途径感染HCV患者86例为研究对象,采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)方法,进行HLA分型.采用ELISPOT技术观察HCV非结构蛋白NS3、NS4及NS5诱导T细胞分泌IFN-γ反应.结果 86例HCV感染者中Bw4/4纯合子患者29例(33.7％)、Bw4/6杂合子患者38例(44.2％)、Bw6/6纯合子患者19例(22.1％).Bw4/4纯合子、Bw4/6杂合子、Bw6/6纯合子HCV病毒载量分别为(3.98±0.32) Log(IU/ml)、(5.22±0.29) Log(IU/ml)、(5.04±0.38) Log(IU/ml),3组比较,HCV病毒载量差异具有统计学意义(P=0.0153).24例患者进行HCV非结构蛋白(NS3、NS4、NS5)诱导T细胞分泌IFN-γ反应,Bw4/4纯合子组HCV特异性T细胞反应率为50％ (5/10),反应强度中位数为70 SFU/106 PBMC(0～2020 SFU/106 PBMC),非Bw4/4纯合子组中,HCV特异性T细胞反应率为14.28％ (2/14),反应强度中位数为0 SFU/106 PBMC (0～200SFU/106 PBMC).两组比较,Bw4/4纯合子组反应强度明显高于非Bw4/4纯合子组,差异有统计学意义(P=0.0450),前者HCV特异性T细胞反应频率高于后者,差异接近有统计学意义(P=0.069).在Bw4/4纯合子组,HCV以NS5诱导的T细胞反应为主体,其反应频率为50％ (5/10),非Bw4/4纯合子组,NS5反应频率仅为7.14％(2/14),两者比较差异接近具有统计学意义(P=0.050).结论 携带Bw4/4纯合子HCV感染者,病毒载量较低,HCV特异性T细胞反应较强.Bw4可能通过增强HCV特异性T细胞免疫,进而产生对抗HCV复制的作用.     

鼠抗HCV单克隆抗体研制及初步应用探讨

交联HCV 合成多肽抗原,用鼠一鼠杂交瘤技术获得8株稳定分泌抗HCV 的特异性单抗,分别命名为YLCV 系1—8。经初步研究结果表示,抗HCV 抗体阳性血清可抑制酶标YLCV-1和YLCY-5单抗与抗原的反应。抗原测定结果6份血清中有一份呈强阳性反应,由此提示单抗在HCV 抗体抗原检测系统中应用的可能性,同时为HCV 抗原成份的分析提供了必要的条件.     

肝病患者血清抗HCV及HCVRNA的检测与意义

利用第２代抗ＨＣＶＥＬＩＳＡ试剂和ＰＣＲ技术对１８６例肝病患者进行了抗ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡ检测。６３例患者（３３．８７％）抗ＨＣＶ和／或ＨＣＶＲＮＡ阳性，表明本组肝病患者存在较严重的ＨＣＶ感染，ＨＣＶ标志物（ＨＣＶｍ）阳性肝病患者较ＨＣＶｍ阴性肝病患者有更高的输血，手术，接种和拔牙等血液暴露史（Ｐ〈０．０５或Ｐ〈０．０１）。６３例ＨＣＶ感染者中，３４例抗ＨＣＶ和ＨＣＶＲＮＡ同时阳性，另有患者表现为     

抗HCV中和抗体的研究进展

丙型肝炎病毒（HCV）为具包膜的单股正链RNA病毒，属于黄病毒家族。HCV是已知惟一能造成慢性感染的RNA病毒（除逆转录病毒外），据估计，目前全球约1．7亿HCV感染者中，60％-80％为慢性携带者，而持续性感染最终发展为肝硬化／肝癌的机率高达3．5％-20％。如此高比例的慢性感染率意味着在可能的病毒免疫逃逸机制下，机体往往无法激发或维持有效的抗病毒免疫反应。     

免疫活性细胞回输前后HCV滴度及C区和E2区CTL表位变化

目的：观察免疫活性细胞回输前后慢性丙型肝炎患者外周血丙型肝炎病毒（HCV）滴度及C区和E2区CTL表位的变化情况。方法：定量PCR检测4例接受免疫活性细胞回输的慢性丙型肝炎患者外周血HCV滴度，并利用分子克隆、基因测序和计算机辅助分析技术分析不同时间点不同分离株CTL表位的变化情况。结果：4例患者在接受免疫活性细胞回输前后血清ALT水平存在不同程度波动，其差值从第2例患者的58到第1例患者的198，同时HCV滴度也发生了较大变化，其变化倍数从第3例患者的25．37倍到第4例患者的882．35倍，其对数转换值的波动幅度在1．40－2．94之间。在免疫活性细胞回输后4例患者外周血HCV滴度均出现了不同程度的一过性下降。在全部观察期内HCV C区和E2区的CTL表位编码区均未出现明确的变化。结论：机体免疫攻击状态发生改变时可引起患者体内丙型肝炎病毒滴度的变化，但不伴随目前观察的CTL表位编码基因的改变。     

乙型肝炎患者特异性细胞免疫功能检测的初步研究

目的 通过酶联免疫斑点法检测乙型肝炎（乙肝）患者特异性细胞免疫功能，初步研究各型乙肝患者特异性细胞免疫功能的差异。方法 选择急、慢性乙肝、肝炎肝硬化（乙型）、乙肝病毒（HBV）既往感染，接种乙肝疫苗后血清乙肝病毒学标志中仅表面抗体阳性及未接种过乙肝疫苗、未感染过HBV、血清HBV标志全部阴性者共6组研究对象，每组4例，采用酶联免疫斑点法（ELISPOT）检测其外周血单个核细胞中γ-干扰索分泌细胞的数量。结果 急性乙肝患者、慢性乙肝患者及急性乙肝患者、肝炎肝硬化患者外周血单个核细胞γ-干扰素分泌细胞数量明显不同（P=0．0209及P=0．0211）。结论 通过ELISPOT检测乙肝患者外周血单个核细胞γ-干扰索分泌细胞的数量可以了解乙肝患者特异性细胞免疫功能。急性乙肝患者特异性细胞免疫功能明显强于慢性乙肝患者及肝炎肝硬化患者。     

沈阳地区各型丙型肝炎患者丙型肝炎病毒的基因分型

目的研究沈阳地区丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因型分布状况及其临床意义。方法应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法对沈阳地区８４例血清抗－ＨＣＶ及ＨＣＶＲＮＡ均阳性的各临床型丙型肝炎患者进行ＨＣＶ基因分型。结果８４例丙型肝炎中,ＨＣＶ－Ⅱ型４５例（５３．６％）,ＨＣＶ－Ⅲ型２６例（３０．９％）,Ⅱ／Ⅲ混合型１３例（１５．５％）;ＨＣＶ不同基因型在各型丙型肝炎中总体分布不一致,经统计学处理,Ｐ＜０．０５;在急性肝炎、慢性肝炎轻度、中度、重度及肝炎后肝硬化中,ＨＣＶ－Ⅱ型感染分别占５５．６％,３６．２％,７５．０％,８５．７％及８８．９％;ＨＣＶ－Ⅲ型感染分别占２２．２％,４６．８％,８．３％,０％骸１１．１％。结论沈阳地区ＨＣＶ感染以Ⅱ型为主,其次为Ⅲ型及Ⅱ／Ⅲ混合型;ＨＣＶ基因型与丙型肝炎严重程度密切相关。     

丙型肝炎病毒血清学分型应用的可行性研究

目的 探讨丙型肝炎病毒血清学分型的可行性。方法 应用EIA法对兰州地区148例抗－HCV阳性者进行血清学分型。结果 血清学方法的分型率为56．08％（83／148）,其中血清1型占50．60％（42／83）,血清2型占43．47％（36／83）,1＋2混合型占6．03％（5／83）。对其中70例HCVRNA阳性血清的基因型与血清型结果进行比较,二者完全相符。结论 丙型肝炎病毒的血清学分型具有一定的临床应用价值。     

Predicting factors of present hepatitis C virus infection among patients positive for the hepatitis C virus antibody

Background/Aims

To identify the predicting factors of present hepatitis C virus (HCV) infection among patients with positivity for antibodies to HCV (anti-HCV).

Methods

We analyzed patients who showed positive enzyme immunoassay (EIA) results and performed an HCV RNA test as a confirmatory test at Kyung Hee University Hospital at Gangdong from June 2006 to July 2012. The features distinguishing the groups with positive and negative HCV RNA results were reviewed.

Results

In total, 490 patients were included. The results of the HCV RNA test were positive and negative in 228 and 262 patients, respectively. The index value of anti-HCV, mean age, platelet counts, total bilirubin, prothrombin time international normalized ratio, albumin and alanine transaminase (ALT) levels differed significantly between the two groups. On multivariable analysis, an index value of anti-HCV >10 [odds ratio (OR)=397.27, P<0.001), ALT >40 IU/L (OR=3.64, P=0.001), and albumin <3.8 g/dL (OR=2.66, P=0.014) were related to present HCV infection.

Conclusions

Although EIA is not a quantitative test, considering the anti-HCV titer with ALT and albumin levels may be helpful in predicting present of HCV infection.     

Hepatitis C virus (HCV)-specific memory B-cell responses in transiently and chronically infected HIV positive individuals

BackgroundAntibody responses to hepatitis C virus (HCV) occur delayed and overly decline after viral clearance indicating that the B-cell response to HCV is abnormal. Virus-specific memory B-cells have recently been found in infected individuals, but the viral exposure requirements for the generation of these cells is unknown.ObjectivesThe primary goal of this study was to quantify and compare the HCV-specific memory B-cell response between chronic and resolved HCV-infected individuals. A secondary goal was to examine if HIV-specific memory B-cell responses are maintained during HCV co-infection.Study designHCV core protein- and HIV-specific memory B-cell responses were examined in HIV/HCV-infected individuals treated 4–30 weeks after HCV diagnosis. Memory B-cell frequencies were compared between chronically and transiently infected individuals.ResultsChronically infected individuals had vigorous HCV-specific memory B-cell responses and antibodies, whereas subjects with transient viremia showed low or undetectable virus-specific B-cell responses. In addition, chronically HIV/HCV-infected subjects had robust HIV-specific memory B-cell responses.ConclusionsWhereas chronic HCV infection induces virus-specific antibodies and memory B-cells, transient infection in individuals with sustained viral response to therapy does not stimulate a durable HCV-specific B-cell response indicating that the formation of long-lived virus-specific B-cells is suppressed in the early phase of infection. This may contribute to the inability to spontaneously clear HCV infection.     

丙型肝炎病毒阳性血清体外感染人肝细胞的研究

目的 研究丙型肝炎病毒(HCV)抗体(Ab)阴性,HCV-RNA阳性血清建立体外感染肝细胞模型.方法 HCV Ab阴性,HCV-RNA阳性的窗口期血清与人肝细胞共同培养,用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫荧光染色、Western blot、共聚焦显微镜和透射电镜等方法检测细胞内HCV核酸复制、蛋白质表达及超微结构改变.结果 细胞与病毒共同培养7～45 d,细胞内和/或培养上清中可间断检出HCV正、负链RNA;细胞浆内有HCV 核心和NS3抗原的表达;细胞超微结构有改变,并于感染后第24天时观察到类似病毒样颗粒.结论 窗口期血清中的HCV能在人肝细胞7701中复制一段时间.     

Evolution of the prevalence of hepatitis C virus infection and hepatitis C virus genotype distribution in human immunodeficiency virus-infected patients in Italy between 1997 and 2015

ObjectivesTo analyse the variation of hepatitis C virus (HCV) prevalence and genotype distribution and their determinants in people living with human immunodeficiency virus (HIV) who entered care between 1997 and 2015.MethodsHIV-infected patients enrolled in ICONA who were tested for HCV antibodies (HCV-Ab) were included.ResultsOverall 3407 of 12 135 (28.1%) were HCV-Ab+; and 735 of 12 135 (6.1%) were HBsAg+. Among patients whose HCV genotype was known, the most represented were genotypes 1 and 3. The prevalence of HCV infection decreased from 49.2% (2565/5217) during 1997–2002 to 10.2% (556/5466) during 2009–2015. The frequency of genotype 1a increased from 29.0% (264/911) to 43.0% (129/300), whereas genotype 3 decreased from 38.5% (351/911) to 27.0% (81/300). Independent predictors of HCV-Ab+ status were being female (adjusted OR (AOR) 1.23, 95% CI 1.04–1.50, p = 0.01), risk category (versus injecting drug users: men who have sex with men AOR 0.01, 95% CI 0.01–0.01, p <0.001; heterosexuals AOR 0.01, 95% CI 0.01–0.01, p <0.001; other/unknown AOR 0.02, 95% CI 0.01–0.02, p <0.001), being cared for in Central Italy (versus being cared for in Northern Italy: AOR 0.85, 95% CI 0.73–0.98, p <0.001), being Italian-born (AOR 1.44, 95% CI 1.16–1.80, p = 0.001) and being enrolled in less recent calendar years (versus 1997–2002: 2009–2015 AOR 0.23, 95% CI 0.19–0.27, p <0.001; 2003–2008 AOR 0.49, 95% CI 0.41–0.61, p <0.001).ConclusionsThe prevalence of HCV infection in HIV-infected patients entering into care in Italy significantly declined in more recent calendar years. After adjusting for risk factors and calendar years, HCV co-infection was more frequent in females and in those born in Italy.