半夏炮制解毒机制的研究I

目的：阐明半夏炮制时采用8%明矾水或pH>12碱水炮制的解毒机制。方法：以药典规定的明矾浓度和碱液浓度浸泡生半夏,并采用电子显微镜扫描观察、氧化还原滴定法测定草酸钙含量、家兔眼刺激性实验等。结果：生半夏经过药典规定的8%明矾水浸泡或以10%的Na₂CO₃浸泡后,刺激性成分草酸钙针晶被锈蚀溶解,不溶性草酸钙含量从1%以上急剧下降到0.5%以下,半夏的刺激性也随之下降；半夏炮制后草酸钙含量降低到0.5%以下几乎不引起刺激性。结论：8%明矾水或pH>12以上的碱水炮制可以使生半夏药材中具有强刺激性成分草酸钙针晶的针形晶体破坏,含量降低,刺激性毒性降低；茜草、山药等无刺激性药材中草酸钙针晶的晶形、质地和含量与半夏具有非常大的差异。     

天南星科有毒中药刺激性作用比较研究

目的:研究天南星科具有刺激性毒性作用的部分中药中草酸钙针晶的刺激性作用。方法:采用家兔眼刺激实验方法,考察水半夏、白附子、天南星药材提取的草酸钙针晶的刺激性作用,并对各药材草酸钙针晶刺激性作用进行量效关系试验。结果:生水半夏、生白附子、生天南星中的草酸钙针晶具有强烈刺激性,各药材提取的针晶与各药材生品混悬液在针晶含量相同的条件下,对家兔的眼刺激性作用基本相同,同时针晶浓度与家兔眼刺激程度呈现确切的量效关系。结论:天南星科部分具有刺激性毒性作用的中药中所含的草酸钙针晶是其刺激性成分。     

多指标正交试验优化清半夏炮制工艺

目的：正交试验设计，对现有清半夏的炮制工艺进行客观量化的质量评价和优化？方法：选择白矾浓度、炮制时间及炮制温度3个因素，采用L9（3^4）正交试验设计，以RP—HPLC法测定炮制品中刺激性毒性成分草酸钙针晶的含量；家兔眼结膜刺激性评价刺激性程度；直接电位滴定法测定有效部位总游离有机酸的含量，进行综合评价。结果：根据因素的显著性影响，优选出清半夏炮制工艺：30℃左右，8％浓度的白矾溶液．浸泡24 h.结论：优选的炮制工艺达到了减毒增效的炮制目的，同药典法比较明确了炮制时间和炮制温度，显著缩短了炮制时间。     

生半夏中草酸钙针晶的刺激性作用研究

目的：验证生半夏中草酸钙针晶的刺激性作用。方法：采用家兔眼刺激实验方法,比较半夏提取草酸钙针晶前后、提取出来的纯草酸钙针晶及半夏水和各种有机溶剂提取液的刺激性作用,并对半夏草酸钙针晶刺激性作用进行量效关系试验。同时对半夏和茜草中所含草酸钙针晶的形状进行显微镜检,并在相同浓度下进行刺激性作用比较。结果：生半夏中的草酸钙针晶具有强烈刺激性,与半夏生品混悬液在针晶含量相同的条件下,对家兔的眼刺激作用基本相同,针晶浓度与家兔眼刺激程度呈现确切的量效关系。结论：生半夏中的草酸钙针晶为半夏的刺激性成分。     

RP-HPLC测定天南星科药用植物中草酸钙针晶的含量

众所周知，半夏等天南星科植物的生品具有强烈刺激性，能“戟人咽喉”，引起失音等，一般需炮制后使用。对于其刺激性成分，一直以来存在较大争议。在中国药典记载的天南星科植物中，凡具有刺激性或毒性记载的药物都含有草酸钙针晶，并都需要通过加工炮制降低其毒性或刺激性，如半夏、天南星、白附子及在某些地区被当作半夏使用的水半夏等。     

半夏毒性成分和炮制机理研究现状

对半夏的毒性成分研究和炮制机理现状作一概述。生半夏的毒性主要表现在对多种黏膜的刺激性,这种刺激性是半夏炮制前后毒性比较的一个指标。而从生半夏中提取分离得到的纯草酸钙针晶具有强烈的刺激性作用,其不溶于水和各种有机溶剂,但能够溶于酸、碱性溶液,炮制辅料白矾和石灰水则分别呈一定的酸、碱性,因此提出从草酸钙针晶被破坏的角度解释半夏炮制解毒的机理。     

半夏刺激性成分的研究

目的:研究半夏的刺激性成分。方法:采用溶剂提取法,X衍射,电镜扫描,氧化还原滴定,紫外分光光度法等。结果:各种实验表明半夏中含有的草酸钙针晶为半夏的刺激性成分之一,其晶形、含量与半夏的刺激性有关。经炮制后,晶形发生变化,含量急剧下降,刺激性明显减弱。结论:半夏中所含的草酸钙针晶为半夏的刺激性成分之一。     

经方中半夏的炮制方法与现代半夏炮制方法的去毒效果实验分析

目的：对古法制半夏与现代制半夏（法半夏、姜半夏、清半夏）的有毒成分（草酸钙针晶）进行分析,考量经方中半夏的炮制方法是否合理。方法：采用显微鉴别法考量其有毒成分（草酸钙针晶）的含量多寡、晶型情况。结果：古法制半夏其草酸钙晶形发生变化,不溶性草酸钙针晶束被打散、破坏,草酸钙针晶针尖被磨损、溶化,最后有毒成分（草酸钙针晶）含量急剧下降。结论：经方中半夏的炮制方法去毒效果优于现代法半夏、姜半夏、清半夏的炮制方法。     

正交试验优选清半夏的炮制工艺

目的:优选清半夏的炮制工艺。方法:以浸出物、总酸及白矾质量分数为指标,通过正交试验考察药材-白矾的质量比、浸泡时间、水煮时间对清半夏炮制工艺的影响。结果:优选的炮制工艺为浸泡2 h,水煮6 h,药材-白矾质量比10∶1;总酸、浸出物、白矾平均质量分数依次为0.83%,10.5%,6.4%。结论:总酸、浸出物及白矾含量均符合2010年版《中国药典》对清半夏的要求,清半夏粉末中草酸钙针晶明显减少,说明通过水煮炮制可降低半夏的毒性和刺激性,与传统工艺相比缩短了炮制时间。     

多指标综合加权评分法优选法半夏炮制工艺

目的用正交试验设计对现有法半夏的炮制工艺进行质量评价和优化.方法选择生石灰用量、甘草用量、炮制时间及炮制温度4个因素,采用L9(34)正交试验设计,以RP-HPLC法测定炮制品中刺激性毒性成分草酸钙针晶以及水溶性有效成分鸟苷及甘草酸的含量,家兔眼结膜刺激性评价刺激性程度,多指标综合加权评分,优选法半夏炮制工艺.结果根据正交试验结果,优选出法半夏炮制工艺在30℃下,每100 g半夏,用生石灰10 g、甘草15 g,浸泡48 h.结论优选的炮制工艺达到了降低半夏刺激性毒性的炮制目的,同药典法比较明确了炮制时间和炮制温度,显著缩短了炮制时间.     

天南星科植物中黏膜刺激性成分的研究现状与分析

天南星科植物可被作为观赏性和药用植物,但大部分都有刺激性毒性。通过对国内外文献的查阅,发现大多数研究报告均将其刺激性成分认为是该科植物中所含有的特殊生物代谢产物草酸钙针晶,这与本课题组前期对半夏研究中得出的半夏中草酸钙针晶是其主要刺激性成分的结论一致。草酸钙针晶产生刺激性毒性的机制被认为与其特殊的针形晶型,针晶上所附的蛋白酶类物质及植物中黏液细胞相关。     

天南星炮制减毒机制探讨(Ⅰ)

目的:研究天南星炮制减毒机制。方法:通过小鼠急性毒性试验和家兔眼结膜刺激性试验比较天南星生品、炮制品、针晶及其不同提取部位的毒性;采用扫描电镜观察法研究炮制前后天南星饮片中特殊草酸钙针晶的变化情况及明矾中相关离子对针晶的形态变化的影响。结果:急性毒性试验表明天南星针晶组LD50为42.53 mg.kg-1,生天南星粉末组LD50为1 062 mg.kg-1,天南星炮制品粉末组LD50为2 788 mg.kg-1。家兔眼刺激试验显示生药粉组和针晶组表现出轻度刺激和中度刺激,而其他各种提取物均无刺激性反应。电镜观察发现,天南星炮制前后饮片中的针晶超微结构发生了明显变化,经KAl(SO4)2.12H2O,AlCl3溶液浸泡12 h后,针晶尖端被破坏,而Na2SO4,KCl溶液浸泡后其形态基本没有太大改变,尖端依然存在。结论:天南星针晶是产生刺激性毒性的主要物质基础,天南星针晶的刺激毒性与其结构形态有关,明矾炮制减毒的机制可能是其Al3+加速破坏了草酸钙针晶的形态。     

半夏及不同炮制品中总游离有机酸含量比较

目的建立半夏及其不同炮制品中总游离有机酸的含量测定方法,比较半夏及其炮制品中总游离有机酸的含量。方法采用电位返滴定法,以琥珀酸为对照品,测定生品及炮制品中总游离有机酸的含量。结果分别测定了3批生品及清半夏、姜半夏中游离有机酸含量,姜半夏和清半夏中游离有机酸含量相对于生品有不同程度的提高。加样回收率为95．20％,RSD=1．81％。结论本法简便、准确、可靠,可作为半夏及其炮制品清半夏和姜半夏中游离有机酸测定方法。     

半夏及掌叶半夏毒针晶中共性毒蛋白的研究

目的:寻找天南星科半夏属有毒中药半夏及掌叶半夏毒性物质基础毒针晶中的共有蛋白,研究刺激性相关蛋白的致炎效应。方法:采用溶液内双酶解方法将半夏与掌叶半夏毒针晶中的蛋白降解为混合肽段,采用液相色谱与串联质谱偶联分析降解后的肽段,将质谱分析数据与BIOWORKS软件搜索的NCBI绿色植物Viridiplantae蛋白库比对进行蛋白质检索分析。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对半夏、掌叶半夏毒针晶蛋白进行分析,同时采用胶内酶解后液相色谱与串联质谱偶联的方法,分析并鉴定约13kDa蛋白。提取分离半夏中的凝集素蛋白,并采用中性粒细胞迁移试验和测定腹腔渗出液中PGE2的含量,考察毒针晶及凝集素的炎症刺激性效应。结果:半夏及掌叶半夏毒针晶中均含约13kDa的蛋白条带,此条带经鉴定为凝集素类蛋白,且此13kDa蛋白条带为毒针晶中的主要蛋白之一,凝集素类蛋白可诱导中性粒细胞向大鼠腹腔迁移,可显著增加小鼠腹腔渗出液中PGE2的含量。结论:天南星科有毒中药半夏及掌叶半夏毒针晶蛋白中均含有凝集素类蛋白,且此类凝集素蛋白具有显著的致炎作用,是半夏与掌叶半夏毒针晶中的共性毒蛋白。     

天南星炮制减毒机理研究（I）

目的：研究天南星炮制减毒机理。方法：通过小鼠急性毒性实验和家兔眼结膜刺激性实验比较天南星生品、炮制品、针晶及不同化学提取部位的毒性;采用扫描电镜观察法研究炮制前后天南星饮片中特殊草酸钙针晶的变化情况,以及明矾所含相关离子对针晶的形态变化的影响。结果：急性毒性实验结果显示,天南星针晶组LD50为42.53mg/kg,生天南星粉末组LD50为1062mg/kg,天南星炮制品粉末组LD50为2788mg/kg。家兔眼刺激实验结果表明,生药粉组和针晶组表现出轻度刺激和中度刺激,而其它各种提取物均无刺激性反应。电镜观察发现,天南星炮制前后饮片中的针晶超微结构发生了明显变化,经KAl(SO4)2?12H2O、AlCl3溶液浸泡12h后,针晶尖端被破坏,而Na2SO4、KCl溶液浸泡后其形态基本没有太大改变,尖端依然存在。结论：天南星针晶是产生刺激性毒性的主要物质基础,天南星针晶的刺激毒性与其结构形态有关,明矾炮制减毒的机制可能是其Al3 加速破坏了草酸钙针晶的形态。     

天南星中草酸钙针晶形态炮制前后变化比较

目的 :提供天南星样的刺激作用是由其草酸钙针晶尖端所至的实验证据。方法 :从炮制前后及加工过程的动态变化 ,对天南星中草酸钙针晶的显微及超微改变进行了定性定量观察 ,并结合同批样品刺激反应的时效及量效数据的定量分析为南星的刺激物质的确定提供相关证据。结果与结论 :毛须针晶不同含量的天南星具有不同刺激作用。天南星中草酸钙针晶尖端变化率与兔眼结膜刺激反应呈量效关系 (r=0 .995) ;与矾水浸泡时间呈时效关系 (r=0.993)。     

半夏姜制对鸟苷含量的影响

目的:比较“正交法”和药典法两种炮制工艺的姜半夏中微量水溶性成分鸟苷的含量,对半夏的其他姜制炮制品中鸟苷含量进行比较。方法:采用反相高效液相色谱法。结果:“正交法”和药典法两种炮制工艺炮制的姜半夏中鸟苷含量接近,与生半夏相比,没有明显变化,其他炮制品的鸟苷含量则有较大幅度下降。结论:“正交法”和药典法炮制的姜半夏没有明显区别,浸制工艺对鸟苷含量影响较大。