肝细胞癌患者血清与癌组织中抗HCV及HCVRNA的检测

８８例经病理确诊的肝细胞癌患者，用ＥＬＩＳＡ法检测其血清抗－ＨＣＶ与ＨＢＶ－Ｍ，阳性率分别为１４．７７％和９０．９１％。用ＰＣＲ法检测发现血清ＨＣＶＲＮＡ阳性１２例（１３．６４％）；１１例血清ＨＢＶＤＮＡ阳性病人的肝癌组织中８例ＨＢＶＤＮＡ阳性；１例肝癌组织中同时检出ＨＣＶＲＮＡ与ＨＢＶＤＮＡ。结果表明，本组肝癌的发生主要与ＨＢＶ感染有关。而与ＨＣＶ感染也可能有一定关系。     

肝细胞癌患者血清与癌组织中抗HCV及HCVRNA的检测

８８例经病理确诊的肝细胞癌患者，用ＥＬＩＳＡ法检测其血清抗ＨＣＶ与ＨＢＶ－Ｍ，阳性率分别为１４．７７％和９０．９１％。用ＰＣＲ法检测发现血清ＨＣＶＲＮＡ阳性１２例（１３．６４％）；１１例血清ＨＢＶＤＮＡ阳性病人的肝癌组织中８例ＨＢＶＤＮＡ阳性；１例肝癌组织中同时检出ＨＣＶＲＮＡ与ＨＢＶＤＮＡ。结果表明，本组肝癌的发生主要与ＨＢＶ感染有关，而与ＨＣＶ感染也可能有一定关系。     

荧光定量PCR技术在检测HCV—RNA中的应用

目的 评价荧光定量ＰＣＲ技术测定ＨＣＶ－ＲＮＡ水平的价值,探讨ＰＢＭＣ中检出ＨＣＶ－ＲＮＡ的意义。方法 采用荧光定量ＫＲ及ＲＴ－ＰＣＲ技术同时检测８７例血液透析患者的血清和淋巴细胞中ＨＣＶ－ＲＮＡ。结果血清、淋巴细胞中ＨＣＶ－ＲＮＡ的荧光定量ＰＣＲ检出率（４９．４％、６９．０％）,分别高于相应标本中ＨＣＶ－ＲＮＡ的ＲＴ－ＰＣＲ阳性率（３３．３％、３５．６％）（Ｐ ＜０．０５）。血清、淋巴细胞中同时检出ＨＣＶ－ＲＮＡ的一致率,荧光定量ＰＣＲ法（３１．０％）显著高于ＲＴ－ＰＣＲ定性法（６．９％）（Ｐ＜０．００１）． 荧光定量ＰＣＲ法,淋巴细胞中ＨＣＶ－ＲＮＡ检出率高于血清（Ｐ＜０．０１）。结论 与 ＲＴ－ＰＣＲ相比,荧光定量ＰＣＲ技术检测 ＨＣＶ－ＲＮＡ敏感性较高,对ＰＢＭＣ内ＨＣＶ－ＲＮＡ检测有利于提高ＨＣＶ检测的阳性率。     

应用聚合酶链反应进一步探讨原发性肝癌与HBV,HCV感染的关系

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测原发性肝癌（ＰＨＣ）及肝硬化（ＬＣ）患者血中ＨＢＶ－ＤＮＡ及ＨＣＶ－ＲＮＡ，同时检测血中乙肝５项标志及抗－ＨＣＶ。结果５６例ＰＨＣ中，ＨＢＶ５项标志阳性者４３例（７６．７８％），ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者４２例（７５．００％），两种方法联合应用阳性率为４９例（８７．５％）；其中３４例检测ＨＣＡ－ＲＮＡ阳性者８例（２３．５３％）。６２例ＬＣ中，ＨＢＶ５项标志阳性者３５例（５６．４５％），ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者３８例（６１．２９％），二者联合应用阳性数为４５例（７２．５８％），其中３４例检测ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性数为９例（２３．６８％）。ＰＨＣ组ＨＢＶ感染率显著高于ＬＣ组（Ｐ＜０．０５），ＨＣＶ感染率两组差异无显著性（Ｐ＜０．０５）。并对ＨＢＶ、ＨＣＶ感染与ＬＣ、ＰＨＣ的发生发展作进一步讨论。     

乙型病毒性肝炎的基因诊断

对１２０例乙肝病毒（ＨＢＶ）感染者血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ用ＰＣＲ技术进行检测，结果表明，ＰＣＲ法的敏感性阳性检出率７５．８％，明显高于ＥＬＩＳＡ法（ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ和ＨＢＣＡｂ）的阳性率分别为６１％、３８％和６２％）；ＰＣＲ检测ＨＢｓＡｇ和ＨＢＡｂ一血清的ＨＢＶ－ＤＮＡ，阳性率分别为２６％、５２％和２４％，ＰＣＲ检测三者均为阳性血清的ＨＢＶ－ＤＮＡ，阳性率为１００％慢性迁延肝炎、慢性活动性肝炎     

丙型肝炎患者血清和外周血单个核细胞HCV—RNA检测

目的：了解丙型肝炎患者血清和外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中ＨＣＶ－ＲＮＡ存在情况及其意义。方法：采用套式ＰＣＲ检测３８例急性丙肝炎和３６例慢性丙型肝炎患者血清和外周血ＰＢＭＣ中ＨＣＶ－ＲＮＡ《结果：７４例丙型肝炎血清ＨＣＶＲＮＡ阳性６８例,ＰＢＭＣ阳性４４例;急性丙型肝炎患者ＰＢＭＣ中ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性１５例（３９．５％）,慢性丙型肝炎患者ＰＢＭＣ中阳性２９例（８０．６％）。慢性丙型肝炎患者ＰＢＭ     

103例肝病患者丙型肝炎病毒核酸检测及其临床意义

本文采用逆转录巢式多聚酶链反应（ＲＴ－ｎＰＣＲ）检测了１０３例无输血、血制品史的肝炎患者的丙型肝炎病毒核酸（ＨＣＶＲＮＡ），阳性者２７例（２６．２％）。同时采用ＥＬＩＳＡ法检测抗一ＨＣＶ，结果显示两者符合率达７３．１％。１０．４％抗一ＨＣＶ阴性患者ＨＣＶＲＮＡ阳性。１０３例患者中，ＨＢＶ感染者７２例（６９．９％），其中并发ＨＣＶ感染者１１例（１０．７％），结果提示感染ＨＣＶ可使病情加重或慢性化，并对ＨＢＶ复制有一定抑制作用。     

应用RT—PCR检测丙肝病毒246例分析

用ＲＴ－ＰＣＲ（逆转录聚合酶链反应）扩增丙型肝炎病毒５’端非编码（５’ＮＣＲ）序列，２４６例肝炎患者中ＨＣＶ ＲＮＡ（丙型肝炎病毒核糖核酸）阳性者４５例，阳性率１８．３％（４５／２４６），凡阳性者用酶联免疫法测定－ＨＣＶ（抗丙型肝炎病毒抗体），其中２４例测到抗－ＨＣＶ，阳性重叠率５３．３％（２４／４５），和ＲＴ－ＰＣＲ法检测ＨＣＶ ＲＮＡ，能在抗－ＨＣＶ转阳以前检出ＨＣＶ ＲＮＡ，更早地确诊丙型肝     

聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒DNA与ELISA检测e系统间的关系

作应用聚合酶链反应检测了８９例慢性乙型肝炎ｅ系统阳性患血清乙型肝炎病毒ＤＮＡ，其中４４例ＥＬＩＳＡ法ＨＢｅＡｇ阳性，ＰＣＲ法ＨＢＶＤＮＡ检出率为８８．１０％；４７例抗－ＨＢｅ阳性，ＰＣＲ法ＨＢＶＤＮＡ检出率为６５．９６％，应用高特异，高录敏的ＰＣＲ法检测ｅ系统阳性患血清ＨＢＶＤＮＡ提示既往认为ＨＢｅＡｇ阳性转为抗－ＨＢｅ阳性做为病毒复制减弱或消失，病情缓解的指标是不确切的，而情缓解的指标     

原发性肝癌和职业献血员庚肝病毒感染和核酸序列测定

目的：为了解本地区原发性肝癌（ＰＨＣ）中ＨＧＶ感染状况和与输血的关系。方法：采用逆转录－套式聚合酸链反应法（ＲＴ－ｎＰＣＲ）对２０例ＰＨＣ和４４例职业献血员进行了ＨＧＶ０－ＲＮＡ检测,并对３例阳性产物纯化克隆后,采用ＡＢＩ Ｐｒｉｓｒｎ３７７ＤＮＡ自动测序仪,对其５＇非编码区基因序列（１１５～４６７ｎｔ）进行了测定。结果：２０例ＰＨＣ中,２例（１０．０％）ＨＧＶ０ＲＮＡ阳性,该２例分别为ＨＢＶ、Ｈ     

血液病患者中HCV和HBV感染及其复制分析

对１２６例血液病患者ＨＣＶ和ＨＢＶ感染及其病毒复制进行了研究，结果：（１）１２６例患者中ＨＣＶ抗体阳性８例（６．４％）大约比献血员感染率高１０倍（Ｐ〈０．０１），在抗体阳性者中有７例ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性（８７．５％）（２）所测患才中ＨＢＶ五项标志物单项或多项阳性２６例（２０．６％）其中ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性１２例（４６．２％）在８例ＨＣＶ感染者中有３例与ＨＢＶ重叠感染（３７．５％）５例有既往输血史（６２     

庚肝病毒复制时嘌呤代谢酶活性及IL-6和IL-8的浓度变化

目的;探讨腺苷脱氨酶（ＡＤＡ）,鸟嘌呤酶（ＧＵＡ）、ＩＬ－６和ＩＬ－８,在庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）复制中的改变,方法：以ＲＴ－ＰＣＲ分析不同肝病患者中ＨＧＶ－ＲＮＡ,并对反映肝细胞损害灵敏的嘌呤酶活性,ＩＬ－６和ＩＬ－８浓度进行检测,对单纯ＨＧＶ感染和ＨＧＶ与其它病毒复合感染作了比较分析。结果：在肝病组中ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性率为１０．５％,在非肝病组中的阳性率为７．５％,在３７例ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性患得     

慢性丙型肝炎患者血清HCVRNA水平与AST/ALT比例的关系

目的分析抗-HCV阳性患者血清水平HCVRNA与AST/ALT活性的关系;评价AST/ALT比值,HCVRNA水平在判断丙肝患者预后方面的价值。方法采用ELISA法检测抗-HCV,阳性标本分别用荧光PCR试剂盒测定HCVRNA;全自动生化分析仪检测AST/ALT。结果 78份抗-HCV阳性标本经PCR检测后有31份标本含有HCVRNA,HCVRNA拷贝量与AST/ALT比例呈正相关。结论动态监测AST/ALT比例和HCVRNA的水平,可用于丙型肝炎的预后估计。     

慢性乙型肝炎患者的HCV重叠感染

研究45例慢性乙型肝炎患者的HCV重叠感染。病例均为后发抗HCV阳性的慢性HBsAg携带者,无先抗HCV阳性而后HBsAg阳性的个案,这可能反映HBV和HCV两种病毒感染的先后次序、不同传播方式及HBV对HCV易感性的增进作用。用RT-PCR检出30/45例血浆HCV RNA阳性,不仅确证HCV重叠感染诊断,还证实HCV复制及传染性。23/30例HCVRNA阳性者有输血史,提示输血是其获得HCV重叠感染的主要途迳。用PCR检出25/45例血清HBV DNA阳性,其中抗HBe阳性者的HBV DNA检出率为42.9％(12/18),明显低于(P<0.001)我们前文报道,提示重叠HCV感染对HBV复制有抑制作用。此外有9例抗HBe阳性者,其HBV DNA阴性但HCV RNA阳性,反映HCV可能已取代HBV成为致肝损害的主要病因。     

青少年原发性肝癌与乙型及丙型肝炎病毒感染的关系分析

目的研究我院收治的青少年原发性肝癌(PHC)患者乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、HBV/HCV混合感染率,为采取有效的防治措施提供科学依据。方法收集2001年1月—2011年10月解放军302医院收治的青少年PHC患者为病例组,同期住院的其他肝病患者为对照组,对HBV、HCV、HBV/HCV血清标志物阳性率情况进行分析。结果病例组HBsAg、抗HBe、HBeAg、HBV-DNA阳性率分别为77.5%、55.0%、17.5%和40.0%,均高于对照组(25.0%、20.0%、5.0%和7.5%);抗HCV和HCV-RNA阳性率分别为12.5%和15.0%,HBV/HCV混合感染率为12.5%,均高于对照组(5.0%、2.5%和2.5%)。结论 HBV感染、HBV/HCV混合感染对青少年PHC患者的发病具有一定作用,但HBV感染仍是主要的因素。     

1 638例孕妇产前肝炎病毒及梅毒感染分析

目的 了解潮汕地区普通孕妇乙型（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV、）及梅毒（RPR）产前感染的情况,分析母婴传播的危险性并探讨其传播途径.方法 运用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测HBV标志物六项、抗-HCV,及荧光定量聚合酶链式反应（FQ-PCR）检测HBV-DNA、HCV-RNA;RPR做梅毒血清学检测.结果 1 638例孕妇检测HBsAg阳性189例（11.5%）;30例HBV-DNA阳性母亲所生婴儿中8例阳性,母婴传播率26.7%.RPR阳性3例（0.18%）;抗-HCV阳性15例（0.92%）,其中10例HCV-RNA阳性,所生10名婴儿有2例阳性,母婴传播率20%.结论 潮汕地区普通孕妇人群产前肝炎病毒及梅毒的感染率不低,并有垂直传播的危害性,故提倡采取预防保健措施以达到优生优育的目的.     

急性病毒性肝炎中肝炎病毒的多重感染

在243例急性黄疸型肝炎患者中发现肝炎病毒多重感染者77例(31.69％),包括HAV+HBV双重感染65例,HBV+HDV协同感染4例,HAV+HBV+HDV三重感染7例,HBV+CMV重叠感染1例。多重或单一病毒感染组其SB和SGPT升高的水平差异无显著性,但肝炎病毒多重感染与甲或乙型急性肝炎相比,其黄疸消退和SGPT恢复时间均明显延长。     

职业献血浆员HBV和HCV感染状况的研究

本文采用ELISA法检测247名职业健康献血浆员中抗-HCV和HBV感染标志(HB-VM),并用PCR技术检测其中85人血清HBV-DNA的存在状况.发现抗-HCV阳性率为4.0%,HBVM阳性率为29.1%,HBV-DNA阳性率为11.8%≥40岁人群抗-HCV阳性率明显高于30岁以下人群(7.7%比0,P=0.042).HBVM阳性者抗-HCV阳性率明显高于HBVM阴性者(8.3%比2.3%,P=0.038),HBV感染与HCV感染之间存在一定的伴随关系.HBVM阳性者血清HBV-DNA阳性率明显高于HBVM阴性者(18.2%比 0,P<0.05).结论认为目前常规筛选献血员的方法不安全,建议加以改进.     

慢性HBV和HCV合并感染患者肝损害的血清学改变

目的了解乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)合并感染的患者肝损害的血清学改变特点。方法收集225例慢性肝病(包括慢性乙型肝炎,慢性丙型肝炎,乙、丙肝病毒合并感染引起慢性肝炎或肝硬化,肝炎后肝硬化)患者的肝穿病理标本;所有病例均常规检测肝功能、血清HBVDNA、HBV血清标志物、血清HCVRNA,抗-HCV。所有肝活检标本均用10%中性福尔马林固定,石蜡包埋,做苏木素-伊红染色,进行肝炎分级分期,HBsAg、HBcAg免疫组化,HBVDNA、HCVRNA原位杂交检测。结果①重度慢性肝炎患者:HBV/HCV合并感染的患者(B加C组)谷-丙转氨酶(ALT)、谷-草转氨酶(AST)、总胆红素(TB)、直接胆红素(DB)水平与HCV单独感染(C组)患者相比差异无显著性(P>0.05),而比HBV单独感染的患者(B组)低(P<0.05)。②非重度慢性肝炎患者:三组的血清学改变差异无显著性(P>0.05)。③C组与B加C组患者的发病年龄相似(P>0.05),但明显大于B组患者(P<0.01)。④单独感染组发病的病程长短差异无显著性(P>0.05),但比合并感染组长,与单纯感染组相比,合并感染组发展为重肝的时间要短(P<0.01)。结论在重度慢性肝炎的患者中,肝功能损害的血清学指标(AST、ALT、TB、DB)不能很好地反映肝内损害严重度。与单纯感染组相比,HBV与HCV合并感染组发展为重度肝炎的时间要短。