国际脐血库建设现况

美国纽约血液中心 (ＮＹＢＣ)于 1992年 9月创建了世界第一个脐血库 (ＣｏｒｄＢｌｏｏｄＢａｎｋ)。 1994年 ,Ｋｕｒｔｚｂｅｒｇ等[1] 报道了首例无关供体的脐血移植 (ＵＣＢＴ)。迄今 ,世界许多国家都相继建立了脐血库 ,库存脐血约 5万份 ,无关供体ＵＣＢＴ已有10 0 0余例[2 4 ] 。现就国际脐血库建设现况作一介绍。1　脐血库的组织机构　一般来说 ,脐血库的组织机构主要由①采集单位 ;②冷冻保存实验室 ;③造血干细胞生物学实验室 ;④移植免疫实验室 ;⑤病原体检测实验室 ;⑥资料保存室 ;⑦质量控制和监测部门等组成[6 8] 。1.1　脐血…     

脐血库与脐血移植发展现状

1995年 ,我曾就脐血库建设问题发表浅见 ,几年来 ,该文提及的欣喜和忧虑有的已渐显分晓。然而有些问题 ,似乎仍然是喜忧参半 ,愿再次与同道商榷。1　关于脐血库　据全球骨髓供者登记处 (ＢＭＤＷ )2 0 0 1年资料 ,冻存脐血 7万余份 ,占骨髓库供者的1%。并不像筹建之初基于随机人群中ＨＬＡ相合的概率低 ,担忧脐血库与骨髓库一样 ,至少需要 5万份以上库存量方能发挥提供造血细胞的功能。如纽约脐血库 ,当 1996年冻存 30 0 0份脐血时 ,已为临床提供 10 0余份脐血 ,1998年库存 770 5份 ,供临床移植6 76份 ,其使用率达到库存量的近 10 %。我国山…     

日本脐血库和脐血移植的现状

1988年 Gluckman 为1例 Fanconi 贫血患儿实施了来源其胞妹的脐血移植并获成功,这为须接受造血干细胞移植(HSCT)治疗而寻找不到 HLA 配型相合骨髓的患者带来了希望,脐血移植因此被世界医学界所关注。此后,非血缘关系脐血移植和脐血库的建立取得突破性进展。日本东京大学医学科学研究所(东大医科所)于1994年     

脐血库建立及脐血移植临床应用的现状

人类脐血富含造血干细胞,作为骨髓与外周血以外的一种重要造血干细胞来源日益受到重视。脐血移植（ＣＢＴ）用于临床已有１０年历史,世界各先进国家积极开展无关供体脐血移植的研究,并相继建立起脐血库,我国这方面的工作也正在起步。本就ＣＢ在采集,冻存,质量检测、ＣＢＴ临床应用资料及医学伦学方面的研究现状和建库面临的问题等作一综述。     

骨髓库和脐血库中的HLA分型技术和策略

造血干细胞移植要求供者和患者的人类白细胞抗原(HLA)有最大程度的配合.供者来源包括HLA配合的患者亲属以及无亲缘关系的个体或脐带血.为了找到HLA配合的无亲缘关系供者,自20世纪80年代末起,在世界范围内建立了各种骨髓供者登记(以下简称骨髓库)和脐血库.根据世界骨髓供者联网(BMDW)的统计,目前已有37个国家或地区的48个骨髓库和15个国家的23个脐血库参加该组织.到2001年3月止,登记在册的骨髓供者和脐血总数已超过700万例(http:/www.bmdw.org).在建立骨髓库和脐血库中,都涉及HLA分型的问题.特别是在目前HLA分型技术转向DNA方法的过渡阶段,究竟采用什么样的HLA分型策略显得格外重要.本文将综述目前国际上通用的HLA分型标准,为制定中国骨髓库和脐血库的HLA分型策略提供依据. 1 HLA-DNA分型已取代血清学分型 血清学方法是HLA分型的经典技术,它需要有活力的T和B淋巴细胞,以及特异性明确的HLA分型标准血清.由于HLA抗血清本身的交叉反应,弱反应以及额外反应等特性,造成HLA血清学分型错误率高.美国国家骨髓库(NMDP)在一项大规模研究中,比较了42160例骨髓供者的HLA-AB血清学分型和DNA分型结果,发现血清学方法错误率HLA-A为8%,HLA-B为13%,HLA-A和B为3%,总错误率达24%[1].此外由于淋巴细胞的保存相对比较困难,以及高质量的单价HLA分型血清,特别HLA-DR分型血清来源有限,这些因素导致血清学方法被淘汰.自1996年第12届国际组织相容性讨论会后,以DNA为基础的HLA基因分型技术日趋成熟,并逐渐取代血清学方法.HLA血清学也不再被列入以后的国际组织相容性讨论.     

脐血库建立及脐血移植临床应用的现状

人类脐血(Cord Blood,CB)富含造血干细胞,作为骨髓与外周血以外的一种重要造血干细胞来源日益受到重视。脐血移植(CBT)用于临床已有10年历史,世界各先进国家均积极开展无关供体脐血移植的研究,并相继建立起脐血库,我国这方面的工作也正在起步。本文就CB在采集、冻存、质量检测、CBT临床应用资料及医学伦理学方面的研究现状和建库面临的问题等作一综述。     

山东脐血库保存4000人份脐血资料的统计分析

对山东脐血库保存的 4 0 0 0人份脐血的部分结果进行了统计分析 ,每份脐血的平均有核细胞数超过 1.2× 10 9,每份脐血CD34+ 细胞总量平均为 3.9× 10 6,有 76 8人份脐血有核细胞数超过 1.5× 10 9,一般可满足体重 4 0kg以上的患者使用。对基因频率的分析表明 ,常见基因与中国其他地区的统计结果相近 ,有 4 0 %的患者可以在山东脐血库找到 1个位点不合的脐血     

脐血造血干细胞库建立及其临床应用

目的 建立脐血造血干细胞库,用于治疗白血病、淋巴瘤、再生障碍性贫血等疾病。方法 采集新生儿脐血,用6％HES离心法分离脐血有核细胞以缩小脐血体积,样本以10％DMSO保存,检测有核细胞数、CD_(34)~+、CFU-GM及HLA,并作病原学捡测。结果 收集590份脐血,合格230份(合格率39％),平均脐血体积(89±20)ml,平均有核细胞数(1.48+0.36)×10~9,分离后有核细胞数(1.25±0.28)×10~9,有核细胞回收率(91+7)％,脐血CD_(34)~+细胞的百分率为(0.37±0.26)％,复苏后CFU-GM回收率为84％,平均每份脐血含CFU-GM(0.9±0.4)×10~6个集落,14％的样本CMV抗体阳性。73人查询,HLA 4个抗原以上相合率为95.7％。至2001年7月,提供3份脐血用于非亲缘脐血移植,1份用于亲缘脐血移植,3例植入,1例排斥。结论 建立脐血库有良好的应用前景。     

HLA测序技术在非亲缘性脐血移植应用价值探讨

1998年6月至2004年7月，广州脐血库向国内21家移植中心54例患者提供了非亲缘性异基因脐血。为了探讨非亲缘性脐血移植供／受者HLA等位基因及其亚型与脐血移植GVHD发生率的关系，对54例非亲缘性脐血移植病例中，半年后有反馈随访资料的48例，利用盐析或柱提法提取移植的非亲缘性脐血的DNA及移植病例的全血DNA，采用HLA—SBT方法分别对HLA—A、B、DRB1位点进行了高分辨分型，并与我库脐血收集常规采用的HLA—SSP（HLA—Sequencing specific primers）低分辨结果进行了比较分析。结果发现，HLA不合位点不多于2个和HLA不合位点不少于3个的病例GVHD的发生率具有统计学显著性差异（P〈0．05）。在对HLA—A、B、DRB1等位基因高分辨单因素分型结果中，HLA—B和HLA-DRB1等位基因匹配全相合的病例GVHD发生率显著低于不完全相合病例GVHD的发生率（P=0．000，P=0．005）。结论：PCR—SBT技术在非亲缘性脐血移植HLA配型方面具有重要的临床应用价值。     

广州脐血库3 605脐血供者6个月后随访

本研究回顾分析了脐血库对库存3605份脐血所进行的脐血供者6个月后的随访情况,探讨供者随访制度在脐血库运作过程中的作用。1998年6月至2004年2月间,通过电话、信函方式对捐献脐血满6个月的母亲进行了母婴健康调查随访,对脐血的质量作出了评估结果表明：有3195人接受了电话随访,18人婉拒、对于无法通过电话随访的,则采用信函调查形式．共发信392封,回信15封。电话随访每例平均耗时12分钟随访资料显示婴儿染色体异常2例、先天性甲状腺功能低下1例、粒细胞减少症1例、白化病1例、不明原因死亡5例。所有这些被查明为非正常婴儿供者的脐血均被废弃,总之：脐血库进行脐血供者6个月后的随访工作．能有效地提高库存脐血的质量。     

脐带血库质量控制的探讨

近年来的临床报告表明,脐带血已为造血干细胞移植开辟了新的来源,从而导致了在世界范围内脐带血库的兴起。在建立大规模的脐带血库以前,制定质量控制标准对脐带血库及脐带血的临床应用是非常必要的。随着对有关血液制品生产企业的加强管理,质量控制在血液制品中心及造血干细胞实验室更是起着重要作用。我们根据近几个有关脐带血生物学特性及脐带血库发表的献,结合着山东脐带血库脐带血采集的方法,脐带血在洁净车间的分离,以及为科研和临床应用的脐带血保存等经验,阐述对质量控制的要求。我们的结论是：①按照cGMP的要求,在我国建立一座大型的脐带血库为临床移植应用,是完全可行的;②HES沉降去除红细胞,SSP组织相容性抗原（HLA）配型,条形参政和计算机联网,病毒及细菌检测以及采用50毫升冰冻贮存袋保存脐带血是建立大型脐带血库的有效而经济的操作程序;③平均60毫升脐带血含有足够的细胞为儿童及部分成人开展脐带血移植;④和骨髓血相比,脐带血造血干/祖细胞在体外扩增方面具有更大的潜力。     

HLA三维结构匹配预测脐带血移植后急性GVHD

为探讨一种有效预测脐带血移植后急性移植物抗宿主疾病 (aGVHD)的方法 ,采用分子模拟技术对 2 5对已接受非亲缘脐带血移植并成功植入的血液病患者及其供者HLA A ,B ,DRB1分子的三维结构进行了模拟 ,并通过计算供受者不匹配的HLA分子间均方根差 (RMSD)及各差异位点的总RMSD ,将供受者之间不匹配HLA分子的结构差异转化为数字 ,根据量化差异分析预测非亲缘脐带血移植后aGVHD的发生和程度。 2 5名患者分为 3组 :第 1组为不发生aGVHD组 ,第 2组为aGVHDⅠ -Ⅱ组 ,第 3组为aGVHDⅢ -Ⅳ组。结果表明 :第 1组 8例 ,第 2组 13例 ,第 3组 4例。 3组供受者总RMSD值±标准差分别为 :0 .2 4± 0 .15 ,0 .2 5± 0 .14和 0 .4 7± 0 .2 2。第 3组的总RMSD值明显高于第 1和第 2组 (P <0 .0 5 )。结论 :采用HLA分子三维结构模拟匹配的方法 ,可以快速、简捷、准确地预测非亲缘脐带血移植后严重的aGVHD发生 ,为临床医生选择最佳脐血供者和避免严重的aGVHD的发生提供了理论依据 ,并对移植后免疫抑制药物的应用具有重要的指导意义。     

HLA 高分辨分型在非亲缘双份脐血移植中的应用价值简

本研究探讨人类白细胞抗原（HLA）高分辨在脐血移植中的应用价值及对移植预后的影响.对34名患有恶性血液病患者行非亲缘双份脐血移植,采用DNA序列测序方法（SBT）、序列特异性寡核苷酸探针（SSOP）和高分辨序列特异性引物（SSP）分型方法,对供、患者双方行低分辨HLA-A,B,DRB1及高分辨HLA-A,B,Cw,DRB1,DQB1配型,对比分析其在优势脐血植入、造血重建时间、急性移植物抗宿主病（aGVHD）及移植后感染之间的差异.结果表明,总有核细胞（TNC）中位数为6.0×10 7/Kg,当TNC≥5×107/kg时,可缩短中性粒细胞植入时间（P＜0.05）,HLA高分辨（6-10）/10组在脐血优势植入、血小板植入时间、aGVHD发生方面优于（4-5）/10组（P＜0.05）.高分辨HLA-Ⅰ＋Ⅱ类位点错配、HLA-DRB1、DQB1位点不合,能延长血小扳植入时间（P＜0.05）.低分辨HLA （5-6）/6组与4/6组相比,在优势脐血植入无显著性差异（P＞0.05）,但在血小板植入时间及aGVHD的发生方面HLA-5/6优于4/6组（P＜0.05）.供受体性别、血型等对造血重建、优势脐血重建、GVHD的发生均未见统计学差异及与血小板及中性粒细胞植入时间均无相关性.结论：对非亲缘脐血移植受体和移植物进行HLA高分辨配型有利于遴选最佳脐血,在促进造血重建及降低移植后并发症方面具有重要的临床应用价值.     

干细胞移植治疗神经遗传疾病中HLA配合的几率分析

为了探讨干细胞移植(Stem Cell Transplantation)对神经系统中预后不良的单基因遗传性疾病之一DMD(假肥大型肌营养不良症)的临床可行性，采用PCR反向序列特异性寡核苷酸杂交技术(polymerase chain reactionreverse sequence specific oligonucleotide，PCR—RSSO)对30例DMD患者进行HLA—ABDR基因分型，并与广东省脐血干细胞库668份和中国造血干细胞捐献者库34910份分别进行HLA—ABDR基因频率比较和无关供者干细胞的配合性分析。结果表明：DMD疾病组的HLA基因呈正态遗传，DMD患者HLA基因表达与广东健康人群无统计学上显著差异；DMD患者中1／4寻找到合适用于移植的干细胞，其中在广东脐血库寻找到≥5个HLA—ABDR基因配合的几率为50％，在中国造血干细胞库寻找到6个HLA—ABDR基因配合的几率为26％。结论：对DMD患者进行非亲缘异基因脐带血/外周血移植治疗具有HLA配合供者高选择几率的可行性基础；干细胞移植不仅将使致死性神经肌肉疾病患者获得临床症状改善，并且为难治性神经系统疾病受益于干细胞移植治疗打造技术平台。     

新生儿脐血ABO血型正反定型及交叉配血实验结果分析

目的探讨婴幼儿ABO正反定型的符合情况及交叉配血试验在婴幼儿输血时的局限性。方法选2010名新生儿的脐血标本,用微柱凝胶血型卡进行正定型,用试管法和纸片法做反定型,用微柱凝胶技术选择异型血与脐血进行交叉配血。结果正定型为A型700份标本中,499份检出抗B,但有39例反应弱,201例未检出抗B,抗B检出率为71.28%(499/700)。正定型为B型的510例标本中,373例检出抗A,但有23例反应弱,137例未检出抗A,抗A检出率为73.13%(373/510)。正定型为O型的800例标本中,只有571例同时检出了抗A和抗B,检出率为71.37%(571/800),131例未检出抗A、抗B,占16.38%(131/800),另有53例仅检出抗A,45例仅检出抗B。选用反定型完全没有凝集的新生儿A、B型的血清各40例分别进行相反血型交叉配血试验,即A(B)型血清 B(A)型红细胞,在这80例的配血结果中:盐水配血法全部阴性,聚凝胺配血法有2例弱阳性,微柱凝胶技术配血法发现有8例弱阳性。结论新生儿ABO血型鉴定中大部分已正反定型相符,在新生儿常规血型检查时反定型的价值不可忽视。微柱凝胶抗人球蛋白技术能有效地发现微弱的血型抗体,是一种较为敏感、安全的方法。     

多份脐血移植13例回顾性分析

为了探索成人多份脐血移植的可行性 ,对广州市脐血库 1998年 6月至 2 0 0 3年 7月提供的 13例非亲缘关系多份脐血移植进行回顾性分析。脐血均采自广州市妇婴医院正常分娩的足月顺产孕妇 ,脐血分离、冻存、复温方法参照纽约脐血库标准及相关文献 ;多份移植脐血HLA匹配为 1 6 - 2 6位点不相合。结果表明 :1998年 6月至2 0 0 3年 7月 ,广州市脐血库向国内 7家移植中心提供非亲缘关系脐血 2 8份 ,治疗患者 13例。受者中位年龄 2 2 (8- 4 1)岁 ,中位体重 5 0 (2 1- 75 )公斤 ,2 8份脐血中TNC总输入量中位数为 2 .91× 10 7 kg。13例中 6例植入 (中性粒细胞 >5× 10 8 L) ,植入率为 4 6 .1% ,植入平均时间为 19天。 1例患者发生GVHD反应 ,1例患者发生自体恢复。生存率 4 6 .2 % (6 13)。结论 :多份脐血移植具有良好的应用前景。     

54例非亲缘脐血造血干细胞移植回顾性分析

本研究对广州市脐血库1998年6月至2003年7月提供的54例非亲缘脐血移植进行回顾性分析,以研究脐血移植的相关影响因素.脐血均采自广州市妇婴医院正常分娩的足月顺产孕妇,脐血分离、冻存、复温方法参照纽约脐血库标准及相关文献;选择脐血的依据是HLA相合程度及有核细胞数量.结果表明1998年6月至2003年7月间,库存脐血3475份,与21家移植中心合作提供脐血99份,治疗患者85例.其中同胞脐血移植11例.对54例非亲缘关系脐血移植病例进行统计分析显示,在54例受者中,恶性病患者43例,占79.6%,非恶性病患者11例,占20.4%,受者中位年龄9.5(1.2-33)岁,中位体重27(10-60)公斤,TNC中位输入量6.82×107/kg,移植后60天植入43例(ANC＞500/μl的中位时间为17天),植入率为79.6%.脐血移植有核细胞重建时间与输入的有核细胞数以及疾病类型相关,同HLA相合程度不相关.急性Ⅲ-Ⅳ度GVHD发生率为21.6%,慢性GVHD发生率为5.4%.6例患者出现自体恢复(11.1%).存活率42.6%.结论非亲缘性脐血造血干细胞移植尤其在治疗小儿白血病方面具有良好的应用前景.     

新生儿脐血RhD阴性稀有血型资料库的建立研究

目的 建立新生儿脐血RhD阴性稀有血型资料库,了解天津脐血库存储人群Rh血型分布情况.方法 收集2001年10月至2011年8月天津脐血库存储的154 882例健康新生儿脐血样本作为研究对象,使用试管法检测样本ABO抗原和RhD抗原,RhD阴性确认采用间接抗人球蛋白试验.结果 154882例脐血样本中检出RhD阴性58...