亚低温处理大鼠脑缺血再灌注损伤后Caspase-3mRNA的表达变化

目的探讨亚低温处理大鼠脑缺血再灌注损伤后Caspase-3mRNA的表达变化及其与损伤神经细胞凋亡的关系。方法采用大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型，大脑中动脉阻塞2h，再灌注损伤12h，用流式细胞仪(FCM)和半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术分别检测假手术组、对照组和亚低温组的DNA断裂百分率和Caspase-3mRNA表达水平。结果亚低温组和假手术组DNA断裂百分率和Caspase-3mRNA表达水平均明显低于对照组。结论亚低温处理大鼠脑缺血再灌注损伤后Caspase-3mRNA表达水平明显降低可能与其抗损伤神经细胞凋亡作用有关。     

急性脑缺血大鼠海马CA1区细胞凋亡与Caspase-3及Caspase-10蛋白表达的相关性

目的探讨急性脑缺血大鼠海马CA1区细胞凋亡与Caspase-3及Caspase-10蛋白表达的关系。方法线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)再灌注模型。应用原位末端标记法检测细胞凋亡,免疫组化法及Western-blotting蛋白印记技术分别检测Caspase-3及Caspase-10蛋白表达。结果①脑缺血大鼠海马CA1区3h出现凋亡阳性细胞,48 h达到高峰,72 h凋亡阳性细胞的数量开始下降。②脑缺血大鼠海马CA1区3 h可见Caspase-3及Caspase-10蛋白阳性细胞,48 h表达达高峰,72 h表达开始减少。③脑缺血大鼠海马CA1区Caspase-3及Caspase-10蛋白表达的变化与细胞凋亡数呈正相关(r=0.976,P﹤0.01;r=0.986,P﹤0.01)。结论脑缺血大鼠海马CA1区存在细胞凋亡,且与Cas-pase-3及Caspase-10蛋白表达的变化一致,Caspase-3及Caspase-10蛋白可促进细胞凋亡发生。     

原花青素对大鼠脑缺血再灌注损伤Caspase-3表达和神经元凋亡的影响

目的探讨原花青素（PC）对脑缺血再灌注损伤大鼠Caspase-3表达和神经元凋亡的影响。方法40只大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、PC低剂量治疗组和PC高剂量治疗组,线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型。各组于缺血90min再灌注24h用免疫组化法观察大鼠额顶部皮质Caspase-3蛋白表达,采用TUNEL法检测神经细胞凋亡,并进行TTC染色和HE染色观察脑梗死体积及病理形态学变化。结果缺血再灌注组与假手术组比较,Caspase-3表达增加,凋亡细胞明显增加;PC治疗组与缺血再灌注组比较均显著减少Caspase-3表达,减少凋亡细胞,高、低剂量组之间差异有统计学意义（P〈0．05）。PC治疗组脑组织缺血损伤病理学改变均明显轻于缺血再灌注组,PC高剂量治疗组缺血改变亦轻于低剂量治疗组。PC治疗组脑梗死体积均较缺血再灌注组减小,且高、低剂量组之间差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论PC对缺血再灌注脑损伤具有保护作用,其机制可能与通过减少Caspase-3表达,抗凋亡有关。     

辛伐他汀对脑缺血再灌注大鼠海马BDNF和SDF-1的影响

目的探讨辛伐他汀对脑缺血再灌注大鼠海马脑源性神经营养因子(brain-derived neurothrophic factor,BDNF)和基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)的影响。方法 2015年3月—2016年3月选取清洁级大鼠60只,随机分为正常组、治疗组和未治疗组各20只。10%水合氯醛麻醉,暴露并钳夹双侧颈总动脉40 min,造模使大鼠急性脑缺血。治疗组:造模后给予每日灌服辛伐他汀1 mg/kg,未治疗组:造模后胃灌盐水1次/d,正常组:正常饮食。3周后,测量大鼠脑梗死面积,分别测定三组大鼠脑海马CA1区BDNF和SDF-1蛋白的表达情况。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用t检验,P0.05为差异有统计学意义。结果治疗组的脑梗死面积为(16.24±4.48)%,未治疗组的脑梗死面积为(32.56±6.73)%,两组大鼠的脑梗死面积比较,差异有统计学意义(t=9.028,P0.05)。三组大鼠BDNF和SDF-1蛋白表达[(83.32±11.46)、(61.25±12.31)、(100.67±10.36)pg/ml与(2.48±0.83)、(0.78±0.96)、(3.23±0.87)ng/μl]比较,差异均有统计学意义(均P0.05);两两比较发现,正常组BDNF和SDF-1蛋白表达明显高于治疗组和未治疗组,差异均有统计学意义(均P0.05)。治疗组BDNF和SDF-1蛋白表达明显高于未治疗组,差异均有统计学意义(均P0.05)。结论辛伐他汀可以提高BDNF和SDF-1蛋白水平,增加内源性保护机制和神经干细胞增殖、迁移,保护神经元的功能。     

眼针对急性脑缺血再灌注损伤大鼠海马组织ICAM-1表达的影响

目的:观察眼针对急性脑缺血再灌注损伤模型大鼠海马组织细胞间黏附因子(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)表达的影响.方法:64只SD大鼠随机分为4组:正常组(未处理)、假手术组(同模型组,仅鱼线插入深度1cm)、模型组(应用线栓法复制脑缺血再灌注损伤大鼠模型,鱼线插入深度1.8~2cm)和眼针组(模型成功后取肝区、上焦区、下焦区、肾区进行眼针治疗20min,每日两次),每组16只.于再灌注后3h进行神经功能缺损评分,采用Western blot、实时荧光定量聚合酶链反应(RQ-PCR)方法测定海马组织ICAM-1蛋白及mRNA表达的变化.结果:眼针治疗后可使大鼠神经功能缺损评分明显下降,并显著降低海马组织ICAM-1蛋白及mRNA表达(P＜0.01).结论:眼针具有明显的改善大鼠脑缺血再灌注损伤的作用;其机制与下调海马组织ICAM表达有关.     

兔脑缺血再灌注后PPARγ表达对神经元凋亡的影响

目的观察脑缺血再灌注损伤后过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达对神经元凋亡的影响。方法日本大耳白兔72只,参照Pulsinelli四动脉阻断法建立兔全脑缺血90min/再灌注6h,1d,3d,7d,14d和28d的动物模型。TUNEL法染色观察脑皮质、海马和纹状体区神经元凋亡,免疫组织化学法检测PPARγ阳性神经元在各区的表达。结果脑缺血90min再灌注6h,1d,3d,7d,14d皮质、海马和纹状体区凋亡神经元明显增加(t皮质=3.86,P<0.01;t海马=4.96,P<0.01;t纹状体=2.91,P<0.05)。脑缺血再灌注6h,1d,3d,7d,14d,28d,PPARγ阳性神经元在各区明显增加(t皮质=7.98,P<0.01;t海马=7.65,P<0.01;t纹状体=6.98,P<0.01),其中再灌注6h,7d,14d,28d阳性神经元呈高值表达。结论脑缺血再灌注损伤后PPARγ表达能有效抑制神经元凋亡。     

JNK信号通路介导大鼠局灶性脑缺血再灌后海马神经元凋亡

[目的]研究局灶性脑缺血再灌(I/R)后c-Jun氨基端激酶(JNK)蛋白表达及其依赖的caspase途径激活情况,探讨此通路在海马神经元凋亡中可能的作用及机制.[方法]建立大鼠可逆性大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,采用免疫印迹法检测不同实验组中海马区p-c-jun及凋亡Caspase-3表达,TUNEL法原位检测CA1区凋亡锥体细胞.[结果]与假手术组比较.模型组p-e-jun蛋白平均灰度值显著增强,以3h、6h、12h差异有统计学意义(P＜0.05).模型组Caspase-3于再灌注后6h开始表达(P＜0.05),12h其条带密度达高峰(P＜0.05).I/R3h至24h海马区p-c-jun表达与caspase-3呈正相关(r=0.696,P＜0.01);caspasse-3与TUNEL星正相关(r=0.310,P＜0.001).[结论]大鼠I/R后JNK部分激活了Caspase依赖的促凋亡通路.     

预吸氧对新生鼠宫内脑再灌注损伤Caspase-3和iNOS的影响

目的:探讨预吸氧对新生鼠宫内脑再灌注损伤Caspase-3和iNOS的影响。方法:取孕21天Wistar大鼠制成脑缺血再灌注损伤模型。另有同日龄孕鼠分别在30%、50%和90%氧浓度下预吸氧30 min后,完成宫内缺血后再灌注模型的制备。取出新生鼠脑组织应用免疫组织化学分析检测Caspase-3和iNOS的阳性细胞数,同时应用病理组织学观察脑组织病理变化。结果:各组间Caspase-3和iNOS的阳性细胞数量差异有统计学意义。再灌注组和90%预吸氧组Caspase-3和iNOS的阳性细胞数量比对照组有明显增加。50%预吸氧组Caspase-3和iNOS的阳性细胞数量比再灌注1h组降低。30%和50%预吸氧组均可见以上神经元损伤改变,与缺血再灌注后无明显差别,而90%预吸氧组新生鼠脑组织病理改变加重,可见个别神经元细胞变性、凋亡。结论:再灌注损伤后,Caspase-3和iNOS的表达增加是脑损伤神经细胞凋亡的重要因素。高浓度预吸氧加重脑缺血再灌注损伤神经细胞凋亡,而50%预吸氧可能改善脑缺血再灌注损伤神经细胞凋亡。     

疏血通对大鼠脑缺血再灌注后MDA、SOD的影响

目的本试验通过观察疏血通对超氧化物歧化酶、丙二醛的影响，探讨它的保护作用及作用机制。方法Wistor雌、雄性大鼠共30只，随机分为假手术组、盐水对照组及疏血通用药组，根据Koizumi线栓法建立大鼠左侧大脑中动脉缺血再灌注模型（MCAO）。24h断头取脑，同时检测脑组织中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的含量。结果与盐水对照组组相比，疏血通治疗组光镜下病理损伤轻，脑组织中MDA含量降低、SOD含量升高。结论疏血通对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用，其机制可能与抑制自由基损伤有关。     

脑心通对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨脑心通对大鼠脑缺血的保护作用.方法 应用线栓法制备大鼠脑缺血模型.将大鼠分为假手术组、模型组、低剂量组和高剂量组,各组分别于术后给予不同剂量脑心通灌胃,术后24、48、72、96h取脑组织进行HE染色、TTC染色及测定bcl-2表达的动态变化.结果 低、高剂量组均能减少大鼠脑梗死体积;提高脑缺血区bcl-2的表达.结论 脑心通对大鼠脑缺血损伤有保护作用.     

Caspase-3和Caspase-8在氟化钠致人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡中的作用

目的探讨半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶(Caspase)家族中的Caspase-3和Caspase-8对氟化钠(NaF)致人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的影响。方法先用不同浓度NaF(20、40、80μg/ml)对SH-SY5Y细胞进行染毒,24h后检测细胞存活率、凋亡率、Caspase-3活性以及Caspase-3和Caspase-8 mRNA表达水平;再选择适宜的40μg/mlNaF染毒剂量组,观察在Fas受体激动剂CH11或拮抗剂ZB4作用下其细胞凋亡率、Caspase-3活性及Caspase-3和Caspase-8 mRNA表达水平的改变。结果与对照组比较,40、80μg/ml染毒组细胞存活率降低,差异有统计学意义(P<0.01);细胞凋亡率随染毒剂量的升高呈上升趋势,且40、80μg/ml染毒组细胞凋亡率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);40、80μg/ml染毒组Caspase-3活性及Caspase-3和Caspase-8 mRNA表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);激动剂CH11与NaF共培养对细胞凋亡显示出协同效应,拮抗剂ZB4可部分阻断NaF致SH-SY5Y细胞的凋亡。结论NaF可通过上调死亡受体Fas途径的关键酶Caspase-3和Caspase-8的表达,促进SH-SY5Y细胞凋亡。     

铅对小鼠睾丸TGFβ1及Caspase-3表达的影响

目的 探讨不同浓度和时间醋酸铅染毒对小鼠睾丸转化生长因子β1（Transforming growth factor β1，TGFβ1）、半胱天冬酶3（Caspase-3）表达的影响，进一步阐明醋酸铅所致睾丸毒性的作用机制。方法 45只雄性小鼠分为空白对照组和0．2％，0．4％醋酸铅染毒组，每组15只。并在第2，4，6周分别处死每组小鼠各5只，取其睾丸组织，免疫组化检测TGFβ1、Caspase-3表达的差异。结果 染铅后不同周TGFβ1、Caspase-3的表达较空白对照组增强，差异有统计学意义（P〈0．05）。且随着染毒时间的延长，表达越强（P〈0．05）。但在0．2％与0．4％不同周染铅组之间TGFβ1、Caspase-3的表达差异并无统计学意义（P〉0．05）。结论 醋酸铅使睾丸TGFβ1 Caspse-3的表达增强，从而促使生殖细胞发生凋亡。     

Survivin、Caspase-3在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的:探讨凋亡相关蛋白Survivin(生存素)和Caspase-3(半胱氨酸蛋白酶-3)在子痫前期患者与正常妊娠妇女胎盘组织中的表达规律及其在子痫前期发病过程中可能的机制。方法:随机选取子痫前期患者60例(轻度组25例,重度组35例)和正常妊娠孕妇30例作为病例组和对照组,应用免疫组织化学(SABC)法对3组胎盘的Survivin、Caspase-3进行标记,通过彩色病理图像分析系统对染色结果进行定量检测并分析。结果:①Survivin在子痫前期重度组表达低于轻度组及对照组,差异有统计学意义(P<0.01);轻度组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);②Caspase-3在子痫前期重度组表达高于轻度组及对照组,轻度组表达高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01);③Survivin与Caspase-3在3组胎盘组织中表达呈负相关(r=-0.370,P<0.05)。结论:子痫前期患者胎盘组织中凋亡相关蛋白Survivin表达下调、Caspase-3表达上调,Survivin及Caspase-3的表达变化可能与子痫前期的发病机制有关。     

氟对大鼠切牙细胞凋亡以及Caspase-3和Caspase-8活力的影响

目的 研究在氟中毒引起氟斑牙时,氟对大鼠切牙细胞凋亡、天冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)和Caspase-8活力的影响.方法 将20只健康成年SPF级雄性SD大鼠随机分为4组,分别为对照(蒸馏水)组和低(10mg/L)、中(50mg/L)和高(100mg/L)浓度NaF染毒组,每组5只.采用自...     

锰对大鼠生精细胞半胱氨酰天冬氨酸酶-3和细胞色素C表达的影响

目的研究锰对大鼠生精细胞中半胱氨酰天冬氨酸酶-3(caspase-3)和细胞色素C(cytochrome-c)表达的影响。方法将健康雄性清洁级SD大鼠48只随机分为高(30mg/kg)、低剂量(15mg/kg)MnCl2染毒组和空白对照组(生理盐水),每组16只。采用腹腔注射方式染毒,每天1次,每周5天,连续染毒6周。分别于染毒第4、6周末称重,处死大鼠,分离睾丸,采用免疫组化法检测睾丸生精细胞中caspase-3与cytochrome-c的阳性细胞率。并进行病理学观察。结果与空白对照组比较,高、低剂量MnCl2染毒组大鼠生精细胞中caspase-3阳性细胞率均升高,cytochrome-c阳性细胞率均降低,差异有统计学意义(P<0.01);且随着锰染毒剂量的升高,大鼠生精细胞中caspase-3阳性细胞率呈上升趋势,cytochrome-c阳性细胞率呈下降趋势。与染锰第4周比较,高、低剂量MnCl2染毒组第6周大鼠生精细胞中caspase-3阳性细胞率均升高,cytochrome-c阳性细胞率均降低,差异有统计学意义(P<0.01)。直线相关分析发现,各组大鼠生精细胞caspase-3阳性细胞率与cytoc...     

茶多酚对去卵巢大鼠肝脏脂质代谢及JNK、Caspase-3蛋白表达的影响

目的 探讨茶多酚（tea polyphenols, TP）对去卵巢大鼠肝脏脂质代谢及JNK、Caspase-3蛋白表达的影响。 方法 60只SD雌性大鼠按体重将其随机分为假手术组（Sham）、去卵巢组（OVX）,75、150、300mg/kg TP干预组（L-TP、M-TP、H-TP）及60mg/kg VE组（VE）,每组10只。除Sham组外,其余各组实施双侧卵巢摘除术,术后恢复1周开始每日腹腔注射D-半乳糖100mg/kg;Sham组仅切除卵巢附近等体积脂肪组织,注射等量生理盐水。同时,L-TP、M-TP、H-TP组及VE组每日给予相应TP及VE灌胃,其余两组每日给予等体积蒸馏水灌胃,干预持续12周,并于每周记录大鼠体重。干预结束后,检测大鼠血清和肝脏TC、TG水平,HE染色观察肝组织形态学改变,Western Blot测定肝脏组织JNK、Cleaved Caspase-3蛋白的表达水平。 结果 与Sham组比,OVX组大鼠体重明显增加（P<0.05）,血清TG及肝脏TC、TG水平均升高（P<0.05）,肝组织内肝索结构排列紊乱,炎性细胞浸润,脂肪空泡明显可见（P<0.05）,JNK、Cleaved Caspase-3蛋白表达水平增加（P<0.05）;与OVX组比,M-TP、H-TP组和VE组血清TG及肝脏TC、TG水平降低（P<0.05）,脂肪空泡明显改善（P<0.05）,JNK和Cleaved Caspase-3蛋白表达下调（P<0.05）;且H-TP干预能明显改善血清TG及肝脏TC、TG的水平（P<0.05）。 结论 TP干预可以降低去卵巢大鼠血清及肝脏脂质水平并下调肝细胞JNK、Caspase-3蛋白表达发挥一定的肝脏保护作用。     

重度子痫前期胎盘组织中Bcl-2和Caspase-3的表达及意义

目的:探讨重度子痫前期患者胎盘组织中Bcl-2和Caspase-3的表达及其与重度子痫前期发生、发展的关系。方法:采用免疫组织化学染色方法检测20例正常晚期妊娠孕妇(对照组)、40例重度子痫前期患者(重度子痫前期组,其中早发型20例,晚发型20例)的胎盘组织进行Bcl-2和Caspase-3的定位,并用计算机图像分析系统进行定量分析。结果:与对照组比较,重度子痫前期组Bcl-2的表达显著降低和Caspase-3的表达显著升高,且两者呈负相关(r=-0.334,P=0.009),早发型重度子痫前期与晚发型重度子痫前期比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在胎盘组织中Bcl-2低表达和Caspase-3的高表达,可能与重度子痫前期的发生有关。     

Caspase-3蛋白在尖锐湿疣组织中的表达及临床意义

目的:探讨尖锐湿疣组织中Caspase-3的表达及意义。方法:采用免疫组化SP法分别检测39例女性宫颈尖锐湿疣组织和35例慢性宫颈炎组织中Caspase-3的表达。结果:Caspase-3在尖锐湿疣组织和慢性宫颈炎组织中均呈阳性表达,但前者显著低于后者(χ2=6.02,P<0.05)。结论:Caspase-3的表达下调在尖锐湿疣的发生发展中起一定作用。     

染锰大鼠生精细胞Caspaes-3和Ki-67表达

目的 研究氯化锰对大鼠生精细胞半胱天冬酶(Caspase-3)和抗霍奇金淋巴瘤细胞核抗体(Ki-67)表达的影响及意义。方法 48只雄性SD大鼠随机分为6组:空白对照组,15和30mg/kgMnCl₂组,锰与生理盐水均为腹腔注射,1次/d,5d/周,分别染锰4和6周。用免疫组化法检测睾丸生精细胞Caspase-3与Ki-67表达。结果 与空白对照组比较,各染锰组Caspase-3阳性细胞率均显著升高(P<0.01);染锰剂量相同,染锰6周组与4周组比较,Caspase-3阳性细胞率均显著升高(P<0.01);染锰时间相同,30mg/kgMnCl₂与15mg/kgMnCl₂组比较,Caspase-3阳性细胞率均显著升高(P<0.01)。与空白对照组比较,染锰15mg/kgMnCl₂4周组Ki-67阳性细胞率降低(P<0.05);染锰30mg/kgMnCl₂4周组,15mg/kgMnCl₂6周组,30mg/kgMnCl₂6周组Ki-67阳性细胞率均显著降低(P<0.01);染锰时间相同,30mg/kgMnCl₂组与15mg/kgMnCl₂组比较,Ki-67阳性细胞率显著降低(P<0.01)。各组大鼠生精细胞Caspase-3阳性细胞率与Ki-67阳性细胞率呈明显负相关(r=-0.798,P<0.01)。结论 染锰15mg/kg4周即可促进大鼠生精细胞Caspase-3表达和抑制大鼠生精细胞Ki-67表达,且存在一定的剂量-效应和时间-效应关系,锰的这种双重作用可能是导致大鼠生精障碍的主要机制。